2017-2018學(xué)年高中生物 第一章 無(wú)菌操作技術(shù)實(shí)踐 第1課時(shí) 微生物的分離和培養(yǎng)同步備課教學(xué)案選修1

1、學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精第1課時(shí)微生物的分離和培養(yǎng)學(xué)習(xí)導(dǎo)航1。簡(jiǎn)述高壓蒸汽滅菌鍋的使用方法及注意事項(xiàng)。2。掌握制備細(xì)菌培養(yǎng)基的方法。3.學(xué)會(huì)利用無(wú)菌操作技術(shù)接種與培養(yǎng)大腸桿菌。重難點(diǎn)擊1。培養(yǎng)基的配制方法及常見(jiàn)種類.2.大腸桿菌的接種與分離培養(yǎng)。一、微生物分離和培養(yǎng)的基本理論1.無(wú)菌操作技術(shù)實(shí)驗(yàn)室常利用高溫處理達(dá)到滅菌效果，包括采用干熱滅菌或濕熱滅菌等方法。（1）干熱滅菌方法是將擬滅菌的物品放在干熱滅菌箱內(nèi)，在160170 溫度下加熱12 h以達(dá)到滅菌的目的.(2）濕熱滅菌方法常采用高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行，如手提式高壓蒸汽滅菌鍋就是實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌儀器之一。高壓蒸汽滅菌鍋的使用包括加水、裝鍋、加

2、熱排氣、保溫保壓、出鍋等步驟.2。配制培養(yǎng)基（1)培養(yǎng)基概念：為人工培養(yǎng)微生物而制備的適合微生物生長(zhǎng)、繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。(2）培養(yǎng)基類型天然培養(yǎng)基：采用動(dòng)植物組織或微生物細(xì)胞以及它們的提取物或粗消化物配制而成，如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。優(yōu)點(diǎn):取材便利、營(yíng)養(yǎng)豐富、配制簡(jiǎn)便；缺點(diǎn)：營(yíng)養(yǎng)成分難以控制、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性較差。合成培養(yǎng)基：由準(zhǔn)確稱量的分析純等級(jí)別的高純度化學(xué)試劑加蒸餾水配制而成，如葡萄糖銨鹽培養(yǎng)基。優(yōu)點(diǎn)：化學(xué)成分及其含量明確、實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性好；缺點(diǎn)：配制繁瑣、成本較高.(3)培養(yǎng)基成分：一般都含有水、碳源(提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì))和無(wú)機(jī)鹽等最基本的物質(zhì).（4)

3、培養(yǎng)基的配制原則：在配制培養(yǎng)基時(shí)，根據(jù)擬培養(yǎng)的微生物的不同需要,有時(shí)還要加入維生素等特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),并要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的ph使之滿足微生物生長(zhǎng)的需要。3.接種微生物（1)接種的概念:在無(wú)菌條件下將微生物接入培養(yǎng)基的操作過(guò)程。(2)常用的接種工具：玻璃涂布器、接種針、接種環(huán)等。（3)接種方法用接種針進(jìn)行穿刺接種。用接種環(huán)進(jìn)行斜面接種或在固體培養(yǎng)基平板上進(jìn)行劃線接種.用玻璃涂布器進(jìn)行涂布平板接種等.1.“無(wú)菌操作”與人們的生活休戚相關(guān)，無(wú)時(shí)無(wú)處不在。在日常生活、生產(chǎn)實(shí)踐、自身健康防護(hù)中,有哪些“無(wú)菌操作”的例子？答案日常生活、生產(chǎn)實(shí)踐、自身健康防護(hù)中“無(wú)菌操作”的例子分別有：(1)被褥、鞋襪要常曬；肉

4、制品儲(chǔ)存時(shí)用鹽腌等。（2)家畜閹割后，要在其傷口處涂抹一些酒精或白酒；初冬楊樹(shù)樹(shù)干涂刷生石灰水等.（3)打針時(shí)，注射部位要用酒精棉球擦洗，一般要在其傷口處涂抹一些碘酒。2。實(shí)驗(yàn)室常利用高溫處理達(dá)到滅菌效果,包括采用干熱滅菌或濕熱滅菌等方法。以下圖高壓蒸汽滅菌鍋的使用為例,探究無(wú)菌技術(shù)的方法.(1）高壓蒸汽滅菌的使用原理是什么？答案使用原理:將待滅菌物品放在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)；把鍋內(nèi)的水加熱煮沸，并把其中原有的冷空氣徹底驅(qū)盡后將鍋密閉；再繼續(xù)加熱就會(huì)使鍋內(nèi)的蒸汽壓逐漸上升,從而溫度也隨之上升到100 以上。(2)簡(jiǎn)述手提式高壓蒸汽滅菌鍋的使用步驟。答案加水、裝鍋、加熱排氣、保溫保壓、出

5、鍋等。（3)消毒和滅菌的原理是什么？消毒和滅菌都能殺死所有的微生物嗎？是否適用于所有的生物和物品？答案都是使微生物的蛋白質(zhì)變性，借此殺死微生物。滅菌可殺死處理材料中的全部微生物(包括芽孢和孢子)，而消毒僅能殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(一般不包括芽孢和孢子）。不是，無(wú)菌技術(shù)既要考慮效果,又要考慮操作對(duì)象的承受能力。例如，活體生物材料、操作者的雙手等只能消毒，而不能滅菌.（4)無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外，還有什么目的？答案還能有效避免污染環(huán)境以及操作者自身被微生物感染。3。微生物的培養(yǎng)離不開(kāi)培養(yǎng)基，根據(jù)下面某微生物培養(yǎng)基的配方回答下列問(wèn)題：成分含量nano33 g

6、k2hpo41 gkcl0.5 gmgso47h2o0。5 gfeso40。01 gc6h12o630 gh2o1 000 ml青霉素0。1萬(wàn)單位(1)該培養(yǎng)基的碳源、氮源分別是什么?答案碳源:c6h12o6；氮源:nano3。(2）依據(jù)物理性質(zhì)用途劃分,該培養(yǎng)基屬于什么培養(yǎng)基？答案依據(jù)物理性質(zhì)劃分，該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基；依據(jù)用途劃分，則屬于選擇培養(yǎng)基。根據(jù)培養(yǎng)基的原料,所培養(yǎng)微生物的同化作用的類型是異養(yǎng)型，培養(yǎng)的微生物可能是酵母菌或霉菌。（3）在固體培養(yǎng)基中加入的瓊脂能為微生物提供營(yíng)養(yǎng)嗎？為什么？答案不能,微生物不能分解瓊脂。(4）普通培養(yǎng)基能培養(yǎng)病毒嗎？為什么？答案不能，因?yàn)椴《局荒苓M(jìn)行

7、活細(xì)胞寄生生活。整合提升（1）消毒與滅菌的區(qū)別項(xiàng)目條件結(jié)果常用的方法消毒較為溫和的物理學(xué)或化學(xué)方法僅殺死物體上絕大多數(shù)微生物（包括病原微生物和有害微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞）煮沸消費(fèi)法（在100 下56 min可以殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽孢）、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法滅菌強(qiáng)烈的物理學(xué)或化學(xué)方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌、灼燒滅菌（2）培養(yǎng)基的成分及功能營(yíng)養(yǎng)要素含義作用主要來(lái)源碳源凡能提供所需碳元素的物質(zhì)構(gòu)成生物體細(xì)胞的物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物,有些是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)無(wú)機(jī)碳源：co2、nahco3等；有機(jī)碳源:糖類、脂肪酸、花生餅粉、石油等氮源凡能提供所需氮元素的物

8、質(zhì)合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物無(wú)機(jī)氮源:nh3、銨鹽、硝酸鹽等;有機(jī)氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨等生長(zhǎng)因子(特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)）生長(zhǎng)必不可少的微量有機(jī)物酶和核酸的組成成分維生素、氨基酸、堿基等水在生物體內(nèi)含量很高,在低等生物體內(nèi)含量更高不僅是優(yōu)良的溶劑,而且可維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定培養(yǎng)基、大氣、代謝產(chǎn)物等無(wú)機(jī)鹽為微生物提供除碳、氮元素以外的各種重要元素,包括某些大量元素細(xì)胞內(nèi)的組成成分；生理調(diào)節(jié)物質(zhì);某些化能自養(yǎng)菌的能源;酶的激活劑培養(yǎng)基、大氣等環(huán)境1。高溫滅菌的原理是()a.每種微生物生長(zhǎng)的最適溫度是一定的b。微生物對(duì)于高溫環(huán)境不適應(yīng)c。高溫破壞了微生物細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸，影響其生命活動(dòng)d

9、.高溫降低了環(huán)境中氧的濃度答案c解析高溫的致死作用主要是使微生物的蛋白質(zhì)和核酸等重要生物大分子物質(zhì)發(fā)生不可逆轉(zhuǎn)的變性.2.下列關(guān)于培養(yǎng)基的說(shuō)法正確的是()a.培養(yǎng)基是為微生物的生長(zhǎng)繁殖提供營(yíng)養(yǎng)的基質(zhì)b。培養(yǎng)基只有兩類：液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基c。除水以外的無(wú)機(jī)物只能提供無(wú)機(jī)鹽d.無(wú)機(jī)氮源不可能提供能量答案a解析根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)，可分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，在液體培養(yǎng)基中加入不同量的凝固劑如瓊脂可形成半固體或固體培養(yǎng)基；除水以外的無(wú)機(jī)物如nh4hco3,既可以是碳源,也可以是氮源，不僅僅提供無(wú)機(jī)鹽；無(wú)機(jī)氮源有時(shí)也能提供能量，如nh3可以為硝化細(xì)菌提供能量.方法鏈接培養(yǎng)基的種類分

10、類標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基特點(diǎn)作用物理性質(zhì)固體培養(yǎng)基外觀固態(tài)微生物的分離、計(jì)數(shù)等半固體培養(yǎng)基容器放倒不致流出,劇烈振動(dòng)則破散觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、鑒定菌種等液體培養(yǎng)基呈液態(tài)常用于工業(yè)生產(chǎn)功能選擇培養(yǎng)基允許特定種類的微生物生長(zhǎng),同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)選擇、分離鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn),在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品鑒定成分來(lái)源天然培養(yǎng)基化學(xué)成分還不清楚工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn)合成培養(yǎng)基化學(xué)成分完全了解在實(shí)驗(yàn)室用來(lái)對(duì)微生物分析二、大腸桿菌的接種與分離培養(yǎng)1.配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基2.斜面接種和培養(yǎng)大腸桿菌斜面接種大腸桿菌的主要目的有菌種轉(zhuǎn)移、擴(kuò)大培養(yǎng)和保存純凈菌種等。具體操作步驟:3。

11、平板劃線分離和培養(yǎng)大腸桿菌在實(shí)驗(yàn)室中，平板常常被用來(lái)培養(yǎng)、分離細(xì)菌等微生物。（1）牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的平板制作配制好的培養(yǎng)基裝瓶滅菌倒平板操作（a。打開(kāi)瓶塞b。灼燒瓶口滅菌c.倒培養(yǎng)基d.倒置平板）。（2）平板劃線分離與培養(yǎng)大腸桿菌平板劃線法的含義：用帶有微生物的接種環(huán)在平板培養(yǎng)基表面通過(guò)分區(qū)劃線而純化分離微生物的一種方法。注意事項(xiàng)：接種和劃線操作時(shí)需要在酒精燈火焰附近進(jìn)行。1.利用培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物時(shí)，首先要把微生物接種到培養(yǎng)基上。以牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配制為例，完成下列有關(guān)問(wèn)題:（1）以下為細(xì)菌培養(yǎng)基的配制的流程，若將分裝步驟與調(diào)節(jié)ph步驟顛倒過(guò)來(lái)是否可行?答案不行。若分裝后再調(diào)節(jié)ph,

12、會(huì)使培養(yǎng)基中ph調(diào)節(jié)不均勻；還可能將培養(yǎng)基弄到試管口，易被污染。(2）從防止雜菌污染的角度思考，平板冷凝后將平板倒置的原因是什么?答案平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。2。斜面接種和培養(yǎng)大腸桿菌（1)下圖接種方法分別是什么？答案圖1是穿刺接種、圖2是斜面接種、圖3是平板劃線接種。（2)下表是關(guān)于接種操作步驟及其目的或分析說(shuō)明，請(qǐng)完善下表。順序接種操作步驟分析說(shuō)明或目的將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅將接種環(huán)滅菌，避免污染菌種在火焰旁冷卻接種環(huán)，拔去試管棉塞避免雜菌污染菌

13、種將試管口通過(guò)火焰灼燒滅菌,防止試管口菌體污染培養(yǎng)基將滅過(guò)菌的接種環(huán)伸入菌種管，先將環(huán)部接觸斜面頂端使接種環(huán)冷卻,避免殺死菌種抽出接種環(huán)時(shí)，帶菌部分不要觸及管壁或通過(guò)火焰防止菌種沾于管壁，防止菌種被殺死在培養(yǎng)基斜面上由底部向上輕輕劃“s”型曲線，但不要將培養(yǎng)基表面劃破初步接種.劃破培養(yǎng)基不利于后續(xù)的繼續(xù)劃線，長(zhǎng)出的菌落不標(biāo)準(zhǔn)將試管口與試管塞通過(guò)火焰23次，迅速塞緊試管防止雜菌污染將接過(guò)種的試管，放在恒溫箱（37 ）中培養(yǎng)24_h培養(yǎng)細(xì)菌，觀察接種和培養(yǎng)的結(jié)果3。平板劃線分離和培養(yǎng)大腸桿菌在實(shí)驗(yàn)室中，平板常常被用來(lái)培養(yǎng)、分離細(xì)菌等微生物。思考回答下列相關(guān)問(wèn)題：(1）平板劃線法接種菌種時(shí)，哪些操作

14、可防止雜菌污染？答案接種前將接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒。劃完一個(gè)區(qū)域后,將接種環(huán)灼燒，冷卻后再劃下一區(qū)域.接種環(huán)沾取菌液時(shí)，要將試管口、棉塞等通過(guò)火焰。劃線時(shí)將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條縫隙，將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)。(2)在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線?答案避免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。（3）為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?答案操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物。每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目

15、逐漸減少，是為了保證菌落是由單一的細(xì)菌繁殖而成.（4)在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？答案需要.劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。（5）在做第二次劃線以及其后的操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線？答案劃線后末端含有的細(xì)菌數(shù)目較少，每次從上一次的末端開(kāi)始劃線能夠使細(xì)菌的數(shù)目隨劃線次數(shù)的增加而逐漸減少,最終分散成單個(gè)的細(xì)菌。（6）為何最后一次劃線不能與第一次劃線相連？答案最后一次劃線已經(jīng)將細(xì)菌稀釋成單個(gè)的細(xì)胞，如果與第一次劃線相連則增加了細(xì)菌的數(shù)目，達(dá)不到純化的效果。3。關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述中,不正確的是(）

16、a.配制固體培養(yǎng)基時(shí)一般要加適量的瓊脂b.分裝到試管中的液體培養(yǎng)基的高度約為試管高度的1/2c。待培養(yǎng)基冷卻至50 左右時(shí)進(jìn)行擱置斜面d.擱置斜面時(shí)，斜面長(zhǎng)度不超過(guò)試管總長(zhǎng)的1/2答案b解析在配制固體培養(yǎng)基時(shí)，瓊脂是最常用的凝固劑,a正確;分裝到試管中的液體培養(yǎng)基的高度約為試管長(zhǎng)度的1/5，b錯(cuò)誤；待培養(yǎng)基冷卻至50 左右時(shí)進(jìn)行擱置斜面,以防培養(yǎng)基因溫度過(guò)高而燙手，也不能過(guò)低,防止凝固后不易倒平板，c正確;擱置斜面時(shí)，將試管口部枕在高約1 cm的木條或其他合適高度的物體上,使其自然傾斜,斜面長(zhǎng)度不超過(guò)試管總長(zhǎng)的1/2，d正確。4.在接種操作的過(guò)程中，不正確的是()a。要將接種環(huán)灼燒滅菌b.取下

17、棉塞后要將試管口灼燒滅菌c.將接種環(huán)伸入試管內(nèi)，先接觸長(zhǎng)菌多的部位d.接種后還要將管口滅菌加塞答案c解析接種環(huán)伸入試管內(nèi)后先接觸培養(yǎng)基斜面頂端或其他無(wú)菌體的培養(yǎng)基部位,待接種環(huán)冷卻后再接觸長(zhǎng)菌部位。5。下圖是微生物平板劃線示意圖，劃線的順序?yàn)?2345。下列操作方法正確的是(）a。操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌b。劃線操作須在火焰上進(jìn)行c。在5區(qū)域中才可以得到所需菌落d。在12345區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌答案d解析在每次劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在火焰上灼燒，接種時(shí)劃線操作在火焰邊進(jìn)行；在5個(gè)區(qū)域中，只要有單個(gè)活細(xì)菌，通過(guò)培養(yǎng)即可獲得所需菌落。一題多變（1)

18、平板劃線法所用培養(yǎng)基屬于什么培養(yǎng)基？答案瓊脂固體培養(yǎng)基。(2）如何確認(rèn)制備的培養(yǎng)基是否合格？答案將一個(gè)未接種的培養(yǎng)基同接種培養(yǎng)基一起培養(yǎng)，若未接種的培養(yǎng)基無(wú)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明制備的培養(yǎng)基合格，否則需要重新制備。（3）如果培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的菌落相互重疊，則說(shuō)明存在什么問(wèn)題？答案說(shuō)明劃線不充分，應(yīng)該重新操作。（4）在第二區(qū)域內(nèi)劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于哪里？答案接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次(第一區(qū)中)劃線的末端。1。下圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖,其中甲、乙、丙依次指(）a.安全閥、排氣閥、壓力表b。排氣閥、安全閥、壓力表c.安全閥、排氣閥、溫度表d。排氣閥、安全閥、溫度表答案a解析根據(jù)教材p8圖高

19、壓蒸汽滅菌鍋結(jié)構(gòu)示意圖，可判斷甲、乙、丙分別為安全閥、排氣閥、壓力表。2.在培養(yǎng)基的配制過(guò)程中,具有如下步驟，其正確的順序?yàn)椋ǎ┤芑{(diào)ph加棉塞包扎分裝稱量a。 b.c. d.答案b解析上述步驟中，培養(yǎng)基的配制順序?yàn)榉Q量溶化調(diào)ph分裝加棉塞包扎。3.下列有關(guān)平板劃線操作的敘述，不正確的是（)a.第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物b。每次劃線前，灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種c.在第二區(qū)域內(nèi)劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于菌液d.劃線結(jié)束后，灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者答案c解析平板劃線操作中，接種環(huán)挑取

20、菌種前灼燒的目的是避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物，以后每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線后殘留的菌種。劃線結(jié)束仍需灼燒接種環(huán)，是為了能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。從第二次劃線開(kāi)始,每次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端。4.下列依次表示倒平板、接種的位置，以及劃線法接種的路徑示意圖，其中錯(cuò)誤的是（）答案d解析倒平板時(shí)，用左手將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋，防止空氣中的雜菌污染,故a正確;接種時(shí),左手將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條縫隙,右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，故b正確；劃線時(shí)要從上一

21、次劃線的末端開(kāi)始進(jìn)行，讓菌種來(lái)源于上一次劃線末端，故c正確，d錯(cuò)誤。5。下表所示為某微生物培養(yǎng)基的配方，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：成分含量nano33 gk2hpo41 gkcl0.5 gmgso47h2o0.5 gfeso40.01 gc6h12o630 gh2o1 000 ml青霉素0。1萬(wàn)單位（1)按照物理性質(zhì),該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。（2)該培養(yǎng)基中的碳源是_。不論何種培養(yǎng)基，在各成分都溶化后分裝前,要進(jìn)行的是調(diào)整ph和_,倒平板時(shí)，一般需冷卻至_左右，在_附近操作。答案(1)液體（2)c6h12o6滅菌50 酒精燈火焰解析(1）培養(yǎng)基中沒(méi)有加入瓊脂，是液體培養(yǎng)基。(2）c6h12o6為微生物提供

22、碳源，培養(yǎng)基在分裝前要調(diào)整ph和滅菌,倒平板時(shí),一般需冷卻至50 左右,在酒精燈火焰附近操作。課時(shí)作業(yè)學(xué)考達(dá)標(biāo)1.在微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中，下列各項(xiàng)操作不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行的是（)a。配制培養(yǎng)基 b。倒平板c.接種 d。培養(yǎng)答案a解析配制培養(yǎng)基時(shí)不需要無(wú)菌操作，因?yàn)榕渲坪蟮呐囵B(yǎng)基需要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。2。下列關(guān)于滅菌和消毒的敘述中，不正確的是()a.滅菌是指殺滅環(huán)境中的一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子b.消毒和滅菌實(shí)質(zhì)上是相同的c.接種環(huán)用灼燒法滅菌d.常用的滅菌方法有加熱法、過(guò)濾法、紫外線法、化學(xué)藥品法答案b解析消毒是指用較為溫和的物理學(xué)或化學(xué)方法殺滅物體上絕大多數(shù)微生物的方法,而滅菌則是指采用

23、強(qiáng)烈的物理學(xué)或化學(xué)方法使物體內(nèi)外所有的微生物永遠(yuǎn)喪失生長(zhǎng)和繁殖能力的方法,二者實(shí)質(zhì)上不同。3。將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基都放入37 恒溫箱的目的是（）a.對(duì)比觀察培養(yǎng)基有沒(méi)有被微生物利用b.對(duì)比分析培養(yǎng)基上是否生有雜菌c.沒(méi)必要放入未接種的培養(yǎng)基d.為下次接種時(shí)再使用答案b解析通過(guò)設(shè)計(jì)對(duì)照實(shí)驗(yàn)，目的是為了檢測(cè)培養(yǎng)基制備是否成功,即是否生有雜菌。4。下列有關(guān)倒平板操作錯(cuò)誤的是()a。將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上b.使打開(kāi)的錐形瓶瓶口迅速通過(guò)火焰c.將培養(yǎng)皿打開(kāi)，培養(yǎng)皿蓋倒放在桌面上d.等待平板冷卻凝固后需要倒過(guò)來(lái)放置答案c解析倒平板時(shí)，培養(yǎng)皿的蓋不能完全打開(kāi)。5。在微生物的實(shí)驗(yàn)室

24、培養(yǎng)過(guò)程中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是()a.將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌b。接種純種細(xì)菌c。在適宜條件下培養(yǎng)d。防止外來(lái)雜菌的入侵答案d解析將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌只是無(wú)菌技術(shù)的一個(gè)方面，不代表無(wú)菌技術(shù)的全部，a錯(cuò)誤;接種純種細(xì)菌是獲得純凈培養(yǎng)物的前提，b錯(cuò)誤；接種方法和培養(yǎng)條件不能防止雜菌的污染,c錯(cuò)誤;防止外來(lái)雜菌的入侵是獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵，d正確.6。在平板劃線操作中，錯(cuò)誤的是(）a。將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅b。將燒紅的接種環(huán)在火焰旁邊冷卻c。接種環(huán)在平板上的劃線位置是隨機(jī)的d.在挑取菌種前和接種完畢后均要將試管口通過(guò)火焰答案

25、c解析接種環(huán)灼燒及接種前后試管口要通過(guò)火焰，其目的是為了防止雜菌污染,將接種環(huán)先冷卻再接種可以避免高溫燙死菌種，因此a、b、d都是正確的；在平板上劃線時(shí)，要?jiǎng)澣廖鍡l平行線,而不是隨機(jī)劃線，因此c項(xiàng)錯(cuò)誤.高考提能7。防止雜菌入侵，獲得純凈的培養(yǎng)物，是研究和應(yīng)用微生物的前提。下列敘述錯(cuò)誤的是（)a。實(shí)驗(yàn)室里可以用紫外線或化學(xué)藥物進(jìn)行消毒b.接種環(huán)、接種針等金屬用具，直接在酒精燈火焰的內(nèi)焰部位灼燒滅菌c。在實(shí)驗(yàn)室中，切不可吃東西、喝水，離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室時(shí)一定要洗手，以防止被微生物感染d。使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境答案b解析為防止雜菌污染，研究和應(yīng)用微生物時(shí)應(yīng)進(jìn)行消毒和滅菌,實(shí)驗(yàn)

26、室可以用紫外線或化學(xué)藥物進(jìn)行消毒，a項(xiàng)正確；接種環(huán)、接種針等金屬用具,直接在酒精燈火焰的充分燃燒層即外焰部位灼燒滅菌,b項(xiàng)錯(cuò)誤;在實(shí)驗(yàn)室中,切不可吃東西、喝水，離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室時(shí)一定要洗手，以防止被微生物感染，c項(xiàng)正確;使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理,以免污染環(huán)境，d項(xiàng)正確。8.下列關(guān)于平板劃線操作正確的是(）a。使用已滅菌的接種針、培養(yǎng)皿，在操作過(guò)程中不再滅菌b。打開(kāi)含菌種的試管,需通過(guò)火焰滅菌，取出菌種后，需馬上塞上棉塞c。將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線即可d.最后將平板倒置，放在培養(yǎng)箱中答案d解析在平板劃線時(shí)，已滅過(guò)菌的接種針在每次劃線后，都必須用灼燒滅菌法滅菌，以

27、防雜菌污染，a錯(cuò)誤；盛有菌種的試管在打開(kāi)或重新塞棉塞前，都需通過(guò)火焰灼燒滅菌，b錯(cuò)誤；接種時(shí)用帶有微生物的接種環(huán)在平板培養(yǎng)基表面分區(qū)劃線,不能將沾有菌種的接種環(huán)伸入平板內(nèi),c錯(cuò)誤；平板凝固后，須將平板倒置，d正確。9.下圖為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過(guò)程中的部分操作步驟，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是(）a。步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行b。步驟中，待倒入的培養(yǎng)基冷卻后蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋c。步驟中,每次劃線前后都需對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理d.劃線接種結(jié)束后，將圖平板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)答案b解析培養(yǎng)與純化大腸桿菌的過(guò)程中需要在酒精燈的火焰旁進(jìn)行，故a正確；步驟中倒入培養(yǎng)基后立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋，故b錯(cuò)誤；步驟接

28、種時(shí),每次劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理,故c正確；劃線接種結(jié)束后，將平板倒置后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)，防止冷凝水污染培養(yǎng)基，故d正確.10。接種是微生物培養(yǎng)和微生物選擇的必要步驟之一.下列關(guān)于接種的敘述中，不正確的是（)a.接種通常在酒精燈火焰附近進(jìn)行b。接種之前要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌c.接種指無(wú)菌條件下將微生物接入培養(yǎng)基的操作d。接種時(shí)接種環(huán)要將培養(yǎng)基的表面劃破答案d解析為了保證無(wú)菌操作，整個(gè)接種過(guò)程都需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行,故a、b、c均正確；接種時(shí)接種環(huán)不能劃破培養(yǎng)基的表面，故d錯(cuò)誤.11.下表是某種微生物培養(yǎng)基的配方表，請(qǐng)據(jù)表回答下面的問(wèn)題：牛肉膏蛋白胨nacl瓊脂蒸餾水0。5 g1 g0

29、。5 g1 g200 ml（1)此培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分有五類，其中蛋白胨提供的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是_。(2)在培養(yǎng)基制備過(guò)程中,各種成分溶化后分裝前，必須的操作是_。(3)在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)研究上，常需要進(jìn)行微生物的培養(yǎng)和計(jì)數(shù)。如圖是利用_法進(jìn)行微生物接種，把聚集的菌種逐步_分散到培養(yǎng)基的表面。為達(dá)到這一目的，操作上應(yīng)注意：_ (至少答兩項(xiàng)）.答案（1)碳源、氮源、維生素(2)調(diào)節(jié)ph（3)平板劃線稀釋每次劃線前要灼燒接種環(huán)；冷卻后從上一區(qū)劃線末端開(kāi)始劃；首尾區(qū)不重疊（任選兩項(xiàng)）解析微生物培養(yǎng)基含有碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),培養(yǎng)基制備過(guò)程中各種成分溶化后分裝前，必須調(diào)節(jié)ph。12。下圖顯示微生物的接種實(shí)驗(yàn)中

30、的一些步驟，回答下列問(wèn)題：（1）圖中接種工具的名稱是_.（2）解釋步驟和的操作：步驟中，為何要將接種工具灼燒至變紅?_.步驟中，為何要將接種工具冷卻？_。(3)圖示接種方法的目的是_。答案（1）接種環(huán)（2）殺滅接種環(huán)上可能引起污染的微生物避免燙死接種物(3）使接種物逐漸稀釋，經(jīng)培養(yǎng)后獲得單個(gè)菌落解析(1)圖中所用的接種工具是接種環(huán)。（2）步驟中，將接種工具灼燒至變紅的目的是殺滅接種環(huán)上可能引起污染的微生物；步驟中,將接種工具冷卻的目的是避免燙死接種物。（3)圖示接種方法是平板劃線法，目的是使接種物逐漸稀釋，經(jīng)培養(yǎng)后獲得單個(gè)菌落。13.請(qǐng)回答下列關(guān)于大腸桿菌培養(yǎng)的問(wèn)題：（1)在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中

31、,除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮_、_和滲透壓等條件.由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類型容易選擇、_、_等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料.(2）在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行_（消毒、滅菌）;操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和_（消毒、滅菌)；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性,還能_。(3）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是_.(4）若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)_處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。答案(1)溫度酸堿度易培養(yǎng)生活周期短（2)滅菌消毒損傷dna的結(jié)構(gòu)（3)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生（4）滅菌真題體驗(yàn)14。（2015江蘇，19)做“微生物的分離與培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí)，下列