實驗1植物組織滲透勢的測定(質(zhì)壁分離法)

1、實驗 1 植物組織滲透勢的測定（質(zhì)壁分離法）一、實驗?zāi)康?觀察植物組織在不同濃度溶液中細胞質(zhì)壁分離的產(chǎn)生過程及其用于測定植物組織滲透勢的方法。二、實驗原理 當植物組織細胞的汁液與其周圍的某種溶液處于滲透平衡狀態(tài)， 植物細胞的壓力勢為零時， 細胞汁液的滲透勢就等于該溶液的滲透勢。 該溶液的濃度稱為等 滲濃度。當用一系列梯度濃度溶液觀察細胞質(zhì)壁分離現(xiàn)象時， 細胞的等滲濃度將介于 剛剛引起初始質(zhì)壁分離的濃度和尚不能引起質(zhì)壁分離的濃度之間的溶液濃度。 代 入公式即可計算出滲透勢。三、實驗儀器、試劑、材料等 顯微鏡；載玻片及蓋玻片；鑷子；刀片 配成 0.5 0.1mol/L 梯度濃度的蔗糖溶液各 50m

2、l 。稱 34.23g 蔗糖用蒸餾水配成 100ml ，其濃度為 1m0le/L （母液）。再配制 成下列各種濃度：0.50mol/L ：吸母液 25ml+ 水 25ml0.45mol/L ：吸母液 22.5ml+ 水 27.5ml0.40mol/L ：吸母液 20.0ml+ 水 30.0ml0.35mol/L ：吸母液 17.5ml+ 水 32.5ml0.30mol/L ：吸母液 15.0ml+ 水 35.0ml0.25mol/L ：吸母液 12.5ml+ 水 37.5ml0.20mol/L ：吸母液 10.0ml+ 水 40.0ml0.15mol/L ：吸母液 7.5ml+ 水 42.5m

3、l0.10mol/L ：吸母液 5.0ml+ 水 45.0ml四、實驗方法 將帶有色素的植物組織（葉片） ，一般選用有色素的洋蔥鱗片的外表皮、紫 鴨跖草、苔蘚、紅甘藍或黑藻、絲狀藻等水生植物，也可用蠶豆、玉米、小麥等 作物葉的表皮。 撕取下表皮， 迅速分別投入各種濃度的蔗糖溶液中， 使其完全浸 入，5 10 分鐘后，從 0.5mol/L 開始依次取出表皮薄片放在滴有同樣溶液的載 玻片上，蓋上蓋玻片， 于低倍顯微鏡下觀察， 如果所有細胞都產(chǎn)生質(zhì)壁分離的現(xiàn) 象，則取低濃度溶液中的制片作同樣觀察， 并記錄質(zhì)壁分離的相對程度。 實驗中必須確定一個引起半數(shù)以上細胞原生質(zhì)剛剛從細胞壁的角隅上分離的濃度，和

4、不引起質(zhì)壁分離的最高濃度。在找到上述濃度極限時，用新的溶液和新鮮的葉片重復(fù)進行幾次，直至有把 握確定為止。在此條件下，細胞的滲透勢與兩個極限溶液濃度之平均值的滲透勢 相等。將結(jié)果記錄下表。測出引起質(zhì)壁分離剛開始的蔗糖溶液最低濃度和不能引起質(zhì)壁分離的最高 濃度平均值之后，可按下列公式計算在常壓下該組織細胞質(zhì)液的滲透勢。s RTiCs為細胞滲透勢。R 為氣體常數(shù)=0.083 X1O5/L Pamol K。T為絕對溫度，單位K,即273 C + t，t為實驗濕度。I為解離系數(shù)，蔗糖為1。C為等滲溶液的濃度，單位為 mol/L。貝U:s=0.083 X105X（273 C + t）X1 XC實驗人時間

5、材料名稱實驗時室溫C蔗糖摩爾濃度（mol/L ）滲透勢（P a）質(zhì)壁分離的相對程度（以圖表示）0.500.450.400.350.300.250.200.150.10五、實驗作業(yè)：1、敘述細胞滲透作用的原理2、測定并計算不同植物組織的滲透勢實驗 2 植物組織水勢的測定（小液流法）一、實驗?zāi)康?了解植物組織中水分狀況的另一種表示方法及用于測定的方法和它們的優(yōu)缺點。二、實驗原理 將植物組織分別放在一系列濃度遞增的溶液中，當找到某一濃度的溶液與 植物組織之間水分保持動態(tài)平衡時， 則可認為此植物組織的水勢等于該溶液的水 勢。因溶液的濃度是已知的，可以根據(jù)公式算出其滲透壓，取其負值，為溶液的 滲透勢（書

6、）即代表植物的水勢（ M） （waterpotential ）。収v =書n P= CRT （大氣壓）三、實驗儀器、試劑、材料等（一）材料：小白菜或其它作物葉片（二）儀器設(shè)備： 1.帶塞青霉素小瓶 12 個；2.帶有橡皮管的注射針頭；3. 鑷子； 4.打孔器 5.培養(yǎng)皿。（三）試劑： 1.0.05 、0.10、0.15 、0.20 、0.25、0.30mol/L 蔗糖溶液；2. 甲烯藍粉末。四、實驗方法1、取干燥潔凈的青霉素瓶 6個為甲組，各瓶中分別加入 0.05 0.30mol/L 蔗糖溶液約 4ml （約為青霉素瓶的 23 處），另取 6 個干燥潔凈的 青霉素瓶為乙組，各瓶中分別加入 0.

7、050.30mol/L 蔗糖溶液 1ml 和微量甲烯 藍粉末著色，上述各瓶加標簽注明濃度。2、 取待測樣品的功能葉數(shù)片，用打孔器打取小圓片約50 片，放至培養(yǎng)皿 中，混合均勻。用鑷子分別夾入 58 個小圓片到盛有不同濃度的甲烯藍蔗糖溶 液的青霉素瓶中 （乙組）。蓋上瓶塞，并使葉圓片全部浸沒于溶液中。 放置約 30 60min ，為加速水分平衡，應(yīng)經(jīng)常搖動小瓶。3、經(jīng)一定時間后，用注射針頭吸取乙組各瓶藍色糖液少許，將針頭插入對 應(yīng)濃度甲組青霉素瓶溶液中部， 小心地放出少量液流， 觀察藍色液流的升降動向。（每次測定均要用待測濃度的甲烯藍蔗糖溶液清洗幾次注射針頭） 。如此方法檢 查各瓶中液流的升降動

8、向。 若液流上升，說明浸過小圓片的蔗糖溶液濃度變小 （即 植物組織失水）；表明葉片組織的水勢高于該濃度糖溶液的滲透勢；如果藍色液 流下降則說明葉片組織的水勢低于該糖溶液的滲透勢， 若藍色液流靜止不動， 則 說明葉片組織的水勢等于該糖溶液的滲透勢， 此糖溶液的濃度即為葉片組織的等 滲濃度4、將求得的等滲濃度值代入如下公式：M =書齊一CRTix1.013 0.1。式中： M =植物組織的水勢（單位： Mpa ）n=溶液的滲透勢C =等滲濃度（mol/L ） R =氣體常數(shù)（0.008314MPa/L/mol/K） T=絕對溫度 i =解離系數(shù)（蔗糖=1 , CaCI2 = 2.60 ）1 大氣壓

9、=1.013 = 0.1MPa。五、實驗作業(yè) 用小液流法測定植物組織的水勢與用質(zhì)壁分離法測定植物細胞的滲透勢都 是以外界溶液的濃度算出的溶質(zhì)勢,它們之間的區(qū)別何在？實驗3 蒸騰速率的測定（快速稱重法）一、實驗?zāi)康膶W(xué)會用快速稱重法測定植物的蒸騰速率，加深對植物水分代的認識。二、實驗原理植物蒸騰失水，重量減輕。因此，用稱重法測得一定面積或一定重量的蒸騰 器官在一定時間里的失水量，即可測得其蒸騰速率。三、實驗儀器、試劑、材料等精度為10mg的扭力天平1架枝剪1把；剪刀1把；鉛筆1支；線1根; 坐標方格紙1 ;標簽1個；尺子1把；各種樹木的帶葉枝條。四、實驗方法1、將扭力天平放在被測樹木附近的平穩(wěn)處，

10、 調(diào)平，然后在被測植株上選一重 約10g左右且有代表性的枝條，在其基部掛上標簽，并縛一細線。在綁線處 上方12cm處將、枝條剪下，立即稱重（記為 W1，精確至0.001g），并在 讀數(shù)時準確計時（t1 ）。2、 迅速將枝條用線懸掛原處，使其在原環(huán)境中蒸騰，約 15min后，取下枝 條，第二次稱重（記為 W2，精確至0.001g），并準確計時（t2）。兩次所稱 重量只差即是這段時間枝條蒸騰部位的鮮重。3、求算葉面積或蒸騰部位的鮮重。（1）用稱紙法求算葉面積 用尺量出坐標紙邊長，算出全紙面積，稱出全 紙重，精度同上。摘下葉子，平攤在坐標紙上，在坐標紙上用鉛筆繪出葉子輪廓， 剪下葉形，稱重，精度同上

11、。按下式計算葉面積（S）:S（cm2） =剪下的葉形紙重（g） x全紙面積（cm2）全紙重（g）（2）求算蒸騰部位的鮮重 剪下枝條上的葉片和嫩梢，稱枝重（ W3），精度同上，W1減去W3即為蒸騰部分的鮮重：蒸騰部位的鮮重=W1-W24、計算蒸騰速率。蒸騰速率g /(m2 h1)(W1 W2)(g)10000602S(cm ) (t2 t|)(min)或:蒸騰速率mg / (g min)W1 W2)(mg)_ (Wi W3)(g) (t2 ti)(min)五、實驗作業(yè)計算所測植物的蒸騰強度。實驗 4 單鹽毒害及離子間拮抗現(xiàn)象一、實驗?zāi)康?通過簡單試驗說明培養(yǎng)液中各種離子平衡（各種離子及其濃度）的

12、重要性。二、實驗原理離子間的拮抗現(xiàn)象的本質(zhì)是復(fù)雜的， 它可能反映不同離子對原生質(zhì)親水膠粒 的穩(wěn)定度、 原生質(zhì)膜的透性， 以及對各類酶活性調(diào)節(jié)等方面的相互制約作用， 從 而維持機體的正常生理狀態(tài)。三、實驗儀器、試劑、材料等燒杯；紗布；石蠟； 0.12mol/L KCl ；0.06mol/L CaCl 2 ；0.12mol/L NaCl （所用藥品均需用 AR）四、實驗方法實驗前 3 4 天選擇飽滿的小麥種子 100 粒浸種，在室溫下萌發(fā)，待根長 1cm 時即可用作材料。取 4 個小燒杯，依次分別倒人不列鹽溶液：（1）0.12mol L KCI（2）0.06 mol L CaCl2（3）0.12 mol L NaCI（4）0.12 mol L NaCl 10