動物生理學(xué)實驗二魚類采血技術(shù)與血細(xì)胞生理

1、實驗二實驗二 魚類采血技術(shù)與血細(xì)胞生理魚類采血技術(shù)與血細(xì)胞生理 血液：血液：是一種由血漿和血細(xì)胞組成的流體組織，由心臟 搏動推動在心血管系統(tǒng)中不斷循環(huán)流動，具有運(yùn)輸、防御和運(yùn)輸、防御和 免疫免疫、維持內(nèi)環(huán)境的相對穩(wěn)定維持內(nèi)環(huán)境的相對穩(wěn)定和參與體液調(diào)節(jié)參與體液調(diào)節(jié)等多種功能。 血液組成血液組成 紅細(xì)胞脆性與溶血脆性與溶血：紅細(xì)胞具有選擇透過性，高滲：紅細(xì)胞具有選擇透過性，高滲 失水，低滲吸水，低滲條件下或其他原因致使紅細(xì)胞易破失水，低滲吸水，低滲條件下或其他原因致使紅細(xì)胞易破 裂導(dǎo)致血紅蛋白逸出稱裂導(dǎo)致血紅蛋白逸出稱溶血。溶血。 1學(xué)習(xí)魚類采血的主要方法，掌握魚類尾柄動 脈采血技術(shù)； 2了解血液

2、的組成，進(jìn)一步深刻認(rèn)識血漿與血 清的主要區(qū)別。 3觀察紅細(xì)胞在不同濃度生理鹽水中的細(xì)胞形 態(tài)，進(jìn)一步認(rèn)識紅細(xì)胞的滲透脆性。 鯽魚鯽魚 肝素鈉溶液、MS-222溶液，生理鹽水 （1%，0.65%，0.3%）、蒸餾水。 解剖盤1個、毛巾1塊，1 mL注射器5個、 燒杯（200 mL）、1.5 mL 離心管（10個）、 顯微鏡、載破片5片、滴管2支、拭鏡紙。 1 1、血液采集、血液采集 （1）實驗魚的麻醉 將鯽魚先放入MS- 222溶液的桶中，進(jìn)行實驗魚的麻醉，當(dāng)鯽 魚在麻醉劑溶液中緩慢運(yùn)動或在桶中側(cè)翻 時，這時表明麻醉的程度比較適中。 魚類麻醉前后對比示意圖魚類麻醉前后對比示意圖 （2）取血的準(zhǔn)備

3、 將準(zhǔn)備好的1mL注射器 ，一只不作任何處理，一只抽動活塞用肝 素鈉溶液將注射器內(nèi)濕潤，為血液的采集 做好準(zhǔn)備工作。 （3）血液的采集 注射器的針頭從臀鰭 基部下針，將針頭沿著垂直于尾柄的方向 推進(jìn)，使針頭剛好尾部脊柱的下側(cè)，此時 保證針頭的位置不隨意挪動，右手大拇指 和食指帶動活塞向外運(yùn)動，經(jīng)大氣壓力將 血液壓入注射器中。 2 2、血清、血漿的制備血清、血漿的制備 血清的制備 用未經(jīng)肝素鈉溶液處理的 注射器所采集的血樣，注入離心管后讓其 靜止放置20分鐘，待血液凝結(jié)后所析出的上 清液即為血清。 血漿的制備 經(jīng)肝素鈉溶液處理的注 射器所采集的血樣，注入離心管后放置1小 時，或者3000 轉(zhuǎn)/分

4、鐘轉(zhuǎn)速下離心5分鐘， 獲得的上層淡黃色液體即為血漿。 比較血漿和血清兩者存在的區(qū)別。 3 3、紅細(xì)胞的滲透脆性紅細(xì)胞的滲透脆性 等滲觀察 用滴管吸0.65%的生理鹽水 ，吸1mL左右滴入1只新的離心管中，再將 剛采取的新鮮血液（或去纖維蛋白血）用 注射器輕輕推1-2滴到該生理鹽水中，待輕 輕顛倒混勻后，用吸管滴1滴到載玻片上， 放于顯微鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)。 滲透失水 用滴管吸1%的生理鹽水， 吸1mL左右滴入1只新的離心管中，再將剛 采取的新鮮血液（或去纖維蛋白血）用注 射器輕輕推1-2滴到該生理鹽水中，待輕輕 顛倒混勻后，用吸管滴1滴到載玻片上，放 于顯微鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)。 滲透吸水 用滴

5、管吸0.3%的生理鹽水 ，將1mL左右生理鹽水滴入1只新的離心管 中，再將剛采取的新鮮血液（或去纖維蛋 白血）用注射器輕輕推1-2滴到該生理鹽水 中，待輕輕顛倒混勻后，用吸管滴1滴到載 玻片上，放于顯微鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)。 脆性鑒定 再將新鮮血液滴入蒸餾水 中，觀察細(xì)胞的形態(tài)。 1麻醉實驗魚時不要過度麻醉，會對 血液的流動產(chǎn)生一定的影響，最終導(dǎo)致采 血困難。同時，麻醉的時間也不能過短， 否則影響采血操作。 2肝素鈉溶液處理注射器時，一定要 將注射器內(nèi)部全部濕潤，否則仍可能會產(chǎn) 生凝血。 3下針的位置有要準(zhǔn)，一定要刺到脊 柱腹側(cè)，且針頭不能輕易變動位置，不然 血液很難抽出，若出現(xiàn)位置失誤，應(yīng)該重 新再試一次。 4未經(jīng)肝素鈉處理的注射器，抽出的 血液要盡快注入到離心管中，避免血液在 注射器中凝固。 5血液顛倒混勻的過程要輕，不能太 劇烈，否則容易導(dǎo)致溶血。 6離心的速度不能太快，否則易導(dǎo)致 溶血。 1. 描述血漿與血清的主要特點，并說出 他們的主要區(qū)別。 2. 描述不同濃度下紅細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)， 以及形成這種結(jié)果的原因。 3. 描述尾柄動脈采血的過程。 1采出的血液很快