最新關(guān)于體外診斷試劑校準品溯源和質(zhì)控品賦值的溯源性說明-2匯編

1、天津市體外診斷試劑校準品和質(zhì)控品技術(shù)審查要點1 范圍本文規(guī)定了對建立或確認測量正確度為目的的校準品和質(zhì)控品賦值的計量學溯源性進 行確認的方法，校準品和質(zhì)控品由生產(chǎn)企業(yè)提供，作為體外診斷試劑的一部分或與其一起使用。適用于體外診斷試劑校準品和質(zhì)控品的技術(shù)審查。2 規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本說明的引用而成為本說明的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本說明，然而，鼓勵根據(jù)本說凡是注日期的引用文件， 其最新 生物樣品中量的測量校準品和控制 生物源性樣品中量的測量 參考測量 生物源性樣品中量的測量 參考物質(zhì)明達成協(xié)議的各方研究是否可以使用這些文件

2、的最新版本。 版本適用于本說明。GB/T 21415 - 2008/ISO 17511: 2003 體外診斷醫(yī)療器械 物質(zhì)賦值的計量學溯源GB/T 19702 - 2005/ISO 15193: 2002 體外診斷醫(yī)療器械 程序的說明GB/T 19703 - 2005/ISO 15194: 2002 體外診斷醫(yī)療器械的說明3術(shù)語與定義下列術(shù)語與定義適用于本說明3.1 計量學溯源性 metrological traceability通過一條具有規(guī)定不確定度的不間斷的比較鏈，使測量標準的值能夠與規(guī)定的參考標 準，通常與國家標準或國際標準聯(lián)系起來的特性。3.2國際標準品具有最高的計量學特性，其值不必

3、參考相同量的其他標準，被指定或普遍承認的測量標準。3.3國家標準品用國際標準品標定的，或我國自行研制的（尚無國際標準品者）用于微生物（或其產(chǎn)物）的定性鑒定或疾病診斷的生物試劑、生物材料或特異性抗血清。3.4企業(yè)標準品通過與相同量的國際（國家）標準品和/或進口（國產(chǎn)）試劑比對而定值的測量標準。3.5濃儲液使用國家標準品和/或企業(yè)標準品賦值，作為企業(yè)標準品和或校準品配制過程中的母液。3.6 校準品 Calibritaor具有在校準函數(shù)中用作獨立變量值的參考物質(zhì)。3.7質(zhì)控品用于控制結(jié)果的準確性和重復性的物質(zhì)。3.8 測量準確度 accuracy of measurement 測量結(jié)果與被測量真值之

4、間的一致程度。4 要求應提供校準品的溯源性資料， 計量學溯源鏈的說明應始于該產(chǎn)品的值，止于計量上最高參考標準。校準品如有互換性，應提供互換性研究資料。應至少提供一批校準品靶值的賦值 程序及測量不確定度資料，校準品如有互換性，應提供互換性驗證時對其賦值進行統(tǒng)計學處理、修訂的研究資料。質(zhì)控品需提供質(zhì)控品賦值的詳細資料，包括來源、賦值、性能測定等。根據(jù)計量學溯源至 SI的可能性及測量程序和校準品的不同計量水平的可獲得性，將計 量學溯源鏈的上端分為以下幾種：4.1測量結(jié)果可以在計量上溯源至國家（國際）標準品的量。有可用的國家（國際）標準品作為參考物質(zhì)，校準品配制過程中使用國家（國際）標準 品作為參照。

5、溯源至國家（國際）標準品，需詳細提供國家（國際）標準品相關(guān)信息，如使用說明書、 批號、質(zhì)量要求、有效期和裝量等。確保校準品準確性、精密性、穩(wěn)定性。4.2測量結(jié)果不能在計量上溯源至國家（國際）標準品的量。無可用的國家（國際）標準品作為參考物質(zhì)，生產(chǎn)企業(yè)需建立自用的標準品，即企業(yè)標準品，校準品配制過程以企業(yè)標準品為參照，確保校準品準確性、精密性、穩(wěn)定性。企業(yè)標 準品溯源至目前已有批文的進口（國家）試劑或者得到行業(yè)內(nèi)普遍認可的試劑。生產(chǎn)企業(yè)提供該試劑的詳細資料，包括廠商、來源、注冊證號、相關(guān)性能指標等。溯源至企業(yè)標準品，生產(chǎn)企業(yè)提供企業(yè)標準品溯源及制備過程，包括具體溯源鏈、實驗方法、數(shù)據(jù)及統(tǒng)計分析等

6、詳細資料。生產(chǎn)企業(yè)需提供校準品的制備方法，包括原料的選擇、校準品制備、定值過程及試驗資料，涉及的主要原料應進行列舉，對于外購的主要原材料，詳述外購原材料的名稱及來源（生 物學、化學等），外購方名稱，提交外購方提供的該原材料的性能指標及檢驗證書（如有），詳述生產(chǎn)企業(yè)對該原材料技術(shù)指標的要求以及生產(chǎn)企業(yè)確定該原材料為主要原材料的依據(jù)， 如驗證試驗方案、結(jié)果及結(jié)論。4.3準確性準確性的評價包括與國家（國際）標準品（和或企業(yè)標準品）的偏差分析、回收試驗和 方法學比對，企業(yè)可根據(jù)實際情況選擇合理方法進行研究。其中相對偏差應在10%范圍內(nèi)，回收率應在 85%115%范圍內(nèi)。4.4精密性校準品的精密性應滿足

7、瓶內(nèi)、瓶間CV10%。4.5穩(wěn)定性效期穩(wěn)定性：生產(chǎn)企業(yè)應規(guī)定產(chǎn)品的有效期，到效期后的校準品檢測準確性和精密性， 應符合4.34.4的要求。熱穩(wěn)定性：檢測校準品準確性和精密性，應符合4.34.4的要求。5 試驗方法5.1校準品溯源性5.1.1主要原材料的選擇選擇抗原（抗體）或純品，按照4.2提供原料選擇資料。選用由生產(chǎn)企業(yè)推薦或經(jīng)實驗證明可使用的緩沖液作為稀釋液，如可采用牛血清、人血清、5%牛血清白蛋白或人白蛋白溶液。詳述緩沖液選擇的試驗資料。5.1.2企業(yè)標準品的建立5.1.2.1 濃儲液的配制將抗原（抗體）或純品按照說明書要求操作，獲得溶液。操作過程確保準確。根據(jù)實際需要可將其配制成一定濃度

8、的溶液作為濃儲液。用緩沖液將濃儲液按照一定比例稀釋， 按照4.1要求使用國家（國際）標準品進行標定。濃度乘以稀釋倍數(shù)為濃儲液濃度，重復測定3次，平均值為濃儲液最終濃度。如無國家（國際）標準品，則按照4.2要求選擇進口 （國產(chǎn)）試劑進行標定，濃儲液溯源至國家（國際）標準品或進口（國產(chǎn)）試劑。5.1.2.2 企業(yè)標準品配制根據(jù)產(chǎn)品的測定范圍，確定企業(yè)標準品濃度，使用稀釋液將抗原（抗體）、純品或濃儲液稀釋到所需濃度， 按照4.1、4.2對企業(yè)標準品進行標定。如需要可通過添加稀釋液和濃儲液調(diào)整企業(yè)標準品濃度，經(jīng)3次及以上反復測定，確定企業(yè)標準品濃度。企業(yè)標準品溯源至至國家（國際）標準品或進口（國產(chǎn)）試

9、劑。5.1.3校準品的配制根據(jù)校準品理論濃度及配制體積，計算確定稀釋液及抗原（抗體）、純品或濃儲液所需量。準確移取稀釋液和抗原（抗體）、純品或濃儲液配制成校準品，按照4.1、4.2對校準品進行標定。如需要可通過添加稀釋液和濃儲液調(diào)整校準品濃度，經(jīng)3次及以上反復測定，確保校準品性能符合 4.3、4.4、4.5要求，校準品溯源至國家（國際）標準品或企業(yè)標準品。5.1.4準確性5.1.4.1 與國家（國際）標準品或企業(yè)標準品的比對研究確定參考物質(zhì)，配制校準品，以參考物質(zhì)測定校準品濃度，計算相對偏差，根據(jù)公式： 相對偏差=（測定濃度-理論濃度）X100%，結(jié)果應符合4.3的要求。5.1.4.2 回收試

10、驗選擇一定濃度的檢測樣本，分為體積相同的3-4份，在其中的2-3份中加入不同量的待測物，配制成2-3個不同加入濃度的回收樣本，計算加入的待測物的濃度。在領(lǐng)一份樣本中 加入同樣兩的無被測物的溶劑，制成基礎(chǔ)樣本。對回收樣本和基礎(chǔ)樣本進行測定，通常對樣本進行2-3次重復分析，取其均值進行計算?；厥諛颖緷舛? -基礎(chǔ)樣本濃度x 100%計算回收率：回收率 1 =疔入二度丨計算平均回收率：(回收率1 +回收率2 +回收率3) * wo%平均回收率=；回收率應符合4.3的要求。注：加入的標準液體積一般在樣本體積的10%以內(nèi)；并且保證在加樣過程中的取樣準確度。加入待測物的濃度：在保證總濃度在方法分析測量范圍

11、內(nèi)，盡量使加入標準液后樣本中的被測物濃度達到醫(yī)學決定水平。標準物濃度：因為標準物溶液加入體積不到10%，為保證得到不同濃度的回收樣本，標準物的濃度應該足夠高。5.1.4.3 方法學比對采用參考方法或國內(nèi)/國際普遍認為質(zhì)量較好的同類試劑作為參比方法，與生產(chǎn)企業(yè)試 劑同時檢測一批病人樣品，從測定結(jié)果間的差異了解生產(chǎn)企業(yè)試劑與參比方法間的偏倚。如偏倚很小或在允許的誤差范圍內(nèi)，說明兩檢測系統(tǒng)對病人標本測定結(jié)果基本相符，對同一份臨床樣本的醫(yī)學解釋，生產(chǎn)企業(yè)試劑與參比方法相比不會產(chǎn)生差異結(jié)果。在實施方法學比對前，應分別對生產(chǎn)企業(yè)試劑和參比試劑進行初步評估，只有在確認兩者都分別符合各自相關(guān)的質(zhì)量標準后方可進

12、行比對試驗。方法學比對時應注意質(zhì)量控制、樣本類型、濃度分布范圍并對結(jié)果進行合理的統(tǒng)計學分析。5.1.5精密性隨機抽取校準品進行精密性測定，每個濃度的校準品隨機抽取10支，用生產(chǎn)企業(yè)試劑進行檢測。每支校準品測試 1次，計算平均濃度值 X1和標準差S仁另外隨機選取1支測試 10次，計算平均濃度值 X2和標準差S2。根據(jù)公式CV ( %) = ( S12-S22)/ X1X100，計算校準品的瓶內(nèi)、瓶間重復性。應符合4.4的要求。5.1.6穩(wěn)定性效期穩(wěn)定性：到效期后的校準品按照 5.1.4、5.1.5方法進行試驗，應符合4.34.4的要求。熱穩(wěn)定性：取有效期內(nèi)校準品按照37C放置1天相當于28C存放

13、1.6個月，由剩余效期計算37C放置天數(shù)，將校準品于 37C放置，按照5.1.4、5.1.5方法進行檢測，校準品準確 性和精密性，應符合 4.34.4的要求。5.2質(zhì)控品的建立如試劑盒有相應的國家參考品，則企業(yè)內(nèi)部陽性/陰性參考品應參考國家參考品的項目設(shè)置。在不低于國家參考品要求的前提下，可以結(jié)合實際情況設(shè)置合理的內(nèi)部陽性/陰性參考品。對于沒有國家參考品的產(chǎn)品，申請人應根據(jù)產(chǎn)品性能驗證的實際情況自行設(shè)定企業(yè)內(nèi)部參考品，陽性參考品應著重考慮抗體滴度要求，陰性參考品則主要涉及對分析特異性(交叉反應）的驗證情況。陽性參考品一般應含有高、中、低值?？蓪⑻禺愋再|(zhì)控血清歸入陰性建立質(zhì)控血清時，陽性/陰性參

14、考品的數(shù)量應以能充分說明試劑盒性能為準，可根據(jù)試 劑盒的實際性能指標規(guī)定質(zhì)控血清的檢出程度，如：陽性/陰性參考品符合率最低限度。應對陽性/陰性參考品中具體的參考品進行必要說明，包括必須檢出的陽性參考品編號和必須 不被檢出的陰性參考品編號，以及可以檢出陰性參考品編號和可以不檢出的陽性參考品編 號，女口：特異性血清應歸入必須不被檢出的參考品，高值陽性參考品應歸入必須被檢出的參考品等。5.2.1質(zhì)控品的配制可選擇臨床樣本，或經(jīng)試驗驗證的基質(zhì)控品的成分應為與檢測樣本的基質(zhì)相似或一樣, 質(zhì)作為質(zhì)控品配制的原料進行質(zhì)控品的配制。臨床樣本的選擇：用于質(zhì)控品配制的樣本應為去除溶血、黃疸、脂血、染菌的樣本，為 臨床陰性和陽性血清和/或血漿樣本。樣本預處理：樣本經(jīng)過預處理后用于質(zhì)控品的配制，包括滅活處理、離心處理等。質(zhì)控品配制：將預處理后的臨床樣本進行定值,記錄檢測結(jié)果，根據(jù)所需質(zhì)控品濃度添使用基質(zhì)配制質(zhì)控品過加稀釋液或濃儲液， 調(diào)整質(zhì)控品濃度，直至濃度達到生產(chǎn)企業(yè)要求。程可與此相同。5.2.2質(zhì)控品的賦值SD），對質(zhì)控品進行3次檢測，每次各測定10孔，計算平均濃度值（X）和標準偏差 根據(jù)質(zhì)控要求，可選擇 X 3SD作為質(zhì)控范圍。5.2.3質(zhì)控品性能測定按照5.1.4、5.1.5方法進行測定，應