第二章 天然藥物化學成分提取分離鑒定方法1

1、第二章第二章 天然藥物化學成分天然藥物化學成分 提取分離鑒定的方法與技術(shù)提取分離鑒定的方法與技術(shù) 1 2 3 鑒定鑒定 提取提取 分離分離 工業(yè)生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn) 科學研究科學研究 藥品藥品 化妝品化妝品 青蒿素青蒿素 白藜蘆醇白藜蘆醇 內(nèi)內(nèi) 容容 第一節(jié)第一節(jié) 提取方法與技術(shù)提取方法與技術(shù) 第二節(jié)第二節(jié) 分離精制方法與技術(shù)分離精制方法與技術(shù) 第三節(jié)第三節(jié) 結(jié)構(gòu)研究方法與技術(shù)結(jié)構(gòu)研究方法與技術(shù) 4 第一節(jié)第一節(jié) 提取方法與技術(shù)提取方法與技術(shù) 常用的方法有：常用的方法有： 一、溶劑提取法一、溶劑提取法（最常用）（最常用） 二、水蒸氣蒸餾法二、水蒸氣蒸餾法 三、升華法三、升華法 四、超臨界流體萃取法四、

2、超臨界流體萃取法 提?。禾崛。哼x擇選擇適宜的溶劑適宜的溶劑和和適當?shù)姆椒ㄟm當?shù)姆椒?，將，將所要的成所要的?分分盡可能完全地從天然藥物中提取出來，而雜質(zhì)盡盡可能完全地從天然藥物中提取出來，而雜質(zhì)盡 可能少地被提出的過程。可能少地被提出的過程。 5 一、溶劑提取法一、溶劑提取法 （一）定義：（一）定義： 指根據(jù)天然藥物中各化學成分的指根據(jù)天然藥物中各化學成分的溶解性能溶解性能，選，選 擇擇對有效成分溶解度大而對其他成分溶解度小對有效成分溶解度大而對其他成分溶解度小的溶的溶 劑，用適當?shù)姆椒▽⑺杌瘜W成分盡可能完全從藥劑，用適當?shù)姆椒▽⑺杌瘜W成分盡可能完全從藥 材組織中溶解提出的方法。材組織中溶

3、解提出的方法。 在實際工作中應在實際工作中應 用最普遍用最普遍 6 7 溶劑溶劑對對藥材藥材組織細胞不斷作往返的擴散、滲透、組織細胞不斷作往返的擴散、滲透、 溶解，直至藥材組織細胞內(nèi)外溶液中被溶解的溶解，直至藥材組織細胞內(nèi)外溶液中被溶解的化學化學 成分成分的濃度達平衡。的濃度達平衡。 擴散、滲透、擴散、滲透、 溶解溶解 （二）基本原理（二）基本原理 ：“相似相溶相似相溶” 親脂性的成分易溶于非極性的溶劑中，親水親脂性的成分易溶于非極性的溶劑中，親水 性的成分易溶于極性的溶劑中。性的成分易溶于極性的溶劑中。 （三）溶劑的極性（三）溶劑的極性 8 石油醚苯石油醚苯(C6H6)乙醚乙醚(Et2O無水

4、無水)氯仿氯仿(CHCl3) 乙酸乙酯乙酸乙酯(EtOAc)正丁醇正丁醇(n-BuOH)丙酮丙酮(Me2CO) 乙醇乙醇(EtOH) 甲甲 醇醇(MeOH)水水(H2O) 與介電常數(shù)與介電常數(shù)有關(guān)，介電常數(shù)越大，極性越大。有關(guān)，介電常數(shù)越大，極性越大。 極性從低到高的順序依次是：極性從低到高的順序依次是： 9 極性極性 低低 親脂性親脂性 有機溶劑有機溶劑 與水分層的有機溶劑與水分層的有機溶劑? 能與水分層的極性最大的有機溶劑能與水分層的極性最大的有機溶劑? 與水可以以任意比例混溶的有機溶劑與水可以以任意比例混溶的有機溶劑? 極性最大的有機溶劑極性最大的有機溶劑? 極性最小的有機溶劑極性最小的

5、有機溶劑? 1 1、水：、水： 為極性最大的溶劑，適用于提取水溶性成分。為極性最大的溶劑，適用于提取水溶性成分。 如：苷類、生物堿鹽、糖類、蛋白質(zhì)、氨基酸、 鞣質(zhì)、小分子有機酸、有機酸鹽、親水性色素、 無機鹽。其中蛋白質(zhì)不溶于熱水。其中蛋白質(zhì)不溶于熱水。 優(yōu)點：價廉、安全、無毒、對組織穿透力強。優(yōu)點：價廉、安全、無毒、對組織穿透力強。 缺點：缺點：提取液易發(fā)霉提取液易發(fā)霉，蒸發(fā)濃縮耗能大，含，蒸發(fā)濃縮耗能大，含 多糖類原料過濾困難。多糖類原料過濾困難。 10 常見溶劑的適用范圍常見溶劑的適用范圍 2 2、親水性有機溶劑（丙酮、乙醇、甲醇）：、親水性有機溶劑（丙酮、乙醇、甲醇）： 以乙醇最常用。

6、提取范圍較廣以乙醇最常用。提取范圍較廣，除蛋白質(zhì)、 粘液質(zhì)、果膠、淀粉、部分多糖和油脂等外，大 多天然藥物化學成分能在乙醇中溶解。 優(yōu)點：對組織細胞穿透力強，優(yōu)點：對組織細胞穿透力強，提取全面提取全面，毒，毒 性小，易過濾，不霉變，易濃縮回收。性小，易過濾，不霉變，易濃縮回收。 缺點：價高、易燃，缺點：價高、易燃，需回流設(shè)備需回流設(shè)備。 11 3 3、親脂性有機溶劑：、親脂性有機溶劑： 與水不相混溶的與水不相混溶的石油醚、苯、氯仿、乙酸乙酯石油醚、苯、氯仿、乙酸乙酯 等有機溶劑。等有機溶劑。用以提取揮發(fā)油、苷元、蒽醌類、游 離生物堿、黃酮等親脂性成分。 優(yōu)點：優(yōu)點：提取提取專屬性強專屬性強（提

7、出物較純，雜質(zhì)少）（提出物較純，雜質(zhì)少）, , 易回收濃縮。易回收濃縮。 缺點：缺點：價高、易燃、價高、易燃、有毒、穿透性差、有毒、穿透性差、對設(shè)備對設(shè)備 要求高。要求高。 12 （四）溶劑選擇的原則（四）溶劑選擇的原則 13 基本要求：基本要求： 1 1、對所提取成分的溶解度大，對雜質(zhì)的溶解度小；對所提取成分的溶解度大，對雜質(zhì)的溶解度?。?2 2、對目標組分不起化學反應；、對目標組分不起化學反應； 3 3、經(jīng)濟易得，低毒安全，使用方便；、經(jīng)濟易得，低毒安全，使用方便； 4 4、沸點適中，易回收。、沸點適中，易回收。 選擇適當?shù)娜軇┦翘崛〔襟E的關(guān)鍵。主要根據(jù)選擇適當?shù)娜軇┦翘崛〔襟E的關(guān)鍵。主要

8、根據(jù) 溶劑的極性、被分離成分的性質(zhì)、共存的其它成分溶劑的極性、被分離成分的性質(zhì)、共存的其它成分 （雜質(zhì)）的性質(zhì)（雜質(zhì)）的性質(zhì)三個方面。三個方面。 （五）操作方式（五）操作方式 1、浸漬法、浸漬法 2、滲漉法、滲漉法 3、煎煮法、煎煮法 4、回流提取法、回流提取法 5、連續(xù)回流提取法、連續(xù)回流提取法 6、超聲提取法、超聲提取法 14 1、浸漬法：、浸漬法： 將藥材用適當?shù)娜軇┰趯⑺幉挠眠m當?shù)娜軇┰诔鼗驕責幔ǔ鼗驕責幔?0-60） 的情況下浸泡一定時間，以溶出其中成分。的情況下浸泡一定時間，以溶出其中成分。 15 冷浸法：室溫（冷浸法：室溫（15-25） 溫浸法：溫浸法：40-60 多重浸漬法

9、：重復浸提多重浸漬法：重復浸提2-3次次 分類分類 粉碎好的藥材放入提取用的容粉碎好的藥材放入提取用的容 器中，加入溶劑使沒過藥面，器中，加入溶劑使沒過藥面， 浸泡。浸泡。 濾出溶劑，加入新的溶劑繼續(xù)濾出溶劑，加入新的溶劑繼續(xù) 提?。ǘ嘀亟n）。提?。ǘ嘀亟n）。 加入溶劑浸泡加入溶劑浸泡 浸泡后浸泡后 浸漬法浸漬法 17 本法適用于本法適用于有效成分遇熱易破壞有效成分遇熱易破壞以及含大以及含大 量淀粉、樹膠、果膠、粘液質(zhì)等多糖藥物的藥量淀粉、樹膠、果膠、粘液質(zhì)等多糖藥物的藥 材的提取。材的提取。 優(yōu)點：操作方便，簡單易行優(yōu)點：操作方便，簡單易行。 缺點：缺點：浸出效率較低浸出效率較低，故對貴

10、重、有效成，故對貴重、有效成 分含量低、需制成高濃度制劑的藥材的提取不分含量低、需制成高濃度制劑的藥材的提取不 宜采用；宜采用；耗時長，耗時長，溶劑用量大，水提液易發(fā)霉。溶劑用量大，水提液易發(fā)霉。 浸漬法浸漬法 2、滲漉法：、滲漉法： 將藥材粉末裝在滲漉筒滲漉筒中，不斷添加新溶劑， 使其滲透過藥材，自上而下從滲漉筒下部流出浸 出液的一種浸出方法 。 本法適用于本法適用于有效成分遇熱易破壞的藥材有效成分遇熱易破壞的藥材及有及有 效成分含量低的藥材。效成分含量低的藥材。 優(yōu)點：優(yōu)點：提取效率較高提取效率較高，浸出液較澄清。，浸出液較澄清。 缺點：缺點：耗時長，耗時長，溶劑用量大溶劑用量大，操作麻煩

11、。，操作麻煩。 18 滲漉法滲漉法 連續(xù)滲漉裝置連續(xù)滲漉裝置 粉碎粉碎浸潤浸潤裝筒裝筒排氣排氣浸漬浸漬滲漉滲漉收集收集 提取溶劑 粉碎藥材 棉花或紗布 滲漉液 3、煎煮法、煎煮法（熱提取，只能用水做溶劑）：（熱提取，只能用水做溶劑）： 煎煮法是我國最早使用的傳統(tǒng)的浸出方法。所 用容器一般為陶器、砂罐或銅制、搪瓷器皿，不宜不宜 用鐵鍋，用鐵鍋，以免藥液變色。適用于有效成分能溶于水適用于有效成分能溶于水 且不易被水、熱破壞的天然藥物的提取。且不易被水、熱破壞的天然藥物的提取。 優(yōu)點：優(yōu)點： 簡便易行。簡便易行。 缺點：缺點：提出雜質(zhì)多提出雜質(zhì)多；不能用于提取含揮發(fā)油；不能用于提取含揮發(fā)油 成分及遇

12、熱不穩(wěn)定性成分的提?。缓嗵穷愗S富的成分及遇熱不穩(wěn)定性成分的提??；含多糖類豐富的 藥材，因煎液粘稠，難以濾過。藥材，因煎液粘稠，難以濾過。 20 21 煎煮法煎煮法 “加水煮沸，去渣取汁加水煮沸，去渣取汁” 藥材加藥材加 水浸泡水浸泡 加熱加熱 至沸至沸 微沸狀態(tài)微沸狀態(tài) 一定時間一定時間 濾取濾取 煎液煎液 重復重復 1-21-2次次 合并合并 煎液煎液 4、回流提取法：、回流提取法： 用用低沸點、易揮發(fā)低沸點、易揮發(fā)的有機溶劑加熱提取天的有機溶劑加熱提取天 然藥物中有效成分時，需采用回流提取法以減然藥物中有效成分時，需采用回流提取法以減 少溶劑的揮發(fā)損失，提高浸出效率。少溶劑的揮發(fā)損失，提

13、高浸出效率。 22 適用于適用于脂溶性較強脂溶性較強的天然藥物化學成分的的天然藥物化學成分的 提取。提取。 23 回流提取法回流提取法 優(yōu)點：提取效率較高。優(yōu)點：提取效率較高。 缺點：缺點：受熱時間較長受熱時間較長， 不能用于熱不穩(wěn)定性成不能用于熱不穩(wěn)定性成 分的提??；且分的提取；且溶劑消耗溶劑消耗 量仍大量仍大，操作較麻煩。，操作較麻煩。 5、連續(xù)回流提取法：、連續(xù)回流提取法： 為了彌補回流提取法中需要溶劑量大，操為了彌補回流提取法中需要溶劑量大，操 作較煩瑣的不足，可采用連續(xù)提取法，即作較煩瑣的不足，可采用連續(xù)提取法，即用用最最 少量溶劑少量溶劑最大限度地提出有效成分。最大限度地提出有效成

14、分。 適用范圍：適用范圍：脂溶性化合物脂溶性化合物。 裝置：脂肪提取器或稱裝置：脂肪提取器或稱索氏提取器索氏提取器。 24 25 連續(xù)回流連續(xù)回流 (索氏提取索氏提取) 優(yōu)點：優(yōu)點：提取效率最高，提取效率最高， 最節(jié)省溶劑。最節(jié)省溶劑。 缺點：回流時間長缺點：回流時間長 （4-10 h），不能用），不能用 于熱不穩(wěn)定性成分的于熱不穩(wěn)定性成分的 提取。提取。 6、超聲提取法、超聲提取法 原理：利用超聲波的空化作用空化作用 對細胞膜的破壞，有助于有效成分 的溶出與釋放；超聲波使提取液不 斷震蕩，有助于溶質(zhì)擴散；同時超 聲波的熱效應使水溫基本在57， 對原料有水浴作用。 提取速度快、時間短、收率高、

15、提取速度快、時間短、收率高、 無需加熱。無需加熱。 是一種利用超聲波超聲波浸提有效成分的方法。 26 1、溶劑性質(zhì)、溶劑性質(zhì) 2、操作方式（方法）、操作方式（方法） 3、藥材粉碎度、藥材粉碎度 4、溫度、溫度 5、時間、時間 6、其他因素、其他因素 27 （六）影響提取的因素（六）影響提取的因素 選擇合適的溶劑和選擇合適的溶劑和 操作方式是關(guān)鍵！操作方式是關(guān)鍵！ 二、其他提取方法二、其他提取方法 水蒸氣蒸餾法水蒸氣蒸餾法 28 是將含有揮發(fā)性成分的藥材與水共蒸餾，使揮是將含有揮發(fā)性成分的藥材與水共蒸餾，使揮 發(fā)性成分隨水蒸氣一并餾出，經(jīng)冷凝分取揮發(fā)性成發(fā)性成分隨水蒸氣一并餾出，經(jīng)冷凝分取揮發(fā)性

16、成 分的浸提方法。分的浸提方法。 道爾頓分壓定律：道爾頓分壓定律：P = P水 水+P不溶物質(zhì)不溶物質(zhì) P等于外界大氣壓的時候，混合物沸騰。因此等于外界大氣壓的時候，混合物沸騰。因此 在常壓下應用水蒸氣蒸餾，在常壓下應用水蒸氣蒸餾，能在低于能在低于100的情況的情況 下將高沸點組分與水一起蒸出。下將高沸點組分與水一起蒸出。 29 水蒸氣發(fā)生部分水蒸氣發(fā)生部分蒸餾部分蒸餾部分 冷凝部分冷凝部分 接收器接收器 防止液體倒吸防止液體倒吸 和系統(tǒng)堵塞！和系統(tǒng)堵塞！ 進行水蒸氣蒸餾的物質(zhì)必須具備以下三個條件：進行水蒸氣蒸餾的物質(zhì)必須具備以下三個條件： 30 該法適用于具有該法適用于具有揮發(fā)性、能隨水蒸氣

17、揮發(fā)性、能隨水蒸氣 蒸餾而不被破壞蒸餾而不被破壞的中草藥成分的提取。主的中草藥成分的提取。主 要用于要用于揮發(fā)油揮發(fā)油的提取。的提取。 1、不溶或難溶于水；、不溶或難溶于水； 2、共沸下與水不發(fā)生化學反應；、共沸下與水不發(fā)生化學反應； 3、在、在100左右時，必須具有一定的蒸氣壓。左右時，必須具有一定的蒸氣壓。 31 升華法升華法 有些固體物質(zhì)受熱后會直接汽化，遇冷后又凝固有些固體物質(zhì)受熱后會直接汽化，遇冷后又凝固 為原來的固體化合物，該現(xiàn)象稱之為升華。對于具有為原來的固體化合物，該現(xiàn)象稱之為升華。對于具有 升華性質(zhì)的有效成分，可采用升華法提取。升華性質(zhì)的有效成分，可采用升華法提取。 如從如從

18、樟木中提取樟腦樟木中提取樟腦，從，從茶葉中提取咖啡因茶葉中提取咖啡因。 此法簡單易行，但在實際提取時此法簡單易行，但在實際提取時 很少采用。因為升華所需溫度很高，很少采用。因為升華所需溫度很高， 中草藥容易炭化，炭化后產(chǎn)生的揮發(fā)中草藥容易炭化，炭化后產(chǎn)生的揮發(fā) 性的焦油狀物，容易黏附在升華物上，性的焦油狀物，容易黏附在升華物上， 不易精制除去；其次，升華不完全，不易精制除去；其次，升華不完全， 產(chǎn)率低，有時還伴隨有分解現(xiàn)象。產(chǎn)率低，有時還伴隨有分解現(xiàn)象。 32 超臨界流體萃取法（超臨界流體萃取法（SFESFE） 利用利用超臨界流體超臨界流體優(yōu)良的溶解性能對成分進行提優(yōu)良的溶解性能對成分進行提

19、取和分離的新技術(shù)取和分離的新技術(shù)。 特點：特點： 流體密度近似液體，粘度與氣體相似。流體密度近似液體，粘度與氣體相似。擴散力擴散力 和滲透性優(yōu)于液體，介電常數(shù)隨壓力增大而增加，和滲透性優(yōu)于液體，介電常數(shù)隨壓力增大而增加， 有利于溶質(zhì)的萃取，有利于溶質(zhì)的萃取，無溶劑殘留。無溶劑殘留。 常用作超臨界流體的物質(zhì)：常用作超臨界流體的物質(zhì)： 二氧化碳二氧化碳、氧化亞氮、乙烷、乙烯和甲苯等。、氧化亞氮、乙烷、乙烯和甲苯等。 表表1、天然藥物提取方法小結(jié)、天然藥物提取方法小結(jié) 水或有機水或有機 溶劑溶劑 不加熱不加熱效率低效率低 各類成分，尤遇各類成分，尤遇 熱不穩(wěn)定成分熱不穩(wěn)定成分 出膏率低，易出膏率低，

20、易 發(fā)霉發(fā)霉 水或有機水或有機 溶劑溶劑 不加熱不加熱脂溶性成分脂溶性成分 消耗溶劑量大，消耗溶劑量大， 費時長費時長 水水直火加熱直火加熱水溶性成分水溶性成分 易揮發(fā)、熱不易揮發(fā)、熱不 穩(wěn)定不宜用穩(wěn)定不宜用 有機溶劑有機溶劑水浴加熱水浴加熱脂溶性成分脂溶性成分 熱不穩(wěn)定不宜熱不穩(wěn)定不宜 用，溶劑量大用，溶劑量大 有機溶劑有機溶劑水浴加熱水浴加熱 節(jié)省溶劑、節(jié)省溶劑、 效率最高效率最高 親脂性較強成分親脂性較強成分 用索氏提取器，用索氏提取器， 時間長時間長 水水 水蒸氣蒸水蒸氣蒸 餾餾 揮發(fā)性成分，與揮發(fā)性成分，與 水不相混溶水不相混溶 工藝簡單，但工藝簡單，但 適用范圍較窄適用范圍較窄 無

21、無 直火直火/水水 浴浴/油浴油浴 升華性成分升華性成分 操作時間長，操作時間長， 物質(zhì)易分解物質(zhì)易分解 33 第二節(jié)第二節(jié) 分離精制方法與技術(shù)分離精制方法與技術(shù) 34 天然藥物粗提液是多種天然藥物粗提液是多種 物質(zhì)的混合，需要進行進一物質(zhì)的混合，需要進行進一 步的分離和精制。步的分離和精制。 分離精制前需濃縮提取分離精制前需濃縮提取 液，減壓蒸餾為最常用的液，減壓蒸餾為最常用的 方法。方法。 “去其糟粕，取其精華去其糟粕，取其精華” 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 35 一、系統(tǒng)溶劑分離法：溶解度差異一、系統(tǒng)溶劑分離法：溶解度差異 二、兩相溶劑萃取法：分配比差異二、兩相溶劑萃取法：分配比差異 三、沉淀

22、法：溶解度三、沉淀法：溶解度/ /酸堿度差異酸堿度差異 四、結(jié)晶與重結(jié)晶法：溶解度差異四、結(jié)晶與重結(jié)晶法：溶解度差異 五、透析法：分子大小差異五、透析法：分子大小差異 六、分餾法：沸點差異六、分餾法：沸點差異 七、色譜法：吸附、分配以及親和力差異七、色譜法：吸附、分配以及親和力差異 分離依據(jù)：共存成分的性質(zhì)差異分離依據(jù)：共存成分的性質(zhì)差異 一、系統(tǒng)溶劑分離法一、系統(tǒng)溶劑分離法 是一種按是一種按極性由小到大極性由小到大的順序，選用不同極性的的順序，選用不同極性的 溶劑組成溶劑系統(tǒng)，依次分離提取液中各種不同成分，溶劑組成溶劑系統(tǒng)，依次分離提取液中各種不同成分， 使各使各溶解度有差異溶解度有差異的成

23、分得到的成分得到分段分離分段分離的方法。的方法。 提取液浸膏提取液浸膏/惰性吸附劑惰性吸附劑 表表3、天然藥物成分及其較適用的提取分離溶劑、天然藥物成分及其較適用的提取分離溶劑 天然藥物成分的極性天然藥物成分的極性天然藥物成分的類型天然藥物成分的類型適用的提取分離溶劑適用的提取分離溶劑 強親脂性強親脂性 揮發(fā)油、脂肪油、蠟、脂揮發(fā)油、脂肪油、蠟、脂 溶性色素、甾醇類、某些溶性色素、甾醇類、某些 苷元苷元 石油醚、乙烷石油醚、乙烷 親脂性親脂性 苷元、生物堿、樹脂、醛、苷元、生物堿、樹脂、醛、 酮、醇、醌、有機酸、某酮、醇、醌、有機酸、某 些苷類些苷類 乙醚、氯仿乙醚、氯仿 中等極性中等極性 小

24、小某些苷類（如強心苷類）某些苷類（如強心苷類） 某些苷類（如黃酮苷類）某些苷類（如黃酮苷類） 某些苷類（如皂苷、蒽醌某些苷類（如皂苷、蒽醌 苷類）苷類） 氯仿：乙醇（氯仿：乙醇（2：1） 乙酸乙酯乙酸乙酯 正丁醇正丁醇 中中 大大 親水性親水性 極性很大的苷、糖類、氨極性很大的苷、糖類、氨 基酸、某些生物堿基酸、某些生物堿 丙酮、乙醇、甲醇丙酮、乙醇、甲醇 強親水性強親水性 蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)、果膠、蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)、果膠、 糖類、氨基酸、無機鹽類糖類、氨基酸、無機鹽類 水水 37 38 此法是早年研究天然此法是早年研究天然 藥物有效成分的一種最重藥物有效成分的一種最重 要的方法，主要用于分離要的方

25、法，主要用于分離 提純含有極性不同的各種提純含有極性不同的各種 化學成分的中藥提取液?；瘜W成分的中藥提取液。 目前目前仍是研究不明成分最仍是研究不明成分最 常用的方法常用的方法。 此法操作繁瑣，此法操作繁瑣，相同相同 成分可能會散在不同的抽成分可能會散在不同的抽 提部位提部位，不易濃集。限制，不易濃集。限制 了微量成分、結(jié)構(gòu)性質(zhì)相了微量成分、結(jié)構(gòu)性質(zhì)相 似成分的分離純化。似成分的分離純化。 特點特點適用范圍適用范圍 二、兩相溶劑萃取法二、兩相溶劑萃取法 39 原理：利用混合物中各成分在互不相溶的兩相溶劑原理：利用混合物中各成分在互不相溶的兩相溶劑 中中分配系數(shù)的差異分配系數(shù)的差異而達到分離的方

26、法。而達到分離的方法。 分配系數(shù)分配系數(shù) K=CU/CL CU、CL 分別為溶質(zhì)在上相、下相的平衡濃度。 K相差越大相差越大,分離效率越高。分離效率越高。 舉例：舉例：A、B兩種溶質(zhì)在兩種溶質(zhì)在CHCl3/H2O中進行分配，如中進行分配，如A、B均均 為為1克，克，KA=10，KB=0.1，兩相溶劑體積比為，兩相溶劑體積比為VCHCl3/VH2O=1， 在分液漏斗中作一次振搖分配平衡后，在分液漏斗中作一次振搖分配平衡后，90%以上的溶質(zhì)以上的溶質(zhì)A將將 分配在上相溶劑（水）中，不到分配在上相溶劑（水）中，不到10%的的A分配到下相溶劑分配到下相溶劑 （氯仿）中。同樣的道理，溶質(zhì)（氯仿）中。同樣

27、的道理，溶質(zhì)B分配將與分配將與A相反。相反。 分離難易與分離因子分離難易與分離因子 40 100時時 一次簡單萃取即可將二者分開一次簡單萃取即可將二者分開; 100 10時，需萃取時，需萃取1012次次; 2宜用逆流分溶法宜用逆流分溶法; 1不能用本法分離。不能用本法分離。 定義：定義：A、B 兩種溶質(zhì)在同一溶劑系統(tǒng)中分配系數(shù)兩種溶質(zhì)在同一溶劑系統(tǒng)中分配系數(shù) 的比值的比值(注：注：KAKB )。 分離因子分離因子 =KA/KB 越大越大,兩種溶質(zhì)越易分離。兩種溶質(zhì)越易分離。 分配比與分配比與pH 41 對對酸性、堿性及兩性化合物酸性、堿性及兩性化合物來說，分配比還受來說，分配比還受 溶劑系統(tǒng)溶

28、劑系統(tǒng)pH的影響。的影響。因為pH的變化可以改變它們的 存在狀態(tài)（游離型或解離型），從而影響在溶劑系統(tǒng) 中的分配比。 一般一般pH 3時，酸性物質(zhì)多呈非解離狀態(tài)時，酸性物質(zhì)多呈非解離狀態(tài) （HA）、堿性物質(zhì)則呈解離狀態(tài)（）、堿性物質(zhì)則呈解離狀態(tài)（BH+）存在；）存在； 但但pH 12，則酸性物質(zhì)多呈解離狀態(tài)（，則酸性物質(zhì)多呈解離狀態(tài)（A-）、堿）、堿 性物質(zhì)則呈非解離狀態(tài)（性物質(zhì)則呈非解離狀態(tài)（B）存在。）存在。 如何利用如何利用 萃取溶劑的選擇萃取溶劑的選擇 42 萃取分離必須滿足兩個條件：萃取分離必須滿足兩個條件： （1 1）兩相溶劑必須）兩相溶劑必須互不相溶互不相溶； （2 2）被分離各

29、成分有）被分離各成分有不同分配系數(shù)不同分配系數(shù)。 藥材水提液中親脂性成分藥材水提液中親脂性成分, ,可用石油醚、可用石油醚、 苯、氯仿、乙醚萃??；中等極性成分用乙酸乙酯苯、氯仿、乙醚萃?。恢械葮O性成分用乙酸乙酯 萃??；親水性成分可用正丁醇、異戊醇等萃取。萃取；親水性成分可用正丁醇、異戊醇等萃取。 1、簡單萃取法、簡單萃取法 2、pH梯度萃取法梯度萃取法 3、逆流、逆流連續(xù)萃取法連續(xù)萃取法 4、逆流分逆流分溶溶法法 兩相溶劑萃取常用方法與技術(shù)兩相溶劑萃取常用方法與技術(shù) 43 1 1、簡單萃取法、簡單萃取法: : 萃取操作原則：萃取操作原則：“少量多次少量多次” 。 操作注意操作注意（1 1）水提

30、液的相對密度應在）水提液的相對密度應在1.1-1.21.1-1.2之間。之間。 （2 2）防止乳化。）防止乳化。 44 實驗室用實驗室用分液漏斗分液漏斗; 一般在水和親脂性有機溶劑中進行。一般在水和親脂性有機溶劑中進行。 45 2、pH梯度萃取法：梯度萃取法： 利用不同成分的酸堿性的差異，利用不同成分的酸堿性的差異，在某一定在某一定pH下，某下，某 些成分可以成鹽或游離，改變該成分在溶劑系統(tǒng)中的分些成分可以成鹽或游離，改變該成分在溶劑系統(tǒng)中的分 配系數(shù)而與其它成分分離。配系數(shù)而與其它成分分離。 舉例：舉例：用用pH梯度萃取法的萃取劑分離某有機溶梯度萃取法的萃取劑分離某有機溶 劑中的黃酮類化合物

31、，可依次選用劑中的黃酮類化合物，可依次選用pH由低到高由低到高 的堿液如的堿液如5%碳酸氫鈉、碳酸氫鈉、5%碳酸鈉、碳酸鈉、0.2%氫氧氫氧 化鈉、化鈉、4%氫氧化鈉的水溶液做萃取劑進行萃取，氫氧化鈉的水溶液做萃取劑進行萃取， 使成鹽而達到分離目的使成鹽而達到分離目的 。 3、逆流連續(xù)萃取法、逆流連續(xù)萃取法 原理：利用兩相互不相溶的溶劑相對密度的不同，原理：利用兩相互不相溶的溶劑相對密度的不同， 使相對密度小的液相做為移動相，逆流穿過相對密使相對密度小的液相做為移動相，逆流穿過相對密 度大的作為固定相的相液度大的作為固定相的相液，借以交換溶質(zhì)而達到分，借以交換溶質(zhì)而達到分 離的目的。離的目的。

32、 優(yōu)點：操作簡單、優(yōu)點：操作簡單、避免乳化避免乳化、溶劑用量小、溶劑用量小、 萃取效率高。萃取效率高。 46 例如：例如：用氯仿從川楝樹皮的水 浸液中萃取川楝素。將氯仿盛 于萃取管內(nèi)，而比重小于氯仿 的水提取濃縮液貯于高位容器 內(nèi)，開啟活塞，則水浸液在高 位壓力下流入萃取管，遇瓷圈遇瓷圈 撞擊而分散成細粒撞擊而分散成細粒，使與氯仿 接觸面增大，萃取就比較完全。 47 逆流連續(xù)萃取法逆流連續(xù)萃取法 如果一種藥材的水浸液需 要用比水輕的苯、乙酸乙酯 等進行萃取，則需將水提濃 縮液裝在萃取管內(nèi)，而苯、 乙酸乙酯貯于高位容器內(nèi)。 48 4、逆流分溶法、逆流分溶法 此法相當于多次萃取，對于分離具有非常相

33、似性此法相當于多次萃取，對于分離具有非常相似性 質(zhì)的混合物效果較好。質(zhì)的混合物效果較好。50時采用。時采用。 在在No.0No.0漏斗中溶入溶質(zhì)并加入流動相。振搖使兩相漏斗中溶入溶質(zhì)并加入流動相。振搖使兩相 溶劑充分混合，靜置分層后，分出流動相，令其移溶劑充分混合，靜置分層后，分出流動相，令其移 入入No.1No.1管，再在管，再在No.0No.0管中補加新鮮流動相，再次振管中補加新鮮流動相，再次振 搖混合，靜置分層并進行轉(zhuǎn)移。如此連續(xù)不斷地操搖混合，靜置分層并進行轉(zhuǎn)移。如此連續(xù)不斷地操 作下去，溶質(zhì)即在兩相溶劑中，不斷地重新分配并作下去，溶質(zhì)即在兩相溶劑中，不斷地重新分配并 達到分離的目的。

34、達到分離的目的。 49 三、沉淀法三、沉淀法 指在天然藥物的提取液中加入某些試劑，使部指在天然藥物的提取液中加入某些試劑，使部 分物質(zhì)分物質(zhì)生成沉淀生成沉淀或降低溶解性而或降低溶解性而從溶液中析出從溶液中析出，從，從 而獲得有效成分或去除雜質(zhì)的方法。而獲得有效成分或去除雜質(zhì)的方法。 可逆可逆 可逆可逆/不可逆不可逆 可逆可逆 1 1、酸堿沉淀法、酸堿沉淀法 50 通過加入酸、堿以調(diào)節(jié)溶液通過加入酸、堿以調(diào)節(jié)溶液pH值改變分子的存值改變分子的存 在狀態(tài)，從而在狀態(tài)，從而改變?nèi)芙舛雀淖內(nèi)芙舛榷_到分離的目的。而達到分離的目的。 50 游離型游離型/ /分子態(tài)分子態(tài)解離型解離型/ /離子態(tài)離子態(tài) H

35、 H+ + BHBH+ +B B OHOH- - H H+ + A A- -HAHA OHOH- - 脂溶性脂溶性水溶性水溶性 51 A A酸酸/ /堿法（酸提取堿沉淀法）堿法（酸提取堿沉淀法） 生物堿的提取、純化生物堿的提取、純化 藥材（藥材（B B） 藥渣藥渣酸水提取液酸水提取液 稀酸水提取稀酸水提取 （ BHBH+ + ） 堿化堿化 沉淀沉淀 （B B） 堿水液堿水液 （水溶性雜質(zhì)）（水溶性雜質(zhì)） （脂溶性雜質(zhì)）（脂溶性雜質(zhì)） 52 藥材（藥材（HAHA） 藥渣藥渣堿水提取液堿水提取液 堿水提取堿水提取 （ A A- - ） 酸化酸化 沉淀沉淀 （HAHA） 酸水液酸水液 （水溶性雜質(zhì)）

36、（水溶性雜質(zhì)） （脂溶性雜質(zhì)）（脂溶性雜質(zhì)） B B堿堿/ /酸法（堿提取酸沉淀法）酸法（堿提取酸沉淀法） 黃酮、蒽醌等酚性成分的提取、純化黃酮、蒽醌等酚性成分的提取、純化 53 2、試劑沉淀法：、試劑沉淀法：利用一些成分能與某些試劑利用一些成分能與某些試劑產(chǎn)產(chǎn) 生沉淀生沉淀的性質(zhì)，或利用某些成分在不同溶劑中的性質(zhì)，或利用某些成分在不同溶劑中溶解度溶解度的的 差異，通過加入特定試劑或者溶劑，使生成沉淀，從而差異，通過加入特定試劑或者溶劑，使生成沉淀，從而 與其他成分分離。與其他成分分離。 舉例舉例1 1：在生物堿鹽的溶液中，加入 某些生物堿沉淀試劑（見生物堿性質(zhì) 下），則生物堿生成不溶性復鹽而

37、析 出。水溶性生物堿難以用萃取法提取 分出，常加入雷氏銨鹽使生成生物堿 雷氏鹽沉淀析出。膽固醇與甾體皂苷 生成沉淀；蛋白質(zhì)與鞣質(zhì)形成沉淀等。 54 水提醇沉法：水提醇沉法：除去多糖、蛋白質(zhì)、淀粉、無機除去多糖、蛋白質(zhì)、淀粉、無機 鹽等水溶性雜質(zhì)。鹽等水溶性雜質(zhì)。 醇提水沉法：醇提水沉法：除去脂溶性的油脂、樹脂、葉綠除去脂溶性的油脂、樹脂、葉綠 素等水不溶性雜質(zhì)。素等水不溶性雜質(zhì)。 天然藥物中大多數(shù)化學成分易溶于水和醇。天然藥物中大多數(shù)化學成分易溶于水和醇。 舉例舉例2 2： 3 3、鉛鹽沉淀法鉛鹽沉淀法 55 鉛鹽沉淀法為分離某些中草藥成分的經(jīng)典方法之一。鉛鹽沉淀法為分離某些中草藥成分的經(jīng)典方

38、法之一。 堿式醋酸鉛堿式醋酸鉛在水及醇溶液中，能與多種中草藥成分 生成難溶的鉛鹽或絡(luò)鹽沉淀，故可利用這種性質(zhì)使 有效成分與雜質(zhì)分離。 中性醋酸鉛中性醋酸鉛可與酸性物質(zhì)或某些酚性物質(zhì)結(jié)合成不 溶性鉛鹽。 脫鉛法：（1）硫化氫脫鉛法（PbS沉淀） （2）硫酸、磷酸及其鈉鹽脫鉛法 （3）離子交換脫鉛法 四、結(jié)晶和重結(jié)晶法四、結(jié)晶和重結(jié)晶法 56 結(jié)晶和重結(jié)晶結(jié)晶和重結(jié)晶是利用固體混合物中各種成分在是利用固體混合物中各種成分在 溶劑中的溶劑中的溶解度溶解度的差別，使所需成分以結(jié)晶狀態(tài)析的差別，使所需成分以結(jié)晶狀態(tài)析 出，達到分離精制的目的出，達到分離精制的目的, ,可獲得較純的單體可獲得較純的單體。

39、使物質(zhì)從液態(tài)或氣態(tài)形成晶體的使物質(zhì)從液態(tài)或氣態(tài)形成晶體的 方法即結(jié)晶法。方法即結(jié)晶法。將不純的結(jié)晶進一步將不純的結(jié)晶進一步 精制成較純的結(jié)晶的過程稱重結(jié)晶。精制成較純的結(jié)晶的過程稱重結(jié)晶。 在溶液中，在溶液中，溶質(zhì)的過飽和溶質(zhì)的過飽和是其結(jié)是其結(jié) 晶的驅(qū)動力，天然藥化最常采用的結(jié)晶的驅(qū)動力，天然藥化最常采用的結(jié) 晶法為晶法為降溫結(jié)晶法降溫結(jié)晶法。 結(jié)晶溶劑的選擇結(jié)晶溶劑的選擇 57 （1 1）不與結(jié)晶物質(zhì)發(fā)生化學反應；）不與結(jié)晶物質(zhì)發(fā)生化學反應； （2 2）對結(jié)晶物質(zhì)的溶解度隨溫度不同有顯著差異，對結(jié)晶物質(zhì)的溶解度隨溫度不同有顯著差異， 熱時溶解度大，冷時溶解度??；對可能存在的雜質(zhì)熱時溶解度大

40、，冷時溶解度小；對可能存在的雜質(zhì) 溶解度非常大或非常小；溶解度非常大或非常??； （3 3）沸點適中，不宜過高或過低（）沸點適中，不宜過高或過低（3513535135）。）。 常用溶劑有水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、三常用溶劑有水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、三 氯甲烷等；氯甲烷等； （4 4）若無理想單一溶劑時，還可用混合溶劑。）若無理想單一溶劑時，還可用混合溶劑。 采用試驗的方法選擇合適的溶劑采用試驗的方法選擇合適的溶劑 58 例如：例如： 取0.1g目標物質(zhì)于一小試管中，滴加約1mL溶劑， 加熱至沸。若完全溶解，且冷卻后能析出大量晶體，這 種溶劑一般認為合用。如樣品在冷時或熱時，都能溶于

41、 1mL溶劑中，則這種溶劑不合用。 若樣品不溶于1mL沸騰溶劑中，再分批加入溶劑， 每次加入0.5mL，并加熱至沸?？偣灿?mL熱溶劑，而樣 品仍未溶解，這種溶劑也不合用。若樣品溶于4mL以內(nèi) 的熱溶劑中，冷卻后仍無結(jié)晶析出，這種溶劑也不合用。 如果難于選擇一種適宜的溶劑，可考慮如果難于選擇一種適宜的溶劑，可考慮 選用混合溶劑。選用混合溶劑?；旌先軇┮话阌蓛煞N能互相 溶解的溶劑組成，目標物質(zhì)易溶于其中之一 種溶劑，而難溶于另一種溶劑。 59 食鹽晶體食鹽晶體 單晶冰糖單晶冰糖 薄荷醇晶體薄荷醇晶體 小檗堿晶體小檗堿晶體 結(jié)晶的條件結(jié)晶的條件：溶劑溶劑、雜質(zhì)的去除雜質(zhì)的去除、有效成分的含、有效成分的含 量、溶液的濃度、溫度、時間等。量、溶液的濃度、溫度、時間等。 60 判斷結(jié)晶純度的方法：判斷結(jié)晶純度的方法： 1 1、晶形、色澤（初判）；、晶形、色澤（初判）； 2 2、熔點測定：純品、熔點測定：純品熔距?。蝗劬嘈?； 3 3、薄層色譜法：用三種以上不同展、薄層色譜法：用三種以上不同展 開系統(tǒng)，只出現(xiàn)一個斑點時可初步判開系統(tǒng)，只出現(xiàn)一個斑點時可初步判 斷為單一成分；斷為單一成分； 4 4、光譜測定（紫外光譜、紅外光譜）、光譜測定（紫外光譜、紅外光譜） 待待分離分離混合混合物物 飽和飽和溶液溶液 結(jié)晶結(jié)晶 粗結(jié)晶粗結(jié)晶 溶于選擇的溶劑，加熱