他汀個(gè)體化檢測(cè)的臨床意義

1、精心整理 他汀個(gè)體化基因SLC01B1和ApoE多態(tài)性診斷的介紹 【項(xiàng)目背景】 汀類(lèi)藥物分為天然化合物（如洛伐他丁、辛伐他汀、普伐他汀、美伐他汀）和完全 人工合成化合物（如氟伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、羅伐他汀、pitavastatin） 是最為經(jīng)典和有效的降脂藥物，廣泛應(yīng)用于高脂血癥的治療。 他汀類(lèi)藥物（statins）是羥甲基戊二酰輔酶A（ HMG-CoA ）還原酶抑制劑，此類(lèi) 藥物通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性抑制內(nèi)源性膽固醇合成限速酶 （HMG-CoA）還原酶，阻斷細(xì)胞內(nèi)羥甲 戊酸代謝途徑，使細(xì)胞內(nèi)膽固醇合成減少，從而反饋性刺激細(xì)胞膜表面（主要為肝細(xì) 胞）低密度脂蛋白（lowdensitylipopr

2、otein，LDL）受體數(shù)量和活性增加、使血清膽固醇 清除增加、水平降低。 自1987年起，他汀開(kāi)始應(yīng)用于臨床，旨在防范心腦血管事件，處方量很大。因 而，臨床對(duì)于他汀的安全性和預(yù)后一直存在顧慮，特別是他汀與肌肉安全性的問(wèn)題， 嚴(yán)重時(shí)可致命，雖然發(fā)生率很低，但卻直接影響患者的生存質(zhì)量及預(yù)后，且可影響 患者是否應(yīng)該長(zhǎng)期服用他汀的選擇。 研究表明，肌肉安全性與他汀代謝中的關(guān)鍵酶SLCO1B1基因編碼的OATP1B1 密切相關(guān)【1】，有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽（OATP1B1 ）參與多種藥物的轉(zhuǎn)運(yùn)，在他汀 L. I 藥物代謝中負(fù)責(zé)將血液中的藥物轉(zhuǎn)移至肝臟直接發(fā)揮藥效或代謝轉(zhuǎn)化成為有活性的 物質(zhì)。SLCO1B1

3、定位于12號(hào)染色體，研究顯示SLCO1B1基因具有遺傳多態(tài)性， 其中388AG、521TC是兩種常見(jiàn)的單核苷酸多態(tài)性，可以形成 4種單倍型 SLCO1B1*1a （ 388A-52仃）、SLCO1B1*1b （ 388G-52仃）、SLCO1B1*5 （388A-521C ）和 SLCO1B1*15 （388G-521C ）。突變型 SLCO1B1 基因會(huì)引起編 精心整理 碼的0ATP1B1轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白活力減弱，表現(xiàn)為肝臟攝取藥物能力降低，引起他汀類(lèi)藥 物血藥濃度上升，增加橫紋肌溶解癥或肌病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。 研究表明，他汀的療效及預(yù)后與載脂蛋白 ApoE密切相關(guān)【2】，載脂蛋白E(ApoE) 通過(guò)多種

4、途徑參與機(jī)體的脂質(zhì)代謝調(diào)節(jié)，是影響機(jī)體血脂水平的重要內(nèi)在因素。ApoE 多肽被認(rèn)為是高脂蛋白血癥及動(dòng)脈粥樣硬化性血管病的易感候選基因，與冠心病 【3】、老年癡呆【4】等疾病風(fēng)險(xiǎn)密切相關(guān)，人類(lèi)ApoE基因定位于19號(hào)染色體上， 主要有兩種單核苷酸多態(tài)性 526CT和388TC，可以形成3種單倍型分別是ApoE3 (388T-526C)、ApoE2( 388T-526T )、ApoE4( 388C-526C)。文獻(xiàn)報(bào)道，ApoE4 攜帶者患冠心病的風(fēng)險(xiǎn)要高40%，并且他汀類(lèi)藥物對(duì)ApoE4攜帶者療效往往不佳或 無(wú)療效【2】，而對(duì)ApoE2攜帶者的降脂作用最強(qiáng)。 【方法原理】 本產(chǎn)品使用的方法為多重

5、熒光定量 PCR技術(shù)，該技術(shù)基于熒光定量PCR平臺(tái)， 首先針對(duì)SNP位點(diǎn)上下游設(shè)計(jì)特異性引物，分別針對(duì)野生型及突變型位點(diǎn)設(shè)計(jì)不同 熒光基團(tuán)標(biāo)記的特異性探針，然后對(duì)引物及探針進(jìn)行科學(xué)的配比組合，配置SNP位 點(diǎn)檢測(cè)體系，通過(guò)熒光定量PCR儀對(duì)臨床樣本DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，同時(shí)收集擴(kuò)增 信號(hào)，如果信號(hào)為野生型探針信號(hào)，那么樣本為純合野生型；如果信號(hào)為突變型探 針信號(hào)，那么樣本為純合突變型；如果信號(hào)同時(shí)有野生型及突變型探針信號(hào)，那么 樣本為雜合突變型。該方法及相關(guān)產(chǎn)品具有以下明顯優(yōu)勢(shì)：1操作簡(jiǎn)便，檢測(cè)時(shí)間短、 結(jié)果易判讀；2.特異性及靈敏度更高，確保結(jié)果客觀準(zhǔn)確；3可實(shí)現(xiàn)一管檢測(cè)一個(gè) SNP位點(diǎn)，通

6、量大；4.具有UNG防污染體系，可有效預(yù)防臨床氣溶膠污染，避免假 陽(yáng)性；5.具有獨(dú)特的內(nèi)標(biāo)系統(tǒng)，可監(jiān)控操作過(guò)程；6.具有弱陽(yáng)性對(duì)照及空白對(duì)照，可 監(jiān)控試劑及環(huán)境質(zhì)量。 原理示意圖 精心整理 【適應(yīng)癥】 心內(nèi)科（服用他汀患者的個(gè)體化基因診斷，用于風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)、療效及預(yù)后） 體檢科、老年科（用于冠心病、老年癡呆等發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)，提供健康管理方案） 【臨床意義】 SLC01B1基因檢測(cè)的位點(diǎn)為388AC、52仃C，其可形成4種單倍型*1a、*1b、 *5、*15，SLCO1B1基因編碼的蛋白主要參與藥物的轉(zhuǎn)運(yùn)， 負(fù)責(zé)將血液中的藥物轉(zhuǎn)移 至肝臟中直接發(fā)揮藥效或代謝轉(zhuǎn)化為有活性的物質(zhì)。突變型SLCO1B1基因

7、引起自身 轉(zhuǎn)運(yùn)活力減弱，表現(xiàn)為肝臟攝取藥物能力降低，引起他汀藥物血藥濃度上升，增加 橫紋肌溶解癥或肌病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。 臨床指導(dǎo) 基因 基因型 臨床意義 SLCO1B1 *1a/*1a,*1a/*1b,*1b/*1b 正常肌病風(fēng)險(xiǎn)，他汀耐受劑量較高 *1a/*5,*1a/*15,*1b/*15 中度肌病風(fēng)險(xiǎn)，他汀耐受劑量中等 *5/*5,*5/*15,*15/*15 高度肌病風(fēng)險(xiǎn)，他汀耐受劑量較低 ApoE基因檢測(cè)的位點(diǎn)為526CT、388TC，其可形成3種單倍型ApoE2、ApoE3、 ApoE4，ApoE基因編碼的蛋白是影響機(jī)體血脂水平的重要內(nèi)在因素，文獻(xiàn)報(bào)道， ApoE4的攜帶者服用他汀療效

8、往往不佳或無(wú)效，ApoE2攜帶者服用他汀效果最佳。 臨床指導(dǎo) 基因型 建議飲食 預(yù)防疾病提示 用藥提示 E2/E2 魚(yú)油降脂效果最好 注意黃斑變性、山類(lèi)高脂血癥；老年癡呆、腦梗塞 他汀療效較好 E2/E3 適量飲酒風(fēng)險(xiǎn)明顯降低 有保護(hù)因子，冠心病風(fēng)險(xiǎn)低 E2/E4 魚(yú)油降脂效果最好 正?；蛐停夏臧V呆、腦梗塞、冠心病正常 他汀治療療效正常 E3/E3 適量飲酒風(fēng)險(xiǎn)明顯降低 精心整理 魚(yú)油降脂風(fēng)險(xiǎn)加大 增加冠心病、心梗、腦梗、老年癡呆風(fēng)險(xiǎn)，宜低脂 E3/E4 他汀療效較差 適量飲酒風(fēng)險(xiǎn)明顯大增 低鹽低糖，忌煙酒魚(yú)肉 【參考文獻(xiàn)】 1 MikkoNiemi,MarjaK.Pasanen,andP

9、erttiJ.Neuvonen.OrganicAnionTransportingPolypeptide1B1:aGeneticallyPolymorphicTransporterofMaj orlmportanceforHepaticDrugUptake. PharmacolRev63:157 -81,2011 2 .JohnF.Thompson,PhD;CraigL.Hyde,PhD;LindaS.Wood,MS;SaraA.Paciga,MA;DavidA.Hinds,PhD;DavidR.Cox,MD,PhD;G.KeesHovingh,MD,P hD;JohnJ.P.Kastelein

10、,MD,PhD.ComprehensiveWhole-GenomeandCandidateGeneAnalysisforResponsetoStatinTherapyintheTreatingtoNewT argets (TNT)Cohort.CircCardiovascGenet.2009;2:173-181. 3 Rapha?IChouinard-WatkinsandMe laniePlourdeFattyAcidMetabolisminCarriersofApolipoproteinEEpsilon4Allele:lsltContributingtoHigherR iskofCognitiveDeclineandCoronaryHeartDisease?Nutrients2014,6,4452-4471;doi:10.3390/nu6104452 4 PingWu1,2Hong-LeiLi1Zhi-JunLiu1Qing-QingTao1MiaoXu1Qi-HaoGuo1ZhenHong