土壤各種指標(biāo)的檢測方法

1、土壤含水量的測定（烘干法）原理:土壤樣品在105土 2 C烘至恒重時的失重，即為土壤樣品所含水分的質(zhì)量。主要儀器設(shè)備：烘箱，天平，干燥器，坩堝測定步驟：1. 稱取自然濕土樣20g （精確到0.01g），放入坩堝中，蓋好蓋子，稱量坩堝加土樣的 總質(zhì)量。2. 打開坩堝的蓋子，放入烘箱中，在 105C下烘至恒定質(zhì)量（約 12h），含有機(jī)物質(zhì)多 的土樣（8%）不宜在105C以上烘烤過久；取出后放入干燥器內(nèi)冷卻至室溫（約 2030min）。3. 從干燥器內(nèi)取出坩堝，蓋好蓋子，稱量坩堝和烘干土的質(zhì)量。4. 結(jié)果計(jì)算土壤質(zhì)量含水量（g/kg）=叫_m 1000m式中： m烘干土質(zhì)量， g m2濕土質(zhì)量，g土

2、壤體積含水量（g/L）土壤質(zhì)量含水量（g/kg）土壤密度（mg/m：） 水的密度（mg/m3）5. 允許偏差平行測定結(jié)果的允許絕對偏差不得大于10g/kg。pH值（電位測定法）原理：當(dāng)規(guī)定的指示電極和參比電極浸入土壤懸濁液時，構(gòu)成一原電池，其電動勢和懸濁液的pH有關(guān)，通過測定原電池的電動勢即可得到土壤的pH值。儀器設(shè)備：2mm孔徑篩網(wǎng)、pH計(jì)、電導(dǎo)率儀測定步驟：1、試樣的制備：1.1 風(fēng)干新鮮樣品應(yīng)進(jìn)行風(fēng)干。將樣品平鋪在干凈的紙上，攤成薄層，于室內(nèi)陰涼通風(fēng)處風(fēng) 干，切忌陽光直接暴曬。風(fēng)干過程中應(yīng)經(jīng)常翻動樣品，加速其干燥。風(fēng)干場所應(yīng)防止酸、 堿等氣體及灰塵的污染。當(dāng)土樣達(dá)到半干狀態(tài)時，宜及時將大

3、土塊捏碎。亦可在不高于 40 C條件下干燥土樣。1.2磨細(xì)和過篩用四分法取適量風(fēng)干樣品，剔除土壤以外的侵入物，如動植物殘?bào)w、磚頭、石塊等，再用圓木棍將土樣碾碎，使樣品全部通過2mm 孔徑的篩網(wǎng)。過篩后的土樣應(yīng)充分混勻，裝入潔凈的土樣袋中，備用。貯存期間，試樣應(yīng)盡量避免日光、高溫。潮濕、酸堿氣體等的影響。2 、分析步驟稱取土樣20.0 g （W樣品:V蒸餾水=125 ）,加入50 mL水，攪拌均勻，靜置半小時。用 pH 計(jì)和電導(dǎo)率儀進(jìn)行測定。氨氮、硝氮、亞硝氮和總氮的測定預(yù)處理 （提取 ） ：取 10 g 檢出異物的新鮮尾礦，稱取 10 g 置于 150 mL 三角瓶中，加入 50 mL 10%

4、 NaCl 溶 液，閉嚴(yán)，在振蕩器上震蕩 10 min 后，迅速用定性濾紙進(jìn)行過濾。氨氮的測定測定原理：氨與苯酚及次氯酸鈉在堿性介質(zhì)中，以亞硝酰鐵氰化鈉為催化劑，生化靛酚。顏色的深度 與氨濃度成比例，可用分光光度法測定。主要儀器設(shè)備： 分光光度計(jì)測定步驟：1 、試劑的配制：10% NaCI溶液：稱取50g NaCI，溶解于水，用鹽酸調(diào)至pH為2.5,定容至500 mL。氨氮準(zhǔn)液：準(zhǔn)確稱取130 C下烘干的硫酸銨 0.4720 g，用蒸餾水溶解并稀釋至 1 L,含氨氮 為 100 mg?L-1 。工作溶液以此稀釋。溶液 B ：溶解 5 g 苯酚和 25 mg 亞硝酰鐵氰化鈉于水中，稀釋至 500

5、 mL ，放棕色瓶中，置 冰箱中貯存。溶液C :溶解2.5 g氫氧化鈉，18.7 g磷酸氫二鈉和15.9 g磷酸三鈉于水中，加入含有有效氯 250 mg 的次氯酸鈉，定容至 500 mL ，放棕色瓶中，置冰箱中貯存。1 %EDTA 溶液：溶解 1 gEDTA 于 100 mL 水中，用濃氫氧化鈉調(diào)節(jié)至 pH=10。2、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：在一系列 100 mL 容量瓶中取 0-50 mg 氨氮，各加 1 mL 1% EDTA （如水樣含鈣鎂較多時加3 mL）搖勻，加入10 mL溶液B , 10 mL溶液C,搖勻，定容，置 37C恒溫水浴中發(fā)色0.5 h。用1 cm比色槽，在625 nm波長處測定吸

6、光度，由測定的吸光度對氨的濃度繪制標(biāo) 準(zhǔn)曲線。3、取濾液 5 mL 于 100 mL 容量瓶中其他與制作標(biāo)準(zhǔn)曲線相同，最后測出吸光度。硝氮的測定測定原理：利用硝酸鹽在220nm波長具有吸收，而275nm波長不具有吸收的性質(zhì)進(jìn)行測定，于275nm波長測出有機(jī)物吸收值在測定結(jié)果中校正，消除溶解的有機(jī)物對測定的影響。主要儀器設(shè)備：分光光度計(jì)測定步驟：1、硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取0.7218 g硝酸鉀（優(yōu)級純）溶于蒸餾水中，稀釋至1000 mL,此溶液含100 mg -L-1硝酸鹽氮。2、 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：將硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液（100 mg L-1）稀釋10倍，分別取其1.00, 2.00, 3.00, 4.

7、00 mL，各加入1 mL 1M鹽酸稀釋至50 mL ,充分混勻。用水做參比，用石英比色槽 在220 nm和275nm波長處測定。根據(jù)220nm與二倍275nm波長吸光度值之差對濃度作圖，繪 制標(biāo)準(zhǔn)曲線。3、取濾液 10 mL 于 100 mL 容量瓶其他與制作標(biāo)準(zhǔn)曲線相同,最后測出吸光度。結(jié)果計(jì)算校正吸光度計(jì)算： Ar=A220nm-2A 275nm式中：Ar 校正吸光度；A220nm220nm波長處測得的吸光度； A275nm一 275門01波長處測得的吸光度由標(biāo)準(zhǔn)曲線算出相應(yīng)水樣硝態(tài)氮含量。亞硝氮測定測定步驟：1 、試劑的配制：亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)儲備液：稱取1.232 g亞硝酸鈉溶于水中稀釋至

8、1000 mL，加入1 mL氯仿保存,此溶液每毫升含亞硝酸鹽氮約 0.25 mg。亞硝酸鈉中間標(biāo)準(zhǔn)溶液：將上述標(biāo)定好的貯備溶液用水稀釋至50.0卩g m1L亞硝酸鹽氮的標(biāo)準(zhǔn)中間溶液,臨用時配制。亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用溶液：將50.0 g m1L亞硝酸鹽氮的標(biāo)準(zhǔn)中間溶液稀釋至0.50卩g mN的亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液。該溶液現(xiàn)配現(xiàn)用。對氨基本磺酰胺溶液：稱取 5 g 對氨基本磺酰胺（磺胺） ,溶于含 50 mL 濃鹽酸和 350 mL 升水的混合液中，稀釋至500 mL ,此溶液可以穩(wěn)定數(shù)月。N-1 萘-乙二胺鹽酸鹽溶液：稱取 500 mL N-1 萘-乙二胺鹽酸鹽溶于 500 mL 水中,貯于棕色 瓶中,在

9、冰箱中保存可穩(wěn)定一個月。當(dāng)有顏色時,應(yīng)重新配制,如有沉淀需過濾。2、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：在50 mL比色管中，分別加入 0.5卩g mLN的亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液 0-10 mL ,分別加入1.0 mL 對氨基本磺酰胺溶液，搖勻，放置2-8 min，加1.0 mL N-1萘-乙二胺鹽酸鹽溶液，用水稀釋至50 mL ,顯色后在分光光度計(jì)上于543 nm波長處以試劑空白做參比測其吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。3、取濾液 10 mL 于 100 mL 容量瓶中其他與制作標(biāo)準(zhǔn)曲線同,最后測出吸光度?？偟獌x器設(shè)備： 電熱板,凱氏定氮儀主要試劑： 硫酸,高氯酸 稱取1 g （精確至0.0001 ）的土樣于150 mL三角瓶中

10、，加少許水潤濕后，加入3 mL硫酸和幾滴高氯酸,瓶口放上彎頸小漏斗,同時做無土空白對照。在電熱板上消煮,待土樣呈 白色或灰白色時（如土壤仍為灰黑色,則取下三角瓶,待冷卻后繼續(xù)加入硫酸和高氯酸）, 消煮完全。將消煮完全的土壤全部洗入凱氏定氮儀，產(chǎn)生的氨氣由硼酸混合指示劑吸收后，用 0.01mol L-1 (1/2H2SO4)標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定餾出液由藍(lán)綠色至剛變?yōu)榧t紫色。記錄所用酸標(biāo)準(zhǔn)溶液 的體積(mL)?？瞻诇y定所用酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，一般不得超過 0.4 mL。最后用樣品消耗 的硫酸體積與空白消耗的硫酸體積的差來計(jì)算土樣總氮含量。土壤速效磷的測定中性和石灰性土壤速效磷的測定一一0.05 mol L-

11、1NaHCO3法方法原理：石灰性土壤由于大量游離碳酸鈣存在，不能用酸溶液來提有效磷。一般用碳酸鹽的堿溶 液。由于碳酸根的同離子效應(yīng)，碳酸鹽的堿溶液降低碳酸鈣的溶解度，也就降低了溶液中 鈣的濃度，這樣就有利于磷酸鈣鹽的提取。同時由于碳酸鹽的堿溶液，也降低了鋁和鐵離 子的活性，有利于磷酸鋁和磷酸鐵的提取。此外，碳酸氫鈉堿溶液中存在著OH-、HCO3-、CO32-等陰離子，有利于吸附態(tài)磷的置換，因此NaHCOs不僅適用于石灰性土壤，也適應(yīng)于中性和酸性土壤中速效磷的提取。待測液中的磷用鉬銻抗試劑顯色，進(jìn)行比色測定。主要儀器 ：往復(fù)振蕩機(jī)、分光光度計(jì)或比色計(jì)。主要試劑：1、0.05 mol L-1NaH

12、CO3浸提液 溶解 NaH COs42.0g 于 800mL 水中，以 0.5 mol L-1NaOH 溶液調(diào)節(jié)浸提液的 pH至8.5。此溶液曝于空氣中可因失去 CO2而使pH增高，可于液面加一 層礦物油保存之。此溶液貯存于塑料瓶中比在玻璃中容易保存，若貯存超過1 個月，應(yīng)檢查 pH 是否改變。2、無磷活性炭。活性炭常含有磷，應(yīng)做空白試驗(yàn)，檢驗(yàn)有無磷存在。如含磷較多，須先用2mol L-1HCl浸泡過夜，用蒸餾水沖冼多次后，再用0.05 mol L -1NaHCO3浸泡過夜，在平瓷漏斗上抽氣過濾，每次用少量蒸餾水淋洗多次，并檢查到無磷為止。如含磷較少，則直接用NaHCO3處理即可。3、 鉬銻抗

13、試劑。A.5 g L-1酒石酸氧銻鉀溶液：取酒石酸氧銻鉀K(SbO)C 4H4O60.5g，溶解 于100mL水中。B.鉬酸銨一硫酸溶液：稱取鉬酸銨 (NH4)6M07O24 4H2O10g，溶于450mL 水中，緩慢地加入 153mL濃H2SO4，邊加邊攪。再將上述 A溶液加入到B溶液中，最后加 水至1L。充分搖勻，貯于棕色瓶中，此為鉬銻混合液。臨用前(當(dāng)天)，稱取左旋抗壞血酸(C6H 8O5,化學(xué)純)1.5g，溶于100mL鉬銻混合 液中，混勻，此即鉬銻抗試劑。有效期24 小時，如藏冰箱中則有效期較長。此試劑中H2SO4為5.5mol L-1 ( H+),鉬酸銨為10 g L-1，酒石酸氧

14、銻鉀為 0.5 g L-1，抗壞血酸為1.5 g L-1 。4、 磷標(biāo)準(zhǔn)溶液。準(zhǔn)確稱取在105 C烘箱中烘干的KH2PO4 (分析純)0.2195g，溶解在 400mL水中，加濃H2SO45mL （加H2SO4防長霉菌，可使溶液長期保存），轉(zhuǎn)入1L容量瓶 中，加水至刻度。此溶液為 50卩gm L-P標(biāo)準(zhǔn)溶液。 吸取上述磷標(biāo)準(zhǔn)溶液 25mL，即為5-1g m L P標(biāo)準(zhǔn)溶液（此溶液不宜久存）。操作步驟：1、 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：分別吸取 5卩g m的P標(biāo)準(zhǔn)溶液0-5 mL于150 mL三角瓶中，再加 入0.5 mol L NaHCO3 10mL，準(zhǔn)確加入水使各瓶的總體積達(dá)到 45 mL,搖勻；最后加

15、入鉬 銻抗試劑5 mL,混勻顯色。 12、 稱取過篩的風(fēng)干土樣 2.5 g （精確至0.0001 ）于150 mL三角瓶中，加入 0.5mol L- NaHCO3溶液50 mL,再加入一勺無磷活性炭，賽緊瓶塞，振蕩0.5 h,立即用無磷濾紙過濾，濾液承接于 100ml三角瓶中，吸取濾液10ml （含磷量高時吸取 2.5 5.0ml，同時應(yīng)補(bǔ)加0.5 mol L -1 NaHCO 3溶液至10ml ）于150 mL三角瓶中，在準(zhǔn)確加入蒸餾 水35 mL,最后加入鉬銻抗試劑 5 mL,搖勻，放置0.5 h后，用700 nm波長比色，以 空白液的吸收值為0，讀出待測液的吸收值（A ）。結(jié)果計(jì)算：土壤

16、中有效磷（ P ）含量（mg/kg ） =.，.】1式中：p-從工作曲線上查得 P的質(zhì)量濃度（ppm ） V-顯色時定容體積（ml ）;ts 為分取倍數(shù)（即浸提液總體積與顯色對吸取浸提液體積之比）；m 風(fēng)干土質(zhì)量（g ）; k 將風(fēng)干土換算成烘干土質(zhì)量的系數(shù)；-310 將卩g換算成mg ; 1000 換算成每kg含P量。酸性土壤速效磷的測定方法A 0.03 mol L-1NH4F 0.025mol L-1HCl方法原理：NH4F HCl法主要提取酸溶性磷和吸附磷，包括大部分磷酸鈣和一部分磷酸鋁和磷酸鐵。 因?yàn)樵谒嵝匀芤褐蟹x子能與三價(jià)鋁離子和鐵離子形成絡(luò)合物，促使磷酸鋁和磷酸鐵的溶 解：3NH

17、4F +3HF+AIP0 4宀 H3PO4+（ NH 4） 3AIF 63NH4F +3HF+FePO4 H3PO4+（NH4）3FeF6溶液中磷與鉬酸銨作用生成磷鉬雜多酸，在一定酸度睛被Sn CI2還原成磷鉬藍(lán)，藍(lán)色深淺與磷的濃度成正比。主要儀器：分光光度計(jì)試劑:1、 0.5mol L-1鹽酸溶液。20.2mL濃鹽酸用蒸餾水稀釋至 500mL。2、 1mol L-1氟化銨溶液。溶解 NH4F37g于水中，稀釋至1L,貯存在塑料瓶中。3、 浸提液。分別吸取1.0mol L-1NH4F溶液15mL和0.5mol L;1鹽酸溶液25mL，加入到-1-1460mL 蒸餾水中，此即 0.03mol L

18、 NH4F0.025mol L HCl 溶液。4、鉬酸銨試劑。溶解鉬酸銨（NH4）6MoO24 4H2O15g于350mL蒸餾水中，徐徐加入10mol L-1HCl350mL，并攪動，冷卻后，加水稀釋至1L,貯于棕色瓶中。5、 25g L-1氯化亞錫甘油溶液。溶解SnCl? 2H2O 2.5g于10mL濃鹽酸中，待 SnCI2全部溶解溶液透明后，再加化學(xué)純甘油90mL，混勻，貯存于棕色瓶中）。6、 50用mL-1磷（P）標(biāo)準(zhǔn)溶液參照土壤全磷測定方法一。吸取50馮mL-1磷溶液50mL于250mL容量瓶中，加水稀釋定容，即得10g mL-1磷（P）標(biāo)準(zhǔn)溶液。操作步驟：1、 稱1.000g 土樣，

19、放入20mL度管中，從滴定管中加入浸提液7mL。試管加塞后，搖動1min，用無磷干濾紙過濾。如果濾液不清，可將濾液倒回濾紙上再過濾，吸取濾液2mL ,加蒸餾水6mL和鉬酸銨試劑 2mL ,混勻后，加氯化亞錫甘油溶液1滴，再混勻。在 515min內(nèi)，在分光光度計(jì)上用700nm波長進(jìn)行比色。2、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：分別準(zhǔn)確吸取 10g mL-1磷（P）標(biāo)準(zhǔn)溶液2.5、5.0、10.0、15.0、20.0 和25.0mL，放入 50mL容量瓶中，加水至刻度，配成 0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 g mL-1 磷（P）系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別吸取系列標(biāo)準(zhǔn)溶液各2mL，加水6mL和鉬試劑2mL，再

20、加1滴氯化亞錫甘油溶液進(jìn)行顯色，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果計(jì)算!: 10 7土壤速效磷（P）含量（mgkg-1） =3 1000=亍35m漢2匯103式中：p從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得磷的質(zhì)量濃度（卩 g mL-1）;m風(fēng)干土質(zhì)量（g）;10顯色時定容體積（mL ）;7 浸提劑的體積（mL ）;2 吸取濾液的體積（mL ）;103將馮換算成的mg;1000換算成每kg含磷量。土壤全磷測定法（NaOH熔融一鉬綈抗比色法）測定原理土壤樣品與氫氧化鈉熔融，使土壤中含磷礦物及有機(jī)磷化合物全部轉(zhuǎn)化為可溶性的正磷酸鹽，用水和稀硫酸溶解熔塊，在規(guī)定條件下樣品溶液與鋁銻抗顯色劑反應(yīng)，生成磷鉑藍(lán)， 用分光光度法定量測定。3 儀器

21、設(shè)備土壤篩：孔徑1mm和0.149mm,分析天平：感量為O.OOOIg，鎳（或銀）坩堝：容量30mL , 高溫電爐，分光光度計(jì)，容量瓶（ 5 0 、 1 0 0、1 0 0 0 mL ），移液管（ 5 , 1 0 , 1 5 , 2 0 mL）漏牛（直徑7 c m）,燒杯（1 5 0 , 1 0 0 0 mL ）,瑪瑙研缽試劑-1氫氧化鈉，無水乙醇，100gL-碳酸鈉溶液：10g無水碳酸鈉溶于水后，稀釋至1 0 0mL ， 搖勻 ;-150mL -L-硫酸溶液：吸取5mL濃硫酸緩緩加人 9 0 m I水中，冷卻后加水至1 0 0 mL3 m o l / L 硫酸溶液 ：量取 1 6 8 m L

22、 濃硫酸緩緩加入到盛有 8 0 0 m L 左右水的大燒杯 中, 不斷攪拌, 冷卻后, 再加水至 1 0 0 0mL;二硝基酚指劑：稱取 0 . 2g2, 6 一二 硝 4 酚溶于 1 0 0 mL 水中 ;5g/L 酒石酸銻鉀溶液：稱取化學(xué)純酒石酸銻鉀 0.5g 溶于 100mL 水中； 硫酸鑰銻貯備液：量取 1 2 6 m L 濃硫酸, 緩緩加入到 4 0 0 m L 水中, 不斷攪拌, 冷卻 另稱取經(jīng)磨細(xì)的鉬酸銨 1 0 g溶于溫度約6 0C 3 0 0 m L水中，冷卻，然后將硫酸溶液緩 緩倒入鉬酸銨溶液中。 再加入 5g/L 酒石酸銻鉀溶液 100mL 。冷卻后,加水稀釋至 1000

23、mL ,搖勻,貯于棕色試劑瓶中,此貯備酸含鉬酸銨 1%,硫酸 2.25moI/L 。 鉬銻抗顯色劑：稱取 I . 5 g 抗壞血酸 （ 左旋, 旋光度 +2 1- 2 2 ） 溶干 1 0 0 m L 鉬銻貯 備液中。此溶液有效期不長 . 宜用時現(xiàn)配。磷標(biāo)準(zhǔn)貯備液：準(zhǔn)確稱取經(jīng)1 0 5 C下烘干2 n的磷酸 二氫鉀（優(yōu)級純）0 .4 3 9 0 g ,用水 溶解后， 加入 5 m L 濃硫酸， 然后加水定容至 1 0 0 0 m L 。 該溶液含磷 1 0 0 m g / L . 放入冰箱可供長期使用 ;5 m g / L 磷標(biāo)準(zhǔn)溶液 ： 吸取 5 m L 磷貯備液， 放入 1 0 0 m L

24、 容量瓶中， 加水定容。 該溶 液用時現(xiàn)配。無磷定性濾紙。土壤樣品制備：取通過 1 m m 孔徑篩的風(fēng)干土樣在牛皮紙上鋪成薄層， 劃分成許多小方 格。 用小勺在每個方格中提取出等量土樣 （ 總量不少于 2 0 g ） 于瑪瑙研缽中進(jìn)一步研磨， 使其全部通過 0 . 1 4 9 m m 孔徑篩。 混勻后裝入磨口 瓶中備用。操作步驟1 熔樣準(zhǔn)確稱取風(fēng)干樣品 0 . 2 5 g , 精確到 0 . 0 0 0 1 g ， 小心放入鎳 （ 或銀 ）坩堝 底部， 切 勿粘在壁上，加入無水乙醉 3 - - 4 滴， 潤濕樣品， 在樣品上平鋪 2g 氫氧化鈉。 將坩堝 （ 處理大批樣品時， 暫放入大干燥器中

25、以防吸潮 ） 放入高溫電爐， 升溫。 當(dāng)溫度升至 4 0 0 C左右時， 切斷電源， 暫停1 5 m i n。然后繼續(xù)升溫至7 2 0 C,并保持1 5 m i n , 取出冷卻。 加入約8 0C的水1 0 m L ,待熔塊溶解后， 將溶液無損失地轉(zhuǎn)入 1 0 0 m L容 量瓶內(nèi), 同時用 3 moI / L 硫酸溶液 1 0 m L 和水多次洗柑渦, 洗滌液也一并移入該容量 瓶。 冷卻, 定容。 用無磷定性濾紙過濾或離心澄清。 同時做空白試驗(yàn)。2 繪制校準(zhǔn)曲線分別吸取5 m g / L磷標(biāo)準(zhǔn)溶液0,2,4,6,8 , 1 0 m L于5 0 m L容量瓶中，同時加入與顯色測定所用的樣品溶液

26、等體積的空白溶液及二硝基酚指示劑2 3滴。并用100g/L碳酸鈉溶液或5 %硫酸溶液調(diào)節(jié)溶液至剛呈微黃色。準(zhǔn)確加入鉬銻杭顯色劑 5 m L，搖勻，加水定容，即得含磷量分別為 0.0,0.2,0. 4,0 .8, 1.0 m g / L的標(biāo)準(zhǔn)溶液系列。 搖勻，于 1 5 C以上溫度放置3 0 m i n后，在波長7 0 0 n m處，測定其吸光度。 在方格坐標(biāo)紙上 以吸光度為縱坐標(biāo)，磷濃度（mg / L ）為橫坐標(biāo)， 繪制校準(zhǔn)曲線3樣品溶液中磷的定量3 . 1顯色吸取待測樣品溶液 2 1 0 mL （含磷0 . 0 4 -1 . 0 ug ）于5 0 m L容量瓶中， 用水稀釋 至總體積約3 /

27、 5處。加入二硝基酚指示劑 2 - - 3滴，并用100g -L1碳酸鈉溶液或5 %硫酸 溶液調(diào)節(jié)溶液至剛呈微黃色。準(zhǔn)確加入 5mL鉬銻抗顯色劑，搖勻，加水定容。在室溫 15C以上條件下，放置 30min。3.2比色顯色的樣品溶液在分光光度計(jì)上，用7 0 0 n m, I c m光徑比色皿，以空白試驗(yàn)為參比液調(diào)節(jié)儀器零點(diǎn)，進(jìn)行比色測定， 讀取吸光度 從校準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)的含磷量。分析結(jié)果的表述lot土壤全磷量的百分?jǐn)?shù)（按烘干土計(jì)算），由下式給出CX式中:C 從校準(zhǔn)曲線上查得待測樣品溶液中磷的含量，mg / L ;m-稱樣量,g ;V1 -樣品熔融后的定容體積，m L ;V2 顯色時溶液定容的體

28、積，mL ;V3 -從熔樣定容后分取的體積，mL5-410 -將m g /L濃度單位換算為百分含量的換算因數(shù)；一將風(fēng)干土變換為烘干土的轉(zhuǎn)換因數(shù);H 風(fēng)干土中水分含量百分?jǐn)?shù)。用兩平行測定的結(jié)果的算術(shù)平均值表示，小數(shù)點(diǎn)后保留三位。允許差平行測定結(jié)果的絕對相差，不得超過0 . 005%水溶性有機(jī)質(zhì)主要儀器：離心機(jī)，回流裝置主要試劑：N K 20207溶液，H2SO4-Ag 2SO4,硫酸亞鐵銨溶液測定步驟：稱取20 g （精確至0.0001）經(jīng)去除細(xì)根的新鮮土樣于 100 mL離心管內(nèi)，加入 20 mL蒸餾 水，攪拌均勻，20 C下浸提30 min，經(jīng)離心機(jī) 3000 rpm離心5 min，上清液經(jīng)

29、 0.45 艸過 濾，備用。取 5 mL濾液，加入 5 mL 0.5 N K 2。2。7溶液和15 mL H 2SO4-Ag 2SO4溶液，混 勻后在175C下回流冷凝2 h,最后用標(biāo)定的硫酸亞鐵銨溶液來滴定反應(yīng)液，同時做空白對 照，最后用空白消耗的硫酸亞鐵銨體積與樣品消耗的硫酸亞鐵銨體積的差來計(jì)算提取態(tài)有 機(jī)質(zhì)的含量?？傆袡C(jī)質(zhì)主要儀器： 坩堝,馬弗爐,烘箱 測定步驟：在已知重量的瓷坩堝（G）中準(zhǔn)確稱取5.0000 g 土樣，放入105 C烘箱烘至恒重，稱重后（值記為GJ放入馬弗爐550C加溫6 h,冷卻稱重（值記為 G2）,測得總有機(jī)質(zhì)（即燒失 量）為（G2 - GJ /（ G!G）。燒失量

30、常常將土壤中碳酸鹽等物質(zhì)的損失也計(jì)算在內(nèi)，因此燒 失量的值往往稍大于土壤中實(shí)際有機(jī)質(zhì)的含量。速效鉀試劑和材料：乙酸銨溶液, c（ CH3COONH 4） =1.0mol/L ：稱取 77.08g 乙酸銨溶于近 1L 水中,用稀乙酸 或氨水（1 + 1） （ NH 3 H2O）調(diào)節(jié)pH為7.0.用水稀釋至1L。該溶液不宜久放。鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液，c （ K） =100ug/mL :稱取經(jīng)110C烘2h的氯化鉀0.1907g溶于乙酸銨溶液 中,并用該溶液定容至 1L。儀器設(shè)備:往復(fù)式震蕩機(jī),火焰光度計(jì)操作步驟:稱取通過1mm孔徑篩的風(fēng)干土試樣 5g （精確至0.01g）于200mL塑料瓶（或100mL三角

31、 瓶）中，加入50.0mL乙酸銨溶液（土液比為 1 : 10）。蓋緊瓶塞，在 20C 25C下， 150r/min 180r/min震蕩30min，干過濾。濾液直接在火焰光度計(jì)上測定。同時做空白試 驗(yàn)。標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:分別吸取鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液體積（ mL）: 0.00、3.00、6.00、9.00、12.00、15, 00 于 50mL 容量瓶 中,用乙酸銨溶液定容,即為濃度（ug/mL ）0、6、12、18、24、30 的鉀標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。以鉀濃度為 0 的溶液調(diào)節(jié)儀器零點(diǎn),用火焰光度計(jì)測定,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或求回歸方程。結(jié)果計(jì)算:土壤速效鉀含量以鉀的質(zhì)量分?jǐn)?shù) w 計(jì)。數(shù)值以 mg/kg 表示w=c 1

32、 V 1/m1式中:C1查標(biāo)準(zhǔn)曲線或求回歸方程而得待測液中鉀的濃度數(shù)值，單位為ug/mLV1浸提液體積的數(shù)值，單位為mLm1試樣的質(zhì)量的數(shù)值，單位為 g 取平行測定結(jié)果的算數(shù)平均值為測定結(jié)果,結(jié)果取整數(shù)。土壤有機(jī)質(zhì)（重鉻酸鉀容量法稀釋熱法）方法原理 在加熱的條件下（利用濃硫酸和重鉻酸鉀迅速混合時所產(chǎn)生的熱） ，用一定濃度的重鉻酸鉀 硫酸溶液氧化土壤有機(jī)質(zhì)（碳） ，剩余的重鉻酸鉀用硫酸亞鐵來滴定，從所消耗的重鉻 酸鉀量，計(jì)算有機(jī)碳的含量。由于產(chǎn)生的熱，溫度較低，對有機(jī)質(zhì)氧化程度較低，只有 77%。儀器天平，滴定管試劑1、 1 mol L-1（1/6K2Cr2O7）溶液。準(zhǔn)確稱取 K262O7 （

33、分析純，105C烘干）49.04g，溶于水 中，稀釋至 1L。2、 0.4 mol L-1（l/6K2Cr2O7）的基準(zhǔn)溶液。準(zhǔn)確稱取K262O7 （分析純）（在130C烘3h）19.6132g于250mL烽杯中，以少量水溶解，將全部洗入1000mL容量瓶中，加入濃 H2SQ約70mL,冷卻后用水定容至刻度，充分搖勻備用其中含硫酸濃度約為2.5 mol L-1（ 1/2H2SO4） 。3、 0.5 molL-1FeSO溶液。稱取 FeSO 7fO140g溶于水中，加入濃 H2SQ15mL,冷卻稀釋 至1L或稱取 Fe（NH） 2（SO4）2 6HzO196.1g溶解于含有 200mL濃H2SQ

34、的800 mL水中，稀釋 至1L。此溶液的準(zhǔn)確濃度以 0.4 mol L-1（1/6K2Cr2O7）的基準(zhǔn)溶液標(biāo)定之。即準(zhǔn)確分別吸取3 份0.4 mol L-1（1/6K2Cr2O7）的基準(zhǔn)溶液各 25mL于150mL三角瓶中，加入鄰啡羅啉指示劑23滴（或加2羧基代二苯胺1215 滴）,然后用0.5 mol L-1FeSQ溶液滴定至終點(diǎn)，并 計(jì)算出的準(zhǔn) FeSQ確濃度。硫酸亞鐵（FeSQ）溶液在空氣中易被氧化，需新鮮配制或以標(biāo) 準(zhǔn)的K2Cr2O7溶液每天標(biāo)定之。4、指示劑4.1 鄰 啡 羅 啉 指 示 劑 ： 稱 取 鄰 啡 羅 啉 （ GB1293-77 ， 分 析 純 ）1.485g） 與

35、 FeSO4 7H2O0.695g，溶于 100mL水中。4.2 2-羧基代二苯胺（O-phenylanthranilicacid，又名鄰苯氨基苯甲酸，C13H11O2N）指示劑：稱取0.25g試劑于小研缽中研細(xì)，然后倒入100mL小燒杯中，加入 0.1 8mol L-1 NaOH溶液12mL ,并用少量水將研缽中殘留的試劑沖洗入100mL小燒杯中，將燒杯放在水浴上加熱使其溶解，冷卻后稀釋定容到250mL,放置澄清或過濾，用其清液。5、Ag 2SO4。硫酸銀（Ag2SO4, HG3-945-76，分析純），研成粉末。6、SiO2。二氧化硅（SiO2, Q/HG22-562-76，分析純），粉末

36、狀。操作步驟準(zhǔn)確稱取0.5000g泥碳稱0.05g （土壤有機(jī)質(zhì)含量低于10g kg-1者稱2.0g 土壤）樣品于500mL的三角瓶中，然后準(zhǔn)確加入1mol L-1（1/6K2Cr2O7）溶液10mL于土壤樣品中，轉(zhuǎn)動瓶子使之混合均勻，然后加濃H2SQ20mL,將三角瓶緩緩轉(zhuǎn)動1min，促使混合以保證試劑與土壤充分作用，并在石棉板上放置約30min，加水稀釋至250mL,加2羧基代二苯胺1215滴，然后用0.5 mol -L-1FeSQ標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定之，其終點(diǎn)為灰綠色?；蚣?4滴鄰啡羅啉指示劑，用0.5 mol L-1FeSQ標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至近終點(diǎn)時溶液顏色由綠變成暗綠色，逐漸加入FeSQ直至生成

37、磚紅色為止。用同樣的方法做空白測定（即不加土樣）。如果K2Cr2O7被還原的量超過75%則須用更少的土壤重做。結(jié)果計(jì)算-1、 c（V - V） 103.0 1.33土壤有機(jī)碳（g kg ） =-1000烘干土重1 1土壤有機(jī)質(zhì)（g kg- ） = 土壤有機(jī)碳（g kg- ）x 1.724式中：1.33為氧化校正系數(shù)；c 為0.5 mol L-1FeSO標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度；V0空白滴定用去 FeSO4體積（mL）;V 樣品滴定用去 FeS04體積（mL ）;3.0 1/4碳原子的摩爾質(zhì)量（g mol-1）；10-3將mL換算為L;土壤中重金屬測定方法土壤有效態(tài)重金屬稱取25 g （精確至0.0001

38、）的風(fēng)干土樣，加入 50 mL 1mol L-1的醋酸銨溶液，于 25C恒溫 搖床中振蕩2 h，轉(zhuǎn)速為180 r min-1,立即用無灰分濾紙過濾。取25 mL過濾液于150 mL三角瓶中，放置在電熱板上加熱，待三角瓶中還剩余少量溶液加入幾滴高氯酸（如溶液有 沉淀，可將三角瓶取下冷卻后繼續(xù)加入幾滴高氯酸），直至溶液呈清亮色。定容至50 mL ,ICP-AES 測定。土壤重金屬總量準(zhǔn)確稱取0.5 g （準(zhǔn)確到0.1 mg ）風(fēng)干土樣于聚四氟乙烯坩堝中，用幾滴水潤濕后，加入10mL HCl （密度=1.19g mL-1）,于電熱板上低溫加熱，蒸發(fā)至約剩5 mL時加入15 mL HNO 3（密度=1

39、.42g mL-1）,繼續(xù)加熱蒸至近粘稠狀，加入10 mL HF （密度=1.15 g mL-1）并繼續(xù)加熱，為了達(dá)到良好的除硅效果應(yīng)經(jīng)常搖動坩堝。最后加入5 mL HClO 4 （密度1.67=g mL-1）,并加熱至白煙冒盡。對于含有機(jī)質(zhì)較多的土樣應(yīng)在加入HCIO4之后加蓋消解，土壤分解物應(yīng)呈白色或淡黃色（含鐵較高的土壤），傾斜坩堝時呈不流動的粘稠狀。用稀酸溶液沖 洗內(nèi)壁及坩堝蓋，溫?zé)崛芙鈿堅(jiān)?，冷卻后，定容至 100 mL或50 mL ,最終體積依待測成分 的含量而定。ICP-AES測定。土壤中酶活性的測定土壤脫氫酶活性的測定一TTC比色法標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：用三苯基四氮唑氯化物還原產(chǎn)物（TP

40、F）配制標(biāo)準(zhǔn)溶液。在光電比色計(jì)上，于波長460 nm處，測定顏色深度。以光密度值為縱坐標(biāo)，以濃度為橫坐標(biāo)繪制成標(biāo)準(zhǔn) 曲線。稱取 20 g 土壤置于 50 mL 三角瓶中，加入 200 mg 碳酸鈣?；靹蚝?，加入 2 mL 1% 三苯基 四氮唑氯化物，加水至最大持水量的90%。于30C,在相對濕度70%下培養(yǎng)24 h。培養(yǎng)結(jié)束后，往反應(yīng)混合物中加入 25 mL甲醇，振蕩5 min，過濾。殘?jiān)蒙倭考状枷礈鞌?shù)次， 直至濾液無色。合并濾液及洗液，并且定容，分光光度計(jì)比色。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求出TPF量，計(jì)算酶活性。土壤過氧化氫酶活性的測定 KMnO 4滴定法稱取5 g新鮮土壤于100 mL三角瓶中。加甲苯

41、 0.5 mL,搖勻，于0-4C冰箱放置半小時。 取出。立刻加入25 mL冰箱儲存的含3% H2O2的水溶液。充分搖勻后，再放置0-4C冰箱半小時。取出立即加入 2 N H2SO4 25 mL,搖勻，過濾。取 1 mL濾液，加1 N H2SO44mL ,用0.1 N KMnO 4滴定。按此操作，用不加土壤的基質(zhì)作對照測定，并根據(jù)對 照和試樣0.1 N KMnO 4的滴定，求出相當(dāng)分解的H2O2的量的0.1 N KMnO 4消耗值。土壤堿性磷酸酶活性測定比色法標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：取 1-5 mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液于25 mL容量瓶中，水稀釋至 5 mL。分別加入1 mL 氯化鈣溶液和 4 mL 0.5 N

42、氫氧化鈉溶液,搖勻,顯色后,在光色比色計(jì)上用藍(lán)色濾光 片(400-420 nm) 測定顏色深度,并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。取 1g 過 2 mm 篩的土壤,至于 50 mL 三角瓶中。加 4 mL 通用緩沖液 (pH=6.5) , 0.25 mL 甲 苯和1 mL 0.115 M p-硝基磷酸鈉溶液。搖勻后，至于37C恒溫箱中1 h。培養(yǎng)結(jié)束后，加入 1 mL 0.5 M 氯化鈣和 4 mL 0.5 M 氫氧化鈉溶液混合 .通過致密濾紙過濾,在比色計(jì)上測 定顏色深度。由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出p-硝基苯酚量，以表示酶的活性。土壤脲酶活性測定苯酚 -次氯酸鈉比色法標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：稱取 0.4717 g硫酸銨溶于水中，

43、稀釋至 1 L,則得1 mL含100卩諺氮的標(biāo) 準(zhǔn)溶液,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線時再稀釋 10 倍使用。分別吸取 0-10 mL 經(jīng)稀釋的標(biāo)準(zhǔn)溶液于 50 mL 的容量瓶中，用蒸餾水加至 10 mL。然后加入4 mL苯酚鈉溶液，立即加入 3 mL次氯酸鈉 溶液，充分搖勻，放置 20 min。顯色后稀釋至刻度，用 1 cm液槽，在比色計(jì)上于 578 nm 處測定顏色深度。以光密度值,對濃度繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。稱取10 g 土壤置于100 mL容量瓶中。用 2 mL甲苯處理15 min。往瓶中加入10 mL10%尿 素溶液和20 mL檸檬酸緩沖液(pH=6.7 )。自習(xí)混合后，將瓶放在 37 C恒溫箱中，放置 3

44、 h。與此同時，進(jìn)行以水代替基質(zhì)，及無土壤的基質(zhì)對照測定。培養(yǎng)結(jié)束后，用熱的 38C的水稀釋至刻度。搖勻，將懸液過濾。吸取1mL濾液于50 mL容量瓶中，用蒸餾水加至 10 mL。然后用標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制的操作加入苯酚鈉等試劑，顯色， 比色,最后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求出銨態(tài)氮量。土壤中微生物量和呼吸作用的測定微生物量C、N 熏蒸-浸提法將經(jīng)去除細(xì)根、雜質(zhì)的新鮮土樣，放入28C恒溫培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng) 7天后。稱取25 g (精確至 0.0001 )尾礦于培養(yǎng)皿中,將培養(yǎng)皿和盛有 50 mL 氯仿和 50 mL 1 M NaOH 的燒杯同時 置入干燥器，用真空泵抽至氯仿沸騰并保持2 min，后密封置于28C恒溫培養(yǎng)箱中熏蒸 24h,熏蒸結(jié)束后，取出氯仿和NaOH，用真空泵反復(fù)抽氣直至土壤無氯仿味后。取出培養(yǎng)皿將尾礦轉(zhuǎn)入250 mL三角瓶中，加入100 mL 0.5 mol L-1 K2SO4在振蕩器中振蕩 0.5 h,轉(zhuǎn)速180 rpm。取出迅速用無灰分濾紙過濾，濾液用于微生物量C、N的測定；同時做未熏蒸處理，取25 g （精確至0.0001 ）相同尾礦，直接加入 100 mL 0.5 mo