高效液相色譜法測(cè)定苯扎貝特中的有關(guān)物質(zhì)

1、prevention is the best way to solve a crisis.精品模板助您成功?。?yè)眉可刪）高效液相色譜法測(cè)定苯扎貝特中的有關(guān)物質(zhì) 很多學(xué)生第一次寫畢業(yè)論文往往有盲目性和輕視心理。不知道如何入手寫論文，也不清楚格式要求。加之臨近畢業(yè)都在忙著找工作或者到處找實(shí)習(xí)單位，而無(wú)暇顧及編寫論文，最后往往導(dǎo)致論文不合格，重新答辯。下面文書幫帶來(lái)化學(xué)畢業(yè)論文一篇，助攻畢業(yè)生寫論文! 摘要：目的：對(duì)采用高效液相色譜法測(cè)定苯扎貝特當(dāng)中的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行研究。方法：uskh071233c18：甲醇=4：6，流動(dòng)相是磷酸二氫鉀溶液，在檢測(cè)的過(guò)程中，檢測(cè)波長(zhǎng)度為228nm，流速為1.0ml/m

2、in。結(jié)果苯扎貝特和五種主要的雜質(zhì)都能取得良好的分離效果。結(jié)論：這種測(cè)定方法在應(yīng)用的過(guò)程中能夠體現(xiàn)出非常高的靈敏度和準(zhǔn)確度，因此這種方法也可以應(yīng)用在苯扎貝特有關(guān)物質(zhì)含量的控制和測(cè)定當(dāng)中。關(guān)鍵詞：苯扎貝特;系統(tǒng)適用性;有關(guān)物質(zhì)苯扎貝特是一種氯貝丁酸衍生物類的血脂調(diào)節(jié)類藥物，在降血脂方面，其具備兩種機(jī)制：首先是提高脂蛋白脂酶和肝脂酶的活性，這樣也就使得低濃度的蛋白可以更加迅速的完成分解和代謝功能，從而使得上血甘油三脂的水平出現(xiàn)了非常明顯的下降現(xiàn)象，從而也就使得基底密度的脂蛋白分泌量出現(xiàn)非常顯著的減少現(xiàn)象，從而也就十分有效的降低了血低密度蛋白酶的量以及膽固醇的水平，在生產(chǎn)的過(guò)程中可能會(huì)出現(xiàn)一定的雜質(zhì)

3、，所以我們需要對(duì)其進(jìn)行測(cè)定和分離，保證藥物的藥效。一、儀器與試藥高效液相色譜儀系統(tǒng)：agilent 1200檢測(cè)器： agilent 1200分離單元(四元泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱);軟件：安捷倫工作站;hp1020打印機(jī)。苯扎貝特ep標(biāo)準(zhǔn)品(lot：n0.1.a);甲醇(色譜純04020-3，oceanpak alexative chemlcal);雜質(zhì)a(lot：20_1116，含量：99.8%中間體);雜質(zhì)b(lot：t20_0919，含量：100%國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)，雜質(zhì)c(lot：20_1101，含量：99.6%自制)，雜質(zhì)d(lot：20_1101，含量：99.5%自制)，雜

4、質(zhì)e(lot：20_0226，含量：99.5%自制)。二、方法與結(jié)果2.1 色譜條件色譜柱： uskh071233c18(5um)0.125m4mm。流速為1ml/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為228nm。流動(dòng)相：磷酸二氫鉀溶液(2.72g/l，用磷酸調(diào)節(jié)ph2.3)：甲醇=4：6;進(jìn)樣量：20ul。2.2 溶液制備供試樣品溶液：精確稱取該品50mg，將其放置在容積為100ml的容量瓶當(dāng)中，加入一定的流動(dòng)相，采用超聲波的方式使其溶解，將其靜置直至其溫度達(dá)到室溫的水平。用流動(dòng)相稀釋到刻度的位置，將其混合均勻之后配制成0.5mg/ml的溶液。對(duì)照品溶液(a)精確量取供試品溶液10ml，加入流動(dòng)相之后將其放入到

5、容積為100ml的容量瓶當(dāng)中，稀釋到刻度的位置。再吸出5.0ml的上述溶液，加入適量的流動(dòng)相，使其稀釋到100ml。對(duì)照品溶液(b)：精確吸取對(duì)照品溶液(a)5.0ml，加入適量的流動(dòng)相將其稀釋到50.0ml即完成了對(duì)照品溶液(b)的配制。對(duì)照品溶液(c)：精確量取1ml的試驗(yàn)溶液和1ml濃度為1mol/l的鹽酸溶液，和其充分的混合之后，在電熱板上進(jìn)行加熱處理，直至蒸干。殘?jiān)褂昧鲃?dòng)相進(jìn)行溶解處理，同時(shí)壞要將其稀釋到20ml。2.3 系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)系統(tǒng)在運(yùn)行的過(guò)程中達(dá)到相對(duì)平衡的狀態(tài)之后，根據(jù)上述的色譜條件精確量取對(duì)照溶液(a)20l進(jìn)行進(jìn)樣處理，對(duì)系統(tǒng)的靈敏度進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，從而使得主峰的高

6、度占到記錄儀最大刻度的5成以上，連續(xù)進(jìn)樣5次，從而得到苯扎貝特峰計(jì)算的理論塔板數(shù)n=3916，峰面積rsd=1.0%，在2.0%以內(nèi)。之后再精確的量取對(duì)照溶液(c)20l進(jìn)行進(jìn)樣處理，對(duì)這一過(guò)程中的色譜圖進(jìn)行全面的記錄。在記錄對(duì)照液(c)的色譜圖過(guò)程中，兩個(gè)主峰分離度達(dá)到了5.0以上。在對(duì)對(duì)照液(b)的色譜圖進(jìn)行記錄的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)色譜圖當(dāng)中的信噪至少是5?？瞻诇y(cè)試：取適量的流動(dòng)相進(jìn)行進(jìn)樣處理，作為容積空白，這也充分的標(biāo)明流動(dòng)相對(duì)雜質(zhì)的測(cè)定并不會(huì)產(chǎn)生負(fù)面的影響，樣品測(cè)定過(guò)程中的溶劑峰可以忽略不計(jì)。2.4 方法的專屬性2.4.1 結(jié)構(gòu)確認(rèn)(委托中國(guó)藥科大學(xué)檢測(cè))：經(jīng)紅外光譜，核磁共振，質(zhì)譜等結(jié)構(gòu)解析

7、確證各雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)。2.4.2 單個(gè)雜質(zhì)的定性。依次取“2.7線性關(guān)系項(xiàng)下雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)貯備液”(雜質(zhì)a、雜質(zhì)b、雜質(zhì)c、雜質(zhì)d、雜質(zhì)e和雜質(zhì)f)1.0ml，各至一個(gè)50ml容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，混合均勻。每個(gè)溶液分別進(jìn)樣，記錄各組分的保留時(shí)間，用保留時(shí)間對(duì)每個(gè)雜質(zhì)進(jìn)行定性。2.5 破壞性試驗(yàn)精密稱取樣品細(xì)粉10mg，將其放入到容積為10ml的容量瓶當(dāng)中，將其平均分成5份，對(duì)其分別進(jìn)行高溫、光照、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿和強(qiáng)氧化等破壞性試驗(yàn)，使用流動(dòng)相將其稀釋成濃度為1mg/ml的溶液，分別對(duì)其進(jìn)行進(jìn)樣測(cè)定。測(cè)定之后發(fā)現(xiàn)所有破壞條件下降解產(chǎn)物和主成分峰分離的效果非常好。2.6 精密度和重復(fù)性在重復(fù)性和中間精

8、密度測(cè)試項(xiàng)之下，標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)進(jìn)行6次進(jìn)樣處理，各組分的峰面積rsd都在2.0%之內(nèi)，重復(fù)性和中間的密度并沒(méi)有非常明顯的差異。2.7 線性關(guān)系考察雜質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：分別嚴(yán)格按照要求去稱取以下標(biāo)準(zhǔn)品：分別精密稱取以下標(biāo)準(zhǔn)品：雜質(zhì)ae和苯扎貝特10.0mg，各至一個(gè)25ml容量瓶中，各加入流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，混合均勻，得到每個(gè)雜質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)貯備液。每個(gè)雜質(zhì)的濃度均約為400ug/ml。雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(a)分別量取雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液5.0ml，將其放入到容積為100.0ml的容量瓶當(dāng)中，使用適量的流動(dòng)相將其稀釋到刻度的位置，同時(shí)還要進(jìn)行搖勻處理。各雜質(zhì)和苯扎貝特的濃度為20g/ml。雜質(zhì)線性標(biāo)準(zhǔn)溶液：

9、分別取雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液(a)0.5ml，1.0ml，2.5ml，4.0ml，5.0ml，6.0ml，8.0ml各至一個(gè)50.0ml容量瓶，用流動(dòng)相稀釋至刻度，混合均勻，得到no.1no.7線性標(biāo)準(zhǔn)溶液。各雜質(zhì)及苯扎貝特的濃度范圍為0.23.2ug/ml，相當(dāng)于雜質(zhì)及苯扎貝特含量0.02%0.32%。測(cè)定：分別取no.1no.7線性標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別進(jìn)樣，每個(gè)濃度連續(xù)進(jìn)3次，記錄色譜圖。以各組分峰面積平均值對(duì)其濃度(ug/ml)，使用origin5.0軟件進(jìn)行線性回歸，得到各組分的標(biāo)準(zhǔn)曲線。在線性測(cè)試項(xiàng)下各組分峰面積與溶液的濃度均成線性關(guān)系，且相關(guān)系數(shù)r均大于0.999，該方法的線性關(guān)系良好。2.8

10、 回收率以中間精密度項(xiàng)下5號(hào)現(xiàn)象標(biāo)準(zhǔn)溶液為主要標(biāo)準(zhǔn)，按照其特定的公式來(lái)對(duì)回收率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，同時(shí)還要計(jì)算出平均的回收率。在回收率測(cè)試項(xiàng)當(dāng)中，各個(gè)組分在不同濃度下不同雜質(zhì)的平均回收率都處在了85.0%-115.0%之間。2.9 雜質(zhì)檢測(cè)限、定量限的測(cè)定在色譜系統(tǒng)下進(jìn)樣，記錄色譜圖。當(dāng)待測(cè)組分的信噪比為23倍時(shí)，對(duì)應(yīng)的濃度為該組分的最小檢測(cè)濃度(cm1);當(dāng)待測(cè)組分的信噪比為1020倍時(shí)，對(duì)應(yīng)的濃度為該組分的最小定量濃度(cm2)。所有測(cè)定雜質(zhì)的檢測(cè)限結(jié)果范圍從0.001%0.002%，定量限結(jié)果范圍從0.002%0.02%;其它未知雜質(zhì)的檢測(cè)限和定量限以苯扎貝特進(jìn)行評(píng)價(jià)，依次為0.001%和0.002%。2.10 樣品的穩(wěn)定性取0.5mgml-1樣品溶液分別于0、5、10、20、30和50h進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果表明，樣品放置室溫下，2天穩(wěn)定性良好。2.11 樣品有關(guān)物質(zhì)測(cè)定。空白測(cè)試：取流動(dòng)相20l進(jìn)樣，記錄色譜圖。在樣品的測(cè)試中忽略溶劑峰。取樣品溶液20l進(jìn)樣，記錄色譜圖。樣品雜質(zhì)含量測(cè)定結(jié)果符合規(guī)定。三、討論在本實(shí)驗(yàn)當(dāng)中，研究人員采用的是高效液相色譜法對(duì)相關(guān)物質(zhì)進(jìn)行測(cè)定，這種方法能夠有效的對(duì)苯扎貝特的主成分，中間體和分離產(chǎn)物進(jìn)行分離處理，這種方法操作便捷，同時(shí)還具備非常強(qiáng)的專屬性。這種方法在很廣泛的范圍之內(nèi)都能體現(xiàn)出較好的檢測(cè)靈敏度，同時(shí)還能對(duì)中間體和其他雜質(zhì)進(jìn)行全面的檢查