hplc驗(yàn)證方案

1、設(shè)備/ 系統(tǒng)名稱： 高效液相色譜儀設(shè)備 / 系統(tǒng)型號： Waters515 泵、 2487 檢測器方案編號： VM-QC-001-01儀器編號： R211-JY-04方案制備姓名：日期：方案審核姓名：日期：姓名：日期：方案審核 / 批準(zhǔn)姓名：日期：姓名：日期：目錄目錄1 . 目 的 42 . 范 圍 43 . 組 織 與 分 工 44. 偏差解決 55. 變更控制 56. 確認(rèn)內(nèi)容 56.1 安裝確認(rèn) . 56.2 運(yùn)行確認(rèn) . 76.3 性能確認(rèn) 87. 驗(yàn) 證 結(jié) 果 匯 總 及 評 價(jià) 128 . 驗(yàn) 證 周 期 139 . 設(shè)備確認(rèn)總結(jié)報(bào)告 1410. 附件 1410.1 偏差記錄 .

2、 1510.2. 偏差和解決報(bào)告 1610.3. 附錄文件清單 1711. 方案完成后審核 / 批準(zhǔn) 181. 目的為確認(rèn) waters515HPLC+waters UV2487高效液相色譜系統(tǒng)測試數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠，性能 穩(wěn)定，特制訂本驗(yàn)證方案，對高效液相色譜儀進(jìn)行驗(yàn)證。驗(yàn)證過程應(yīng)嚴(yán)格按照本方案規(guī) 定的內(nèi)容進(jìn)行。2. 范圍2.1 設(shè)備驗(yàn)證內(nèi)容包括：安裝確認(rèn)、運(yùn)行確認(rèn)、性能確認(rèn)。2.2 該方案適用于本公司實(shí)驗(yàn)室高效液相色譜系統(tǒng)的驗(yàn)證。3. 組織與分工3.1 成員組成：部門姓名職務(wù)3.2 分工（ 1）由 QC負(fù)責(zé)制訂本驗(yàn)證方案。（ 2）由 QA負(fù)責(zé)確認(rèn)本驗(yàn)證方案。（ 3）由 QC負(fù)責(zé)進(jìn)行本驗(yàn)證方案的具

3、體執(zhí)行。（ 4）由 QC負(fù)責(zé)編寫驗(yàn)證報(bào)告。3.3. 職責(zé)劃分：（1）驗(yàn)證小組負(fù)責(zé)本驗(yàn)證方案的設(shè)計(jì)、批準(zhǔn)及實(shí)施。（ 2）QC負(fù)責(zé)按本驗(yàn)證方案對受試儀器進(jìn)行驗(yàn)證， 并及時(shí)報(bào)告驗(yàn)證結(jié)果， 提供驗(yàn)證原始數(shù) 據(jù)。（3）驗(yàn)證小組組長全面協(xié)調(diào)各項(xiàng)驗(yàn)證工作，負(fù)責(zé)報(bào)告驗(yàn)證結(jié)果、審核驗(yàn)證的評價(jià)與建議 以及相應(yīng)的結(jié)論，并在驗(yàn)證過程中提供相關(guān)的技術(shù)支持。4. 偏差解決 偏差指的是任何的測試失敗，偏離規(guī)格，缺失文件，或重大偏離已建立的程序而 導(dǎo)致潛在的 GMP符合性影響。對于一個(gè)偏差事件，偏差必須被審核并評估確定導(dǎo)致偏差 的根源。另外，根據(jù)設(shè)備的狀態(tài)對偏差的影響進(jìn)行分析。如必要，必須進(jìn)行偏差原因的 調(diào)查，將調(diào)查結(jié)果包括

4、在“偏差和解決報(bào)告”中，偏差的解決（如需要采取的糾正措施， 或不采取任何糾正措施但接受該偏差）和說明也包括在“偏差和解決報(bào)告”中，如需要 糾正措施將會(huì)影響部分確認(rèn)，這些部分的確認(rèn)測試將延遲至改正措施完成。偏差還需要 完整的記錄在“偏差記錄”中并在最終總結(jié)報(bào)告中討論。所有的偏差報(bào)告和相關(guān)的文件 必須包括在最終的確認(rèn)文件中。5. 變更控制 所有的變更和修正將根據(jù)相應(yīng)的變更程序進(jìn)行。如果需要進(jìn)行變更，應(yīng)對其作單獨(dú) 評估以決定是否有必要進(jìn)行再確認(rèn)。6. 驗(yàn)證內(nèi)容6.1 安裝確認(rèn)6.1.1 儀器基本情況：設(shè)備名稱液相色譜儀設(shè)備編號R211-JY-04型號Waters515+UV2487生產(chǎn)廠家美國 wa

5、ters 公司操作軟件浙江智達(dá) N2000安裝位置精密儀器室日期：日期：檢查人：復(fù)核人：6.1.2 安裝確認(rèn)所需文件資料 工程部在設(shè)備開箱驗(yàn)收后建立設(shè)備檔案，整理使用手冊等技術(shù)資料，歸檔保存 資料檔案：資料檔案數(shù)量存放處Waters515 泵使用說明書1工程部UV2487使用說明書1工程部AT-330 柱溫箱使用說明書1工程部浙江智達(dá) N2000工作站1質(zhì)量部合格證1工程部檢查人：日期：復(fù)核人：日期：6.1.3 設(shè)備的外觀檢查項(xiàng)目結(jié)果設(shè)備是否無損壞。設(shè)備部件是否無缺失。設(shè)備是否易于拆卸、清洗。設(shè)備安裝、固定是否牢靠。設(shè)備工作環(huán)境是否符合說明書要求。設(shè)備安裝位置是否恰當(dāng)，是否留有足夠的空間。電氣

6、接線連接是否正確，是否有可靠的接地保護(hù)。電纜 是否無損壞。管路連接是否正確，管路和各連接處是否無泄露。檢查人：日期：復(fù)核人：日期：6.1.4 高效液相色譜儀主要部件名稱型號編號液相色譜泵Waters515E04515 795M紫外檢測器Waters uv2487E04487 719M柱溫箱AT-330檢查人：日期：復(fù)核人：日期：6.1.5 備注/ 備件核實(shí)備品 / 備件名稱型號數(shù)量生產(chǎn)廠家色譜柱4.6mm*200mm*0.5m1支大連依利特氘燈LH-36X21個(gè)sonntek針孔濾頭0.45 m*13mm*100個(gè)/ 包8包德國 MEMBRAN公A司小系濾膜0.45 m *50nm*50 張/

7、 盒6盒德國 MEMBRAN公A司檢查人：日期：復(fù)核人：日期：6.1.6. 設(shè)備安裝環(huán)境檢查確認(rèn)設(shè)備的安裝環(huán)境和地點(diǎn)符合儀器說明書要求。檢查結(jié)果在下表記錄。確認(rèn)項(xiàng)目可接受標(biāo)準(zhǔn)確認(rèn)結(jié)果項(xiàng)目結(jié)論設(shè)備安裝檢 查1、電源：電壓： 22010%頻率， 50/60HZ 可靠接地電壓： 頻率： 接地：符合不符合2、環(huán)境檢查 溫度：4 40， 濕度： 20%95%溫度： 濕度：符合 不符合結(jié)論：檢查人：日期：復(fù)核人：日期：6.2 運(yùn)行確認(rèn)6.2.1 按 waters 高效液相色譜儀操作規(guī)程進(jìn)行操作，進(jìn)行控制旋鈕的測試。1. 通電測試：接通儀器電源，將電源開關(guān)按向上，則指示燈亮。2. 斷電測試：關(guān)閉儀器電源，則

8、指示燈滅。3. 泵測試：增加流速時(shí)，顯示屏顯示壓力上升，直至穩(wěn)定，并有廢液流出；降低流速速 時(shí)，顯示屏顯示壓力上升，直至穩(wěn)定。6.2.2 測試結(jié)果，在下表記錄。項(xiàng)目可接受標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果結(jié)論waters 高效液相 色譜儀操作規(guī)程應(yīng)通過審核、批準(zhǔn)符合不符合通電測試接通儀器電源，將電源開關(guān)按向上，則指示燈亮。符合不符合斷電測試關(guān)閉儀器電源，則指示燈滅。符合不符合泵測試增加流速時(shí)，顯示屏顯示壓力上升，直 至穩(wěn)定，并有廢液流出； 降低流速速時(shí)， 顯示屏顯示壓力上升，直至穩(wěn)定。符合不符合結(jié)論：檢查人：日期：復(fù)核人：日期：6.3 性能確認(rèn)6.3.1 驗(yàn)證項(xiàng)目和技術(shù)要求檢定項(xiàng)目可接受標(biāo)準(zhǔn)泵流量設(shè)定值誤差泵流量設(shè)定值

9、誤差 Ss2%；泵流量設(shè)定值誤差流量穩(wěn)定性誤差 SR2%定性測量重復(fù)性（ 5 次定量進(jìn)樣）RSD1.5%. 定量測量重復(fù)性（ 5 次定量進(jìn)樣）RSD1.5%UV檢測器波長準(zhǔn)確性示值誤差 3nm基線漂移.5 X 10 -3（AU/h）基線噪聲-35 X 10 -3 （AU）最小檢測濃度（靜態(tài)）4 X 10 -7g/ml （萘的甲醇溶液）6.3.2 確認(rèn)使用的檢定設(shè)備校正情況，結(jié)果在下表記錄。序號名稱儀器編號規(guī)格校準(zhǔn)日期有效期至1秒表2電子分析天平3容量瓶4溫濕度表結(jié)論：檢查人：日期：復(fù)核人：日期：6.3.3 試劑 D- 鹽酸氨基葡萄糖、重鉻酸鉀、甲醇、硫酸等。6.4 證方法及結(jié)果6.4.1 泵流

10、量設(shè)定值誤差 Ss、流量穩(wěn)定性誤差 SR的檢定。將儀器的輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣器、色譜柱和檢測器連接好，以甲醇為流動(dòng)相，按表1 設(shè)定流量，待流速穩(wěn)定后，在流動(dòng)相排出口用事先清洗稱重過的容量瓶收集流動(dòng)相，同時(shí)用 秒表計(jì)時(shí)，準(zhǔn)確地收集 10-25 分鐘，稱量。按下式計(jì)算 Ss和 SR。表1流量設(shè)定值 ml/min0.51.01.5測量次數(shù)333收集流動(dòng)相時(shí)間 min251510允許誤差Ss3%2%2%SR3%2%2%計(jì)算公式： Ss=(Fm-Fs)/Fs * 100%SR=（Fmax-Fmin）/F*100% 式中 Ss 為流量設(shè)定值誤差（ %） Fm=（W2-W1）/ .t 為流量實(shí)測值（ ml/min

11、 ）； W2 容量瓶 +流動(dòng)相的重量（ g）； W! 容量瓶的重量 （g） ； Fs 流量設(shè)定值（ ml/min ）； 實(shí)驗(yàn)溫度下流動(dòng)相的密度（ g/cm2 ）； t 收集流動(dòng)相的時(shí)間（ min ）；SR 流量穩(wěn)定性誤差（ %）；Fmax 同一組測量中流量最大值（ ml/min ）； Fmin 同一組測量中流量最小值（ ml/min ）； F 同一組測量的算術(shù)平均值（ ml/min ）；泵流量設(shè)定值誤差 Ss、流量穩(wěn)定性誤差 SR的檢定流量設(shè)定值（ ml/min ）0.51.01.5流量實(shí)測值 （ml/min ）平均值流量設(shè)定值誤差S S（%）平均值流量穩(wěn)定性誤差（ %）結(jié)論：檢定人：日期：復(fù)

12、核人：日期：6.4.2 定性、定量測量重復(fù)性的驗(yàn)證 將儀器聯(lián)接好，使之處于正常工作狀態(tài)，用進(jìn)樣閥的定量管注入穩(wěn)定的待分析樣品溶液 （D-鹽酸氨基葡萄糖），記錄保留時(shí)間和峰面積， 連續(xù)測量 5 次，計(jì)算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差 RSD。 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) : 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以流動(dòng)相 A：流動(dòng)相 B （ 90/10 ）為流動(dòng)相（流動(dòng)相 A為磷酸：辛烷磺酸鈉：水 =0.08ml ：0.12g ：99.8ml ；流動(dòng) 相 B 為乙腈），檢測波長為 195nm。測定法: 取D-鹽酸氨基葡萄糖對照品適量 , 精密稱定 , 加蒸餾水溶解并定量稀釋制成每 1ml 中約含 5mg的溶液;搖勻, 取

13、 20l 注入液相色譜儀 ,記錄色譜圖。定性、定量測量重復(fù)性的檢定進(jìn)樣 次 數(shù)保留 時(shí)間峰面積平均峰面積標(biāo)準(zhǔn) 偏差RSD%標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定結(jié)論1RSD1.5%2345結(jié)論：檢定人：日期：復(fù)核人：日期：6.4.3 紫外檢測器性能6.4.3.1 UV 檢測器波長準(zhǔn)確性方法： 已知苯在 233.9nm、238.9nm、243.3nm、248.5nm、254.5nm、260.6nm 有特征吸收，故配置 100mg/ml 苯的乙醇溶液運(yùn)行“ Sample scan”程序。波長誤差均應(yīng)小于 3nm。波長準(zhǔn)確性規(guī)定實(shí)測誤差規(guī)定實(shí)測誤差233.9nm248.5nm238.9nm254.5nm243.3nm260.6n

14、m結(jié)論：日期：日期：檢定人：復(fù)核人：6.4.3.2 基線漂移和基線噪聲的測定將儀器的各部分連接好，紫外檢測器波長調(diào)到 254nm，流動(dòng)相為 100%甲醇，流速為 1.0ml/min ，紙速為 5mm/min，吸收度范圍選擇最靈敏檔，開機(jī)，待基線穩(wěn)定后，記錄基 線 3040 分鐘，計(jì)算基線漂移和噪聲?；€漂移應(yīng) 5 10-3（AU/h）, 基線噪聲應(yīng) 5 10-4(AU) 。基線漂移和基線噪聲的測定指標(biāo)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果結(jié)論基線噪聲（RIU）-4 510-4基線漂移（RIU/h）510-3 (RIU/h )結(jié)論：檢定人： 日期：復(fù)核人： 日期：6.4.3.3 最小檢測濃度檢定在靜態(tài)條件下，用注射器注入

15、 410-7g/ml 萘的甲醇溶液，樣品峰高應(yīng)大于或等于兩倍基 線燥聲峰高，按下式計(jì)算最小檢測濃度。Ct=2HNC/H式中： Ct: 最小檢測濃度（ g/ml）HN:噪聲峰高（記錄儀格數(shù)或?qū)崪y高度 cm）C:樣品濃度（ g/ml ）H: 樣品峰高（記錄儀格數(shù)或?qū)崪y高度 cm）結(jié)論：檢定人：日期：復(fù)核人：日期：7. 驗(yàn)證結(jié)果匯總及評價(jià)驗(yàn)證條件驗(yàn)證項(xiàng)目認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果電壓：環(huán)境溫度： ，輸液系統(tǒng)泵流量設(shè)定值誤差 Ss 2%; 流量穩(wěn)定性誤差 S R2%相對濕度 ；定性測重復(fù)性誤差（ 5 次定量 管進(jìn)樣） RSD1.5%定量測重復(fù)性誤差（ 5 次定量 管進(jìn)樣） RSD1.5%UV檢 測器 性能基線漂移

16、510-3（RIU/h ）; 基線噪聲 5 10-4 （RIU）檢測器波長準(zhǔn)確性 3nm最小檢測濃度 410-8g/ml結(jié)論檢定人：日期：復(fù)核人：日期：8. 驗(yàn)證周期液相色譜儀的驗(yàn)證周期為兩年，當(dāng)更換部件或?qū)x器性能有懷疑時(shí) ,應(yīng)隨時(shí)驗(yàn)證 ,并記錄 驗(yàn)證結(jié)果。9. 設(shè)備驗(yàn)證總結(jié)報(bào)告10. 附件11. 方案完成后審核 / 批準(zhǔn)設(shè)備驗(yàn)證總結(jié)報(bào)告設(shè)備名稱設(shè)備 編號執(zhí)行總結(jié)：確認(rèn)項(xiàng)目測試描述通過 / 失敗有無偏差？安裝確認(rèn)文件核實(shí)通過 失敗有 無主要部件核實(shí)通過 失敗有 無設(shè)備的外觀檢查通過 失敗有 無備件/ 改換部件核實(shí)通過 失敗有 無運(yùn)行及性能SOP的核實(shí)通過 失敗有 無確認(rèn)關(guān)鍵儀表校驗(yàn)的核實(shí)通過 失敗有 無儀器運(yùn)行及性能測試的核 實(shí)。通過 失敗有 無偏差總結(jié)：后續(xù)措施和負(fù)責(zé)人：結(jié)論: PASS 通過FAIL 未通過報(bào)告人日期審核人日期1. 偏差記錄記錄偏差報(bào)告號碼并給出簡短描述。當(dāng)偏差解決后，在偏差結(jié)束欄簽名并注日期偏差編號偏差描述偏差完成人 / 日期2. 偏差和解