解毒利尿顆粒水提工藝的正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選

1、文檔收集于互聯(lián)網(wǎng)，已重新整理排版.word版本可編借，有幫助歡迎下載支持.解毒利尿顆粒水提工藝的正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選作者：杜樹(shù)山，張錚，沈圣民，張海鳴，曹杰，關(guān)銘【摘要】目的優(yōu)選解毒利尿顆粒的最佳水提取工藝。方法以干膏 量、甘草酸提取量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，選擇加水量、提取時(shí)間、提取次數(shù)為 考察因素，利用L9C34）正交實(shí)驗(yàn)確定解毒利尿顆粒的水提取工藝。結(jié) 果最佳提取工藝為加水10倍量，提取3次，2h/次。結(jié)論優(yōu)選出的提 取工藝簡(jiǎn)單、可行，可作為該制劑合理開(kāi)發(fā)的依據(jù)。【關(guān)鍵詞】解毒利尿顆粒;提取工藝;正交實(shí)驗(yàn)解毒利尿顆粒由生甘草、白茅根、赤芍、紫蘇葉、生姜、豬苓 等6味藥材組成，具有清熱解毒、利尿等功效。臨床

2、上主要用于不明 原因的中毒。因木品具有減輕中毒癥狀的作用，可為臨床診斷確定中 毒原因提供時(shí)間。根據(jù)處方中藥材的主要有效成分的性質(zhì)、處方的功 能主治、臨床用藥經(jīng)驗(yàn)、預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果、工廠生產(chǎn)實(shí)際和參考有關(guān)文獻(xiàn) 廣3,本實(shí)驗(yàn)采用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)方中甘草等藥材的水煎煮工藝，進(jìn) 行了考察，以甘草中甘草酸的含量和出膏量為指標(biāo)，優(yōu)選提取工藝。1儀器與試藥1. 1儀器Watersl525高效液相色譜儀（配Waters2487紫外可 見(jiàn)檢測(cè)器）;MeLLennium32 色譜工作站;METTER Toledo AG135 1/10 萬(wàn) 電子分析天平（瑞士 METTER公司）;KQ-250DB數(shù)控型超聲波清洗器（昆 山

3、市超聲儀器公司）；電熱恒溫水浴鍋（北京市長(zhǎng)風(fēng)儀器儀表公 司）;98-l-B型電子調(diào)溫電熱套（天津市泰斯特儀器有限公 司）;101A-3E型電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海實(shí)驗(yàn)儀器廠有限公司）。1. 2試藥與試劑甘草酸彼對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所， 批號(hào)為：110731-200511);所用藥材購(gòu)于同仁堂藥店，經(jīng)鑒定4甘草 為豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch的干燥根，白茅根為 禾本科植物白茅Imperata cylindrica ,赤芍為毛罠科植物芍藥 Paeonia Iact辻lota Pall.的T燥根，紫蘇葉為唇形科植物紫蘇 Perilla frutescens

4、(L. ) Britt.的干燥葉，生姜為姜科植物姜 Zingiber officinale Rose.的新鮮根莖,豬苓為多孔菌科真菌豬苓 Polyporus umbellatus (Pers. ) Fries的干燥根；甲醇為色譜純,水為 純凈水，其他試劑均為分析純。2方法與結(jié)果2. 1正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)經(jīng)過(guò)預(yù)試驗(yàn)，多方考察影響水煎煮的因素, 選擇加水量、提取時(shí)間、提取次數(shù)為影響水煎煮的主因素，以甘草酸 含量及岀膏量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，用L9(34)正交表安排實(shí)驗(yàn)，因素水平表與 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)見(jiàn)表廣2。2.2提取液的制備稱取生甘草、口茅根、赤芍、紫蘇葉、生 姜、豬苓共9份，加入水，按表2進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，得水提取液，分

5、別濃縮 并定容至100 ml,搖勻，即得。表1因素水平表2正交實(shí)驗(yàn)表2. 3甘草酸的含量測(cè)定4色譜條件:色譜柱為DiamonsilCIS (250 mmX4. 6 mm , 5 Um);流動(dòng)相為甲醇-0. 2 mol L1醋酸錢水溶 液-冰醋酸(67 : 33 : 1);檢測(cè)波長(zhǎng)250 nm;柱溫30 C;流速1.0 mlmin-1;理論板數(shù)按甘草酸峰計(jì)算應(yīng)不低于2 000。對(duì)照品溶液的 制備：取甘草酸錢對(duì)照品適量，精密稱定，加流動(dòng)相制成每毫升含0. 2 mg（折合甘草酸為0. 1959 mg）的溶液。供試品溶液的制備：精密吸取 提取液10 ml,轉(zhuǎn)移至100 ml量瓶?jī)?nèi)，加乙醇稀釋至刻度，超

6、聲處理 （功率：250 W,頻率：40 kHz） 30 min,靜置，取上清液，濾過(guò)，取續(xù) 濾液，即得。測(cè)定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 H b注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。2.4出膏量的測(cè)定精密吸取50 ml提取液并轉(zhuǎn)移至己稱重的 干燥蒸發(fā)皿中，水浴蒸至近干，置70C的烘箱進(jìn)行減壓干燥至恒重， 計(jì)算岀膏量。 2. 5數(shù)據(jù)分析對(duì)表2數(shù)據(jù)進(jìn)行直觀分析，以甘草酸 含量及出膏量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，均可得出影響水煎煮因素的主次順序?yàn)镃、 A、B,最佳提取工藝為C3A3B2o對(duì)二者的方差分析結(jié)果見(jiàn)表曠4,因 素A、C對(duì)岀膏量均有極顯著影響，因素B對(duì)出膏量有顯著影響，因素 C對(duì)甘草酸提取量有極顯著影

7、響。根據(jù)以上結(jié)果，得出最佳提取工藝 為C3A3B2,即加水煎煮3次，10倍量，提取2 h。表3甘草酸方差分 析表4出膏量方差分析2.6驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)與結(jié)果稱取生甘草、白茅根、赤芍、紫蘇葉、 生姜、豬苓等6味藥共3份，按上述制備工藝進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果與正交 實(shí)驗(yàn)結(jié)果相符，說(shuō)明木提取工藝穩(wěn)定可行。結(jié)果見(jiàn)表5。3討論3.1煎煮方法的確定方中生甘草、白茅根、赤芍、紫蘇葉、 生姜、豬苓等藥材在臨床上以湯劑應(yīng)用。預(yù)試驗(yàn)結(jié)果表明，采用水煎 煮法可使所含成分得到較完全提取，從而保證制劑的療效。表5驗(yàn)證 實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.2評(píng)價(jià)指標(biāo)的選擇甘草為木品方中的君藥，甘草酸是甘草 的主要有效成分，具有抗炎、解毒、保肝和增強(qiáng)免疫等作用5,這與 木顆粒劑的功能主治一致;而浸膏得率是評(píng)價(jià)水提取效率的傳統(tǒng)手段, 故評(píng)價(jià)指標(biāo)確定為上述兩項(xiàng)亦是合理可行的。3.3最佳工藝的確定根據(jù)以上結(jié)果，結(jié)合臨床用藥與生產(chǎn)實(shí) 際，確定木品藥材的最佳提取工藝為：水煎煮3次，每次加水10倍量, 提取2 h/次?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1 張娟，楊中林，李萍.甘草中甘草酸的制備工藝研究J 中成藥，2007, 29(5)： 686.2 周斌，高文遠(yuǎn)，張鐵軍.甘草配方顆粒制備工藝和質(zhì)量標(biāo) 準(zhǔn)研究J.中成藥,2007, 29(9): 1405.3 王艷平，夏新華，王杰英.正交試驗(yàn)法優(yōu)選紫蒲顆粒提取 工藝的研究J