檢驗樣本的采集

1、臨床檢驗標(biāo)本采集 同濟(jì)醫(yī)院檢驗科 程黎明 1.檢查患者檢查患者 2.申請化驗申請化驗 3.患者準(zhǔn)備患者準(zhǔn)備 4.標(biāo)本采集標(biāo)本采集 5.標(biāo)本運(yùn)送標(biāo)本運(yùn)送 臨床檢驗分析前質(zhì)量控制臨床檢驗分析前質(zhì)量控制 臨床檢驗標(biāo)本采集臨床檢驗標(biāo)本采集 血液標(biāo)本的采集 尿液標(biāo)本的采集 糞便標(biāo)本的采集 腦脊液標(biāo)本的采集 漿膜腔積液標(biāo)本的采集 細(xì)菌學(xué)檢驗標(biāo)本采集 血液樣本的采集血液樣本的采集 1.影響臨床檢驗結(jié)果準(zhǔn)確性的因素 生物因素：生物因素： 固定的生物因素：性別、年齡、種族、遺傳、妊娠 可變的生物因素：營養(yǎng)、飲食、飲酒、體重、肌肉重量、體力活動、 姿勢、氣候、采血時間、作息規(guī)律、治療藥物 干擾因素：干擾因素： 溶

2、血、脂血、膽紅素 抗凝劑、治療藥物及其代謝產(chǎn)物、輸注液 抗凝劑、細(xì)菌、真菌 標(biāo)準(zhǔn)餐后：tg50%；ast20%；膽紅素、p、glu15%；alt10%； 尿酸、總蛋白、白蛋白、尿素、鈣、鈉、膽固醇5% 飲食結(jié)構(gòu)的不同, 對上述指標(biāo)影響不同： 高脂肪飲食會使甘油三酯大幅度升高； 高蛋白飲食會使氨、尿酸和尿素值升高較多。 飲酒后：tg、乳酸、ua、乙酸、醛固酮、腎上腺素 ：glu、ldl-c 飲咖啡(因)后： ：glu、脂肪酸、血管緊張素、兒茶酚胺 1.影響臨床檢驗結(jié)果準(zhǔn)確性的因素 生物因素：生物因素： 固定的生物因素：性別、年齡、種族、遺傳、妊娠 可變的生物因素：營養(yǎng)、飲食、飲酒、體重、肌肉重量

3、、體力活動、 姿勢、氣候、采血時間、作息規(guī)律、治療藥物 干擾因素：干擾因素： 溶血、脂血、膽紅素 抗凝劑、治療藥物及其代謝產(chǎn)物、輸注液 抗凝劑、細(xì)菌、真菌 劇烈運(yùn)動后： k、ca、na、 p、 glu、urea、ua、bil、 alp、 ast、alt、ck、乳酸等 1.影響臨床檢驗結(jié)果準(zhǔn)確性的因素 生物因素：生物因素： 固定的生物因素：性別、年齡、種族、遺傳、妊娠 可變的生物因素：營養(yǎng)、飲食、飲酒、體重、肌肉重量、體力活動、 姿勢、氣候、采血時間、作息規(guī)律、治療藥物 干擾因素：干擾因素： 溶血、脂血、膽紅素 抗凝劑、治療藥物及其代謝產(chǎn)物、輸注液 抗凝劑、細(xì)菌、真菌 應(yīng)用青霉素對常見試驗結(jié)果的

4、影響 ：ast、ck、cr、蛋白電泳、k(靜脈注射青霉素鉀鹽)、血 漿蛋白、尿蛋白、bun、ua、尿17-ks ：血漿白蛋白、膽紅素(新生兒)、hct、hb、rbc、plt、 k(靜脈注射青霉素鈉鹽)、wbc 應(yīng)用vitc對常見試驗的干擾 ：皮質(zhì)激素、crea、ua、17-oh、17-ks、ast、膽紅素 ：cho、glu、ldh、tg、 大便隱血試驗陰性、pt縮短 1.影響臨床檢驗結(jié)果準(zhǔn)確性的因素 生物因素：生物因素： 固定的生物因素：性別、年齡、種族、遺傳、妊娠 可變的生物因素：營養(yǎng)、飲食、飲酒、體重、肌肉重量、體力活動、 姿勢、氣候、采血時間、作息規(guī)律、治療藥物 干擾因素：干擾因素： 溶

5、血、脂血、膽紅素 抗凝劑、治療藥物及其代謝產(chǎn)物、輸注液 抗凝劑、細(xì)菌、真菌 2.如何控制分析前的影響因素 （1）采血前的準(zhǔn)備 采血前禁食12小時，采血前應(yīng)不喝茶、咖啡和酒，不吸煙 避免劇烈運(yùn)動 一貫的體位 在不服藥期間采血 在每一天的同一時間采血 理想的采血時間是在早晨7至8點(diǎn)，最后一次食物和液體的攝入應(yīng) 在前一天下午6至7時；在早晨服藥前采血；采集血樣時患者應(yīng)采 取仰臥位。 （2）血液樣本的采集 使用真空采血管 采血管的選擇 采血帶的使用 采血帶使用時間在1分鐘之內(nèi)，大部分檢驗指標(biāo)不受影響 回血后應(yīng)立即松開止血帶 避免反復(fù)握拳 采血的順序 （2）血液樣本的采集 使用真空采血管 采血管的選擇

6、止血帶的使用 止血帶使用時間在1分鐘之內(nèi)，大部分檢驗指標(biāo)不受影響 回血后應(yīng)立即松開止血帶 避免反復(fù)握拳 采血的順序 clsi真空採血順序真空採血順序 細(xì)菌培細(xì)菌培養(yǎng)養(yǎng) 紅紅 藍(lán)藍(lán) 黃黃 綠綠 紫紫 灰灰 黑黑 生化免疫指標(biāo)生化免疫指標(biāo) 凝血指標(biāo)凝血指標(biāo) 生化免疫生化免疫指標(biāo)指標(biāo) 生化免疫生化免疫指標(biāo)指標(biāo) 血常規(guī)血常規(guī) 血糖血糖 血沉指標(biāo)血沉指標(biāo) 采血量 血液比例過高 2由于抗凝劑相對不足，血漿中出現(xiàn)微凝血塊而阻塞儀器的采樣針。 血液比例過低 2抗凝劑相對過剩 2易溶血 2樣本量不足 凝血功能檢查 血常規(guī)檢查 2采用枸櫞酸三鈉抗 凝 2抗凝劑:血=1:9 2采血量不足，pt、 aptt明顯延長

7、采血量 血液比例過高 2由于抗凝劑相對不足，血漿中出現(xiàn)微凝血塊而阻塞儀器的采樣針。 血液比例過低 2抗凝劑相對過剩 2易溶血 2樣本量不足 凝血功能檢查 血常規(guī)檢查 2采用edtak2抗凝 2edta在血中濃度達(dá)到2.5mg/ml 時，中性粒細(xì)胞會腫脹，分葉 消失，血小板會腫脹，崩解， 影響血常規(guī)結(jié)果。 2采血量1.5-2ml 采血部位 避免在輸液過程中采血！ 嚴(yán)禁在靜脈輸液側(cè)采血! 避免從留置血導(dǎo)管采血！ 2靜脈血生化、血常規(guī)、免疫等。 2動脈血血?dú)夥治鰰r 充分混勻，避免血凝！ 避免溶血！ 造成溶血的因素 用力推血 采血不順利 混勻過猛 運(yùn)輸 采血量不足 酒精未干 漏氣 試管質(zhì)量 推薦使用真

8、空采血系統(tǒng)！ 3.血液樣本的運(yùn)送 標(biāo)本運(yùn)送要注意防止標(biāo)本外溢、蒸發(fā)和污染(標(biāo)本管要蓋蓋子), 應(yīng)嚴(yán)密包裝;有特殊要求的標(biāo)本要按特殊要求運(yùn)送(如血?dú)夥治?標(biāo)本應(yīng)嚴(yán)格密封,與外界空氣隔絕;測定維生素a、維生素b6 、 2胡蘿卜素、膽紅素等標(biāo)本,應(yīng)注意避免暴露于光線下,用黑 紙或鋁箔保護(hù)標(biāo)本)。 血樣應(yīng)豎直放置 避免晃動血樣, 產(chǎn)生溶血 2立即送檢：血氨、血沉、血?dú)狻⑺嵝粤姿崦浮?乳酸、各種培養(yǎng) 20.5h內(nèi)：血糖、電解質(zhì)、血液細(xì)胞學(xué)、體液細(xì) 胞學(xué)、涂片找細(xì)菌、真菌 212h內(nèi)：各種蛋白質(zhì)類、色素類、激素類、脂 類、酶類、抗原、抗體、尿液 2超過2h，分離血清或血漿保存 特殊樣本血?dú)夥治鲅獨(dú)夥治?1

9、.標(biāo)本要求標(biāo)本要求 全血,以動脈血或動脈化毛細(xì)血管血為主 只有動脈血才能真實反映體內(nèi)代謝氧化作用和酸堿平衡的狀況 動脈血液的氣體含量幾乎無部位差異，從主動脈到末梢循環(huán)都是均一的 對o2檢測的有關(guān)指標(biāo)必須采集動脈血，才能真正反映體內(nèi)氧的運(yùn)輸狀態(tài) 對pco2和ph的檢測也以采集動脈血為好。血液循環(huán)無障礙的病人，靜脈 血的這兩項指標(biāo)基本也可反映體液酸堿狀況 特殊樣本血?dú)夥治鲅獨(dú)夥治?動脈血動脈血： 部位：肱動脈、股動脈、前臂動脈以及其他任何部位的動脈均可 采血：專用的血?dú)夥治鲠槻杉?動脈化毛細(xì)血管血動脈化毛細(xì)血管血：指局部組織末梢經(jīng)45溫水熱敷，使循環(huán)加速，血 管擴(kuò)張，局部毛細(xì)血管血液中po2和pc

10、o2值與毛細(xì)血管動脈端血液中的數(shù) 值相近，此過程稱為毛細(xì)血管動脈化 靜脈血靜脈血：靜脈血所測結(jié)果不適用于了解體內(nèi)o2的運(yùn)輸狀態(tài)，故po2及有關(guān) 推算數(shù)據(jù)僅供參考，對ph及pco2等酸堿平衡指標(biāo)是適用的。采靜脈血盡 可能不使用止血帶 特殊樣本血?dú)夥治鲅獨(dú)夥治?3.標(biāo)本采集的注意事項標(biāo)本采集的注意事項 臥床5分鐘 治療過程中采血要特別注意病人所處的狀態(tài) 肝素抗凝，凍干肝素優(yōu)于液體肝素 注意防止血標(biāo)本與空氣接觸 標(biāo)本放置時間：按要求，采取的血標(biāo)本應(yīng)在30分鐘內(nèi)檢測完畢， 如30分鐘后不能檢測，應(yīng)將標(biāo)本置于冰水中保存，最多不超過2小 時，在30分鐘到2小時之間，血po2值是個懷疑值，僅供參考 尿液標(biāo)本

11、的采集尿液標(biāo)本的采集 晨尿或隨機(jī)尿 清潔、專用容器， 避免經(jīng)血、白帶、精液、糞便等污染 2h內(nèi)送檢 24h尿 中段尿 24h尿留取方法 清晨8時排尿棄去；8時后的尿液 全部收集于一個大的容器內(nèi)（由檢 驗科提供，預(yù)先加入防腐劑），至 第二日晨8時，將最后一次尿液排 入容器中。將全部標(biāo)本混合均勻后， 用量桶量取總量并記于化驗單之上， 再從混合均勻的尿液中取出適量的 尿標(biāo)本送檢。 24h尿鈉、鉀、氯、銅 （10ml尿） 建議2-8保存，不添加任何防腐劑 （甲苯0.5-1ml/100ml尿） 24h尿微量白蛋白、微量總蛋白 （10ml尿） 建議2-8保存，不添加任何防腐劑 （甲苯0.5-1ml/100

12、ml尿） 24h尿cr、ua、urea （10ml尿） 建議2-8保存，不添加任何防腐劑 （甲苯0.5-1ml/100ml尿） 24h尿vma定量 （50ml尿） 加鹽酸作為防腐劑(0.5-1ml/100ml尿) 24h尿17-羥、17-酮定量 （50ml尿） 加鹽酸作為防腐劑(0.5-1ml/100ml尿) 24h尿鈣、磷（10ml尿）加鹽酸作為防腐劑(0.5-1ml/100ml尿) 晨尿或隨機(jī)尿 清潔、專用容器， 避免經(jīng)血、白帶、精液、糞便等污染 2h內(nèi)送檢 24h尿 中段尿 中段尿留取方法 -四塊肥皂飽和的紗布、四塊干紗布、手套、無菌容器 -戴上手套、兩腿分開站在抽水馬桶前，用一只手分開

13、陰唇 -用肥皂飽和的紗布從前到后擦洗生殖器區(qū)域4次 -用干紗布從前到后擦4次 -排尿入抽水馬桶 -將盛尿容器置于尿流中 -將殘尿排入抽水馬桶 v晚上盡量憋尿，留取晨尿 v2小時內(nèi)處理，若不能及時運(yùn)送，保存于4不超過6小時。 糞便標(biāo)本的采集和送檢 潔凈、有蓋、專用容器 不得混有尿液，不可有消毒劑及污水 不得用衛(wèi)生紙包裹衛(wèi)生紙包裹 留取10g以上（拇指大小）糞便 重點(diǎn)留取黏液、膿血等腸脫落組織及可疑部位 外觀無異常的糞便可在表面及內(nèi)部不同部位取材 及時送檢 查阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)保溫、快送 腦脊液標(biāo)本采集腦脊液標(biāo)本采集 一般分一般分3 3瓶收集瓶收集 第一瓶作細(xì)菌培養(yǎng) 第二瓶作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查 第三

14、瓶作一般性狀及顯微鏡檢查（腦脊液常規(guī)） 每瓶收集每瓶收集1 12ml2ml 立即送檢！ 漿膜腔積液標(biāo)本采集漿膜腔積液標(biāo)本采集 漿膜腔積液包括胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液及鞘膜液等。 胸水及腹水抽取10 ml，心包液、關(guān)節(jié)液等抽取25 ml。 一般檢查分裝于兩試管中，一管加抗凝劑，另一管不加抗 凝劑。 立即送檢或置4冰箱保存。 抗凝劑為100g/l的乙二胺四乙酸二鉀（edta-k2）或肝素鈉 其他 十二指腸液 胃液 精液 前列腺液 白帶 陰道/宮頸脫落細(xì)胞 細(xì)菌學(xué)檢驗標(biāo)本采集及注意事項細(xì)菌學(xué)檢驗標(biāo)本采集及注意事項 總原則 l無菌操作，有蓋無菌容器，盡量不用棉拭子(咽喉及生殖道除外) l應(yīng)把握采樣時

15、機(jī)，選擇采樣部位 l應(yīng)在使用抗生素前采集標(biāo)本，如已經(jīng)用藥，需停藥三天采集標(biāo)本； 如不能停藥者，應(yīng)在下次用藥前采集 l盡快送檢，如不能及時送檢應(yīng)予冷藏保存(腦脊液、血培養(yǎng)瓶除外) l標(biāo)本中不可添加防腐劑 血液及骨髓 血培養(yǎng)檢測指征血培養(yǎng)檢測指征: : 發(fā)熱（38）或低體溫（36）；寒戰(zhàn)； 白細(xì)胞增多，特別有“核左移”時 粒細(xì)胞減少 血小板減少；皮膚黏膜出血；昏迷和多器官衰竭等 血液及骨髓 1.1.采血時間采血時間 抗生素使用前采集；若已用藥，應(yīng)在下次用藥前采集 細(xì)菌進(jìn)入血流約1小時出現(xiàn)寒戰(zhàn)、高熱，盡可能在寒戰(zhàn)、高熱前，或寒戰(zhàn)、高熱盡可能在寒戰(zhàn)、高熱前，或寒戰(zhàn)、高熱 時立即采集。時立即采集。發(fā)熱被

16、抑制后，隨時間延遲，檢出率下降發(fā)熱被抑制后，隨時間延遲，檢出率下降 若熱型穩(wěn)定，最好在發(fā)燒前采集 皮膚消毒，防止污染皮膚消毒，防止污染（毛囊內(nèi)含有細(xì)菌，須待消毒劑發(fā)揮作用使細(xì)菌崩解后抽血，皮 膚上有很多scn） 含碘制劑需要足夠消毒時間（碘酊、洗必泰30s，碘伏1.52m） 血培養(yǎng)瓶：瓶蓋0.5%碘伏消毒30s1 min 標(biāo)本采集：標(biāo)本采集：無菌操作，靜脈采集，無菌操作，靜脈采集，盡可能不經(jīng)留置導(dǎo)管采集，避免污染； 輕顛倒混勻防凝固；污染率應(yīng)小于3% 血培養(yǎng)前10位病原菌 細(xì)菌正確（%）污染（%）不確定（%） 金黃色葡萄球菌87.26.46.4 大腸艾希菌99.30.00.7 凝固酶陰性葡萄球

17、菌12.481.95.8 肺炎克雷伯菌100.00.00.0 腸球菌屬69.916.114.0 銅綠假單胞菌96.41.81.8 肺炎鏈球菌100.00.00.0 白色念珠菌90.00.010.0 草綠色鏈球菌38.049.312.7 陰溝腸桿菌100.00.00.0 血液及骨髓 2.2.樣本量：樣本量： 血培養(yǎng)血培養(yǎng) 常規(guī)血培養(yǎng)包括需氧/厭氧各1瓶（1套） 成人每次20ml 30ml；兒童-ml；嬰兒及新生兒盡量采集。每次采 血均分至兩瓶（成人每瓶10ml；兒童每瓶1-3ml）。血量不足-先需氧瓶， 剩余血接種厭氧瓶。 （減少1ml，陽性率降低35%） 建議每次采二套，最好三套（不同時間，不

18、同部位）。 骨髓培養(yǎng)骨髓培養(yǎng)：盡量采集(2ml) 貼條碼和標(biāo)簽：標(biāo)簽不可遮蓋條碼 立即送檢 保存：保存：備用瓶應(yīng)置室溫，絕不可放冰箱；備用瓶應(yīng)置室溫，絕不可放冰箱； 血液及骨髓 輸液反應(yīng)輸液反應(yīng) 血培養(yǎng) 剩余液體 剩余液體很容易污染（經(jīng)很多途徑），有時濃度不高不足以致病。 若只培養(yǎng)液體，很難說明是輸液的原因。 若血培養(yǎng)無，則不能說明是液體的原因。 血液及骨髓 血培養(yǎng)瓶（血培養(yǎng)瓶（bdbd）的選擇：）的選擇： 灰色瓶蓋-成人中和抗生素需氧瓶(10ml) 粉紅色粉紅色瓶蓋-兒童中和抗生素需氧瓶(1-3ml) 金黃色瓶蓋-中和抗生素厭氧瓶(10ml) 血液及骨髓 血培養(yǎng)瓶（血培養(yǎng)瓶（bactbact/alert/alert）的選擇）的選擇 黃色黃色瓶蓋-兒童中和抗生素需氧瓶(1-3ml) 淺綠色淺綠色瓶蓋-成人中和抗生素需氧瓶(10ml) 金黃色金黃色瓶蓋-中和抗生素厭氧瓶(10ml) 紅色瓶蓋分支桿菌培養(yǎng)瓶（10ml） 呼吸道標(biāo)本 上呼吸道標(biāo)本上呼吸道標(biāo)本 清水漱口 將咽拭子越過舌根到咽后壁或懸雍垂的后側(cè)，或扁桃體上涂抹明 顯發(fā)紅或偽膜存在的部位 避免觸及舌，口腔粘膜和唾液 下呼吸道標(biāo)本 晨痰：用清