血小板聚集的測(cè)定[行業(yè)知識(shí)]

1、 血小板聚集的測(cè)定血小板聚集的測(cè)定 與臨床應(yīng)用與臨床應(yīng)用 檢驗(yàn)科 方媛 1向陽(yáng)課件 再認(rèn)識(shí)血小板再認(rèn)識(shí)血小板 血小板聚集的病理生理血小板聚集的病理生理 血小板聚集的測(cè)定方法血小板聚集的測(cè)定方法 血小板聚集的臨床應(yīng)用血小板聚集的臨床應(yīng)用 血小板聚集與臨床應(yīng)用 2向陽(yáng)課件 血小板血小板 3向陽(yáng)課件 血小板血小板 血小板是骨髓中巨核細(xì)胞質(zhì)脫落下來(lái)的小塊，故無(wú)細(xì)胞核，表面血小板是骨髓中巨核細(xì)胞質(zhì)脫落下來(lái)的小塊，故無(wú)細(xì)胞核，表面 有完整的細(xì)胞膜。有完整的細(xì)胞膜。 血小板體積小，直經(jīng)為血小板體積小，直經(jīng)為24微米，呈雙凸圓盤(pán)狀。微米，呈雙凸圓盤(pán)狀。 易受機(jī)械、化學(xué)刺激，此時(shí)便伸出突起，呈不規(guī)則形。易受機(jī)械

2、、化學(xué)刺激，此時(shí)便伸出突起，呈不規(guī)則形。 4向陽(yáng)課件 在血液中，血小板是最小的有形細(xì)胞。在血液中，血小板是最小的有形細(xì)胞。 血小板在電子顯微鏡下像橄欖形盤(pán)狀也有梭形或血小板在電子顯微鏡下像橄欖形盤(pán)狀也有梭形或 不規(guī)則形，電鏡下血小板的膜表面有糖衣，能吸附不規(guī)則形，電鏡下血小板的膜表面有糖衣，能吸附 血漿蛋白和凝血因子。血漿蛋白和凝血因子。 正常人血液中血小板計(jì)數(shù)為正常人血液中血小板計(jì)數(shù)為(100300)109/L 三分之一的血小板平時(shí)貯存在脾臟中。三分之一的血小板平時(shí)貯存在脾臟中。 5向陽(yáng)課件 血小板形態(tài)血小板形態(tài) 6向陽(yáng)課件 血小板功能血小板功能 血小板的主要功能是凝血和止血作用，修補(bǔ)破損的

3、血管。 血小板和血液中的其他凝血物質(zhì)血小板和血液中的其他凝血物質(zhì)鈣離子和凝血酶等，在破損鈣離子和凝血酶等，在破損 的血管壁上聚集成團(tuán)，形成血栓，堵塞破損的傷口和血管。的血管壁上聚集成團(tuán)，形成血栓，堵塞破損的傷口和血管。 血小板還能釋放腎上腺素，引起血管收縮，促進(jìn)止血。有保護(hù)血 管內(nèi)皮、參與內(nèi)皮修復(fù)、防止動(dòng)脈粥樣硬化的作用。 7向陽(yáng)課件 血液中的血小板數(shù)低于血液中的血小板數(shù)低于10萬(wàn)萬(wàn)/1(100109/L)為血小為血小 板減少，低于板減少，低于5萬(wàn)萬(wàn)/L(50109/L)則有出血危險(xiǎn)。則有出血危險(xiǎn)。 靜息血小板的壽命平均為靜息血小板的壽命平均為7 71414天。天。 循環(huán)血小板的壽命平均是循環(huán)

4、血小板的壽命平均是59天。天。 8向陽(yáng)課件 血小板聚集的病理生理血小板聚集的病理生理 9向陽(yáng)課件 血小板聚集（platelet aggregation,PAgT）是指血小板與血 小板之間的相互粘附，活化的血小板相互作用聚集成團(tuán) 的生理（病理）特征。 10向陽(yáng)課件 血小板的主要功能 凝血和止血，修補(bǔ)破損的血管凝血和止血，修補(bǔ)破損的血管 血小板的表面糖衣能吸附血漿蛋白和凝血因子，血小板顆粒內(nèi)含有與凝血有關(guān)的 物質(zhì)。 血小板顆粒物質(zhì)的釋放，則進(jìn)一步促進(jìn)止血和凝血。當(dāng)血管受損害或破裂時(shí)，血小 板受刺激，由靜止相變?yōu)闄C(jī)能相，迅即發(fā)生變形，表面粘度增大，凝聚成團(tuán)。 在表面第 因子的作用下，使血漿內(nèi)的凝血酶

5、原變?yōu)槟?，后者又催化纖維蛋 白原變成絲狀的纖維蛋白，與血細(xì)胞 共同形成凝血塊止血。 11向陽(yáng)課件 ADP、腎上腺素、凝血酶和膠原等都是血小板的致聚劑。 不同的致聚劑引起的聚集過(guò)程表現(xiàn)有所不同。 激活的血小板中，血小板膜里的花生四烯酸游離出來(lái)，最后在不同酶的作用 下，形成血栓烷A2（TXA2）。血栓烷A2是迄今已知的最強(qiáng)的致聚劑。 內(nèi)皮細(xì)胞釋放的前列腺素I2（PGI2）可通過(guò)激活腺苷酸環(huán)化酶使環(huán)腺苷酸 （cAMP）水平升高，抑制血小板聚集。 血小板聚集是指活化的血小板導(dǎo)致粘附的血小板之間聚集成團(tuán)的 特性。 血小板聚集功能主要與血小板膜GPba、b、血漿纖維蛋 白原及細(xì)胞外鈣離子等有關(guān)。 12

6、向陽(yáng)課件 動(dòng)脈粥樣硬化 冠狀動(dòng)脈疾病，CAD和急性心肌梗死 腦血管疾病和中風(fēng) （腦血管意外） 周圍動(dòng)脈閉塞性疾病 （PAOD） 糖尿病 導(dǎo)致血小板聚導(dǎo)致血小板聚 集的病理因素集的病理因素 13向陽(yáng)課件 血小板在執(zhí)行生理性止血的同時(shí)，也在病理血小板在執(zhí)行生理性止血的同時(shí)，也在病理 性血栓形成過(guò)程中起重作用。性血栓形成過(guò)程中起重作用。 血小板功能檢測(cè)對(duì)于臨床相關(guān)疾病的診斷和血小板功能檢測(cè)對(duì)于臨床相關(guān)疾病的診斷和 抗血小板藥物的篩選及相關(guān)研究有著重要的抗血小板藥物的篩選及相關(guān)研究有著重要的 意義。意義。 14向陽(yáng)課件 血小板聚集的測(cè)定方法血小板聚集的測(cè)定方法 15向陽(yáng)課件 血小板聚集-比濁法 在富含

7、血小板的血漿（PRP）或全血（WB）中，加入致聚劑（亦 稱誘導(dǎo)劑）連續(xù)攪拌能誘發(fā)血小板聚集。 快速，經(jīng)濟(jì)，操作簡(jiǎn)單，高度敏感的特性，應(yīng)用廣泛。 16向陽(yáng)課件 血小板聚集-誘導(dǎo)劑 二磷酸腺苷（ADP） 膠原（COLL） 花生四烯酸（AA） 瑞斯托霉素（RIS） 腎上腺素（Ad） 17向陽(yáng)課件 測(cè)定血小板聚集的方法 18向陽(yáng)課件 血小板聚集的測(cè)定 1.樣品制備 （1）抗凝劑采用3.28%的枸櫞酸鈉，抽血量與抗凝劑應(yīng)為9：1。 （2）PRP（富血小板血漿）制備：抗凝血800轉(zhuǎn)/分，10min。 （3）PPP（貧血小板血漿）制備：將抗凝管第二次離心，3000轉(zhuǎn)/min，10min。 2.光路矯正 加3

8、00 l蒸餾水于測(cè)試杯中，逐各檢查測(cè)試孔光路，比色結(jié)果為0.1710.178為正常 19向陽(yáng)課件 3.測(cè)試步驟： （1）加PPP 250 l于測(cè)試杯中，放預(yù)熱孔中預(yù)熱備用。 （2）加PRP 2250 l于另一測(cè)試杯中（杯內(nèi)預(yù)先放入攪拌珠一粒），放預(yù)熱孔中預(yù)熱備用。 （3）用微量進(jìn)樣器吸取25l AA、ADP聚集劑備用。 （4）將盛有PPP血漿的測(cè)試杯插測(cè)試孔中。 （5）按鍵，測(cè)試孔對(duì)應(yīng)綠燈亮，表明已調(diào)好基準(zhǔn)點(diǎn)。 （6）將PPP測(cè)試杯取出，將PRP測(cè)試杯插到底，將預(yù)先吸好試劑的微量進(jìn)樣器沿管角插 到底，迅速注入試劑，即刻按“TEST”鍵，儀器自動(dòng)完成測(cè)試 （7） 完畢后顯示屏顯示當(dāng)時(shí)的血小板聚集

9、率。 20向陽(yáng)課件 抑制血小板聚集的藥物： 制花生四烯酸代謝的藥物 磷酯酶A2抑制劑 ：阿托品、 氫化可的松 環(huán)氧化酶抑制劑 ：阿司匹林、吲哚美辛、保泰松 酸二酯酶抑制劑：西洛他唑雙嘧達(dá)莫、茶堿 ADP受體拮抗劑： 氯吡格雷、噻氯匹定、腺苷 腎上腺素受體拮抗劑：酚妥拉明、普萘洛爾 血酶拮抗劑：肝素 阿昔單抗、潘生丁、消炎痛、維生素E、維生素B6、氨茶堿、血管擴(kuò)張劑(硝普鈉、硝酸甘油、 亞硝酸鈉)、心得安、速尿、利尿酸、氨丙嗪、非那根、苯海拉明、安妥明、青霉素、羧芐青 霉素、呋喃坦丁、蝮蛇類降纖藥（Svate）、丹參、川芎、赤芍、紅花、當(dāng)歸等。 提高血小板聚集的藥物： 邁格爾（注射用人重組白細(xì)胞

10、介素-11）、利可君、強(qiáng)的松、糖皮質(zhì)激素、甲潑尼龍片仙鶴草、 紫珠草、白芨。 藥物影響 21向陽(yáng)課件 采血注意事項(xiàng) 總原則采血要順利，不可反復(fù)穿刺。 標(biāo)本從采集到操作完成在3小時(shí)內(nèi)完成，放置過(guò)久降低血小板的 聚集強(qiáng)度和速度。 用凝血藍(lán)帽的抗凝管采血4毫升分兩管，立即輕輕顛倒混勻至少3- 5次。 用3.2%的枸櫞酸鈉按和血液1：9混合。 22向陽(yáng)課件 采血注意事項(xiàng) 飲食，采血前須空腹或12小時(shí)內(nèi)未進(jìn)高脂食物。 煙酒，采血前12小時(shí)內(nèi)禁用煙酒。 藥物，一周內(nèi)不用阿司匹林類藥物。 三天內(nèi)不用影響血小板功能的藥物，如潘生丁、消炎痛、維生素E、維生素B6、氨茶堿、 血管擴(kuò)張劑(硝普鈉、硝酸甘油、亞硝酸鈉

11、)、心得安、速尿、利尿酸、氨丙嗪、非那根、 苯海拉明、安妥明、青霉素、羧芐青霉素、呋喃坦丁、蝮蛇類降纖藥（Svate）、丹參、 川芎、赤芍、紅花、當(dāng)歸等活血化瘀中藥等。 采血前需處于安靜狀態(tài),運(yùn)動(dòng)可使血小板激活。 注意年齡、經(jīng)期、妊娠期等生理因素的影響。月經(jīng)和妊娠，雌激素對(duì)聚集和釋放功能 有影響。 23向陽(yáng)課件 聚集性增高：糖尿病、高血壓、冠心病、急性心肌梗塞、高脂 蛋白血癥等。 缺血性腦血管疾?。X卒中）。 手術(shù)后、靜脈注射葡萄糖后、高脂飲食及吸煙后。 多發(fā)性硬化癥、靜脈血栓形成。 24向陽(yáng)課件 聚集性減低：見(jiàn)于血小板無(wú)力癥，輕型血小板病；膠原 無(wú)效性血小板?。z原誘導(dǎo)聚集消失）；巨大血小板

12、綜 合征（瑞斯托霉素誘導(dǎo)聚集消失，其他誘導(dǎo)聚集正常） 繼發(fā)性血小板功能障礙性疾?。ㄈ缒蚨景Y、ITP、原發(fā)性 血小板增多癥、真性紅細(xì)胞增多癥） 25向陽(yáng)課件 使用某些抗血小板藥物后（如阿司匹林、潘生丁、保泰 松、消炎痛、右旋糖苷等） 放射性損傷（腎上腺素及膠原誘導(dǎo)聚集消失，ADP誘導(dǎo)聚 集減弱）。 26向陽(yáng)課件 開(kāi)申請(qǐng)單的注意事項(xiàng) 申請(qǐng)單應(yīng)注明疾病的診斷。 如使用抗血小板藥物，應(yīng)注明使用類型，劑量， 如結(jié)果與臨床不符，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系，進(jìn)行重采血， 復(fù)測(cè)，找出原因。 27向陽(yáng)課件 血小板聚集的臨床應(yīng)用血小板聚集的臨床應(yīng)用 28向陽(yáng)課件 可用于人群的健康查體，篩檢出血小板聚集高凝的病人，可與血 脂、血糖

13、和血液黏度等一樣進(jìn)行常規(guī)檢查，臨床醫(yī)生根據(jù)臨床綜 合分析給與降脂、降糖，應(yīng)用抗血小板藥物，（臨床已證明抗血小 板的藥物能明顯的降低冠心病，腦血管疾病，及周圍性動(dòng)脈血栓形成的發(fā)病 率。） 中醫(yī)藥的活血化瘀治療。 常規(guī)檢測(cè) 29向陽(yáng)課件 血小板聚集與相關(guān)疾病 高血壓，糖尿病，腦血管疾病，高血脂，缺血性腦病，腎病綜合 癥，妊娠高血壓等應(yīng)定期檢測(cè)。 術(shù)前檢測(cè)。當(dāng)血小板聚集明顯降低，或服用阿司匹林、氯吡格雷 等藥物時(shí)，若血小板聚集的明顯降低則術(shù)中有出血的風(fēng)險(xiǎn)。 介入治療后的血小板定期檢測(cè)，指導(dǎo)臨床用藥。 30向陽(yáng)課件 在動(dòng)脈硬化、冠心病、腦血栓、高血壓、糖尿病等血栓性疾病 中，血小板聚集率往往會(huì)升高。 急性冠脈綜合征（ACS）。 通過(guò)治療，血小板聚集率降低時(shí)，不但可抑制血栓形成，還會(huì) 使已形成的血栓溶解，因此測(cè)定血小板聚集率可以