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1、食品質(zhì)量檢測(cè)新技術(shù)課程論文題目我國(guó)轉(zhuǎn)基因食品快速檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展姓名:學(xué)號(hào):專業(yè):農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程教師:姬華副教授時(shí)間:2016年12月20日我國(guó)轉(zhuǎn)基因食品快速檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展摘要:隨著科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展,社會(huì)經(jīng)濟(jì)不斷突破新高。轉(zhuǎn)基因食品進(jìn)入大眾 生活,為我國(guó)帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)效益,但很多人也開始擔(dān)心轉(zhuǎn)基因食品的安全問(wèn) 題。近些年來(lái)我國(guó)轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)技術(shù)已經(jīng)日漸成熟, 為滿足廣大消費(fèi)者的選擇 權(quán)和知情權(quán),以及國(guó)際貿(mào)易的需要,轉(zhuǎn)基因食品的檢測(cè)越來(lái)越引起各國(guó)政府和有 關(guān)食品監(jiān)督機(jī)構(gòu)的重視,而各種檢測(cè)技術(shù)也隨之發(fā)展起來(lái)。本文介紹了幾種常用 的轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)方法并對(duì)未來(lái)的轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)技術(shù)做了展望,
2、通過(guò)深入的科學(xué)研究,為大眾帶來(lái)更加安全、健康的食品。關(guān)鍵詞:轉(zhuǎn)基因食品;安全;快速檢測(cè)引言轉(zhuǎn)基因食品主要是指利用基因工程技術(shù)改變基因組構(gòu)成, 將某些外源基因轉(zhuǎn) 移到動(dòng)物、植物或微生物中去,改造其遺傳物質(zhì),使其性狀、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值或品質(zhì)向 人們所需目標(biāo)轉(zhuǎn)變,并由這些轉(zhuǎn)基因生物所生產(chǎn)的食品和食品添加劑。 轉(zhuǎn)基因食品也稱基因改造食品或基因修飾食品(geneticallRmodifiedfood,GMF)。據(jù)國(guó)際農(nóng) 業(yè)生物技術(shù)應(yīng)用咨詢服務(wù)中心(ISAAA)統(tǒng)計(jì),20RR年全世界轉(zhuǎn)基因作物種植面 積為5260萬(wàn)公頃,比20RR年增長(zhǎng)19%,其中99%的轉(zhuǎn)基因作物種植在美國(guó)、 阿根廷、加拿大和中國(guó)等4個(gè)國(guó)家。已
3、商品化大面積種植的轉(zhuǎn)基因作物種類主要 為大豆、玉米、油菜和棉花,小面積種植的有西紅柿、馬鈴薯、甜椒、西葫蘆、 木瓜等。據(jù)估計(jì),用這些轉(zhuǎn)基因作物生產(chǎn)加工的食品全世界有近萬(wàn)種2 o轉(zhuǎn)基因食品的快速發(fā)展一方面展示出先進(jìn)科學(xué)技術(shù)在生產(chǎn)上的巨大應(yīng)用前 景,另一方面也引發(fā)了轉(zhuǎn)基因食品對(duì)人體健康和生態(tài)環(huán)境影響的爭(zhēng)論。為滿足廣大消費(fèi)者的選擇權(quán)和知情權(quán),以及國(guó)際貿(mào)易的需要,轉(zhuǎn)基因食品的檢測(cè)越來(lái)越引 起各國(guó)政府和有關(guān)食品監(jiān)督機(jī)構(gòu)的重視 ,而各種檢測(cè)技術(shù)也隨之發(fā)展起來(lái)。 1轉(zhuǎn)基因食品對(duì)社會(huì)和人類的影響隨著轉(zhuǎn)基因生物種類的日益繁多和全球范圍內(nèi)轉(zhuǎn)基因食品原料種植面積的 不斷擴(kuò)大,轉(zhuǎn)基因食品成為了世界食品消費(fèi)市場(chǎng)不可或缺
4、的一個(gè)重要組成板塊。 在轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物給人類社會(huì)的發(fā)展和消費(fèi)需求帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)效益的時(shí)候,越來(lái)越多的人開始考慮轉(zhuǎn)基因食品的安全問(wèn)題, 轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物的種植是否對(duì)生態(tài)環(huán)境 帶來(lái)潛在的影響問(wèn)題等等,具體而言,這種質(zhì)疑表現(xiàn)在,轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)的發(fā)展 是否會(huì)改變新食品的成分構(gòu)成,轉(zhuǎn)基因食品添加劑是否對(duì)人體健康帶來(lái)不良影 響;轉(zhuǎn)基因食品是否會(huì)影響到青少年的生長(zhǎng)發(fā)育;新基因在轉(zhuǎn)基因食品的流通中是否會(huì)影響和破壞食物鏈和農(nóng)作物的生長(zhǎng)環(huán)境;轉(zhuǎn)基因食品是否會(huì)對(duì)自然界的生 物多樣性產(chǎn)生不利的影響等4 o2轉(zhuǎn)基因食品存在的爭(zhēng)議及安全監(jiān)管方面的問(wèn)題轉(zhuǎn)基因食品在現(xiàn)階段成為了一個(gè)模棱兩可的爭(zhēng)議食品,到目前為止,轉(zhuǎn)基因食品的安全問(wèn)
5、題都很難下一個(gè)確切的結(jié)論, 也沒(méi)有充足的證據(jù)和嚴(yán)肅的科學(xué)報(bào)告 能夠證明轉(zhuǎn)基因食品的安全性、永久性和環(huán)保性,因而成為了一個(gè)全世界各國(guó)共 同關(guān)注的焦點(diǎn),正在實(shí)現(xiàn)不斷市場(chǎng)化的轉(zhuǎn)基因食品需要建立一種準(zhǔn)確、快速的轉(zhuǎn)基因食品定量檢測(cè)方法和食品定性技術(shù),來(lái)進(jìn)一步完善我國(guó)轉(zhuǎn)基因食品監(jiān)管方面 的科學(xué)規(guī)范5。常規(guī)的轉(zhuǎn)基因食品評(píng)價(jià)方法其靈敏性往往比較差且耗時(shí)長(zhǎng),容易 出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)誤差。加上我國(guó)有關(guān)轉(zhuǎn)基因食品的生產(chǎn)規(guī)范缺乏強(qiáng)有力的法律體系保 障,使得我國(guó)轉(zhuǎn)基因食品市場(chǎng)出現(xiàn)魚目混珠的情形,不利于保障我國(guó)國(guó)民的身體健康。3轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)技術(shù)由于轉(zhuǎn)基因物質(zhì)有可能在耕種、收割、運(yùn)輸、儲(chǔ)存和加工過(guò)程中混入食品, 對(duì)食品造成偶然污染
6、。因此,不論是對(duì)轉(zhuǎn)基因食品貼示標(biāo)簽,或是對(duì)轉(zhuǎn)基因與非 轉(zhuǎn)基因原料進(jìn)行分別輸送,轉(zhuǎn)基因原料和食品的檢測(cè)都是必不可少的;另外,要區(qū)分轉(zhuǎn)基因與非轉(zhuǎn)基因食品,對(duì)轉(zhuǎn)基因食品進(jìn)行選擇性標(biāo)記,對(duì)食品中的轉(zhuǎn)基因 含量的多少加以限制,也需要準(zhǔn)確有效的基因檢測(cè)技術(shù)。 從發(fā)展來(lái)看轉(zhuǎn)基因食品 的檢測(cè)技術(shù)根據(jù)檢測(cè)的直接對(duì)象可分為三類:(1)利用導(dǎo)入外源基因所表達(dá)的特 殊性狀直接鑒定;(2)針對(duì)導(dǎo)入外源基因表達(dá)的蛋白質(zhì)的鑒定方;(3)以導(dǎo)入外 源基因的特定DNA序列為檢測(cè)對(duì)象的檢測(cè)技術(shù)。其中目前用的比較多的是 PCR 技術(shù)、ELISA技術(shù)和生物芯片技術(shù)三種。3.1PCR技術(shù)與轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)PCR檢測(cè)技術(shù)的基本原理是根據(jù)食
7、品中待檢的外源基因核酸序列設(shè)計(jì)合適引物, 經(jīng)PCR反應(yīng)使待檢靶標(biāo)DNA序列得以擴(kuò)增放大,最后經(jīng)凝膠電泳分析靶標(biāo) PCR 產(chǎn)物的有無(wú),從而對(duì)食品中是否含有靶標(biāo)基因序列成分進(jìn)行判定。不僅可以對(duì)轉(zhuǎn)基因食品進(jìn)行定性鑒別,改良后也可以對(duì)轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行定量分析。應(yīng)用PCR技術(shù)的關(guān)鍵是所設(shè)計(jì)的 DNA引物的序列必須和轉(zhuǎn)基因材料或食品中待擴(kuò)增的 DNA序列互補(bǔ),因此為了設(shè)計(jì)有效引物,檢驗(yàn)者必須對(duì)轉(zhuǎn)基因材料或食品中所 含有的外源基因DNA序列有一定的了解。轉(zhuǎn)基因生物中被導(dǎo)入的外源基因序列 一般包括標(biāo)記基因、目的基因及各自的啟動(dòng)子、終止子等調(diào)控序列。3.1.1PCR定性篩選檢測(cè)方法1996年德國(guó)伯恩斯坦大學(xué)的 M
8、eRerRolf等論證了 PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)基因食品的可 能性。到目前為止,全世界已有 30多種轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品得到相關(guān)國(guó)家的安全評(píng)價(jià), 在現(xiàn)有的商品化轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品中絕大多數(shù)含 CaM35S啟動(dòng)子和NOS終止子,兩種 因子常用于轉(zhuǎn)基因植物的構(gòu)建,這就為人們建立針對(duì)這兩種成分的轉(zhuǎn)基因PCR篩選檢測(cè)方法提供了便利。最近一些國(guó)外實(shí)驗(yàn)室已將報(bào)告基因 GUS、NPTII基因, 目的基因CRR、CPT等作為檢測(cè)目標(biāo),力爭(zhēng)更準(zhǔn)確可靠檢出轉(zhuǎn)基因成分 。3.1.2定量 PCR方法隨著人們對(duì)轉(zhuǎn)基因食品重視程度和量化要求的提高,定性檢測(cè)方法已經(jīng)不能滿足需要,加上定性篩選PCR本身具有局限性,所采取的PCR法因其高敏感性 常伴有假
9、陽(yáng)性或假陰性現(xiàn)象,為此,研究者們?cè)诙ㄐ院Y選PC方法的基礎(chǔ)上,發(fā)展了不同的定量轉(zhuǎn)基因食品的 PCR檢測(cè)方法。目前轉(zhuǎn)基因成分的準(zhǔn)確定量檢測(cè) 在國(guó)際貿(mào)易中日趨重要。根據(jù)資料報(bào)道,目前轉(zhuǎn)基因成分的定量檢測(cè)方法有半定 量PCR法、定量競(jìng)爭(zhēng) PCR(QC-PCR)法和實(shí)時(shí)定量 PCR法。其中,半定量 PCR 法比較簡(jiǎn)單,但結(jié)果精密性較差;定量競(jìng)爭(zhēng) PCR的特點(diǎn)是含有內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)子,可 降低實(shí)驗(yàn)室之間的檢測(cè)誤差;而實(shí)時(shí)定量 PCR法可在提取DNA后3h內(nèi),檢測(cè) 樣品的總DNA量及2pg轉(zhuǎn)基因成分的量,但這套 PCR系統(tǒng)目前價(jià)格昂貴。3.121定量競(jìng)爭(zhēng)PCR法先構(gòu)建含有修飾過(guò)的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn) DNA片斷(競(jìng)爭(zhēng)DNA),
10、與待測(cè)DNA進(jìn)行共 擴(kuò)增,因競(jìng)爭(zhēng)DNA片斷和待測(cè)DNA的大小不同,經(jīng)瓊脂糖凝膠可將兩者分開, 并可進(jìn)行定量分析。實(shí)驗(yàn)步驟:樣品DNA的提取和定量。按常規(guī)方法提取 DNA。DNA含量 可用紫外分光光度計(jì)測(cè)定。競(jìng)爭(zhēng) DNA的構(gòu)建。按常規(guī)分子生物學(xué)的方法,用 基因重組技術(shù)構(gòu)建競(jìng)爭(zhēng)DNA片段作為內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)DNA,此片段除含有轉(zhuǎn)基因成分 外(如35S啟動(dòng)子、NOS終止子),還插入數(shù)+bp的DNA序列。標(biāo)準(zhǔn)工作曲線 的建立。取定量模板DNA,所含GMO量分別為0%-100%的系列參考樣,分別 與一定量的競(jìng)爭(zhēng)DNA在同一反應(yīng)體系進(jìn)行PCR擴(kuò)增。特異轉(zhuǎn)基因DNA與競(jìng)爭(zhēng) DNA競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)體系中的相同底物、引物,PC
11、R反應(yīng)獲得相差數(shù)+bp的兩條凝膠電泳帶,兩條帶濃度隨轉(zhuǎn)基因成分含量的不同而有差異。當(dāng)兩條帶濃度相等則說(shuō) 明此參考樣GMO濃度與競(jìng)爭(zhēng)DNA濃度相等。通常實(shí)驗(yàn)時(shí)競(jìng)爭(zhēng) DNA濃度調(diào)整 到與含1%轉(zhuǎn)基因成分的參考樣相當(dāng)。通過(guò)凝膠成像分析系統(tǒng)對(duì)瓊脂糖凝膠電泳 的結(jié)果進(jìn)行分析,得到每條帶的相對(duì)濃度,以此數(shù)據(jù)作目標(biāo)DNA濃度一目標(biāo)DNA濃度/競(jìng)爭(zhēng)DNA濃度的對(duì)數(shù)圖,線性回歸分析后得出工作曲線。待測(cè)樣 品的測(cè)定。將500ng待測(cè)DNA與經(jīng)過(guò)定量的競(jìng)爭(zhēng)DNA共擴(kuò)增,凝膠電泳后經(jīng) 掃描分析得到目標(biāo)DNA/競(jìng)爭(zhēng)DNA的比值,依此數(shù)據(jù)在工作曲線圖上求得待測(cè) 樣品的GMO含量9。3.1.2.2實(shí)時(shí)定量PCR法此方法須設(shè)
12、計(jì)一個(gè)內(nèi)部探針,該探針包含5端熒光報(bào)告因子和3端猝滅因子。PCR反應(yīng)前,由于淬滅因子與熒光報(bào)告因子的位置相近,使熒光受到抑制 而檢測(cè)不到熒光信號(hào)。隨著PCR反應(yīng)進(jìn)行,從上游的PCR引物開始,引物和標(biāo) 記探針與目標(biāo)DNA分子中對(duì)應(yīng)的互補(bǔ)序列復(fù)性,聚合酶與探針相遇,利用其5核酸外切酶活性使報(bào)告因子釋放,產(chǎn)生的熒光可被內(nèi)設(shè)的激光器記錄,記錄到的 熒光強(qiáng)度可反映PCR的產(chǎn)物量,從而實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)定量分析10。PCR檢測(cè)技術(shù)靈敏度高,檢測(cè)迅速,無(wú)論外源基因在受體生物中是否表達(dá), 只要其DNA存在,就能被檢測(cè),同時(shí)適用于加工過(guò)的轉(zhuǎn)基因食品。給予啟動(dòng)子 和終止子調(diào)控序列的檢測(cè)方法無(wú)需了解產(chǎn)品的轉(zhuǎn)基因背景即可對(duì)其進(jìn)
13、行是否含 有轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行篩選鑒定。但是PCR檢測(cè)技術(shù)操作程序繁瑣,需要對(duì)樣品DNA 進(jìn)行提取,對(duì)某些材料可能出現(xiàn)假陽(yáng)性,所以,對(duì)出現(xiàn)假陽(yáng)性的樣品應(yīng)進(jìn)行目的 基因檢測(cè),同時(shí)還應(yīng)選擇合適的植物內(nèi)源基因作為陽(yáng)性擴(kuò)增對(duì)照以檢查核酸抽提 質(zhì)量。因?yàn)镻CR檢測(cè)極為靈敏,整個(gè)操作過(guò)程極為嚴(yán)格,檢測(cè)時(shí)容易遭受到污 染而出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果11。3.2ELISA技術(shù)與轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)ELISA技術(shù)是建立在抗體抗原免疫學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ)上的。 抗原抗體反應(yīng)是一種 非共價(jià)鍵特異性吸附反應(yīng),即在通常情況下,抗原只和它自己(或具有相同抗原 決定簇)誘導(dǎo)產(chǎn)生的抗體發(fā)生反應(yīng),因此具有高度特異性,抗體抗原反應(yīng)雖然產(chǎn) 生肉眼可見的凝集反應(yīng)
14、,但靈敏度太低而且需要大量的抗體和抗原。美國(guó)FDA已研究出用雙夾心ELISA法檢測(cè)食品中是否含有轉(zhuǎn)基因玉米成分12。 EnviroLogiRELISA試劑盒可用于測(cè)定玉米中的 CrR9C蛋白,在同一實(shí)驗(yàn)室和實(shí) 驗(yàn)室間共測(cè)定了 9種含玉米的食品,測(cè)定結(jié)果的重現(xiàn)性很好。13個(gè)EU成員國(guó)和 瑞典共37個(gè)實(shí)驗(yàn)室研究結(jié)果表明13,大豆干粉中轉(zhuǎn)基因組織(GMO)含量為2%, 檢測(cè)可信度達(dá)99%。ELISA分析法特異性高,獲得結(jié)果很快,儀器簡(jiǎn)單,儀器 操作,對(duì)人員要求不高,免去了對(duì)樣品進(jìn)行核酸提取的麻煩, 同時(shí)可降低檢測(cè)的 成本。由于酶具有很高的催化效率,可極大的放大反應(yīng)效果,從而使測(cè)定達(dá)到很 高的靈敏度和
15、穩(wěn)定性。3.3生物芯片與轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè) 就目前轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)中常用的 ELISA和PCR技術(shù)而言,最大的缺點(diǎn)是檢測(cè)范 圍窄,效率低,無(wú)法高通量大規(guī)模地同時(shí)檢測(cè)多種樣品,尤其是對(duì)轉(zhuǎn)基因背景一無(wú)所知的情況下,對(duì)各種候選待檢基因序列或蛋白的逐一篩查幾乎是不可能的14。而目前正在研究的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品所涉及的基因數(shù)量有上萬(wàn)種,今后都有可能 進(jìn)入商品化生產(chǎn),顯而易見對(duì)進(jìn)出口產(chǎn)品的檢測(cè),需要有更有效、快速、特別是 高通量的檢測(cè)方法,最近幾年出現(xiàn)的生物芯片技術(shù)能較好地解決這一問(wèn)題。 轉(zhuǎn)基因作物檢測(cè)基因芯片是將目前通用的報(bào)告基因、抗性基因、啟動(dòng)子和終止子的特異片段(靶片段)固定于玻片上制成檢測(cè)芯片,將從待檢樣品中提
16、取的DNA擴(kuò)增、標(biāo)記后與芯片進(jìn)行雜交,雜交信號(hào)由掃描儀掃描后再經(jīng)計(jì)算機(jī)軟件進(jìn)行分 析判斷。具有如下特點(diǎn);(1)選擇檢測(cè)的報(bào)告基因是具有明顯區(qū)別于受體細(xì)胞遺傳背景的選擇標(biāo)記,通常是在離體條件下易于檢測(cè)的酶或發(fā)光蛋白,目前較為常用的有Gus基因和Gfp基因。(2)該技術(shù)綜合了 PCR和分子雜交的優(yōu)點(diǎn),用量 少,快速而且準(zhǔn)確。(3)芯片具有高密度、高通量的優(yōu)點(diǎn),可同時(shí)檢測(cè)報(bào)告基因、 抗性基因、啟動(dòng)子和終止子,非常適合于轉(zhuǎn)基因作物及加工品的檢測(cè), 使之具有 廣闊的發(fā)展前景。(4)檢測(cè)結(jié)果直接由分析軟件進(jìn)行處理, 使得檢測(cè)結(jié)果更加科 學(xué)、準(zhǔn)確15。4展望近幾年來(lái),轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)技術(shù)得到了迅速的發(fā)展。 但
17、總的說(shuō)來(lái),目前轉(zhuǎn)基因食 品檢測(cè)主要針對(duì)單一食品配料,尚無(wú)適用于檢測(cè)多種轉(zhuǎn)基因成分的方法,還沒(méi)有 國(guó)際認(rèn)同的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)和方法。因此,應(yīng)在進(jìn)一步尋找快速簡(jiǎn)便精確的檢測(cè)方法的 基礎(chǔ)上,加強(qiáng)科研投入力度,加強(qiáng)國(guó)際間的合作與交流,以確定統(tǒng)一的國(guó)際檢測(cè) 標(biāo)準(zhǔn)也是今后發(fā)展的方向之一 16。隨著國(guó)內(nèi)外對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品研究的深入以及對(duì) 轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)要求的提高,現(xiàn)有的檢測(cè)技術(shù)需要不斷改進(jìn)以克服自身的缺陷。目前,色譜技術(shù)(HPLG)、毛細(xì)管電泳技術(shù)(CE)、近紅外波譜技術(shù)(NIS)、超分支 滾環(huán)擴(kuò)增技術(shù)(HRCA)等新技術(shù)在轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測(cè)方面亦有所應(yīng)用。轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展方向應(yīng)是快速簡(jiǎn)便、適用面廣、高通量、高靈
18、敏度、 高精確度、自動(dòng)化和低成本,適應(yīng)樣品量大和目標(biāo)基因種類繁多等特點(diǎn),能滿足對(duì)已有或新型轉(zhuǎn)基因食品進(jìn)行快速準(zhǔn)確的檢測(cè)要求。參考文獻(xiàn)1 霍飛,江國(guó)虹,常改轉(zhuǎn)基因食品的發(fā)展現(xiàn)狀及安全性評(píng)價(jià)J.中國(guó)公共衛(wèi)生,20RR,19(9):113-114.2 王晶.食品安全快速檢測(cè)技術(shù)M.化學(xué)工業(yè)出版社,20RR,171-203.3 陳穎,葛毅強(qiáng),蘇寧,等.食品中轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)方法的研究進(jìn)展J.食品與發(fā)酵 工業(yè),20RR,29(6):82-86.4 周志軍,楊培慧,鄭志雯,等.轉(zhuǎn)基因食品及其檢測(cè)技術(shù)J.武漢工業(yè)學(xué)院學(xué)報(bào),20RR(1):25-28.宋姍,龔加順.轉(zhuǎn)基因食品及其檢測(cè)技術(shù)的研究進(jìn)展J.食品研究與開 發(fā),20RR,26(5):131-135.6 倉(cāng)義鵬,陳曉燕,田娟,等.三種轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)技術(shù)的研究進(jìn)展及發(fā)展趨勢(shì),調(diào)研綜述,20RR,(2):21-24.7 薛麗,何嘯峰轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展淺析J.科技世 界,20RR,12(3):307-308.8 王慶華,呂振岳,黃東東.轉(zhuǎn)基
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