珊瑚菜的化學(xué)成分及其生物活性研究 (1)

1、1 學(xué)生畢業(yè)設(shè)計學(xué)生畢業(yè)設(shè)計(論文論文)與答辯成績記錄表與答辯成績記錄表 學(xué)院、函授站名稱 河北科技大學(xué)承德函授站 專業(yè) 藥學(xué) 學(xué)生姓名尹雪梅學(xué) 號16指導(dǎo)教師夏萬東 設(shè)計(論文) 題目 珊瑚菜的化學(xué)成分及其生物活性研究 記 錄 內(nèi) 容 答 辯 委 員 所 提 問 題 及 答 辯 人 對 問 題 回 答 1.北沙參有何藥理作用？ 答：(1)治肺熱咳嗽 (2)調(diào)節(jié)免疫功能 (3)抗癌、抗突變及抗腫瘤作用 (4)抗真菌作用 (5)解毒 (6)鎮(zhèn)痛和鎮(zhèn)靜作用 2.從生物原料中提取分離活性物質(zhì)的方法有哪些？ 答：硅膠柱層析、凝膠過濾層析、薄層層析、結(jié)晶和重結(jié)晶等方法對其進(jìn)行化學(xué)成分的分離 提取和純化，

2、并利用波譜學(xué)方法，主要是氫譜、碳譜等波譜技術(shù)對得到的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒 定。 3.通過畢業(yè)設(shè)計得到如何結(jié)論？ 答：最終從樣品中共分離得到了兩個不同的化合物，其中一個化合物鑒定為豆甾醇，一個化 合物鑒定為香檸檬內(nèi)酯。 評 價 內(nèi) 容 序 號 評價項目評 價 標(biāo) 準(zhǔn)分值得分 1自述部分 語言簡練，清晰明了，綜合概述全面、準(zhǔn)確、論點正 確，分析歸納合理。 3023 2創(chuàng)新部分 有創(chuàng)新意識，有獨特見解，有一定的實用價值。 108 3回答部分 回答問題果斷，反映敏捷，說理清楚；有較強(qiáng)的分析 問題和解決問題的能力；能回答難度較大的問題。 5043 4資料部分 資料齊全，符合學(xué)院畢業(yè)設(shè)計(論文)規(guī)范化要求。

3、106 合計80 答辯評委簽名：鐘正偉、夏萬東、臧玉紅 2 河北科技大學(xué)繼續(xù)教育學(xué)院 畢業(yè)設(shè)計 (論文)前期工作材料 學(xué)生姓名： 尹雪梅 學(xué) 號： 16 號 院 站： 河北科技大學(xué)承德函授站 專 業(yè)： 藥學(xué) 設(shè)計(論文)題目: 珊瑚菜的化學(xué)成分及其 生物活性研究 指導(dǎo)教師: 夏萬東 材 料 目 錄 序號名 稱數(shù)量備 注 1畢業(yè)設(shè)計(論文)選題、審題表1 2畢業(yè)設(shè)計(論文)任務(wù)書1 3 畢業(yè)設(shè)計(論文)開題報告含文獻(xiàn)綜 述 1 4 畢業(yè)設(shè)計(論文)外文資料翻譯含原 文 1 5畢業(yè)設(shè)計（論文）中期檢查表1 3 河北科技大學(xué)繼續(xù)教育學(xué)院 畢業(yè)設(shè)計（論文）選題、審題表 院 站河北科大承德函授站教師姓名

4、夏萬東 正高副高中級 專 業(yè)藥學(xué) 選 題 教 師 專業(yè)技術(shù) 職 務(wù) 申報課題 名稱 珊瑚菜的化學(xué)成分及其生物活性研究 課題簡介 珊瑚菜又名北沙參，其根入藥，具有養(yǎng)陰潤肺，益胃生津的功 效，現(xiàn)狀漸危。北沙參的營養(yǎng)價值和藥用價值極高，除具有較好的 防癌抗癌作用，還具有抗菌、保健皮膚以及增加冠狀動脈血流量等 生物活性。北沙參主要含香豆素類和糖類等化學(xué)成分。本試驗選擇 珊瑚菜作為研究對象，主要采取了萃取、硅膠柱層析、凝膠過濾、 薄層層析、結(jié)晶和重結(jié)晶、高效液相色譜等多種分離提取技術(shù)。 本實驗選擇山東萊陽北沙參作為研究對象進(jìn)行活性物質(zhì)的提取、 分離和結(jié)構(gòu)鑒定，期望從中能夠發(fā)現(xiàn)新的有活性的化合物。 設(shè)計(

5、論文) 要 求 學(xué)生應(yīng)具備相關(guān)課程扎實的理論知識。按照畢業(yè)設(shè)計任務(wù)書要 求的進(jìn)度，按時完成各項工作。提交查閱的所有文獻(xiàn)資料及目錄； 提交開題報告（含文獻(xiàn)綜述）1 份、外文資料翻譯（原文及譯文）1 份；提交完整的實驗記錄（包括圖表、數(shù)據(jù)）；提交撰寫的畢業(yè)設(shè) 計材料。 大適中小難一般易課題預(yù)計 工作量大小 課題預(yù)計 難易程度 所在專業(yè)審定意見： 同意 負(fù)責(zé)人(簽名)： 宋麗霞 2011 年 8 月 12 日 注：本課題由 尹雪梅 同學(xué)選定，學(xué)號： 16 4 河北科技大學(xué)繼續(xù)教育學(xué)院 畢業(yè)設(shè)計（論文）任務(wù)書 院院 站：站： 河北科技大學(xué)承德函授站 專專 業(yè)：業(yè)： 藥學(xué) 學(xué)學(xué)生生姓姓名名 : : 尹雪

6、梅 學(xué)學(xué) 號號: 16 號 設(shè)計設(shè)計(論文論文)題目題目： 珊瑚菜的化學(xué)成分 及其生物活性研究 起起 迄迄 日日 期期: 2011 年 8 月 12 日-2011 年 11 月 30 日 設(shè)計設(shè)計(論文論文) 地點地點: 承德函授站 指指 導(dǎo)導(dǎo) 教教 師師: 鐘正偉 專專 業(yè)業(yè) 負(fù)負(fù) 責(zé)責(zé) 人人: 宋麗霞 任務(wù)書下達(dá)日期: 2011 年 8 月 12 日 5 畢畢 業(yè)業(yè) 設(shè)設(shè) 計計 ( ( 論論 文文 ) ) 任任 務(wù)務(wù) 書書 1、本畢業(yè)設(shè)計(論文)課題應(yīng)達(dá)到的目的： 通過本課題的研究，使學(xué)生能夠從文獻(xiàn)查閱、綜述的撰寫、外文翻譯、實驗方法的 確定、實驗研究的進(jìn)行，直到畢業(yè)論文的整理完成，得到綜

7、合的訓(xùn)練，初步掌握科學(xué)研 究的基本方法，具備基本的科研素質(zhì)，為以后的工作打下比較扎實的基礎(chǔ)。 2、本畢業(yè)設(shè)計(論文)課題任務(wù)的內(nèi)容和要求(包括原始數(shù)據(jù)、技術(shù)要求、工作要求等)： 本課題任務(wù)的內(nèi)容包括： 1.掌握從原料中提取和分離活性化合物的方法。 2.能對新的有活性的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。 3.在上述研究的基礎(chǔ)上撰寫論文，要求實驗數(shù)據(jù)真實可靠、完整，圖表清晰規(guī)范， 條理清晰，結(jié)論明確可信。 本課題基本要求： 1.學(xué)生應(yīng)具備相關(guān)課程扎實的理論知識和較強(qiáng)的實驗操作能力。 2.遵守實驗室規(guī)章制度，遵守學(xué)校紀(jì)律，不無故缺勤。 3.實驗過程中，應(yīng)按要求規(guī)范操作，認(rèn)真觀察實驗現(xiàn)象，如實做好實驗記錄，勤分 析

8、、多思考，隨時解決實驗中出現(xiàn)的問題。 4.節(jié)約水、電、試劑，愛護(hù)儀器設(shè)備。 5.按照本任務(wù)書要求的進(jìn)度，按時完成各項工作 6 畢畢 業(yè)業(yè) 設(shè)設(shè) 計計 ( ( 論論 文文 ) ) 任任 務(wù)務(wù) 書書 3、對本畢業(yè)設(shè)計(論文)課題成果的要求(包括畢業(yè)設(shè)計論文、圖表、實物樣品等)： 1.提交查閱的所有文獻(xiàn)資料及目錄； 2.提交開題報告（含文獻(xiàn)綜述）1 份、外文資料翻譯（原文及譯文）1 份； 3.提交完整的實驗記錄（包括圖表、數(shù)據(jù)）； 4.提交撰寫的畢業(yè)設(shè)計材料 4、主要參考文獻(xiàn)： 1喬勇進(jìn),房用珍貴的沙生藥用植物北沙參植物雜志，2006 年第 01 期，21 2余椿生北沙參食品與藥品2005 年第 7

9、 卷第 4 A 期，4344 3李寶國,石俊英HPLC法同時測定北沙參不同部位中3種香豆素的含量山東中 醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2005年第29卷第5期，383385 4清吳瑭溫病條辨，卷一 5林喆,趙亞,原中北沙參的化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展中國中醫(yī)藥信息雜 志，2007 年 7 月第 14 卷第 7 期，9192 6 Tan, R. X.; Zou, W. X. Nat. Prod. Rep.2001, 448. 7 Ma, Y. M., Li, Y., Liu, J. Y., Song, Y. C,Tan, R. X. Fitoterapia 2004, 75, 451. 8 Gunatilaka

10、, A. A. L. J. Nat.Prod. 2006, 509. 9明李時珍本草綱目，第五十二卷 10 李寶國,石俊英近十年來北沙參的研究概況時珍國醫(yī)國藥，2002 年第 13 卷 第 5 期，309310. 7 畢畢 業(yè)業(yè) 設(shè)設(shè) 計計 ( ( 論論 文文 ) ) 任任 務(wù)務(wù) 書書 5、本畢業(yè)設(shè)計(論文)課題工作進(jìn)度計劃： 起 迄 日 期工 作 內(nèi) 容 2011 年 8 月 12 日9 月 2 日 9 月 3 日9 月 13 日 9 月 14 日10 月 24 日 10 月 25 日11 月 30 日 11 月 30 日 確定課題，查閱文獻(xiàn)，撰寫文獻(xiàn)綜述，進(jìn)行外文翻譯 確定實驗研究方法 開

11、展實驗 整理數(shù)據(jù)，撰寫論文 準(zhǔn)備論文答辯 所在專業(yè)審查意見： 同意 負(fù)責(zé)人： 宋麗霞 2011 年 8 月 15 日 學(xué)院、站意見： 同意 主管院、站長： 王永良 2011 年 8 月 15 日 8 河河北北科科技技大大學(xué)學(xué)繼繼續(xù)續(xù)教教育育學(xué)學(xué)院院 畢業(yè)設(shè)計(論文)開題報告 題題 目：目： 珊瑚菜的化學(xué)成分 及其生物活性研究 學(xué)生姓名：學(xué)生姓名： 尹雪梅 學(xué)學(xué) 號：號： 16 專專 業(yè)：業(yè)： 藥學(xué) 指導(dǎo)教師：指導(dǎo)教師： 夏萬東 2011 年 11 月 15 日 9 畢畢 業(yè)業(yè) 設(shè)設(shè) 計計 ( 論論 文文 ) 開開 題題 報報 告告 1結(jié)合畢業(yè)設(shè)計（論文）課題情況，根據(jù)所查閱的文獻(xiàn)資料，每人撰寫

12、 2000 字左右的文獻(xiàn)綜述： 珊瑚菜又名北沙參，其根入藥，具有養(yǎng)陰潤肺，益胃生津的功效，現(xiàn)狀漸危。北 沙參的營養(yǎng)價值和藥用價值極高，除具有較好的防癌抗癌作用，還具有抗菌、保健皮 膚以及增加冠狀動脈血流量等生物活性。北沙參主要含香豆素類和糖類等化學(xué)成分。 一、北沙參的形態(tài)特征 北沙參為多年生草本，植株低矮，高 5-25 厘米。其根為直根系植物，主根細(xì)長， 扎根深，可達(dá) 40 厘米以上，在主根上著生細(xì)小須根1，其主根和側(cè)根區(qū)分十分明顯， 圓主開長可達(dá) 70 多厘米。葉密集，基生葉具柄，葉柄長約 10 厘米，基聞寬鞘狀；葉 片輪廊呈卵形或?qū)捜菭盥研危L 5-12 厘米，三出式分或 2 回羽狀分裂

13、，裂葉質(zhì)厚， 卵圓鈍或漸尖，邊緣有粗鋸齒，上面有光澤 。復(fù)傘形花序頂生，總梗長 4-10 厘米， 密生白色或灰褐色絨毛；無總苞；傘輻 10-14，不等長；小總苞片 8-12 枚，線狀披針 形；花白色；萼齒 5，細(xì)?。换ò?5，卵狀披針形，先端內(nèi)折；雄蕊 5，與花瓣互生， 花藥帶紫褐色；花柱基扁圓錐形，花柱短。果實為雙懸果，呈圓球形或橢圓形，密被 棕色刺狀軟毛，具木栓化果棱，5 棱，翅狀，有棕色毛。北沙參的種子細(xì)小，早扁圓狀， 一般千粒重 24.5 克左右。種子壽命較短，只有 1 年，貯藏保管好，可延至 2 年，但發(fā) 芽能力降低，種子還具有低溫后熟的特性。 二、北沙參的分布以及生存現(xiàn)狀 近年來，

14、隨著城市和港口建設(shè)，需要大量用沙，因而生長珊瑚菜的水灘常被挖掘， 生長環(huán)境遭到破壞，影響繁殖生長；加上藥農(nóng)連年挖根，因此資源逐漸減少，分布面 積越來越窄。珊瑚菜主要分布于亞洲東部沿海的海灣沙岸上，我國主要分布于沿海地 區(qū)，尤以海濱沙灘上分布甚廣，比如：遼東半島大連、金縣、長海、新金、復(fù)縣、莊 河、蓋縣、錦西、興城、緩中，河北北戴河，山東半島威海、牟平、菜西、嶗山，江 蘇北部連云港，浙江東南部舟山島、環(huán)壞、瑞安，福建東部連江、馬尾、長樂、海南 10 文昌、萬寧和臺灣淡水、新竹、彰化等地的海濱沙灘。日本、朝鮮、蘇聯(lián)也有分布。 珊瑚菜喜溫暖濕潤，主根深入沙層，能抗寒，耐干埋；適宜在平坦的沿海沙灘或排

15、水 良好的沙土和沙質(zhì)土壤中生長，對肥力的要求不嚴(yán)，忌粘土和積水洼池，抗堿性強(qiáng)， 常和大海鉆苔草、砂引草、葡工匐苦賣菜等植物混生，在沙灘上形成海濱植物群落。 三、北沙參的藥理作用 北沙參果實含有珊瑚菜素、脂肪油，主要脂肪酸有傘形花子油酸、棕擱酸、大量 亞油酸及微量異傘形花子油酸，鮮果實含歐前胡素和佛手柑內(nèi)酯，溫室生長的植株含 有佛手柑內(nèi)酯、歐前胡素等2 3。它的營養(yǎng)價值和藥用價值極高，自古以來就作為一種 重要的中藥材而廣為應(yīng)用以及進(jìn)行科學(xué)研究。 (1)治肺熱咳嗽 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明，沙參麥冬湯4治療慢性咽炎、燥咳、肺結(jié)核、小 兒遷移性肺炎、小兒咳喘等病癥均有較好的作用。 (2)調(diào)節(jié)免疫功能 臨床研

16、究表明，沙參麥冬湯治療陰虛癥黃疽、沙參消渴方治療兩虛 型搪尿病等有較好療效5。 (3)抗癌、抗突變及抗腫瘤作用 北沙參的正己烷、乙醚和乙酸乙酯提取物，均能夠抑 制佛波酯引起的無機(jī)磷滲入 HeLa 細(xì)胞的磷酯中，并且證明，在體內(nèi)具有抗癌作用67 8。北沙參的水或乙醇浸出液對三種致突變劑誘導(dǎo)的突變株回復(fù)突變有良好的抑制效果， 表明北沙參中含有抗突變成分5。 (4)抗真菌作用 采用肉湯稀釋法測定北沙參中所含香豆素及聚炔類的最低抗菌濃度 (MIC)，結(jié)果表明，補(bǔ)骨脂素、佛手柑內(nèi)酯以及花椒毒素等香豆素成分在 400g/mL 濃 度以下無抑菌活性。聚炔類成分 falcarindiol 具有很強(qiáng)的抗格蘭氏陽

17、性菌的活性 (MIC：2.525.0 g/mL)；而另兩種聚炔類成分(9Z)-十七碳-1，9-二烯-4，6-二炔- 3，8，11-三醇和(10E)-十七碳-1，10-二烯-4，6-二炔-3，8，9-三醇的抑菌活性很弱 (MIC：200400g/mg)1。 (5)解毒 杏葉沙參解百藥毒、止痛、治蛇蟲咬，療瘡腫毒等，臨床用于治癤癰9。 畢畢 業(yè)業(yè) 設(shè)設(shè) 計計 ( 論論 文文 ) 開開 題題 報報 告告 (6)鎮(zhèn)痛和鎮(zhèn)靜作用 近年來，奧山等研究了產(chǎn)于日本的北沙參的鎮(zhèn)痛和鎮(zhèn)靜作用，結(jié) 果表明北沙參的甲醇提取物經(jīng)口服給藥，能夠延長戊巴比妥誘導(dǎo)的睡眠時間。進(jìn)一步 11 研究表明，其中的聚炔類成分，以及香豆

18、素類化合物，具有顯著的鎮(zhèn)痛作用5。 12 畢畢 業(yè)業(yè) 設(shè)設(shè) 計計 ( ( 論論 文文 ) ) 開開 題題 報報 告告 本課題要研究或解決的問題和擬采用的研究手段及途徑： 北沙參以根條細(xì)長，均勻色白，質(zhì)堅實者為佳。萊陽沙參的優(yōu)良品質(zhì)除當(dāng)?shù)厮?因素外，還與精細(xì)加工有關(guān)。特別是出口沙參，在普通加工的基礎(chǔ)上，再經(jīng)揀、蒸、 搓、刮等特殊工序而成。根條單枝細(xì)長順直，頭尾大小勻順，皮紋細(xì)嫩，長 30cm 以上， 直徑 0.30.4cm，體質(zhì)堅實而脆，色白或淡黃而均勻，約 20 條扎成一小把，商品稱 “萊胡參”（即萊陽胡城產(chǎn)北沙參），或叫“小子沙參” 。本實驗選擇山東萊陽北沙參 作為研究對象進(jìn)行活性物質(zhì)的提

19、取、分離和結(jié)構(gòu)鑒定，期望從中能夠發(fā)現(xiàn)新的有活性 的化合物。 本論文實驗中，先利用 95%的乙醇對珊瑚菜進(jìn)行提取蒸餾，得到珊瑚菜浸膏。再 利用石油醚和乙酸乙酯萃取出該浸膏的有機(jī)相部分。運用硅膠柱層析、凝膠過濾層析、 薄層層析、結(jié)晶和重結(jié)晶等方法對其進(jìn)行化學(xué)成分的分離提取和純化，并利用波譜學(xué) 方法，主要是氫譜、碳譜等波譜技術(shù)對得到的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。最終從樣品中共 分離得到了兩個不同的化合物，其中一個化合物鑒定為豆甾醇，一個化合物鑒定為香 檸檬內(nèi)酯。 13 河北科技大學(xué)繼續(xù)教育學(xué)院 畢業(yè)設(shè)計 (論文)外文資料翻譯 院院 站：站： 河北科技大學(xué)承德函授站 專專 業(yè)：業(yè)： 藥學(xué) 姓姓 名：名： 尹雪

20、梅 學(xué)學(xué) 號：號： 16 號 外文出處：外文出處： J. Nat. Prod. 1996, 59, 47-48 附附 件：件：1.外文資料翻譯譯文；2.外文原文。 指導(dǎo)教師評語： 能較好完成規(guī)定的外文翻譯，翻譯較為準(zhǔn)確。 簽名：簽名： 夏萬東夏萬東 2011年年 8 月月 25 日日 (用外文寫) 14 附件附件 1：外文：外文資資料翻料翻譯譯譯譯文文 一個從擬盤多毛孢屬菌分離出的新的達(dá)瑪烷性化合物 摘要 一個新的倍半萜 2a-hydroxydimeninol，作為最終的代謝產(chǎn)物從我們培養(yǎng)的一種真 菌中分離了出來，它的結(jié)構(gòu)是由波譜和 X -射線晶體衍射分析來確定的。這種真菌屬于 擬盤多毛孢菌屬

21、，它是一類寄生在紅豆杉中的真菌。 一、引言 研究發(fā)現(xiàn)紫杉酚和紫杉醇類化合物是由一種太平洋紫杉樹的內(nèi)生真菌1代謝而產(chǎn)生 的。而對于這些紅豆杉屬植物的內(nèi)生真菌產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物人們已經(jīng)進(jìn)行了非常系統(tǒng)的 研究。我們最近研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)把從矮葉紅豆杉的樹皮和葉子中分離得到的兩個擬盤多 毛孢屬的菌株培養(yǎng)在改良的 S7 培養(yǎng)基上時，它們能產(chǎn)生很多種化合物。這些化合物是 通過將培養(yǎng)基粗提物進(jìn)行硅膠柱層析，并用氯仿-甲醇 (95:5)的溶劑系統(tǒng)進(jìn)行洗脫來分 離得到的。結(jié)合波譜和 X-射線晶體衍射進(jìn)行鑒定，這些代謝產(chǎn)物中，有一些化合物是 一類新型的丁香烯環(huán)型倍半萜2類化合物。然而這其中的大部分極性化合物，卻屬于一 類新

22、的達(dá)瑪烷型倍半萜的衍生物，它們也正是本篇論文所研究的主題。 O HO HO H 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1112 1314 15 化合物 1 化合物 1（2-hydroxydimeninol）： 化合物 1 在進(jìn)行薄層層析時，當(dāng)用香草醛-硫酸顯色時，檢測到的化合物 1 為一個 紫紅色的斑點。它首先是以黃色油狀物的形態(tài)而被分離得到的，通過在水-乙醇中進(jìn)行 重結(jié)晶，可以獲得便于 X 射線分析（1.25mg/L）的無色針狀結(jié)晶（mp74） 。從 m/z 235 中損失的 18 個質(zhì)量單位（H2O）是快原子轟擊質(zhì)譜法中顯示的唯一的一個有意義 的峰。紅外光譜（KBr）中 3496, 3

23、406,3243cm-1處的譜線同樣也暗示著羥基官能團(tuán)的存 在。 通過對碳譜和質(zhì)譜分析，發(fā)現(xiàn)該化合物中含有三個甲基，四個亞甲基，五個次甲 15 基和三個季碳。其中一個季碳和一個次甲基碳同屬于一個烯族體系。而 CH2O, CHO,CHO2中的每一個基團(tuán)都可以在核磁共振光譜產(chǎn)生的普通中中輕而易舉的找到。 從化合物 1（2-hydroxydrimeninol）晶胞中的單個分子經(jīng)電腦分析后生成的透視圖 中可以看出，化合物 2-hydroxydrimeninol 中不涉及有絕對構(gòu)型。 高分辨率質(zhì)譜在相對原子質(zhì)量為234.1619處有一個突出的峰，顯示分子式為 C15H22O2（計算為234.1620）

24、。同時它也與快原子轟擊質(zhì)譜法中顯示的荷質(zhì)比為235中損 失的那18個質(zhì)量單位（H2O）的那個唯一有意義的峰相吻合。因為在核磁共振光譜檢測 的譜圖上只表明有一個明顯的雙鍵，所以只有當(dāng)這個分子是四環(huán)化合物時才符合該分 子式?？山柚赑FG-HMQC3， PFG-HMBC4，和PFG-DQFCOSY5核磁共振光譜對 其進(jìn)行結(jié)構(gòu)骨架的重建。然而含有兩個氧的分子式不可能是正確的，因為在C-2和C-11 之間不可能存在氧橋結(jié)構(gòu)。此外，如果這個結(jié)構(gòu)式中含有兩個氧那就意味著這個分子 中不會有羥基的存在，但是在紅外光譜（KBr）3496，3406，3243cm-1處所產(chǎn)生的譜圖 中暗示著羥基官能團(tuán)的存在。因此，

25、該化合物真正的分子是應(yīng)該是C15H24O3，而那個荷 質(zhì)比為235的點是由損失的水引起的。 這個含有三個氧的分子式以及它的結(jié)構(gòu)都可以通過X-射線晶體衍射很清晰的展現(xiàn) 出來（如圖所示） 。但是最初的分析是很難確定的，因為一個不對稱晶胞中包含有化合 物1和兩個結(jié)晶水，而且最終的結(jié)構(gòu)完美的聚合了。這三個分子的結(jié)構(gòu)和構(gòu)象在不對稱 晶胞中是相同的，通過NOE差異光譜實驗檢測出它們在固態(tài)中和在液態(tài)中的構(gòu)象是一 致的。 我們將化合物1命名為2-hydroxydrimeninol。達(dá)瑪烷型倍半烯萜類化合物存在于植 物6，真菌7甚至海綿動物8中。盡管很多文獻(xiàn)上報道isodrimeninols未被取代，C-2，C

26、- 3雙取代以及C-3單取代，但這是第一次報道達(dá)瑪烷型化合物只在C-2上有取代基。經(jīng)未 被取代的化合物的微生物氧化實驗證明：如果一個化合物有2-OH官能團(tuán)和2- hydroxypolygodial基團(tuán)就說明它具有潛在的抗癌活性9。在達(dá)瑪烷型化合物中，比如說 polygodial 和waburganal 是人們眾所周知的化合物。它們不但具有feeding-deterrent的 性能而且在它們的第八位和第九位上還有與芳香族二醛等同的化學(xué)活性的取代基，它 可以掩蓋monoaldehyde alcohol的化學(xué)活性。而化合物1就具有與上述兩種達(dá)瑪烷性化合 物的這一功能類似的功能，或著說化合物1就可以做

27、為一個先導(dǎo)化合物。 二、實驗研究: 一般實驗流程： 在JEOLJNM-中的600MHz處記載著1H NMR和所有的二維NMR光譜，而 BrukerAC-300 在 75.5 MHz處則記載著13C-NMR光譜。幾乎所有的FABMS和HMRS的 測量值都建立在JEOL JMS-AX505WA質(zhì)譜儀上，然而紅外光譜是用Nicolet Impact 400 來進(jìn)行測量的。微米級熔點環(huán)境監(jiān)測儀被用來測定該化合物的熔點，JASCO DIP-370數(shù) 16 字旋光計用于測定該化合物的旋光度。我們用Merck公司生產(chǎn)的20厘米長，0.25毫米厚 的硅膠60F254薄層色譜板測定TCL比移值，采用氯仿-甲醇（

28、96：4）系統(tǒng)作為洗脫劑進(jìn) 行洗脫，最后該化合物可以在香草醛和硫酸（5%w/v）的甲醇溶液中溶解并且可以對 其進(jìn)行直觀的分析。 2.1真菌材料: 實驗的真菌是從生長于波茲曼和蒙大拿的矮葉紅豆杉的樹皮中得到的。這些真菌 材料是從培養(yǎng)著幾片葉子的培養(yǎng)基上經(jīng)幾次轉(zhuǎn)移的菌絲體中挑選出來的。這些真菌屬 于擬盤多毛孢屬。小的瓊脂培養(yǎng)基被轉(zhuǎn)移到包括以下成分的液體培養(yǎng)基中：1毫克生物 素，1毫克硫胺素，1毫克鈣補(bǔ)充劑，1毫克pyrodoxin，3.6毫克MgSO4，6.5毫克Ca(NO) 2，1毫克Cu(NO)2，2.5毫克ZnSO4，5毫克MnCl2，2毫克FeCl3，5毫克苯基丙氨酸，100 毫克苯甲酸鈉

29、鹽，1克葡萄糖，3克果糖，6克蔗糖，1克醋酸鈉，1克 (Bacto) Soytone以 及1毫升每公升1摩爾的KH2PO4，是該液體培養(yǎng)基在26的條件下培養(yǎng)46天，即可。 2.2提取與分離: 培養(yǎng)劑是經(jīng)棉花過濾后的液體培養(yǎng)基中的液體（4L） ，該液體用CHCl2(2L)提取再 用硅膠（23cm）進(jìn)行分離提純并真空濃縮后的質(zhì)量為628毫克。將色譜柱中的極性調(diào) 整為氯仿-甲醇（95：5）后接受洗脫劑的量每瓶約2.5ml。通過對每個小瓶中的液體用 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行旋蒸，發(fā)現(xiàn)有黃色油狀物質(zhì)的存在，經(jīng)過稱量該化合物的質(zhì)量為56毫 克。而該化合物在水-乙醇系統(tǒng)中可出現(xiàn)結(jié)晶現(xiàn)象，最后得到純的化合物為50.05

30、毫克。 2a-Hydroxyisodrimeninol(l).： 比移值0.14。固態(tài)結(jié)晶，熔點74，a22D-18.5(c 0.88, MeOH);紅外max(KBr)3550- 3150,2927,1020cm-1; lH-NMR (CDCl3,TMS,600 MHz)0.86(3H，s，H-15)， 0.94(3H，s，H-14)，0.96 (3H, s, H-13), 1.21 (lH, dd, J = 12.2, 11.8 Hz; H-3a), 1.23 (lH, dd, J = 12.4, 11.8 Hz; H-la), 1.28 (lH,dd,J=11.6,5.1Hz,H-5)

31、1.81 (lH, ddd, J = 12.2, 3.9, 2.5 Hz; H-3), 1.89 (lH, dd, J = 16.5, 11.6 Hz; H-6), 2.13 (lH, ddd, J = 12.4, 3.9, 2.5 Hz; H-1), 2.14 (lH, br. d, J = 16.5 Hz, H-6a), 2.29 (lH, br. s, H-9) 3.90 (lH, dddd, J = 11.8, 11.8, 3.9, 3.9 Hz; H-2), 4.17 (lH, d, J =5.7 Hz, H-12a), 4.48 (lH, d, J = 5.7 Hz, H-l2b)

32、, 5.28 (lH, d, J = 2.4 Hz, H-11), 5.51 (lH, br. s, H-7); 13C-NMR(CDCl3, TMS, 300 MHz) 14.9 (q, C-15), 22.4 (q, C- 14), 23.5 (t, C-6), 33.1 (q, C-13), 34.5 (s, C-4), 35.0 (s, C-10), 48.6 (t, C-1), 49.1 (d, C-5), 51.1 (t, C-3), 61.1 (d, C-9), 64.5 (d, C-2), 68.6 (t, C12) 99.0 (d, C-11), 117.1 (s, C-8)

33、, 136.2 (d, C-7); HREIMS m/z234.1619 (calcd for C15H22O2: 234.1620); FABMS (glycerol matrix)m/z 235 (M+H+ -18, 217, 93. 2.3X-射線晶體衍射分析10： 化合物1的具體結(jié)構(gòu)是用單晶X-射線晶體來鑒定的?；衔?的晶體類型屬于斜方 17 晶體系，它的各種數(shù)值為： P212121(Z=4),=10.275(2),b=16.021-(3),=26.656(5),V=4388(2)3, 化合物1結(jié)構(gòu)的測 定應(yīng)用了的是目前最直接最簡單的方法。在X-射線晶體衍射中通過full-matri

34、x least- squares 的方法在2,354處(I 2a- (I)進(jìn)行測定，測定的結(jié)果是氫原子沒有非單折射性， 而且氫原子的單折射性位置與計算的結(jié)果相同。最后得到的結(jié)果中R因子是4.9%，用于 反應(yīng)的質(zhì)量以SHELEX93為標(biāo)準(zhǔn)計算。 2.4致謝: 這項研究工作是在康奈爾NIHCA24487的大力支持下完成的再此表示誠摯的感謝！ 2.5所提供的信息支持: 晶體學(xué)數(shù)據(jù)，原子坐標(biāo)，化何物1的鍵長和鍵角，以及參考的現(xiàn)行的和正準(zhǔn)備發(fā)行 的資料。 參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn) 1 Stierle, A. ; Strobel, G.; Stierle, D. Science 1993, 260, 214. 2

35、 Pulici, M.; Sugawara, F.; Koshino, H.; Uzawa, J.; Yoshida, S.; Lobkovsky, E.; Clardy, J. submitted 3 Hurd, R. E.; John, B. K. J. Magn. Reson. 1991, 91, 648. 4 Wilker, W.; Leibfritz, D.; Kerssebaum, R.; Bermel, W. Magn. Reson. Chem. 1993, 31, 2 87. 5 Hurd, R. E. J. Magn. Reson. 1990, 87, 422. 6 Jaco

36、bsson, U.; Muddathir, K. Phytochemistry 1992, 31, 4207. 7 Ayer, W. A,; Craw, P. A. Can. J. Chem. 1989, 67, 1371. 8 Butler. M. S.; Capon, R. J. Aust. J. Chem. 1993.46. 1255. 9 Tozyo,T. ;Yasuda, F.; Nakai, H.; Tada, H. J . Chem. Soc. Perkin Trans. 1 1992, 1859. 10 Atomic coordinates, thermal parameter

37、s, bond distances and angles, and observed and calculated structure factors have been deposited with the Cambridge Crystallographic Data Centre and can be obtained upon request from Dr. Olga Kennard, University Chemical Laboratory, 12 Union Road, Cambridge CB2 l EZ, UK. 18 附件附件2：外文原文：外文原文 19 河北科技大學(xué)繼

38、續(xù)教育學(xué)院 學(xué)生畢業(yè)設(shè)計（論文）中期檢查表 學(xué)生姓名尹雪梅學(xué) 號 16 指導(dǎo)教師夏萬東 課題名稱珊瑚菜的化學(xué)成分及其生物活性研究 難易程度偏難適中 偏易 選題情況 工作量較大合理 較小 任務(wù)書有 無 開題報告有 無 符合規(guī)范化 的要求 外文翻譯 質(zhì)量 優(yōu)良 中差 學(xué)習(xí)態(tài)度、 出勤情況 好 一般差 工作進(jìn)度快按計劃進(jìn)行 慢 中期工作匯 報及解答問 題情況 優(yōu) 良中差 中期成績評定：良 所在專業(yè)意見： 同意 負(fù)責(zé)人： 宋麗霞 2011 年 10 月 15 日 20 河北科技大學(xué)繼續(xù)教育學(xué)院河北科技大學(xué)繼續(xù)教育學(xué)院 畢畢 業(yè)業(yè) 論論 文文 學(xué)生姓名： 尹雪梅 學(xué) 號： 16 號 院 站： 河北科技大

39、學(xué)承德函授站 專 業(yè)： 藥學(xué) 題 目： 珊瑚菜的化學(xué)成分 及其生物活性研究 指導(dǎo)教師： 夏萬東 評閱教師： 鐘正偉 2011 年 11 月 30 日 21 畢業(yè)設(shè)計（論文）成績評定表 姓 名尹雪梅學(xué) 號 16 成 績 82 專 業(yè)藥學(xué) 題 目珊瑚菜的化學(xué)成分及其生物活性研究 指導(dǎo)教師評語及成績 文章結(jié)構(gòu)比較合理，條理清晰，有一定的邏輯性，體例格式較為規(guī)范， 語言流暢、表達(dá)清楚。該論文內(nèi)容較為全面、具體，評述得當(dāng)，有一定的 實用性。具有一定的藥學(xué)理論基礎(chǔ)和專門知識。但作者自己的觀點不夠明 確，文中個別地方文字和標(biāo)點的使用尚缺規(guī)范。 指導(dǎo)教師：夏萬東 2011 年 12 月 10 日 評閱教師評語

40、及成績 論文結(jié)構(gòu)合理，文章層次分明，語言較為流暢、準(zhǔn)確，圖表清晰、正 確、比較規(guī)范，達(dá)到畢業(yè)論文規(guī)范化要求。 評閱教師：鐘正偉 2011 年 12 月 10 日 答辯小組評語及成 績 該生態(tài)度端正、尊重老師，能比較流利、清晰地闡述論文的主要內(nèi)容， 能較恰當(dāng)?shù)鼗卮鹋c論文有關(guān)的問題。 答辯小組組長：夏萬東 2011 年 12 月 10 日 答辯委員會意見 同意 學(xué)院答辯委員會主任：王永良 2011 年 12 月 10 日 注：該表一試兩份，一份歸檔，一份裝入學(xué)生畢業(yè)設(shè)計說明書（論文）中。 22 畢畢 業(yè)業(yè) 論論 文文 中中 文文 摘摘 要要 北沙參為傘形科瀕危植物珊瑚菜（Glehnia litto

41、ralis）的干燥根。它不但 具有極高的營養(yǎng)價值和藥用價值，還具有較好的防癌抗癌作用。北沙參主要含香 豆素類和糖類化學(xué)成分，其他還有揮發(fā)油、生物堿、磷脂、氨基酸、微量元素及 佛手柑內(nèi)酯等。本實驗選擇山東萊陽北沙參作為研究對象進(jìn)行活性物質(zhì)的提取、 分離和結(jié)構(gòu)鑒定，期望從中能夠發(fā)現(xiàn)新的有活性的化合物。 本論文實驗對其 95%的乙醇浸膏的石油醚和乙酸乙酯萃取出的有機(jī)相部分運 用硅膠柱層析、凝膠過濾除雜、薄層層析分離、結(jié)晶和重結(jié)晶等方法進(jìn)行化學(xué)成 分的分離提取和純化,并利用波譜學(xué)方法對其進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，最終從樣品中共分離 了 2 個不同的化合物。 關(guān)鍵詞 北沙參 分離提取 層析 波譜技術(shù) 豆甾醇 香檸檬

42、內(nèi)酯 23 畢畢 業(yè)業(yè) 論論 文文 外外 文文 摘摘 要要 TitleTitle The chemical composition of coral food and Biological Activities AbstractAbstract North Shashen for the Umbelliferae endangered species of Glehnia littoralis the dry root. North Shashen the nutritional value and medicinal value very high. It has a better anti

43、-cancer anticancer effect. North Shashen major categories of coumarin and carbohydrate chemical composition, there are other essential oil, alkaloids, phospholipids, amino acids, and trace elements such as bergamot glycosides lactone. We use the Laiyang Glehnia littoralis is the object of this exper

44、iment. We expect to discover the new activity leads from Glehnia littoralis . We use 95% ethanol/water liquid to get the extraction from Glehnia littoralis. Then many kinds of technologies which are often used in Phytochemistry are used to get pure compound，such as: silicagel column chromatography,

45、gelfiltration, TLC, crystallization and recrystallization. Some methods of mass spectroscopy are used to make sure the structure of these compounds.Infrared ray and Ultraviolet radiation.2 different compounds are isolated from Glehnia littoralis. Key words Glehnia littoralis extract chromatography s

46、pectra stigmasterol bergapten 24 畢畢 業(yè)業(yè) 論論 文文 第 1 頁 共 1 頁 目 錄 1 前言 .1 1.1 生物學(xué)特性.1 1.2 藥材性狀.1 1.3 藥理作用和臨床應(yīng)用.1 2 實驗部分 .3 2.1 實驗材料與方法.3 2.1.1 實驗材料.3 實驗樣品.3 試劑.3 顯色劑.3 儀器及設(shè)備.3 2.1.2 實驗方法.3 硅膠柱層層析.3 凝膠過濾層析.4 薄層層析.4 重結(jié)晶.4 2.1.3 實驗過程.4

47、拌樣.4 裝柱.4 洗脫.4 化合物結(jié)構(gòu)鑒定.5 2.2 實驗結(jié)果與討論.6 2.2.1 實驗結(jié)果.6 化合物 1 .6 化合物 2 .6 2.2.2 總結(jié).7 結(jié) 論 .8 致 謝 .9 參考文獻(xiàn) .10 25 26 畢畢 業(yè)業(yè) 論論 文文 第 1 頁 共 10 頁 1 1 引言引言 1.11.1 生物學(xué)特性生物學(xué)特性 北沙參植株低矮，高度在 20-30 厘米之間，葉密集，基生，成卵形或?qū)捜切温?形，三出式羽狀分裂或 2-3 回羽狀深裂，鞘狀長葉柄紅紫色，莖上部葉片卵形，葉邊 緣具三角形圓鋸齒，葉表面濃綠，有光

48、澤，略帶革質(zhì)，葉背面分布明顯掌狀葉脈，色 淡，生有灰褐絨毛。北沙參為復(fù)傘形花序，生長于植株頂端，花小白色。北沙參的果 實為雙懸果，近似球形或橢圓形，密被棕色刺狀軟毛，具木栓化果棱，5 棱，翅狀。北 沙參的種子細(xì)小，早扁圓狀，一般千粒重 24.5 克左右。種子壽命較短，只有 1 年，貯 藏保管好，可延至 2 年，但發(fā)芽能力降低，種子還具有低溫后熟的特性。北沙參為直 根系植物，其主根和側(cè)根區(qū)分十分明顯。主根細(xì)長，扎得深，可達(dá) 40 厘米以上，在主 根上著生細(xì)小須根3。 1.21.2 藥材性狀藥材性狀 北沙參以根條細(xì)長，均勻色白，質(zhì)堅實者為佳。萊陽沙參的優(yōu)良品質(zhì)除當(dāng)?shù)厮?因素外，還與精細(xì)加工有關(guān)。

49、特別是出口沙參，在普通加工的基礎(chǔ)上，再經(jīng)揀、蒸、 搓、刮等特殊工序而成。根條單枝細(xì)長順直，頭尾大小勻順，皮紋細(xì)嫩，長 30cm 以上， 直徑 0.30.4cm，體質(zhì)堅實而脆，色白或淡黃而均勻，約 20 條扎成一小把，商品稱 “萊胡參” (即萊陽胡城產(chǎn)北沙參)，或叫“小子沙參”2 。北沙參果實含有珊瑚菜 素、脂肪油，主要脂肪酸有傘形花子油酸、棕擱酸、大量亞油酸及微量異傘形花子油 酸，鮮果實含歐前胡素和佛手柑內(nèi)酯，溫室生長的植株含有佛手柑內(nèi)酯、歐前胡素等7 8。它的營養(yǎng)價值和藥用價值極高，自古以來就作為一種重要的中藥材而廣為應(yīng)用及 研究。 1.31.3 藥理作用和臨床應(yīng)用藥理作用和臨床應(yīng)用 (1)

50、治肺熱咳嗽 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明，沙參麥冬湯4治療慢性咽炎、燥咳、肺結(jié)核、 小兒遷移性肺炎、小兒咳喘等病癥均有較好的作用。 (2)調(diào)節(jié)免疫功能 臨床研究表明，沙參麥冬湯治療陰虛癥黃疽、沙參消渴方治療 兩虛型搪尿病等有較好療效5。 (3)抗促癌、抗突變及抗腫瘤作用 北沙參的正己烷、乙醚和乙酸乙酯提取物，均 能夠抑制佛波酯引起的無機(jī)磷滲入 HeLa 細(xì)胞的磷酯中，并且證明，在體內(nèi)具有抗促癌 作用。北沙參的水或乙醇浸出液對三種致突變劑誘導(dǎo)的突變株回復(fù)突變有良好的抑制 效果，表明北沙參中含有抗突變成分5。 27 (4)抗真菌作用 采用肉湯稀釋法測定北沙參中所含香豆素及聚炔類的最低抗菌濃度 (MIC),結(jié)果

51、表明,補(bǔ)骨脂素、佛手柑內(nèi)酯以及花椒毒素等香豆素成分在 400g/mL 濃度 28 畢畢 業(yè)業(yè) 論論 文文 第 2 頁 共 10 頁 以下無抑菌活性。聚炔類成分 falcarindiol 具有很強(qiáng)的抗格蘭氏陽性菌的活性 (MIC：2.525.0 g/mL)；而另兩種聚炔類成分(9Z)-十七碳-1,9-二烯-4,6-二炔- 3,8,11-三醇和(10E)-十七碳-1,10-二烯-4, 6-二炔-3,8,9-三醇的抑菌活性很弱 (MIC：200400g/mg)1。 (5)解毒 杏葉沙參解百藥毒、止痛、治蛇蟲咬，療瘡腫毒等，臨床用于治癤癰6。 (6)鎮(zhèn)痛和鎮(zhèn)靜作用 近年來，奧山等研究了產(chǎn)于日本的北沙參

52、的鎮(zhèn)痛和鎮(zhèn)靜作用,結(jié) 果表明北沙參的甲醇提取物經(jīng)口服給藥，能夠延長戊巴比妥誘導(dǎo)的睡眠時間。進(jìn)一步 研究表明，其中的聚炔類成分，以及香豆素類化合物，具有顯著的鎮(zhèn)痛作用5。 29 畢畢 業(yè)業(yè) 論論 文文 第 3 頁 共 10 頁 2 2 實驗部分實驗部分 2.12.1 實驗材料與方法實驗材料與方法 2.1.1 實驗材料 實驗樣品 北沙參（Glehnia littoralis），采集于山東萊陽。 試劑 石油醚、乙酸乙酯、丙酮、無水乙醇、香草醛、濃硫酸、蒸餾水、甲醇、氯仿、 無水硫酸鈉等。 顯色劑 香草醛顯色劑：2.5g 香蘭素（香草醛） 、100ml

53、蒸餾水、40ml 濃硫酸、50ml 無 水乙醇。 硫酸顯色劑：95%硫酸和無水乙醇 （25:475） 。 碘顯色劑：碘與硅膠 1:1 混合。 儀器及設(shè)備 高效液相色譜儀、BUCHI R-210 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、水浴鍋 B-491、真空泵 V-700、薄層 層析硅膠板、GF254 自制硅膠板、Sephadex Lh-60 凝膠、飛利浦電吹風(fēng)機(jī)、電子萬用 爐、電子天平、TN 型托盤式扭力天平（100g,0.01g） 、ZF7 三用紫外分析儀、Bruker AM-400 和 Bruker DRX-500 核磁共振儀、VG Auto Spec-3000 質(zhì)譜儀、手動加壓球、分 液漏斗、玻璃

54、漏斗、錐形瓶、加壓泵、電磁式空氣壓縮機(jī)、鑷子、直尺、玻璃棒、濾 紙、棉花、毛細(xì)管等。 以下為合作實驗室有機(jī)波譜分析儀器：Bio-Rad FTS-135 紅外光譜儀，UV-210 紫 外分光光度計，VG Auto Spec-3000 質(zhì)譜儀，Brucker AM-400 和 DRX-500 核磁共振儀。 2.1.2 實驗方法 在本實驗中我們使用了硅膠柱層析、凝膠過濾層析、制備薄層層析和重結(jié)晶等多 種分離提取的方法。提純化合物后，采用質(zhì)譜、紅外光譜、紫外光譜等波譜技術(shù)來鑒 定這些化合物的結(jié)構(gòu)。 硅膠柱層析 硅膠柱層析其吸附本質(zhì)屬于物理吸附。被分離化合物及溶劑分子與吸附劑表面分 子的

55、分子間力的相互作用所產(chǎn)生。吸附強(qiáng)弱及先后順序都大體遵循“相似者易于吸附” 原理12。被分離的物質(zhì)與吸附劑，洗脫劑共同構(gòu)成吸附層析中的三個要素，彼此緊密 相連。 30 凝膠過濾層析 凝膠過濾層析（Gel filtration chromatography，GFC）是把凝膠粒子（通常稱 為 畢畢 業(yè)業(yè) 論論 文文 第 4 頁 共 10 頁 凝膠過濾介質(zhì)）作為固定相，根據(jù)料液中溶質(zhì)相對分子質(zhì)量的差別進(jìn)行分離的一種液 相層析法，又叫分子篩層析9。 （制備）薄層層析 薄層層析(Thin Layer Chromatography)是將吸附劑、載體或其他活性物質(zhì)均勻涂 鋪在平面

56、板（如玻璃板、金屬片等）上，形成薄層（常用厚度為 0.25 毫米左右）后， 在此薄層上進(jìn)行層析分離的分析方法，薄層層析常用 TLC 表示。此法特別適用于揮發(fā) 性較小或在較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物質(zhì)10。 重結(jié)晶 結(jié)晶（Cystallization）是從液相或氣相生成形狀一定、分子（或原子、離子） 有規(guī)則排列的晶體（Crystal）的現(xiàn)象11。重結(jié)晶（recrystallization）是將晶體 溶于溶劑或熔融以后，又重新從溶液或熔體中結(jié)晶的過程，又稱再結(jié)晶。重結(jié)晶可以 使不純凈的物質(zhì)獲得純化，或使混合在一起的鹽類彼此分離。 2.1.3 實驗過程

57、浸膏的制備 稱量準(zhǔn)備用來盛置浸膏的瓶子的重量，加入浸膏后再稱量總體重量，從而得到樣 品浸膏的重量。 向乙醇浸膏中添加蒸餾水，搖勻，然后加入石油醚或乙酸乙酯進(jìn)行萃取：將混合 液體放置于分液漏斗中，靜置 24 小時，最后得到石油醚/乙酸乙酯部分和水溶性部分。 重復(fù)進(jìn)行一次，合并水溶性部分，置于錐形瓶中，保存于冰箱中。石油醚/乙酸乙酯溶 部分減壓濃縮后即為所要得到的樣品。 拌樣 將樣品與硅膠按重量比 1：1 充分混合，使樣品充分吸附于硅膠上，待溶劑揮發(fā)完 全后準(zhǔn)備上樣。 裝柱 上柱有干法上柱和濕法上柱兩種。本論文實驗中采用的是干法上柱。即把硅膠粉 末直接裝入柱中，輕輕

58、敲打柱子兩側(cè)，至硅膠界面不再下降為止，再填入硅膠至合適 高度，然后用循環(huán)水泵抽一下，同時用橡膠塞子不斷敲打玻璃柱，以使硅膠中的空氣 排除和使硅膠表面平整。裝好柱后，加入洗脫劑將柱子沖洗流實。 上樣 把拌好的樣品通過長直筒加到已經(jīng)裝好的層析柱中，然后將下面的活塞打開。先 用滴管加洗脫劑，當(dāng)樣品層全部潤濕后，再采用傾倒法加入洗脫劑。為避免溶劑夾帶 31 樣品過快下行需等溶劑的上液面和樣品層的上表面之間產(chǎn)生一段距離時再加壓。 洗脫 洗脫劑須根據(jù)被分離物質(zhì)與所用的吸附劑性質(zhì)加以考慮。以硅膠作為吸附劑時常用 32 畢畢 業(yè)業(yè) 論論 文文 第 5 頁 共 10 頁 的混合洗脫劑有：石油醚-乙酸乙酯；石油醚-丙酮；氯仿-乙酸乙酯；氯仿-丙酮； 氯仿-甲醇等等。 化合物的結(jié)構(gòu)鑒定： 通過 1H-NMR，13C-NMR 等方法確定該化合物的結(jié)構(gòu)。 北沙參分離提取流程如圖 2-1 圖2-1北沙參分離提取流程圖 組分1組分2 北沙參95%乙醇提取物（浸膏） 有機(jī)溶劑部分 水部分 有機(jī)溶劑萃取 硅膠柱層析 洗脫劑： （石油醚/乙酸乙酯） 反復(fù)使用各種柱層析制備薄層 單體化合物 確定結(jié)構(gòu) 有機(jī)波譜技術(shù) 33 畢畢 業(yè)業(yè) 論論 文文 第 6 頁 共 10 頁 2.22.2 實驗實驗結(jié)果與討論結(jié)果與討論 2.2.1 實驗結(jié)果 化合物 1