細菌放線菌的觀察與革蘭氏染色實驗報告

1、實驗一：細菌、放線菌的形態(tài) 觀察與革蘭氏染色姓名:陳虹邑學號：2系別：生物科學與生物技術班級：周二第一組試驗日期：2011年9月13日同組成員：邢悅婷 呼波一、 實驗目的及意義1、鞏固油鏡的使用;2、掌握細菌形態(tài)觀察的基本方法；3、了解細菌的基本形態(tài)和結構。4、了解革蘭氏染色的原理；5、初步掌握細菌涂片的方法；6、掌握革蘭氏染色的方法；7、掌握放線菌的涂片方法；8、觀察基內菌絲、氣生菌絲和孢子絲。二、 實驗材料與方法【實驗材料】菌種：溶血鏈球菌(Strptococcus haemolyticus),螺菌(Spirillum sp.) ,巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium),

2、蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis), 普通變形菌(Proteus vulgaris), 丙酮丁酸梭菌(Clostridium acetotylicum), 褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)等細菌永久裝片，放線菌5406，金黃色葡萄球菌（staphulococcus aureus），大腸桿菌（E. coli）試劑：香柏油、無菌水、結晶紫、番紅或沙黃、95%酒精、碘液儀器及用具：顯微鏡、擦鏡紙、吸水紙、小滴管，接種環(huán)、載玻片、蓋玻片、酒精燈【實驗方法】細菌的觀察1、在載玻片上滴一小滴水，用接種環(huán)，采用無菌操作，將細菌挑起，涂到載玻片上，蓋上蓋

3、玻片。2、用顯微鏡對細菌進行活體觀察。觀察時先用低倍鏡，再用高倍鏡，有必要的話，再用油鏡觀察。3、觀察細菌的永久裝片，觀察時先用低倍鏡，再用高倍鏡，有必要的話，再用油鏡觀察，找到細菌的各種結構。放線菌的觀察1、玻璃紙法：用剪刀，剪下小塊的玻璃紙，壓片，放在顯微鏡下觀察放線菌的基內菌絲、氣生菌絲。2、印片法：將蓋玻片在火焰上稍加熱，然后蓋到培養(yǎng)基的玻璃紙上，稍用力壓一下。取下蓋玻片，放到載玻片上，進行鏡檢，主要觀察放線菌的孢子絲。革蘭氏染色對細菌進行革蘭氏染色制片1、取一塊載玻片，分成兩個部分，在每部分中央滴一小滴蒸餾水，用接種環(huán)以無菌操作方法從枯草芽孢桿菌和大腸桿菌的培養(yǎng)試管中取少許菌苔于水滴

4、中，混勻。2、將玻片置于火焰上方略加溫，加速干燥。3、涂面向上，通過火焰數(shù)次，使細胞質凝固，是細胞形態(tài)固定，并使細菌黏附在玻片上。染色1、（初染）于制片上滴加結晶紫染液，1min后，用水洗去剩余染料。2、（媒染）滴加碘液與制片上，1min后水洗。3、（脫色）滴加95%乙醇脫色約1min，搖動玻片至紫色不再褪出來為止，水洗。4、（復染）滴加蕃紅染料，復染1min，水洗。觀察在制片上再滴加一小滴蒸餾水，用蓋玻片蓋好，用顯微鏡觀察，三、 實驗結果1、觀察到各種細菌的形態(tài)，以及一些細菌的特殊的結構。如蘇云金芽孢桿菌的芽孢、伴胞晶體；固氮菌的莢膜等。具體實驗結果見附圖。2、枯草芽孢桿菌被染成紫色，可以清

5、楚看見細菌里芽孢，也有芽孢已經釋放出來。變形桿菌和金黃色葡萄球菌均被染成紫色。枯草芽孢桿菌（4010）3、混合的大腸桿菌部分被染成粉紅色，是大腸桿菌，另外染成了紫色的菌是污染菌。4、玻璃紙觀察發(fā)觀察到了放線菌的基內菌絲、氣生菌絲。氣生菌絲較粗，顏色較深，基內菌絲較細，顏色較淺。5、用印片法看到了放線菌的孢子絲?？莶菅挎邨U菌溶血鏈球菌螺菌丙酮丁酸梭菌褐球固氮菌金黃色葡萄球菌大腸桿菌變形桿菌四、 實驗分析與討論1、看細菌形態(tài)的時候，要注意調節(jié)倍數(shù)顯微鏡的倍數(shù)以及光線，來看清一些特殊的結構，如：鞭毛等。2、取菌的時候要注意量一定要少，而且要涂開。否則，在視野里看到的菌都重疊在一起，看不清楚。3、染色的時候要主要把握好染色和脫色的時間，否則會對結果產生影響。在染色巨大芽孢桿菌的時候，由于脫色時間過長，被染成了粉紅色，產生了假陰性的結果。4、觀察放線菌的基內菌絲和氣生菌絲的時候要主要調節(jié)細