2019-2020生物人教版選修1檢測專題5課題3血紅蛋白的提取和分離

1、!課題3血紅蛋白的提取和分離課堂對點訓(xùn)練-ke tang dui dian xum lian題型一血紅蛋白的提取與分離的原理1.利用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理是（）a.蛋白質(zhì)分子與凝膠的親和力的大小b.蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的大小c.蛋白質(zhì)所帶電荷的多少d.蛋白質(zhì)溶解度的大小答案b解析 凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道， 路程長，移動的速度慢，相對分子 質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進入凝膠內(nèi)部的通道， 路程短，移動的速度快，因此相對 分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分離。2.凝膠色譜分離法分離蛋白質(zhì)時，凝膠的種類較多，但其作用的共同點是（）a.

2、改變蛋白質(zhì)分子通過凝膠時的路徑b.吸附一部分蛋白質(zhì)，從而影響蛋白質(zhì)分子的移動速度c.將酶或細胞固定在凝膠中d.與蛋白質(zhì)分子進行化學反應(yīng)，從而影響其移動速度答案a解析 凝膠的種類較多，但每一種凝膠內(nèi)部都有孔隙。相對分子質(zhì)量不同的蛋白 質(zhì)通過凝膠時，相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道， 路程較長， 移動速度較慢；相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快，相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以分離，a正確。3.如圖能正確表示相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)在凝膠中的行進過程的是）（i)ci)答案b解析 相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道，路程長，移動的速度慢；相

3、對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動的速度快，b正確。4 .下列有關(guān)電泳的敘述，不正確的是（）a.電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程b.待測樣品中各種分子的形狀、大小及帶電性質(zhì)的差異等會影響其在電泳中的 遷移速度c.進行電泳時，帶電粒子會向著與其所帶電荷相同的電極移動d.常用的電泳方法是瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳答案c解析 電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程，在電場的作用下，帶 電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動， a正確，c錯誤；由于待分離樣品 中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同，會使帶電分子產(chǎn) 生不同的遷移速度，從而

4、實現(xiàn)樣品中各種分子的分離，b正確；瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳是兩種常見的電泳方法，d正確。5 . sds聚丙烯酰胺凝膠電泳法中加入的 sds的作用是（）a .增大蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量b.將蛋白質(zhì)分解成單個氨基酸c.掩蓋不同蛋白質(zhì)分子間的電荷差別d.增加不同蛋白質(zhì)分子間的電荷差別答案c解析sds聚丙烯酰胺凝膠電泳法中加入 sds的目的是使蛋白質(zhì)完全變性，解 聚成單條肽鏈；同時sds所帶負電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量， 因而掩蓋了不同蛋白質(zhì)間的電荷差別， c正確。）（.下列有關(guān)透析的敘述，錯誤的是 6.a.用于透析的薄膜要具有選擇透過性b.透析膜一般是用硝酸纖維素制成的c.透析

5、袋能使小分子自由進出，而將大分子保留在袋內(nèi)d.透析可用于更換樣品的緩沖液答案a解析 透析袋一般是用硝酸纖維素（又稱玻璃紙）制成的，它沒有生物活性，故不 具有選擇透過性（活的生物膜才具有選擇透過性），b正確，a錯誤；透析袋能使 小分子自由進出，而將大分子保留在袋內(nèi)，c正確；透析可以去除樣品中相對分 子質(zhì)量較小的雜質(zhì)，或用于更換樣品的緩沖液，d正確。題型二 血紅蛋白的提取與分離的實驗過程7 .下列關(guān)于血紅蛋白提取和分離實驗的描述，正確的是 （）a.紅細胞的洗滌：加入蒸儲水，緩慢攪拌，低速短時間離心8 .血紅蛋白的釋放：加入生理鹽水和甲苯，置于磁力攪拌器上充分攪拌c.分離血紅蛋白：將攪拌好的混合液離

6、心、過濾后，用分液漏斗分離d.透析：將血紅蛋白溶液裝入透析袋，然后置于ph為4.0的磷酸緩沖液中透析12 h答案c解析 紅細胞洗滌過程中應(yīng)該用生理鹽水，不能用蒸儲水， a錯誤；血紅蛋白的 釋放應(yīng)該加入蒸儲水和甲苯，使紅細胞吸水漲破，釋放其中的血紅蛋白，b錯誤； 將攪拌好的混合液通過離心、過濾后，用分液漏斗分離出血紅蛋白溶液，c正確； 透析所用的磷酸緩沖液的ph為7.0, d錯誤。8.在血紅蛋白的整個提取過程中，不斷用磷酸緩沖液處理的目的是（）a .磷酸緩沖液會加速血紅蛋白的提取過程b.血紅蛋白是一種兩性物質(zhì)，需要酸進行中和c.防止血紅蛋白被氧氣氧化d.讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的ph范圍內(nèi)，以維持其結(jié)

7、構(gòu)和功能答案d解析 在一定范圍內(nèi)，緩沖溶液能夠抵制外界的酸和堿對溶液ph的影響，維持ph基本不變，防止血紅蛋白的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，從而有利于血紅蛋白的分離。）（.凝膠色譜柱制作的程序一般是 9.橡皮塞打孔挖凹穴裝玻璃管蓋尼龍網(wǎng)蓋尼龍紗將橡皮塞插入玻璃管接尼龍管、裝螺旋夾柱頂插入安裝了 玻璃管的橡皮塞a.一一一一一一一b.一一一一一一一c.一一一一一一一d.一一一一一一一答案b解析凝膠柱制作的一般流程是：選擇玻璃管一選擇合適的橡皮塞一打孔一挖凹 穴一裝玻璃管一蓋尼龍網(wǎng)一蓋尼龍紗一將橡皮塞插入玻璃管一接尼龍管一裝螺 旋夾一柱頂插入安裝了玻璃管的橡皮塞。10.下列關(guān)于凝膠色譜柱的操作，不正確的是 ()a

8、.在色譜柱中裝填凝膠的時候要盡量緊密b.凝膠用酒精充分溶脹后，配成凝膠懸浮液c .加樣前，打開色譜柱下端的流出口d.在凝膠色譜制作過程中，不能發(fā)生洗脫液流干，露出凝膠顆粒的現(xiàn)象答案b解析 凝膠應(yīng)用蒸儲水充分溶脹后，配成凝膠懸浮液，b錯誤。11 .將處理破裂后的紅細胞混合液以 2000 r/min的速度離心10 min后，離心管中的溶液分為四層，從上到下的順序依次是 ()a.血紅蛋白、甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、細胞破碎物沉淀層b.甲苯層、細胞破碎物沉淀層、血紅蛋白、脂質(zhì)物質(zhì)層c.脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、甲苯層、細胞破碎物沉淀層d.甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、細胞破碎物沉淀層答案d解析 將處理破裂后的紅

9、細胞混合液以 2000 r/min的速度離心10 min后，離心管 中的溶液分為四層，從上到下的順序依次是甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、細 胞破碎物沉淀層。12 .在裝填凝膠柱時，不得有氣泡存在的原因是 ().氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果a.b.氣泡阻礙蛋白質(zhì)的運動c.氣泡能與蛋白質(zhì)發(fā)生化學反應(yīng)d.氣泡會在裝填凝膠的時候，使凝膠不緊密答案a解析 在裝填凝膠柱時，不得有氣泡存在的原因是氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果，a正確。13 .紅細胞含有大量血紅蛋白，紅細胞的機能主要是由血紅蛋白完成的， 血紅蛋 白的主要功能是攜帶?；騝o,我們可以選用豬、牛、羊或其他脊

10、椎動物22的血 液進行實驗，來提取和分離血紅蛋白，請完成下列有關(guān)問題：(1)血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步： ? 和。(2)實驗前取新鮮的血液,要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進行離心，收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是 以上所述的過程即是樣品處理，它包括?: 分離血紅蛋白溶液。(3)收集的血紅蛋白溶液在透析袋中透析，這就是樣品的粗分離。透析的目的是-透析的原理是(4)然后通過凝膠色譜法將樣品進一步純化，最后經(jīng) sds-聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定。樣品純化的目的是-血紅蛋白有什么特點? j這一特點對進行蛋白質(zhì)的分離有什么意義？ 答案(1)樣品處理 粗分離 純化 純

11、度鑒定(2)防止血液凝固紅細胞的洗滌血紅蛋白的釋放(3)去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì) 透析袋能使小分子自由進出，而大分子則 保留在袋內(nèi)(4)通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去 血紅蛋白呈現(xiàn)這在 凝膠色譜分離時可以通過觀察顏色來判斷什么時候應(yīng)該收集洗脫液；紅色.使血紅蛋白的分離過程非常直觀，大大簡化了實驗操作程序解析(1)血紅蛋白的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度 鑒定0(2)采取血液時要在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉以防止血液凝固。樣品處理包括紅細胞洗滌、血紅蛋白釋放、分離血紅蛋白溶液。透析即是血紅蛋白的粗分離，透析的目的是除去分子量較小的雜蛋白。透析的原理是透析袋能

12、使小分子自由進出，而大分子則保留在袋內(nèi)。(4)樣品的純化是通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去。血紅蛋白呈紅色，在凝膠色譜分離時可以通過觀察顏色來判斷什么時候應(yīng)該收 集洗脫液，使血紅蛋白的分離過程非常直觀，大大簡化了實驗操作程序。14 .下面是凝膠色譜法分離血紅蛋白時樣品的加入 (圖i)和洗脫(圖n )示意圖, 請據(jù)圖回答下列問題：操作壓圖口(1)在加樣示意圖中，正確的加樣順序是 c?貼著管壁加樣、0(2)用吸管加樣時，應(yīng)注意正確操作，分別是(3)等樣品時，才加入緩沖液，待 接近色譜柱底端時，用試管收集流出液，每 ml收集一管，連續(xù)收集。答案(1)一一一(2)不要破壞凝膠面 使吸管管口

13、沿管壁環(huán)繞移動(3)完全進入凝膠層 紅色的蛋白質(zhì)5管口沿著管壁環(huán)吸管應(yīng)貼著管壁，加樣品時應(yīng)嚴格按要求進行操作，解析.繞移動，還應(yīng)注意不要破壞凝膠面。等樣品完全進入到凝膠層時，才加入緩沖液 進行洗脫。待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時，用試管收集流出液，每 5 ml收 集一管，連續(xù)收集。-課后提能訓(xùn)練-ke hou tl neng xun lian1.分離不同種類的蛋白質(zhì)依據(jù)的原理不包括 （）a.分子的形狀和大小b.所帶電荷的性質(zhì)和多少、吸附性質(zhì)c.對其他分子的親和力d.蛋白質(zhì)分子的組成元素答案d解析 分離不同種類的蛋白質(zhì)依據(jù)的原理包括分子的形狀和大小、所帶電荷的性質(zhì)和多少、吸附性質(zhì)、對其他分子的親

14、和力和蛋白質(zhì)分子的溶解度等。 蛋白質(zhì)分子的組成元素不是分離不同蛋白質(zhì)的依據(jù)。2.下面說法不正確的是（）a.在一定范圍內(nèi)，緩沖溶液能夠抵制外界的酸和堿對溶液 ph的影響，維持ph 基本不變b.緩沖溶液通常由12種緩沖劑溶解于水中配制而成c.血紅蛋白由4條肽鏈組成d.透析袋能使大分子自由進出，而將小分子保留在袋內(nèi)答案d解析 透析袋一般是用硝酸纖維素（又叫玻璃紙）制成的。透析袋能使小分子自由 進出，而將大分子保留在袋內(nèi)。透析可以除去樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)， 或用于更換樣品的緩沖液。3.關(guān)于電泳的說法不正確的是（）a .瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳是兩種常用的電泳方法b.帶電分子會向著與其

15、所帶電荷相反的電極移動c.蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少聚丙烯酰胺凝膠電泳，蛋白質(zhì)的電泳遷移率完全取決于分子的sds.用d.大小答案c解析 蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少以及分子的大小等因素，sds能與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì)一sds復(fù)合物，sds所帶負電 荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量， 因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷 差異，使電泳遷移率完全取決于分子的大小。4.在血紅蛋白的提取過程中，下列有關(guān)敘述不正確的是 （）a.要使紅細胞中的血紅蛋白釋放出來，需蒸儲水和甲苯的共同作用b.離心后的血紅蛋白混合液第1層為白色薄層固體c.豬成熟紅細胞中

16、缺少細胞器和細胞核，提純時雜蛋白較少d.洗滌紅細胞時，使用生理鹽水可防止紅細胞破裂答案b解析 血紅蛋白的釋放需要蒸儲水和甲苯的共同作用，a正確；離心后的血紅蛋白混合液第1層為無色透明的甲苯層，b錯誤；哺乳動物成熟紅細胞中缺少細胞 器和細胞核，可獲得較純凈的血紅蛋白， c正確；洗滌紅細胞時，洗滌的目的是 去除雜蛋白以利于后續(xù)步驟的分離純化，加入的生理鹽水，可防止細胞破裂，d正確。5.取1 ml血紅蛋白溶液裝入透析袋中進行透析，相關(guān)說法不正確的是（）a.透析液為300 ml 20 mmol/l的磷酸緩沖液b.透析時間至少為12 h,時間過長血紅蛋白也會滲漏出去c.除去了相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)，實現(xiàn)

17、了樣品的粗分離d.透析也可用于更換樣品的緩沖液答案b解析 透析過程除去了相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)，實現(xiàn)了樣品的粗分離，透析也 可用于更換樣品的緩沖液，c、d正確；進行血紅蛋白溶液的透析時燒杯中加入 300 ml 20 mmol/l的磷酸緩沖液，透析時間為12小時，充分讓小分子雜質(zhì)與血 紅蛋白分離，a正確，b錯誤。6 .下列關(guān)于凝膠色譜柱的裝填的說法，不正確的是 （）a.在裝填凝膠柱時，不得有氣泡產(chǎn)生 .在操作過程中，不能讓洗脫液流干 b.c.樣品洗脫結(jié)束后，及時倒掉色譜柱中的凝膠d.干的凝膠要用蒸儲水充分溶脹后，才能裝填 答案c解析已裝填好的凝膠柱可重復(fù)多次使用，在使用過程的間隔，要用蒸儲水保持

18、 凝膠濕潤。7 .對在凝膠柱上加入樣品和洗脫的操作，不正確的是 （） a .加樣前要使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液下降到與凝膠面平齊 b.讓吸管管口沿管壁環(huán)繞移動貼壁加樣至色譜柱頂端，不要破壞凝膠面 c .打開下端出口，待樣品完全進入凝膠層后，直接連接緩沖液洗脫瓶開始洗脫 d.待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時，每 5 ml收集一管，連續(xù)收集流出液 答案c解析 樣品完全進入凝膠層后，加入磷酸緩沖液到適當高度，再連接緩沖液洗脫 瓶開始洗脫。8 .下列各項中，一般不影響在凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)中的分離度的是（）a.層析柱高 b.層析柱的直徑.樣品的分布d.緩沖溶液cb答案分離度取決于柱高，為分離不同組分，凝膠柱

19、床必須有適宜的高度，解析影響不符合題意；緩沖溶液的不符合題意；樣品的分布也影響分離度，adph不符合題意；只有層析柱的直蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)與功能，因此也影響分離度，c徑一般不影響分離度，b符合題意。.紅細胞含有大量血紅蛋白，紅細胞的機能主 要是由血紅蛋白完成。我們9可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進行實 驗，提取和分離血紅蛋白。下 圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實驗裝置，請回答下列問題:叮 皿皿乙(1)血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細胞的主要組成成分，其在紅細胞中的作用體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有功能。我們通常選用豬、牛、羊等動物的血液進行實驗,實驗時加入檸檬酸鈉的目的是 甲裝置中，b是血紅蛋白溶液，則

20、 a是;該操作目的是去除樣品中 乙裝置中，操作壓一定，保證 c溶液的流速(k “快” “慢”或“一定” )o用乙裝置分離蛋白質(zhì)的方法叫 。(4)最后經(jīng)sds聚丙烯酰胺凝膠電泳進行 。(5)還有同學將大腸桿菌破碎并提取得到大腸桿菌蛋白質(zhì)，一同學利用瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)將得到的蛋白質(zhì)進行分離， 在電泳過程中，影響蛋白質(zhì)遷移速度的因素包括蛋白質(zhì)分子的分子大小、 以及分子的形狀等。而另一位同學則利 用乙圖分離，待蛋白質(zhì)接近色柱底端時，用試管連續(xù)收集流出液。先收集到的蛋 白質(zhì)與后收集到的蛋白質(zhì)的區(qū)別是先收集到的蛋白質(zhì) 。答案(1)運輸防止血液凝固(2)磷酸緩沖液分子量小的雜質(zhì)一定(3)凝膠色譜法(4)純度

21、鑒定(5)帶電性質(zhì)分子量大解析(1)血紅蛋白具有運輸氧氣的功能；在分離血紅蛋白的實驗中，加入檸檬酸 鈉的目的是防止血液凝固。(2)在血紅蛋白的溶液中，加入適宜的磷酸緩沖溶液，可以除掉分子量較小的雜質(zhì)；在利用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的時候，洗脫液的速度應(yīng)當保持一定。裝置乙分離蛋白質(zhì)的方法是凝膠色譜法。(3).(4)最后用sds-聚丙烯酰胺凝膠電泳對血紅蛋白進行純度鑒定。(5)利用瓊脂糖凝膠電泳進行蛋白質(zhì)分離時， 蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量、帶電性質(zhì)、 分子形狀等因素都能影響蛋白質(zhì)的移動速度； 采用凝膠色譜法進行蛋白質(zhì)分離時， 結(jié)果是相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)，運動路程較短，先被洗脫出來。10 .凝膠色譜法可

22、測定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量，現(xiàn)有 a、b兩種蛋白質(zhì)，請運用 凝膠色譜法完成下列實驗，確定 a、b兩種蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的大小。(1)凝膠色譜法的原理是材料用具：玻璃管、橡皮塞、打孔器、移液管、尼龍網(wǎng)、螺旋夾、凝膠、緩 沖液。(3)實驗步驟：凝膠色譜柱的制作：注意底塞中插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的，否則難以鋪實 ,還會導(dǎo)致液體殘留，蛋白質(zhì)分離不徹底。凝膠色譜柱的裝填：裝填時輕輕敲動色譜柱的原因是 樣品的加入和洗脫： (4)預(yù)期結(jié)果及結(jié)論：答案(1)根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)凹穴底面 尼龍網(wǎng) 使凝膠裝填均勻 將a、b兩種蛋白質(zhì)的混合液加到 凝膠色譜柱的上端，用緩沖液進行洗脫，檢測它們洗脫的先后順序(4)若a先于b洗脫出來，則a的相對分子質(zhì)量大于b;若b先洗脫出來，則b 的相對分子質(zhì)量大于a解析(1)凝膠色