植物組織培養(yǎng)技術(shù)考試復(fù)習(xí)題

1、植物組織培養(yǎng)技術(shù) 考試復(fù)習(xí)題 一、填空題1、組織培養(yǎng)的理論依據(jù)是： 植物細(xì)胞的全能性 。2、根據(jù)培養(yǎng)的外植體材料不同，可將植物組織培養(yǎng)分為以下幾 種類型： 愈傷組織培養(yǎng) 、 器官培養(yǎng) 、 胚培養(yǎng) 、 細(xì)胞培養(yǎng) 、 原生質(zhì)體培養(yǎng)、 遺傳轉(zhuǎn)化 。3、植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室一般劃分為洗滌室、 培養(yǎng)基配置室 、 緩沖室 、 無菌接種室 、培養(yǎng)室、觀察室、 馴化室等分室，其中植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室對無菌條件要求最嚴(yán)格的區(qū) 域是 無菌接種室 。4、培養(yǎng)基成分主要包 水分 、 無機(jī)鹽類 、 有 機(jī) 營 養(yǎng) 成 、 植 物 生 長 調(diào) 節(jié) 物 質(zhì) 、 天 然 物 質(zhì) 、 pH 、 凝固劑 。5、目前應(yīng)用最廣泛的組培基

2、本培養(yǎng)基是 MS 培養(yǎng)基 。6、培養(yǎng)基最常用的碳源是 糖類物質(zhì) ，使用濃度在 1%-5%常 用 3 % 。7、培養(yǎng)基中加入活性炭的目的： 減少外植體的褐變8、生長素 / 細(xì)胞分裂素的高低決定著外植體的發(fā)育方向， 其比值 高則有利于 根 的形成； 其比值低則有利于 芽 的形成。9、一個已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)，并形成未分化 的愈傷組織的現(xiàn)象稱為 _脫分化 _10、某些生長調(diào)節(jié)物質(zhì)及抗生素、酶類物質(zhì)遇熱不穩(wěn)定，對其滅 菌時(shí)不能進(jìn)行 （ 高壓蒸汽 ） 滅菌，而要進(jìn)行 過濾方法滅菌 。11、確定花粉發(fā)育時(shí)期最簡捷有效的方法是壓片鏡檢法12、液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基最主要的區(qū)別是： 固體培養(yǎng)基中

3、添 加了 瓊脂粉 ，而液體培養(yǎng)基一般不添加。13、細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的方法有 分批培養(yǎng) 和 連續(xù)培養(yǎng)14、外植體滅菌常用的消毒劑是 酒精 ，使用濃度一般為 7075 。15、具有防止褐變作用的維生素是抗壞血酸（維生素 c） 。16、常用防止褐變的試劑有有機(jī)酸 、硫代硫酸鈉。17、組培中按照污染的對象分，常見的污染類型有細(xì)菌性污染 、 真菌性污染 。18、在使用超凈工作臺進(jìn)行無菌操作前， 應(yīng)先將借種器械放進(jìn)超 凈工作臺，并打開 紫外線燈和風(fēng)機(jī)組工作 進(jìn)行消毒 20 分 鐘左右。19、配制培養(yǎng)基調(diào)節(jié) pH值時(shí)常用 氫氧化鈉溶液 和 稀鹽 酸溶液 。20、某溶液在使用前已配制成 100 倍的母液，在使用時(shí)

4、，若需要 配制 1/2 L 的培養(yǎng)基，則需要吸取母液的量是 5ml 。21、原球莖 是蘭科植物特有的一種快繁方式。22、組織培養(yǎng)植株的再生途徑有兩條，分別是：器官發(fā)生 途徑 和 胚胎發(fā)生途徑 。23、一般進(jìn)行外植體培養(yǎng)時(shí)，須誘導(dǎo)形成新的分生組織，即形成 愈傷組織 。24、在使用完移液槍后，應(yīng)注意調(diào)回至該移液槍最大量程。25、植物組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù)的基本過程包括材料的初代培養(yǎng) 、 繼代培養(yǎng) 、 生根培養(yǎng) 、 馴化培養(yǎng) 。26、接種室每隔三個月會定期進(jìn)行熏蒸消毒，一般使用甲醛和 高錳酸鉀。二、選擇題：1、20 世紀(jì) 30年代，植物組織培養(yǎng)領(lǐng)域有兩大發(fā)現(xiàn)， 一是（ B ） 族維生素對植物生長的重要

5、性，二是生長調(diào)節(jié)物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)。A、AB 、 BC、 CD、 E2、（ B ）下列哪種不是原生質(zhì)體分離所用的酶 。A 、纖維素酶B、淀粉酶 C 、果膠酶D、半纖維素酶3、（ D ） 下列哪種在 MS培養(yǎng)基中不起促進(jìn)生長作用 。A 、氨基酸 B、肌醇 C、維生素D、瓊脂4、下列激素，（ D ）是天然的A、IBA B 、 NAA C 、 BA D 、 ZT5、下列不能作為植物組織培養(yǎng)的材料是：（D ）A、秋海棠的葉 B 、馬鈴薯的塊莖 C 、成熟的花粉D、木質(zhì)部中的導(dǎo)管細(xì)胞6、離體培養(yǎng)中，對溫度的調(diào)控比對光照更為重要，培養(yǎng)室一般所用 的溫度是（ C ）A、15-35 B 、23-32 C、 252D、

6、20-237、外植體表面滅菌可選擇的表面滅菌劑的種類較多，但滅菌效果最 好的是（ B ）A、2次氯酸鈉B 、 0.1 氯化汞C、 70酒精D、吐溫 808、生根培養(yǎng)一般可采用 12或者 14MS培養(yǎng)基，并加入適量的 （ D ）。A 、 2.4-DB 、赤霉素C 、細(xì)胞分裂素D、生長素9、影響培養(yǎng)基凝固程度因素有（D ）A、瓊脂的質(zhì)量好壞 B 、高壓滅菌的時(shí)間與溫度C、培養(yǎng)基的 PHD 、以上都是10、下列不屬于大量元素的鹽是（ C ）A、 NH4NO3B 、 KNO3C 、 ZnSO4.7H2OD、 MgSO4.7H2O11、接種操作中一方面要建立（A ）的概念，對可能有菌的地方進(jìn)行嚴(yán)格消毒處

7、理，另一方面操作時(shí)干凈利落，不可拖泥帶水。A 、無菌B 、 污染C、科學(xué)D 、滅菌12、在組織培養(yǎng)中，月季、菊花是通過（A ）方式快繁；蝴蝶蘭是通過（ ）方式快繁的。A、 無菌短技型，原球莖發(fā)生型B、原球莖發(fā)生型，無菌短技型C、無菌短技型，器官發(fā)生型D、胚狀體發(fā)生型，原球莖發(fā)生型13、為了誘導(dǎo)芽的形成， 培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素與生長素的濃度 （ A ） A 、比值大B 、 比值小C、 比值相等D 、 比值的大小沒有關(guān)系14、為了誘導(dǎo)根的形成， 培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素與生長素濃度 （ B ） A 、比值大B 、 比值小C、 比值相等D 、 比值的大小沒有關(guān)系15、植物病毒病害防治上，植物病毒脫毒技術(shù)得到

8、了廣泛的應(yīng)用，下 列脫毒技術(shù)效果最好、應(yīng)用最廣泛的是（ C ）。A、熱處理脫毒法B、莖尖培養(yǎng)脫毒法C、熱處理與莖尖培養(yǎng)相結(jié)合的脫毒法D、基因工程技術(shù)脫毒法16、熱處理法中，最主要的影響因素是（ D ）。A、溫度B 、時(shí)間C、濕度D 、溫度和時(shí)間17、根據(jù)特異性的抗原抗體反應(yīng)可檢測植物病毒的存在， 這種檢測方 法是（ C）。A、直接鑒定法 B 、電子顯微鏡鑒定法C、血清學(xué)鑒定法 D 、分子生物學(xué)鑒定法18、( B ) 大多數(shù)植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)基最適 pH 為。A 、5.0-7.0B、5.0-6.0 C 、3.0-4.0 D 、7.0-8.019有一種植物經(jīng)初代培養(yǎng)得到株無菌苗， 以后按每天繼代增

9、殖一次，每次增殖倍數(shù)為倍，一年后繁殖苗有 CA 、 3 410株 B 、4 3 12株C 、 3 10株 D 、 4 12株20、( D ) 下列哪種在 MS培養(yǎng)基中不起促進(jìn)生長作用 _D。A 、氨基酸 B 、肌醇C、維生素D、瓊脂21、植物病毒病害防治上，植物病毒脫毒技術(shù)得到了廣泛的應(yīng)用，下 列脫毒技術(shù)效果最好、應(yīng)用最廣泛的是( C )。A、熱處理脫毒法B、莖尖培養(yǎng)脫毒法C、熱處理與莖尖培養(yǎng)相結(jié)合的脫毒法D、基因工程技術(shù)脫毒法22、下列物質(zhì)不能用高溫蒸汽滅菌的是( C )A、鑷子B 、濾紙 C 、抗生素類 D 、6-BA23、( A ) 下列那種不是無性繁殖的器官 。A、種子 B 、枝條 C

10、 、塊莖 D 、塊根22、( B ) 植物離體保存的主要步驟是 。 離體培養(yǎng)物的保存 離體培養(yǎng)與祛除病原物 種質(zhì)離體收集 遺傳穩(wěn)定性鑒定A、B、C、D、24、( C ) 原生質(zhì)體純化步驟大致有如下幾步 。 將收集到的濾液離心， 轉(zhuǎn)速以將原生質(zhì)體沉淀而碎片等仍懸浮 在上清液中為準(zhǔn)，一般以 500r min 離心 15min。用吸管謹(jǐn)慎地吸去 上清液。 將離心下來的原生質(zhì)體重新懸浮在洗液中 ( 除不含酶外，其他 成分和酶液相同 ) ，再次離心，去上清液，如此重復(fù)三次。 將原生質(zhì)體混合液經(jīng)篩孔大小為 40 100um的濾網(wǎng)過濾， 以除 去未消化的細(xì)胞團(tuán)塊和篩管、導(dǎo)管等雜質(zhì)，收集濾液。 用培養(yǎng)基清洗一

11、次， 最后用培養(yǎng)基將原生質(zhì)調(diào)到一定密度進(jìn)行 培養(yǎng)。一般原生質(zhì)體的培養(yǎng)密度為 104106 ml。A、 B 、 C 、 D 、25、( D ) 下列有關(guān)細(xì)胞全能性的含義，正確的是 。A、每個生物體內(nèi)的所有細(xì)胞都具有相同的功能B、生物體內(nèi)的任何一個細(xì)胞可以完成該個體的全部功能C、生物體的每一個活細(xì)胞都具有發(fā)育成完整個體的潛能D、生物體的每個細(xì)胞都經(jīng)過產(chǎn)生、分裂、分化、生長、衰老、 死亡的全過程26、( D ) 下列不屬于活性炭在組織培養(yǎng)中的作用是 。A、吸附有毒物質(zhì)B、減少褐變，防止玻璃化C、創(chuàng)造黑暗環(huán)境，增加培養(yǎng)基的通透性，利于根的生長D、增加培養(yǎng)基中的養(yǎng)分三、名詞解釋1、植物組織培養(yǎng) ：又稱植

12、物離體培養(yǎng)，是在無菌和人工控制的 條件下，利用合適的培養(yǎng)基，完成對植物的器官，組織，細(xì)胞以及原 生質(zhì)體的培養(yǎng)， 使其按人們的意愿生長， 增殖或再生完整植株的一門 生物技術(shù)。2、脫分化 ：是指一個成熟個體恢復(fù)分化狀態(tài)， 失去已分化組織， 形成愈傷組織的過程。3、離體培養(yǎng) ：在植物組織培養(yǎng)中，把植物體的組織或細(xì)胞離體 在一定條件下培養(yǎng)。4、愈傷組織 ：植物培養(yǎng)中，植物細(xì)胞表現(xiàn)其全能性，經(jīng)過脫分 化，形成的一團(tuán)無序生長的薄壁組織。5、細(xì)胞懸浮培養(yǎng) ：是指植物的細(xì)胞和細(xì)胞小聚體在液體培養(yǎng)基 中進(jìn)行培養(yǎng)，使之在體外繁殖，生長，發(fā)育，并在培養(yǎng)過程中保持很 好的分散性的技術(shù)。6、玻璃化現(xiàn)象 ：是試管苗的一種

13、生理失調(diào)癥狀，當(dāng)植物材料進(jìn) 行離體培養(yǎng)時(shí)， 有些組培苗的嫩莖， 葉片往往會出現(xiàn)半透明狀和水漬 狀的現(xiàn)象。7、外植體：進(jìn)行植物組織培養(yǎng)中作為離體培養(yǎng)材料的器官或組 織的片段。在繼代培養(yǎng)時(shí)， 將培養(yǎng)的組織切段移入新的培養(yǎng)基時(shí)，這種切段也稱外植體。8、馴化現(xiàn)象 ：在植物組織培養(yǎng)的早期研究中，發(fā)現(xiàn)一些植物的 組織經(jīng)長期的繼代培養(yǎng)發(fā)生了一些變化， 在前期的繼代培養(yǎng)中需要生 長調(diào)節(jié)物質(zhì)的植物材料， 其后加入少量或不加入生長調(diào)節(jié)物質(zhì)就可以 繼續(xù)生長的現(xiàn)象。四、簡答題：1. 簡述培養(yǎng)基配制的基本過程1）取出母液并按順序排好，并將有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)貯液溶化待用。2）再取出潔凈各種的玻璃器皿如：燒杯，玻璃棒，移液管，移

14、 液槍，量筒放在指定位置。3）取一個大燒杯，倒入三分之一的純水，并依母液所需量按順 序加入，并不斷攪拌。4）再加入蔗糖，瓊脂，并加熱使其完全溶解。5）加入植物生長調(diào)節(jié)劑，用純水定容。6）調(diào)節(jié) pH，用預(yù)先配制好的氫氧化鈉溶液或稀鹽酸溶液進(jìn)行調(diào) 節(jié)。7）將培養(yǎng)基分裝到各培養(yǎng)器皿，并封好瓶口。2. 在植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，造成污染的因素有哪些？ 答：1）培養(yǎng)基和各種使用器具消毒不徹底2）外植體滅菌不徹底，雜菌殘存外植體表面3）超凈工作區(qū)域污染4）操作人為因素帶入5）環(huán)境不潔凈3. 簡述外植體的消毒過程。清水清洗清潔精清洗吸干水分 70酒精清洗 升汞清洗無菌水清洗。4. 簡述緩解和減輕褐變的措施。1）

15、外植體和培養(yǎng)材料進(jìn)行 2040d 的遮光或暗培養(yǎng)，可以減輕 一些種類的褐變現(xiàn)象；2）選擇適宜的培養(yǎng)基，調(diào)節(jié)激素用量，控制溫度和光照，降低 溫度，減少光照；3）選擇年齡適宜的外植體材料進(jìn)行培養(yǎng)；4）在培養(yǎng)基中，加入抗氧化劑和其他抑制劑如抗壞血素，可以 有效地抑制褐變；5）連續(xù)轉(zhuǎn)移，對易褐變的材料可間隔 1224h 的培養(yǎng)后，再轉(zhuǎn) 移到新的培養(yǎng)基上，連續(xù)培養(yǎng)處理 7 10d 后，褐變現(xiàn)象便會得到控 制或大為減輕；6）添加活性炭等吸附劑，這是生產(chǎn)上常用的降低褐變的有效方 法。5. 脫毒苗的鑒定方法有哪些？1）指示植物病毒鑒定法；2）抗血清鑒定法；3）電子顯微鏡鑒定法；4）分子生物學(xué)方法。6. 植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)中單細(xì)胞分離的方法有哪些？1）從培養(yǎng)愈傷