第四章中藥鑒定_第1頁
第四章中藥鑒定_第2頁
第四章中藥鑒定_第3頁
第四章中藥鑒定_第4頁
第四章中藥鑒定_第5頁
已閱讀5頁,還剩5頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、第四章 中藥鑒定一、中藥鑒定的依據(jù)二、中藥鑒定的一般程序 三、中藥鑒定方法 四、中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定 第一節(jié) 中藥鑒定的依據(jù)中華人民共和國藥典共八版中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)共22冊中成藥部頒標(biāo)準(zhǔn) 共20冊進(jìn)口藥材部頒標(biāo)準(zhǔn) 其它轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)等 藥典記載中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容 1. 名稱:中文名、漢語拼音、中藥拉丁名2. 基源:科名、植(動(dòng))物名、拉丁學(xué)名、藥用部位、采收季節(jié)、加工3. 性狀:形狀、大小、表面、顏色、 質(zhì)地、斷面、氣、味4. 鑒別:顯微(組織、粉末、顯微化學(xué)) 理化(一般理化、TLC)藥典記載中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容5. 檢查:雜質(zhì)、水分、灰分、浸出物6. 含量:主成分測定方法及限量7、

2、炮制:方法及炮制品8、 性味歸經(jīng):9、功能主治:10、用法用量:11、注 意:禁忌和副作用123、貯 藏: 中成藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容藥品名稱 處方制法 性狀鑒別 檢查含量測定 功能主治用法用量 規(guī)格注意 貯藏第二節(jié) 中藥鑒定的一般程序分三步 1. 取樣 2. 鑒定 3. 結(jié)果一、取樣(一) 取樣原則。w 有代表性w 均勻性w 留樣保存(二)取樣的要求與方法 w 取樣前檢查品名、產(chǎn)地、規(guī)格、等級及外包裝w 按5%取樣,超過1000件,超過部分按1%取樣;不足5件及貴重藥材逐件取樣w 粉末狀或lcm藥材,每件不同部位抽取23份,包件少,抽取實(shí)驗(yàn)用量3倍;包件多,每件一般藥材100500g;粉末狀藥材25

3、g;貴重藥材510g。w 存樣保留l年w 對角取樣二、鑒定按藥材標(biāo)準(zhǔn)逐項(xiàng)檢驗(yàn)。 (一)、 真實(shí)性鑒定 中藥的真實(shí)性鑒定,包括性狀、顯微、理化等項(xiàng)目,在有條件時(shí)應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)中藥作對照比較。(二)、 雜質(zhì)檢查 有機(jī)雜質(zhì)和無機(jī)雜質(zhì)種類及其數(shù)量。(三)、 含量測定 中藥中有效成分、浸出物或揮發(fā)油的含量是評價(jià)中藥品質(zhì)優(yōu)良度的主要依據(jù)。 有效成分(或主要成分)的含量測定; 浸出物含量; 揮發(fā)油的含量測定; 生物效價(jià)測定其藥理作用強(qiáng)度。 三、給出結(jié)果試驗(yàn)過程要有詳細(xì)記錄。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果對檢品的真實(shí)性、純度或品質(zhì)優(yōu)良度下結(jié)論:“合格或不合格”、“符合或不符合規(guī)定” “能否供藥用” 。 檢定項(xiàng)目必須有完整的、真實(shí)的和

4、原始的檢驗(yàn)記錄,以備審核。經(jīng)部門主管審核后,簽發(fā)報(bào)告書,并做好檢品留樣工作。 藥品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)簽發(fā)的報(bào)告書具有法律責(zé)任。如果送檢單位對該檢驗(yàn)結(jié)果有疑問或經(jīng)檢定合格的中藥在使用過程中發(fā)生了中毒、死亡等醫(yī)療事故,則需將留樣觀察之樣品送上一級藥品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)作仲栽檢驗(yàn)。 第三節(jié) 中藥鑒定方法四大鑒別方法一、來源(基源) 二、性狀 三、顯微 四、理化 一、來源鑒定 應(yīng)用植(動(dòng)、礦)物的分類學(xué)知識(shí),確定中藥的正確學(xué)名。分三步:采集實(shí)物,觀察形態(tài),核對文獻(xiàn),對照鑒定,核對標(biāo)本,確定學(xué)名 二、 性狀鑒定(經(jīng)驗(yàn)鑒別) 通過眼觀、手摸、鼻聞、口嘗、水試、火試的方法,鑒別藥材的真?zhèn)蝺?yōu)劣。也叫經(jīng)驗(yàn)鑒定十要素:形狀 大小 顏

5、色 表面 質(zhì)地?cái)嗝?氣 味 水試 火試 “看”,就是仔細(xì)觀察中藥的性狀、大小、色澤、表面和斷面特征等,并以一些簡單的詞語來形容。 獅子盤頭:指黨參的根頭部膨大,并有多數(shù)疣狀突起的地上莖痕或芽痕聚集成頭狀,習(xí)稱獅子盤頭.。川木香:根頭偶有黑色發(fā)粘的膠狀物,習(xí)稱“油頭”或“糊頭”菊花心:指藥材斷面有細(xì)密的放射狀紋理,形如一朵開放的菊花,習(xí)稱菊花心?!斑^橋桿”:黃連根莖的中段常有細(xì)長光滑的節(jié)間,習(xí)稱“過橋桿”或“過江枝”。 “摸”,就是用手觸摸中藥,以判斷中藥的表面、質(zhì)地及折斷現(xiàn)象。通常用光滑、粗糙;硬軟、結(jié)松、輕重、韌脆、彈柔以及粉質(zhì)、角質(zhì)、油潤、綿性、柴性、粘性等詞來形容。甘草、茯苓、豬苓“聞”

6、或“嗅”是直接嗅聞完整的中藥,或于剝碎、搓揉、折斷時(shí)所能聞到的氣感。氣無,氣微,氣微香、氣香、氣香濃郁,氣清香。氣特異。 “嘗”是用舌尖接觸中藥表面,或取少量入口咀嚼能感覺到的味感。 甘、酸、苦、辣、咸、澀、淡7味。 舌尖對甜的、舌根對苦的、兩前側(cè)對酸的、兩后側(cè)對咸的較為敏感。 同心紋:指異形維管束排列成同心性環(huán)紋。舉例:(1)水試法鑒別藥材舉例(2)火試法鑒別藥材舉例三、顯微鑒別.定義利用顯微鏡來觀察藥材的組織構(gòu)造、細(xì)胞形狀及內(nèi)含物,鑒定藥材品種和質(zhì)量包括兩種:組織鑒定粉末鑒定.組織鑒定:通過觀察藥材的切片鑒別其組織構(gòu)造特征,適合:完整藥材或粉末特征相似的同屬藥材的鑒別.粉末鑒定:通過觀察藥

7、材的粉末制片鑒別其細(xì)胞分子及內(nèi)含物的特征。適合:破碎、粉末狀藥材或中成藥的鑒別。(一)組織構(gòu)造與細(xì)胞形態(tài)鑒別制片類型、橫切片和縱切片目的:觀察組織構(gòu)造。常用橫切片三、顯微鑒別1.切片方法:.解離組織片、表面片、粉末片目的:鑒定藥材和以原粉入藥的中成藥方法:水合氯醛透化片粉末少許,加水合氯醛加熱透化2-3次,加稀甘油,封片。透化目的: 溶解淀粉粒、蛋白質(zhì)、葉綠體、樹脂、揮發(fā)油等;使已收縮細(xì)胞膨脹。水合氯醛是優(yōu)良透明劑。稀甘油目的:避免析出結(jié)晶;保新。 粉末片要求粉末細(xì)度:藥材80-100目,成藥一般120目,粉碎時(shí)應(yīng)全部過篩。、花粉粒與孢子制片、礦物藥制片(二)細(xì)胞內(nèi)含物和細(xì)胞壁檢測:、細(xì)胞內(nèi)含

8、物()淀粉粒:醋酸甘油或蒸餾水裝片偏光鏡觀察;()糊粉粒:甘油裝片加碘顯棕或黃棕色,加硝酸汞顯磚紅色()菊糖:70%乙醇或水合氯醛液不加熱立即觀察(形成球形結(jié)晶)()草酸鈣結(jié)晶:加硫酸漸溶,析出針狀結(jié)晶;()碳酸鈣(鐘乳體):加稀鹽酸溶解,有氣泡產(chǎn)生;()硅質(zhì)細(xì)胞:硫酸不溶;()粘液細(xì)胞:釕紅顯紅色;()脂肪油、揮發(fā)油或樹脂:蘇丹橘紅、紅色或紫紅色;乙醇脂肪油不溶解,揮發(fā)油溶解。、細(xì)胞壁性質(zhì)檢查()木質(zhì)化:間苯三酚及鹽酸顯紅色或紫紅色;()木栓化或角質(zhì)化:加蘇丹,放置或微熱呈橘紅至紅;()纖維素:加氯化鋅碘試液或加碘再加硫酸液藍(lán)或紫色;()硅質(zhì)化:加硫酸無變化。(三)顯微測量測定某一特征的大小

9、,如:草酸鈣結(jié)晶;顯微定量。 (四)電子顯微鏡四、理化鑒定 利用物理的或化學(xué)的方法對中藥中所含的主要化學(xué)成分或有效成分或特征性成分進(jìn)行定性分析,用于中藥的真?zhèn)舞b定。(一)物理常數(shù)測定 包括相對密度、旋光度、折光率、硬度、黏稠度、沸點(diǎn)、凝固點(diǎn)、熔點(diǎn)等的測定。這對揮發(fā)油、油脂類、樹脂類、液體類(蜂蜜)、和加工品(阿膠)等。 藥材摻有其他物質(zhì)時(shí)物理常數(shù)會(huì)改變。如蜂蜜摻水,比重會(huì)降低,摻蔗糖旋光度會(huì)改變。 正品:(含蔗糖約5)為左旋, 摻蔗糖的蜂蜜:(含蔗糖20)為右旋。05版藥典中的物理常數(shù):如蜂蜜的相對密度在1.349以上,薄荷油為0.8880.908;冰片的熔點(diǎn)為205 210 ;肉桂油的折光率

10、為1.062-1.614等。天竺黃粉末(過4號篩)輕輕裝入量筒內(nèi),其體積不少于35ml。(二)常規(guī)檢查1、水分測定方法:四種;烘干法、甲苯法、減壓干燥法、氣相色譜法如:牛黃含水量不得過.2、灰分測定:高溫灼燒??偦曳窒薅?、酸不溶性灰分 3、膨脹度檢查 膨脹度:是藥品膨脹性質(zhì)的指標(biāo),系指按干燥品計(jì)算,每1g藥品在水或其他規(guī)定的溶劑中,在一定的時(shí)間與溫度條件下膨脹后所占有的體積(ml)。主要用于含黏液質(zhì)、膠質(zhì)和半纖維素類的天然藥品。 藥材中含有的黏液質(zhì)、果膠、樹膠等成分,有吸水膨脹的性質(zhì),其吸水膨脹的程度和其所含的黏液等成正比關(guān)系,可通過測定膨脹度進(jìn)行鑒別。 南葶藶子和北葶藶子外形不易區(qū)分,北葶藶

11、子膨脹度不低于12,南葶藶子膨脹度不低于3。 4、酸敗度檢查 酸敗度:是指油脂或含油脂的種子類藥材,在貯藏過程中發(fā)生復(fù)雜的化學(xué)變化,產(chǎn)生游離脂肪酸、過氧化物和低分子醛類、酮類等分解產(chǎn)物,因而出現(xiàn)異臭味,影響藥材的感觀和內(nèi)在質(zhì)量。 通過酸值、羰基值或過氧化值的測定,以檢查藥材的酸敗程度。 藥典規(guī)定郁李仁的酸值不得過100、 羰基值不得過30、 過氧化值不得過005。 5、色度檢查 色度檢查在貯藏過程中易變色、走油的藥材,利用比色鑒別法檢查藥材在貯藏過程中有色雜質(zhì)的限量,了解和控制其走油變質(zhì)的程度。 中國藥典2005年版一部白術(shù)項(xiàng)下規(guī)定白術(shù)的酸性乙醇提取液與對照液相比較顯色不得較深。 6有害物質(zhì)的

12、檢查 中藥的有害物質(zhì)主要有內(nèi)源性的有害物質(zhì)和外源性的有害物質(zhì)。 (1)內(nèi)源性的有害物質(zhì) 主要為嚴(yán)重危害人體健康的毒性成分。如: 腎毒性成分馬兜鈴酸,主要存在于馬兜鈴科馬兜鈴屬的關(guān)木通、廣防己、青木香、馬兜鈴、天仙藤、朱砂蓮等藥材中。 肝毒性成分吡咯里西啶生物堿,主要存在于農(nóng)吉利、千里光、款冬、佩蘭、豬屎豆等藥材中。 對中藥中馬兜鈴酸和吡咯里西啶生物堿常用的檢測方法是高效液相色譜法、高效毛細(xì)管電泳及其與質(zhì)譜聯(lián)用的技術(shù)。中國藥典2005年版一部已取消了廣防己、關(guān)木通、青木香的藥用標(biāo)準(zhǔn),并將細(xì)辛由全草入藥改為以根和根莖入藥,因細(xì)辛的地上部分含馬兜鈴酸。 (2)外源性的有害物質(zhì) 中藥中的外源性有害物質(zhì)

13、主要是重金屬及有害元素、殘留的農(nóng)藥、黃曲霉毒素和二氧化硫等。農(nóng)藥殘留量測定黃曲霉毒素檢查重金屬檢查砷鹽檢查農(nóng)藥殘留量測定 根據(jù)有關(guān)規(guī)定,生藥材生產(chǎn)過程中不得使用農(nóng)藥,施用過農(nóng)藥的土地,5年內(nèi)不準(zhǔn)種植生藥材。但目前濫用農(nóng)藥的現(xiàn)象極其普遍,特別是某些長效、劇毒、積蓄性的殺蟲劑,如六六六和DDT,由于它們在土壤和生物體中長期殘留和積蓄,對人類的危害極大。這些殺蟲劑雖已停止生產(chǎn),但私自使用的情況仍然存在。中藥中有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量的分析,一般用氣相色譜法測定。中國藥典2005年版一部規(guī)定使用GC-ECD法測定中藥中3類共9種有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量,并對甘草和黃芪明確規(guī)定了有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量六六六(總BHC)不

14、得超過千萬分之二;滴滴涕(總DDT)不得超過千萬分之二;五氯硝基苯(PCNB)不得超過千萬分之一。有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的測定:有機(jī)磷農(nóng)藥常見的有敵敵畏、對硫磷、樂果、二嗪農(nóng)、久效磷等12種。中國藥典2005年版一部規(guī)定使用氣相色譜法檢測中藥中有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留量。擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的測定:中國藥典2005年版一部規(guī)定用氣相色譜法檢測氯氰菊酯、氰戊菊酯及溴氰菊酯在中藥中的殘留量。黃曲霉毒素檢查 中藥在貯藏過程中,如果含水量超過一定限度,則易生霉變質(zhì)。其中危害最大的是黃曲霉菌。黃曲霉菌含多種黃曲霉毒素,有強(qiáng)烈的致肝損害和致癌作用; 世界各國對食品和藥物中黃曲霉毒素的限量均作了嚴(yán)格的規(guī)定。 檢測方法:

15、主要是根據(jù)黃曲霉毒素中毒性最大的成分黃曲霉毒素B1、B2和G1、G2的理化性質(zhì)而設(shè)計(jì)的。 能溶于氯仿和甲醇而不溶于己烷、乙醚和石油醚,在紫外光(365nm)下分別顯藍(lán)色和黃綠色熒光。 中藥粉末經(jīng)氯仿或甲醇提取,提取液濃縮后進(jìn)行薄層色譜分離,以已知濃度的黃曲霉毒素標(biāo)準(zhǔn)品作對照,根據(jù)斑點(diǎn)大小和熒光強(qiáng)度來判斷是否超過規(guī)定的限度。 準(zhǔn)確定量:可采用薄層色譜-紫外分光光度法或熒光光度法、薄層掃描法等。重金屬檢查 中國藥典對某些生藥規(guī)定了重金屬、砷鹽或其它金屬鹽的限度檢查。主要是礦物藥如石膏(不得超過百萬分之三十) 揮發(fā)油類如薄荷油(不得超過百萬分之十) ,加工品如阿膠(不得超過百萬分之三)等。測定的方法

16、和含量限度可按中國藥典有關(guān)規(guī)定進(jìn)行.砷鹽檢查 中國藥典 2005年版一部用古蔡氏法或二乙基二硫代氨基甲酸銀法兩種方法,并規(guī)定玄明粉含砷鹽不得過百萬分之二十;芒硝含砷鹽不得過百萬分之十;石膏含砷鹽不得過百萬分之二;阿膠含砷鹽不得過百萬分之三。 中國藥典2005年版一部對有害元素砷元素規(guī)定用原子吸收分光光度法和電感耦合等離子體質(zhì)譜法進(jìn)行測定。并規(guī)定甘草、黃芪、丹參、西洋參、白芍、金銀花含砷不得過百萬分之二。 二氧化硫的檢查: 不少中藥材在加工或儲(chǔ)藏中常使用硫黃熏蒸以達(dá)到殺菌防腐、漂白藥材的目的。 目前世界上許多國家對藥品和食品中殘留的二氧化硫均作了嚴(yán)格的限量。其檢測方法有酸蒸餾碘滴定法和離子色譜法

17、。 我國法定藥品標(biāo)準(zhǔn)目前尚未對藥材中二氧化硫作限量檢查。(三) 一般理化鑒別1.顯色反應(yīng):可將適當(dāng)?shù)脑噭┲苯蛹拥剿幉谋砻婊蚯衅?。如:?%釩酸鈉的硫酸溶液于番木鱉胚乳切片上迅顯紫色(番木鱉堿反應(yīng))。 用適當(dāng)溶劑和方法將中藥中的某類成分提取出來,再將提取液置于試管中,加入適當(dāng)?shù)脑噭┦巩a(chǎn)生顏色反應(yīng)或也可將中藥提取液滴于白瓷點(diǎn)滴板上、濾紙片或薄層板上,加入1滴試劑觀察其顏色反應(yīng)。2.沉淀反應(yīng): 例如含生物堿類成分中藥的酸水提取液,加入生物堿沉淀劑應(yīng)產(chǎn)生相應(yīng)的沉淀反應(yīng)。3、泡沫指數(shù)和溶血指數(shù) 利用皂苷的水溶液振搖后能產(chǎn)生持久性的泡沫和溶解紅細(xì)胞的性質(zhì),測定皂苷類藥材的泡沫指數(shù)和溶血指數(shù)作為質(zhì)量指標(biāo)。

18、4. 微量升華: 利用中藥中含有的某些化學(xué)成分,在一定溫度下能升華(固態(tài)-氣態(tài))的性質(zhì)獲得升華物,在顯微鏡下觀察其形狀、顏色以及化學(xué)反應(yīng)。例如,大黃、牡丹皮、薄荷、班蝥、兒茶、茶葉均可用微量升華方法得到不同形狀的升華物。升華物的結(jié)晶形狀與升華溫度有關(guān)。5. 顯微化學(xué)反應(yīng):將干粉、徒手切片或浸出液少量,置于載玻片上,滴加某種試劑使產(chǎn)生結(jié)晶或產(chǎn)生特殊的顏色,在顯微鏡下觀察,如: a.直立百部鮮塊根切片,滴加氯化金試液裝片,在皮層中有微黃色玫瑰花狀結(jié)晶(生物堿); b.丁香切片滴加3%氫氧化鈉的氯化鈉飽和液裝片,油室有針狀丁香酚鈉結(jié)晶析出; c.黃連粉末或醇提液加稀HCl,可見針簇狀小檗堿鹽酸鹽結(jié)晶

19、析出。顯微化學(xué)法鑒別藥材舉例6. 熒光分析: 利用中藥中所含某些化學(xué)成分,在紫外光或常光下能產(chǎn)生一定顏色熒光的性質(zhì),作為中藥真?zhèn)舞b別的一種簡易方法。通常可直接取中藥的切片、斷面或粉末在紫外光燈下觀察熒光反應(yīng)。黃連斷面木部顯金黃色熒光,大黃粉末顯深棕色熒光,浙貝母亮綠色熒光,秦皮水浸液天藍(lán)色熒光。 有些中藥本身不產(chǎn)生熒光,但以酸或堿,或經(jīng)其它化學(xué)方法處理后,可使某些成分在紫外光下產(chǎn)生熒光。蘆薈溶液與硼砂共熱,所含蘆薈素即起反應(yīng)顯黃綠色熒光;枳殼的乙醇浸液點(diǎn)于濾紙片上,干后噴0.5%醋酸鎂甲醇溶液,烘干后顯淡藍(lán)色熒光。 熒光顯微鏡觀察: 沉香與土沉香粉末極相似,熒光顯微鏡下觀察:沉香:部分顆粒顯竹

20、篁綠色熒光,部分顆粒顯枯綠色熒光;土沉香:部分顆粒顯海藍(lán)色熒光,部分顆粒顯灰綠色熒光。 可利用熒光顯微鏡觀察中藥的熒光以確定化學(xué)物質(zhì)存在的部位。熒光分析法鑒別藥材舉例(四). 色譜法(層析法) : 是分離天然化學(xué)物質(zhì)和合成有機(jī)物質(zhì)的一種重要方法。 由于不同中藥中所含化學(xué)成分的種類和數(shù)量存在差異,故可通過比較不同中藥間或待鑒定中藥與標(biāo)準(zhǔn)中藥間的色譜圖,或通過鑒定中藥中主要化學(xué)成分的存在,用于中藥的真實(shí)性鑒定。 根據(jù)色譜分離的原理可分為:吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、排阻色譜(凝膠滲透色譜)等。 吸附色譜: 是利用被分離物質(zhì)在吸附劑上被吸附的能力不同,用溶劑或氣體洗脫,使組分達(dá)到分離。吸附劑有

21、氧化鋁、硅膠、聚酰胺等。 分配色譜: 是利用被分離物質(zhì)在兩相中有不同的分配系數(shù)(溶解度)而使組分分離。其中一相為液體,涂布或使之鍵合在固體載體上,稱為固定相;另一相為液體或氣體,稱為流動(dòng)相。載體有硅膠、硅藻土等。 離子交換色譜: 是利用被分離物質(zhì)對離子交換樹脂上的離子親和力程度的不同使組分分離。不同強(qiáng)度的陽、陰離子交換樹脂,流動(dòng)相有水、緩沖液等。按照色譜方法不同可分為:紙色譜、薄層色譜、柱色譜、氣相色譜、高效液相色譜等。 1.紙色譜與薄層色譜法 *紙色譜(paper chromatography, PC)是以層析濾紙為載體,以紙上所含水分或其它物質(zhì)為固定相,以單一或混合有機(jī)溶劑為流動(dòng)相進(jìn)行展開

22、的一種。分配色譜法。 主要用于糖類、甙類、氨基酸類等水溶性成分的分離。常用的展開劑是正丁醇-醋酸-水。由于紙色譜所需的展開時(shí)間較長、分離效果較差、斑點(diǎn)易擴(kuò)散和拖尾、亦不能使用腐蝕性顯色劑等缺點(diǎn),現(xiàn)已較少應(yīng)用。 *薄層色譜(thin layer chromatography,TLC) 是將吸附劑或載體涂布于大小適宜的玻璃板或鋁箔上,使成一均勻 薄層,層析過程在薄層上進(jìn)行。待點(diǎn) 樣展開后,與適宜的對照物(對照品或中藥)按同法同板所得的色譜圖作對比,用于鑒定中藥的真?zhèn)巍?紙色譜和薄層色譜中被分離成 分在色譜圖中的位置是定性的基礎(chǔ),通常用比移(Rf)值來表示。 比移值(Rf)=原點(diǎn)中心至斑點(diǎn)中心的距離

23、/原點(diǎn)中心至流動(dòng)相前沿的距離。 相對比移值(Rst)=原點(diǎn)中心至斑點(diǎn)中心的距離/原點(diǎn)中心至參考物質(zhì)斑點(diǎn)中心的距離。 相對比移值可消除不少系統(tǒng)誤差,具有較好的可比性。 薄層色譜法也可選用適當(dāng)?shù)臈l件用薄層掃描儀繪制薄層掃描圖譜 2. 氣相色譜法(gas chromatography, GC) 主要用于含揮發(fā)性成分的中藥的鑒定,其分離效果、精密度和重現(xiàn)性均較薄層色譜法好。 可用于中藥鑒定的數(shù)據(jù)主要是保留時(shí)間(tR)和相對百分峰面積。 應(yīng)用氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀則可同時(shí)對被分離的色譜峰進(jìn)行分析,通過計(jì)算機(jī)檢索,可快速鑒定成分。 是含揮發(fā)油中藥真?zhèn)舞b別和品質(zhì)評價(jià)不可缺少的手段。 例如,對各種砂仁及其混淆品

24、的氣相色譜/質(zhì)譜分析發(fā)現(xiàn),正品砂仁如陽春砂仁、綠殼砂仁和縮砂所含揮發(fā)油成分相似,主要成分為檸檬烯、芳樟醇、樟腦、龍腦、乙酸龍腦酯,但含量不同,色譜峰也有明顯區(qū)別。 3. 高效液相色譜法(high performance liguid chromatography, HPLC) 具有快速、分離效率高、儀器化等特點(diǎn),而且其適應(yīng)范圍廣、流動(dòng)相可選擇范圍寬、色譜柱可反復(fù)使用以及組份易收集等優(yōu)點(diǎn),已成為天然藥物成分分離和定性、定量分析不可缺少的工具。 根據(jù)中藥中主要化學(xué)成分的性質(zhì),制備適宜的樣品溶液,選擇適當(dāng)?shù)纳V柱和分析條件即可進(jìn)樣分析。 高效液相色譜圖中各色譜峰的保留時(shí)間、相對百分峰面積以及主要色譜

25、峰的紫外吸收光譜等,均可作為中藥真實(shí)性鑒定的指紋資料。HPLC實(shí)例:4.凝膠(蛋白)電泳色譜法 是利用帶電粒子在電場的作用下,遷移的速度不同這一原理進(jìn)行分離的技術(shù)。 聚丙烯酰胺凝膠蛋白電泳是指以為支持介質(zhì)的電泳分離方法。操作簡便,重現(xiàn)性好,電泳譜帶穩(wěn)定可靠。人參、西洋參及偽品鑒別1).樣品的制備及凝膠系統(tǒng)的選擇: 新鮮樣品,低溫干燥(t60 ),取樣品0.5g,冰箱內(nèi)固定1小時(shí),搗碎,過40目篩,加電極緩沖液研磨成勻漿,3500rpm離心10分鐘,上清液再5000rmp離心10分鐘,取上清液備用。 凝膠:分離膠7.5,濃縮膠2.5。電極緩沖為tris甘氨酸 pH8.3緩沖液。2).加樣與電泳:

26、每凝膠管加樣品液100ul,表面小心覆蓋電極緩沖液,上槽負(fù)極緩沖液中加2滴溴酚藍(lán)指示劑,接通電源,調(diào)節(jié)電流至每管1mA,當(dāng)樣品進(jìn)入分離膠后(約20分鐘),加大電流至每管2mA,待溴酚藍(lán)到達(dá)距末端1cm時(shí),停止電泳。3).固定、染色與脫色:電泳完畢后,取出凝膠于12.5三氯乙酸中固定30分鐘,然后浸入含2的考馬斯亮藍(lán)的12.5三氯乙酸中染色2小時(shí),再用7醋酸漂洗脫色至背景清晰為止。4).結(jié)果:譜帶分為四級,色深者為一級,色淺者為二級,色極淺者為三級,譜帶擴(kuò)散者為擴(kuò)散帶。(五)光譜法物質(zhì)溶液對于不同波長的光線的吸收能力是不同的,利用分光光度計(jì)將不同波長的單色光連續(xù)通過該溶液,就可得到該物質(zhì)的吸收光譜。每種物質(zhì)都有其特定的吸收光譜,是天然化合物結(jié)構(gòu)鑒定的重要依據(jù)之一。1、紫外分光光度法2、比色法3、紅外分光光度法4、

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論