土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)

1、整理ppt1 整理ppt2 整理ppt3 整理ppt4 水生耐熱細(xì)菌Taq 耐高溫的Taq DNA聚合酶 在微生物學(xué)中，將在微生物學(xué)中，將允許允許特定種類的微生特定種類的微生 物生長(zhǎng)，同時(shí)物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止抑制或阻止其他種類微生其他種類微生 物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。 整理ppt5 整理ppt6 整理ppt7 整理ppt8 思考書思考書 本本2222頁(yè)頁(yè) 問(wèn)題：?jiǎn)栴}： 第一位同學(xué)第一位同學(xué)只涂布了一個(gè)平板，只涂布了一個(gè)平板，沒(méi)有設(shè)置重復(fù)組，沒(méi)有設(shè)置重復(fù)組，因此因此 結(jié)果不具有說(shuō)服力。結(jié)果不具有說(shuō)服力。第二位同學(xué)第二位同學(xué)考慮到設(shè)置重復(fù)組考慮到設(shè)置重復(fù)組的問(wèn)的問(wèn) 題，涂布了題，涂布了3

2、 3個(gè)平板，但是，個(gè)平板，但是，其中其中1 1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與 另另2 2個(gè)相差太遠(yuǎn)，說(shuō)明在操作過(guò)程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤，個(gè)相差太遠(yuǎn)，說(shuō)明在操作過(guò)程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤， 因此，不能簡(jiǎn)單地將因此，不能簡(jiǎn)單地將3 3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來(lái)求平均值。個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來(lái)求平均值。 這個(gè)實(shí)例啟示學(xué)生，這個(gè)實(shí)例啟示學(xué)生，在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)，一定要涂布至在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)，一定要涂布至 少少3 3個(gè)平板，作為重復(fù)組，才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服個(gè)平板，作為重復(fù)組，才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服 力與準(zhǔn)確性力與準(zhǔn)確性。在分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)，一定要考慮所設(shè)置在分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)，一定要考慮所設(shè)置 的重復(fù)組的結(jié)果是否一致，結(jié)果不一致，意味著操作

3、有的重復(fù)組的結(jié)果是否一致，結(jié)果不一致，意味著操作有 誤，需要重新實(shí)驗(yàn)。誤，需要重新實(shí)驗(yàn)。 整理ppt9 整理ppt10 ） 整理ppt11 整理ppt12 整理ppt13 制備以制備以尿素尿素為唯一氮源的為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基。 整理ppt14 整理ppt15 思考：思考：為什么分離不同的微生物要采用不同的稀為什么分離不同的微生物要采用不同的稀 釋度？測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分釋度？測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分 解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，選用的稀釋范圍相同嗎？解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，選用的稀釋范圍相同嗎？ 整理ppt16 實(shí)驗(yàn)時(shí)要實(shí)驗(yàn)時(shí)要 對(duì)培養(yǎng)皿作對(duì)培養(yǎng)皿作 好標(biāo)記。注好標(biāo)

4、記。注 明培養(yǎng)基類明培養(yǎng)基類 型、培養(yǎng)時(shí)型、培養(yǎng)時(shí) 間、稀釋度、間、稀釋度、 培養(yǎng)物等。培養(yǎng)物等。 整理ppt17 整理ppt18 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)步驟：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)步驟： 整理ppt19 整理ppt20 1 1、結(jié)合對(duì)照，分析培養(yǎng)物中是否有雜菌污染結(jié)合對(duì)照，分析培養(yǎng)物中是否有雜菌污染 以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出一些菌落。以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出一些菌落。 2 2、是否獲得了某一稀釋度下，菌落數(shù)目在是否獲得了某一稀釋度下，菌落數(shù)目在 3030030300的平板。在這稀釋度下，是否至少的平板。在這稀釋度下，是否至少 有兩個(gè)平板的菌落數(shù)相近？有兩個(gè)平板的菌落數(shù)相近？ 3 3、你統(tǒng)計(jì)的每克土壤中含有能分解尿素的細(xì)

5、你統(tǒng)計(jì)的每克土壤中含有能分解尿素的細(xì) 菌的菌落數(shù)是多少？與其他同學(xué)的結(jié)果接近嗎？菌的菌落數(shù)是多少？與其他同學(xué)的結(jié)果接近嗎？ 如果差異很大，可能是什么原因引起的？如果差異很大，可能是什么原因引起的？ 對(duì)照的培養(yǎng)皿在培養(yǎng)中無(wú)菌落生對(duì)照的培養(yǎng)皿在培養(yǎng)中無(wú)菌落生 長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基沒(méi)有被雜菌污染。長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基沒(méi)有被雜菌污染。 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的菌落數(shù)目牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的菌落數(shù)目 明顯大于選擇培養(yǎng)基，說(shuō)明選擇明顯大于選擇培養(yǎng)基，說(shuō)明選擇 培養(yǎng)基具有選擇作用。培養(yǎng)基具有選擇作用。 整理ppt21 整理ppt22 整理ppt23 整理ppt24 整理ppt25 例例2 2在微生物群體生長(zhǎng)規(guī)律的測(cè)定中，種內(nèi)

6、在微生物群體生長(zhǎng)規(guī)律的測(cè)定中，種內(nèi) 斗爭(zhēng)最顯著最激烈的時(shí)期是斗爭(zhēng)最顯著最激烈的時(shí)期是 A A調(diào)整期調(diào)整期 B B對(duì)數(shù)期對(duì)數(shù)期 C C穩(wěn)定期穩(wěn)定期 DD衰亡期衰亡期 解析：種內(nèi)斗爭(zhēng)是一種生態(tài)因素。種內(nèi)斗爭(zhēng)反應(yīng)了種內(nèi)生物解析：種內(nèi)斗爭(zhēng)是一種生態(tài)因素。種內(nèi)斗爭(zhēng)反應(yīng)了種內(nèi)生物 對(duì)生存空間和生活資源的爭(zhēng)奪。在生活空間充裕，營(yíng)養(yǎng)充足的時(shí)對(duì)生存空間和生活資源的爭(zhēng)奪。在生活空間充裕，營(yíng)養(yǎng)充足的時(shí) 候，種內(nèi)斗爭(zhēng)的程度是比較低的。隨著微生物個(gè)體數(shù)目的增加，候，種內(nèi)斗爭(zhēng)的程度是比較低的。隨著微生物個(gè)體數(shù)目的增加， 每個(gè)個(gè)體的生存空間越來(lái)越少，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)也越來(lái)越少，每個(gè)個(gè)體每個(gè)個(gè)體的生存空間越來(lái)越少，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)也越來(lái)越少

7、，每個(gè)個(gè)體 對(duì)生存空間和資源的爭(zhēng)奪也越來(lái)越激烈，種內(nèi)斗爭(zhēng)就越來(lái)越激烈。對(duì)生存空間和資源的爭(zhēng)奪也越來(lái)越激烈，種內(nèi)斗爭(zhēng)就越來(lái)越激烈。 由此可知，在由此可知，在穩(wěn)定期穩(wěn)定期的種內(nèi)斗爭(zhēng)最激烈。在衰亡期，微生物的數(shù)的種內(nèi)斗爭(zhēng)最激烈。在衰亡期，微生物的數(shù) 目已經(jīng)開始減少，目已經(jīng)開始減少，pHpH已經(jīng)極度不適于微生物的生存，次級(jí)代謝產(chǎn)已經(jīng)極度不適于微生物的生存，次級(jí)代謝產(chǎn) 物積累到很高的程度，這時(shí)的微生物的生存斗爭(zhēng)主要是與無(wú)機(jī)環(huán)物積累到很高的程度，這時(shí)的微生物的生存斗爭(zhēng)主要是與無(wú)機(jī)環(huán) 境的斗爭(zhēng)。境的斗爭(zhēng)。 答案：答案：C C 整理ppt26 3.3.使用選擇培養(yǎng)基的目的是（使用選擇培養(yǎng)基的目的是（ ） A.

8、A.培養(yǎng)細(xì)菌培養(yǎng)細(xì)菌 B.B.培養(yǎng)真菌培養(yǎng)真菌 C.C.使需要的微生物大量繁殖使需要的微生物大量繁殖 D.D.表現(xiàn)某微生物的特定性狀與其他微生物加以區(qū)別表現(xiàn)某微生物的特定性狀與其他微生物加以區(qū)別 4.4.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分別是能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分別是 ( )( ) A.CO A.CO2 2和和N N2 2 B. B.葡萄糖和葡萄糖和NHNH3 3 C.COC.CO2 2和尿素和尿素 D.D.葡萄糖和尿素葡萄糖和尿素 C C D D 整理ppt27 5.5.下列說(shuō)法不正確的是（下列說(shuō)法不正確的是（ ） A.A.科學(xué)家從科學(xué)家從70708080度熱泉中分離到耐

9、高溫的度熱泉中分離到耐高溫的TaqDNATaqDNA聚聚 合酶合酶 B.B.統(tǒng)計(jì)某一稀釋度的統(tǒng)計(jì)某一稀釋度的5 5個(gè)平板的菌落數(shù)依次為個(gè)平板的菌落數(shù)依次為M1M1、M2M2、 M3M3、M4M4、M5M5，以，以M3M3作為該樣品菌落數(shù)的估計(jì)值作為該樣品菌落數(shù)的估計(jì)值 C.C.設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因 素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度 D.D.同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大，同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大， 種類最多。種類最多。 6.6.為培養(yǎng)和分離出酵母菌并

10、淘汰雜菌，常在培養(yǎng)基中加為培養(yǎng)和分離出酵母菌并淘汰雜菌，常在培養(yǎng)基中加 入（）入（） A.A.較多的氮源物質(zhì)較多的氮源物質(zhì) B.B.較多的碳源物質(zhì)較多的碳源物質(zhì) C.C.青霉素類藥物青霉素類藥物 D.D.高濃度食鹽高濃度食鹽 B B C C 整理ppt28 利用生物工程生產(chǎn)啤酒、味精、胰島素、酸 奶的常用菌種分別是（ ） A酵母菌、枯草桿菌、大腸桿菌、乳酸菌 B酵母菌、大腸桿菌、青霉菌、乳酸菌 C酵母菌、谷氨酸棒狀桿菌、大腸桿菌、乳 酸菌 D黃色短桿菌、酵母菌、大腸桿菌、乳酸菌 C C 整理ppt29 測(cè)定土壤中細(xì)菌數(shù)量一般選用104、105和 106倍的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)，而測(cè)定真菌 的數(shù)量

11、一般選用102、103和104倍稀釋，其 原因是() A細(xì)菌個(gè)體小，真菌個(gè)體大 B細(xì)菌易稀釋，真菌不易稀釋 C細(xì)菌在土壤中數(shù)量比真菌多 D隨機(jī)的，沒(méi)有原因 C 整理ppt30 用來(lái)判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用需要設(shè) 置的對(duì)照是() A未接種的選擇培養(yǎng)基 B未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 C接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 D接種了的選擇培養(yǎng)基 C 選選C。將菌液稀釋相同的倍數(shù)，在牛肉膏蛋白胨培。將菌液稀釋相同的倍數(shù)，在牛肉膏蛋白胨培 養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的 數(shù)目，因此，應(yīng)選牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對(duì)照。數(shù)目，因此，應(yīng)選牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基

12、作為對(duì)照。 對(duì)照遵循的是單一變量原則，所以與選擇培養(yǎng)基一對(duì)照遵循的是單一變量原則，所以與選擇培養(yǎng)基一 樣接種、培養(yǎng)。樣接種、培養(yǎng)。 整理ppt31 分離土壤中分解尿素的細(xì)菌，對(duì)培養(yǎng)基的要求是分離土壤中分解尿素的細(xì)菌，對(duì)培養(yǎng)基的要求是( ( ) ) 加尿素不加尿素加瓊脂不加瓊脂加尿素不加尿素加瓊脂不加瓊脂 加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸鹽不加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸鹽不 加硝酸鹽加硝酸鹽 A A B B C C D D C 土壤中分解尿素的細(xì)菌能夠合成脲酶，將尿素分解生成氨，利土壤中分解尿素的細(xì)菌能夠合成脲酶，將尿素分解生成氨，利 用尿素中的氮合成自身有機(jī)物。培養(yǎng)基中只加尿素，分解尿素用尿素中的氮合成自

13、身有機(jī)物。培養(yǎng)基中只加尿素，分解尿素 的細(xì)菌能生長(zhǎng)，其他微生物不能生長(zhǎng)；分離微生物要用固體培的細(xì)菌能生長(zhǎng)，其他微生物不能生長(zhǎng)；分離微生物要用固體培 養(yǎng)基；土壤中分解尿素的細(xì)菌屬于異養(yǎng)微生物，需要加葡萄糖養(yǎng)基；土壤中分解尿素的細(xì)菌屬于異養(yǎng)微生物，需要加葡萄糖 作為碳源。作為碳源。 整理ppt32 根據(jù)實(shí)驗(yàn)原理和材料用具，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)確定細(xì)菌質(zhì)粒的抗菌素根據(jù)實(shí)驗(yàn)原理和材料用具，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)確定細(xì)菌質(zhì)粒的抗菌素 基因所抗的抗菌素的類別?；蛩沟目咕氐念悇e。 實(shí)驗(yàn)原理：作為運(yùn)載體的質(zhì)粒帶有標(biāo)記基因，這一標(biāo)記基因?qū)嶒?yàn)原理：作為運(yùn)載體的質(zhì)粒帶有標(biāo)記基因，這一標(biāo)記基因 是抗菌素抗性基因，即有抗性基因的質(zhì)?？捎米?/p>

14、運(yùn)載體。是抗菌素抗性基因，即有抗性基因的質(zhì)?？捎米鲞\(yùn)載體。 材料用具：青霉素、四環(huán)素各材料用具：青霉素、四環(huán)素各1010萬(wàn)單位溶液、菌種試管、滅萬(wàn)單位溶液、菌種試管、滅 菌的含細(xì)菌培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿、酒精燈、接種環(huán)、一次性注菌的含細(xì)菌培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿、酒精燈、接種環(huán)、一次性注 射器、無(wú)菌水、恒溫箱。射器、無(wú)菌水、恒溫箱。 方法步驟：方法步驟： 第一步：分組。第一步：分組。 _ _， 用三只注射器分別向用三只注射器分別向3 3個(gè)培養(yǎng)基中注入個(gè)培養(yǎng)基中注入1 mL1 mL無(wú)菌水無(wú)菌水 _、_，并使之均勻分布在整個(gè)培養(yǎng)基，并使之均勻分布在整個(gè)培養(yǎng)基 表面。表面。 第二步：接種。將接種環(huán)在第二步：接種。將接種環(huán)在_，_接種于接種于 三個(gè)培養(yǎng)基。三個(gè)培養(yǎng)基。 第三步：培養(yǎng)。將第三步：培養(yǎng)。將 _ _。 答案：方法步驟：答案：方法步驟： 第一步：取三個(gè)含培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿，分別編號(hào)為第一步：取三個(gè)含培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿，分別編號(hào)為1 1、 2 2、3 3青霉素液四環(huán)素液青霉素液四環(huán)素液 第二步：酒精燈上灼燒并在酒精燈旁取菌種第二步：酒精燈上灼燒并在酒精燈旁取菌種 第三步：接種后的培養(yǎng)基放在第三步：接種后的培養(yǎng)基放在37 37 的