酶工程 化學(xué)修飾PPT學(xué)習(xí)教案

1、會計學(xué)1 酶工程酶工程 化學(xué)修飾化學(xué)修飾 第1頁/共69頁 延長導(dǎo)致生產(chǎn)工藝的技術(shù)革新延長導(dǎo)致生產(chǎn)工藝的技術(shù)革新 和改進。和改進。 第2頁/共69頁 第3頁/共69頁 第4頁/共69頁 第5頁/共69頁 第6頁/共69頁 第7頁/共69頁 第8頁/共69頁 第9頁/共69頁 第10頁/共69頁 第11頁/共69頁 第12頁/共69頁 第13頁/共69頁 第14頁/共69頁 第15頁/共69頁 第16頁/共69頁 第17頁/共69頁 第18頁/共69頁 酶的表面修酶的表面修 飾飾 第19頁/共69頁 第20頁/共69頁 第21頁/共69頁 第22頁/共69頁 第23頁/共69頁 第24頁/共69

2、頁 第25頁/共69頁 第26頁/共69頁 加加H2O 疏水尾部疏水尾部 親水頭部親水頭部 加酶液加酶液 S P E E E 圖：反相膠團的結(jié)構(gòu)和酶的分布圖：反相膠團的結(jié)構(gòu)和酶的分布 第27頁/共69頁 第28頁/共69頁 第29頁/共69頁 第30頁/共69頁 第31頁/共69頁 第32頁/共69頁 第33頁/共69頁 第34頁/共69頁 （三）反應(yīng)體系中酶與修飾（三）反應(yīng)體系中酶與修飾 劑的比例劑的比例 第35頁/共69頁 輔因子等。酶分子的形狀、大輔因子等。酶分子的形狀、大 小以及寡聚酶的亞基組成。小以及寡聚酶的亞基組成。 第36頁/共69頁 第37頁/共69頁 第38頁/共69頁 第3

3、9頁/共69頁 第40頁/共69頁 第41頁/共69頁 第42頁/共69頁 第43頁/共69頁 第44頁/共69頁 第45頁/共69頁 第46頁/共69頁 第47頁/共69頁 第48頁/共69頁 第49頁/共69頁 天然酶和修飾酶的熱穩(wěn)定性比較天然酶和修飾酶的熱穩(wěn)定性比較 酶酶 修飾劑修飾劑 修飾酶修飾酶 天然酶天然酶 處理條件處理條件 (/(/時間時間) ) 殘留酶活殘留酶活(%)(%) 腺苷脫氫酶腺苷脫氫酶 胰蛋白酶胰蛋白酶 過氧化氫酶過氧化氫酶 溶菌酶溶菌酶 尿激酶尿激酶 糜蛋白酶糜蛋白酶 右旋糖苷右旋糖苷 右旋糖苷右旋糖苷 右旋糖苷右旋糖苷 右旋糖苷右旋糖苷 人血清白蛋白人血清白蛋白

4、肝肝 素素 37/100min 37/100min 100/30min 100/30min 50/10min 50/10min 100/30min 100/30min 37/48h 37/48h 37/24h 37/24h 70 70 100 100 46 46 64 64 40 40 90 90 20 20 99 99 80 80 0 0 95 95 50 50 第50頁/共69頁 第51頁/共69頁 天然酶與修飾酶在生物體內(nèi)半衰期的比較天然酶與修飾酶在生物體內(nèi)半衰期的比較 酶酶 修飾劑修飾劑半衰期或酶活殘留率半衰期或酶活殘留率(%)/時間時間 天然酶天然酶修飾酶修飾酶 羧肽酶羧肽酶C 精氨

5、酸酶精氨酸酶 -淀粉酶淀粉酶 谷氨酰胺酶谷氨酰胺酶-天門天門 冬酰胺酶冬酰胺酶 L-天門冬酰胺酶天門冬酰胺酶 尿酸酶尿酸酶 -葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶 超氧化岐化酶超氧化岐化酶 尿激酶尿激酶 氨基己糖苷酶氨基己糖苷酶A 精氨酸酶精氨酸酶 酰苷脫氨酶酰苷脫氨酶 L-天門冬酰胺酶天門冬酰胺酶 過氧化氫酶過氧化氫酶 右旋糖酐右旋糖酐 右旋糖酐右旋糖酐 右旋糖酐右旋糖酐 糖肽糖肽 聚丙氨酸聚丙氨酸 白蛋白白蛋白 白蛋白白蛋白 白蛋白白蛋白 白蛋白白蛋白 PVP PEG PEG PEG PEG PEG 3.5 h 1.4 h 16%/2 h 1 h 3 h 4 h 10 min 6 min 20 min 5

6、 min 1 h 30min 2 h 0%/6 h 18%/3 h 17 h 12 h 75%/2 h 8.2 h 21 h 20 h 3 h 4 h 90 min 35 min 12 h 28 h 24 h 10%/8 h 65%/3 h 第52頁/共69頁 第53頁/共69頁 第54頁/共69頁 第55頁/共69頁 通過化學(xué)修飾后修飾酶的抗原性變化通過化學(xué)修飾后修飾酶的抗原性變化 酶酶 修飾劑修飾劑修飾酶的抗原性變化修飾酶的抗原性變化 胰蛋白酶胰蛋白酶 過氧化氫酶過氧化氫酶 精氨酸酶精氨酸酶 酰苷脫氨酶酰苷脫氨酶 尿酸酶尿酸酶 谷氨酰胺酶谷氨酰胺酶- -天門冬酰胺酶天門冬酰胺酶 超氧化岐化

7、酶超氧化岐化酶 L-L-天門冬酰胺酶天門冬酰胺酶 超氧化岐化酶超氧化岐化酶 L-L-天門冬酰胺酶天門冬酰胺酶 - -葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶 尿酸酶尿酸酶 尿酸氧化酶尿酸氧化酶 核糖核酸酶核糖核酸酶 鏈激酶鏈激酶 胰蛋白酶胰蛋白酶 L-L-天門冬酰胺酶天門冬酰胺酶 PEGPEG PEGPEG PEGPEG PEGPEG PEGPEG PEGPEG PEGPEG PEGPEG 白蛋白白蛋白 白蛋白白蛋白 白蛋白白蛋白 白蛋白白蛋白 PEGPEG 聚聚DL-DL-丙氨酸丙氨酸 PEGPEG 聚聚DL-DL-丙氨酸丙氨酸 聚聚DL-DL-丙氨酸丙氨酸 消除消除 消除消除 消除消除 消除消除 消除消除 消

8、除消除 消除消除 消除消除 消除消除 消除消除 消除消除 消除消除 消除消除 降低降低 消除消除 降低降低 降低降低 第56頁/共69頁 第57頁/共69頁 第58頁/共69頁 第59頁/共69頁 第60頁/共69頁 天然酶與修飾酶的最適天然酶與修飾酶的最適pH 酶酶修飾酶修飾酶天然酶天然酶修飾劑修飾劑 糜蛋白酶糜蛋白酶 豬肝尿酸酶豬肝尿酸酶 吲哚吲哚-3 -鏈烷羥化酶鏈烷羥化酶 豬肝尿酸酶豬肝尿酸酶 產(chǎn)朊假絲酵母尿酸酶產(chǎn)朊假絲酵母尿酸酶 白蛋白白蛋白 PEG PEG 聚丙烯酸聚丙烯酸 肝肝 素素 10.57.4 - 8.5 5.0 - 5.5 9.0 8.8 3.5 8.2 8.2 8.09

9、.0 第61頁/共69頁 第62頁/共69頁 第63頁/共69頁 第64頁/共69頁 天然酶與修飾酶的Km的對比 酶酶 修飾劑修飾劑 Km 天然酶天然酶修飾酶修飾酶 苯丙氨酸解氨酶苯丙氨酸解氨酶 尿酸酶尿酸酶(豬肝豬肝) 產(chǎn)朊假絲酵母尿酸酶產(chǎn)朊假絲酵母尿酸酶 L-天門冬酰胺酶天門冬酰胺酶 尿酸酶尿酸酶 腺苷脫氨酶腺苷脫氨酶 吲哚吲哚-3-鏈烷羥化酶鏈烷羥化酶 吲哚吲哚-3-鏈烷羥化酶鏈烷羥化酶 尿酸氧化酶尿酸氧化酶(豬肝豬肝) 產(chǎn)朊假絲酵母尿酸氧化酶產(chǎn)朊假絲酵母尿酸氧化酶 精氨酸酶精氨酸酶 谷氨酰氨酶谷氨酰氨酶-天門冬酰氨酶天門冬酰氨酶 胰蛋白酶胰蛋白酶 L-天門冬酰氨酶天門冬酰氨酶 PEG

10、PEG PEG 白蛋白白蛋白 白蛋白白蛋白 右旋糖酐右旋糖酐 聚丙烯酸聚丙烯酸 聚順丁烯二酸聚順丁烯二酸 PEG PEG PEG 糖肽糖肽 右旋糖酐右旋糖酐 聚丙氨酸聚丙氨酸 6 10-5 2 10-5 5 10-5 4 10-5 3.5 10-5 3 10-5 2.4 10-6 2.4 10-6 2 10-5 5 10-5 6 10-3 1.2 10-4 7 10-5 5.6 10-5 6.5 10-5 8 10-5 7 10-5 7 10-6 3.4 10-6 6.9 10-5 5.6 10-5 1.2 10-2 不變不變 不變不變 不變不變 第65頁/共69頁 第66頁/共69頁 天然酶和修飾酶抗失活因子能力比較天然酶和修飾酶抗失活因子能力比較 酶酶抗抑制劑抗抑制劑抗蛋白酶抗蛋白酶修飾劑修飾劑抗失活劑抗失活劑 過氧化氫酶過氧化氫酶 核糖核酸酶核糖核酸酶 溶菌酶溶菌酶 胰蛋白酶胰蛋白酶 - - 葡萄糖苷葡萄糖苷酶酶 尿激酶尿激酶 右旋糖苷右旋糖苷 右旋