2013屆高三生物一輪復(fù)習課時作業(yè)39 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用（廣東專版）

1、課時作業(yè)(三十九)第39講微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用1下列有關(guān)微生物營養(yǎng)物質(zhì)的敘述，正確的是()A是碳源的物質(zhì)不可能同時是氮源B碳源都能提供能量C除水以外的無機物只能提供無機鹽D無機氮源也能提供能量2下列為某同學在培養(yǎng)金黃色葡萄球菌實驗中的部分操作步驟，其中正確的是()A培養(yǎng)基中蛋白胨、牛肉膏溶化后，直接補充蒸餾水至100 mLB用1 mol/L NaOH調(diào)試pH，使pH為5.06.0C加壓至98 kPa之前，要徹底排出鍋內(nèi)的冷空氣D將接種環(huán)放在酒精燈上灼燒，滅菌后立即伸入菌種試管內(nèi)挑取少量菌種3某同學在101、102、103倍稀釋液的平均菌落數(shù)為2 760、295和46，則菌落總數(shù)(個/mL)為()

2、A2.76104B2.95104C4.6104 D3.7751044(雙選)分離纖維素分解菌的實驗過程中操作有誤的是()A經(jīng)選擇培養(yǎng)后將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上B富集培養(yǎng)這一步可省略，但培養(yǎng)纖維素分解菌少C經(jīng)稀釋培養(yǎng)后，用蘇丹紅染色D對照組可用同樣量的培養(yǎng)液涂布到不含纖維素的培養(yǎng)基上5產(chǎn)生標準菌落的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是()A同種少數(shù)細菌，液體培養(yǎng)基B許多細菌，液體培養(yǎng)基C同種少數(shù)細菌，固體培養(yǎng)基D許多細菌，固體培養(yǎng)基6用平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時()可以用相同的培養(yǎng)基都需要使用接種針進行接種都需要在火焰旁進行接種都可以用來計數(shù)活菌ABCD7通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的

3、微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌；在培養(yǎng)基中加入10%酚可以抑制細菌和霉菌。利用上述方法不能從混雜的微生物群體中分別分離出()A大腸桿菌 B霉菌 C放線菌 D固氮細菌82011淮陰模擬某校生物興趣小組制訂計劃從牛糞中篩選出纖維素分解菌，要制備選擇培養(yǎng)基，關(guān)于選擇培養(yǎng)正確的敘述是()A可以增加纖維素分解菌的濃度B可以減少纖維素分解菌的濃度C所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基D選擇培養(yǎng)不可以省略，但可以重復(fù)操作92011揭陽模擬下列關(guān)于微生物分離和培養(yǎng)的有關(guān)敘述，錯誤的是()A微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基進行消毒B測定土壤樣品中的細

4、菌數(shù)目，常用菌落計數(shù)法C分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度D分離能分解尿素的細菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源10“篩選”是分離和培養(yǎng)生物新類型常用的手段，下列有關(guān)技術(shù)中不能篩選成功的是()A在全營養(yǎng)的培養(yǎng)基中，篩選大腸桿菌B在尿素固體培養(yǎng)基中，篩選能夠分解尿素的微生物C用纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基，篩選能夠分解纖維素的微生物D在培養(yǎng)基中加入不同濃度的氯化鈉，篩選抗鹽突變體植物112012江門模擬 (雙選)不同的微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要各不相同。下列有關(guān)一種以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)微生物營養(yǎng)的描述中，不正確的是()A氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮素B碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì)C無機鹽

5、是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)D水不是該微生物的營養(yǎng)要素之一12(雙選)下列有關(guān)土壤微生物的培養(yǎng)和分離的敘述，正確的是()A土壤的稱取和土壤溶液的稀釋都應(yīng)該在火焰旁操作B用于培養(yǎng)的培養(yǎng)基均必需含有碳源、氮源、無機鹽和水C在適宜條件下培養(yǎng)，某培養(yǎng)基上的大腸桿菌將呈“S”型增長D平板劃線法一般劃五個區(qū)域，要先將菌液稀釋成5個不同濃度梯度 13.塑料袋造成的“白色污染”早已成為地球公害，塑料袋的自然分解需要201000年不等。2008年7月3日加拿大媒體報道：16歲的高中生丹尼爾伯德從土壤中找到了一類假單胞桿菌，能將聚乙烯塑料的自然降解過程縮短至3個月，而且分解產(chǎn)物只有水和二氧化碳。伯德也因此被譽為“

6、塑料袋的克星”。以下是伯德尋找到聚乙烯降解菌的大致過程。請回答：圖K391(1)根據(jù)你的生活經(jīng)驗推測，伯德這項研究的“土壤樣品”最可能取自于_。(2)圖中“”表示對土壤懸浮液進行一系列的_，目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞。從而能在號培養(yǎng)基表面形成單個_。(3)號培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基，其作用是使目的菌能“脫穎而出”。如圖采用的接種方法為_。使用號培養(yǎng)基的目的是使目的菌數(shù)目增多，培養(yǎng)基中必須包含水、無機鹽、_等基本營養(yǎng)成分。從物理性質(zhì)來看，號培養(yǎng)基中不能添加_。(4)為避免雜菌污染培養(yǎng)物和環(huán)境，植物組織培養(yǎng)和微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基在接種前和完成實驗后都要進行_；接種時要在_操作。 14.尿素是

7、一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，下列是從土壤中分離分解尿素細菌的有關(guān)問題，請分析回答：圖K392(1)上圖是利用_法進行微生物接種，把聚集的菌種逐步_分散到培養(yǎng)基的表面。(2)如果要對培養(yǎng)的菌落進行純化，在培養(yǎng)基上劃線操作中，操作的第一步及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，目的是對接種環(huán)進行_。(3)下表是一種培養(yǎng)基配方： 成分KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O葡萄糖尿素瓊脂 含量1.4 g2.1 g0.2 g10.0 g1.0 g15.0 g 配制培養(yǎng)基的操作步驟是()a調(diào)節(jié)pHb計算c溶化d稱量e滅菌Aabcde Be

8、bdcaCbdcae Dbdcea該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基(多選)。A液體B固體C鑒定D選擇E天然使用該培養(yǎng)基的目的是_。在培養(yǎng)基中加入_指示劑，可初步鑒定出該種細菌能分解尿素。(4)在進行分離分解尿素細菌的實驗中，A同學從培養(yǎng)基篩選出大約150個菌落，而其他同學只選擇出大約50個菌落。A同學的實驗結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有_。(多選)A由于土樣不同 B由于培養(yǎng)基污染 C由于操作失誤 D沒有設(shè)置對照15飼養(yǎng)動物常用的植物飼料中含有難溶的植酸鈣等物質(zhì)，很難被動物吸收利用，還影響對其他營養(yǎng)物質(zhì)的利用。若在飼料中添加植酸酶，則能催化其水解成為可以吸收利用的磷酸鹽等。以下是科研人員從作物根部土壤中分離產(chǎn)植酸酶的

9、菌株的過程示意圖。請分析作答。圖K393(1)培養(yǎng)基中除了添加植酸鈣以外，應(yīng)含有_、_、水、無機鹽等基本營養(yǎng)物質(zhì)。(2)為防止雜菌污染，要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿等進行_，而且須將接種后的培養(yǎng)皿呈_狀態(tài)放置。(3)接種以前進行的一系列操作，目的是在培養(yǎng)皿表面形成_。根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的_就能大致推測出樣品中的活菌數(shù)。(4)由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基中形成白色渾濁。產(chǎn)植酸酶的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶。實驗結(jié)果顯示AE五種菌株中，_是產(chǎn)植酸酶的理想菌株。(5)獲得目的菌以后，若要用于植酸酶的生產(chǎn)，還需

10、要進行_。162012韶關(guān)月考某實驗小組欲從土壤中篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌，設(shè)計實驗步驟如下，請給予合理的補充。(1)采樣與培養(yǎng)：將采集的土樣混勻后稱取1 g，置于經(jīng)過滅菌處理的_(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基中，28 振蕩培養(yǎng)。(2)接種與選擇：為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高，需將培養(yǎng)液進行_處理。之后，將菌液涂布接種于以_為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，30 條件下培養(yǎng)。為避免污染，需將培養(yǎng)皿呈_狀態(tài)放置。此外，為排除其他因素的影響，提高實驗可信度，本步驟需設(shè)計_作為空白對照。(3)篩選與純化：將適量的碘液滴加在平板中的菌落周圍，如果菌落周圍的現(xiàn)象是_，則說明此種菌能夠_。從平板中挑取實驗效果明

11、顯的目的菌株，采用_法接種于新的培養(yǎng)基平板，可對菌株進行進一步的純化。課時作業(yè)(三十九)1D解析 A、B選項的表達不完整。有的碳源只能是碳源，如CO2，有的碳源可以同時是氮源，如NH4HCO3，有的碳源可以同時是能源，如葡萄糖，有的碳源可以同時是氮源和能源，如蛋白胨。C選項中，除水以外的無機物種類繁多，功能也多樣，如CO2為自養(yǎng)微生物的碳源，NaHCO3可作為自養(yǎng)微生物的碳源和無機鹽，而NaCl則只能提供無機鹽。D選項中，無機氮源提供能量的情況是存在的，如NH3可以為硝化細菌提供能量和氮源。2C解析 A選項應(yīng)該先加水，后加熱溶化，否則培養(yǎng)基會被燒焦；B選項用1 mol/L NaOH調(diào)試pH是正

12、確的，但金黃色葡萄球菌是細菌，本實驗應(yīng)把pH調(diào)為7.47.6；C選項加壓至98 kPa之前，要徹底排出鍋內(nèi)的冷空氣，是為了使高壓鍋能夠在很短的時間內(nèi)達到較高的溫度，使鍋內(nèi)充滿水蒸氣，并使水蒸氣分子運動達到盡可能快的速度，穿透各微生物菌體及芽孢等；D選項接種環(huán)放在酒精燈上灼燒滅菌是應(yīng)該的，但不能立即伸入菌種試管內(nèi)，這樣會燙死菌種。3D解析 菌落計數(shù)法，注意是計算不同稀釋度的平均菌落數(shù)。首先選擇平均菌落數(shù)在30300之間的，當只有一個稀釋倍的平均菌落數(shù)符合此范圍時，則以該平均菌落乘以稀釋倍數(shù)即為該樣品的細菌總數(shù)；若有兩個稀釋倍的平均菌落數(shù)均在30300之間，則按兩者菌落總數(shù)之比值來決定，若比值小于

13、2應(yīng)采取兩者的平均數(shù)，若大于2，則取其中較小的菌落總數(shù)。本題295、46在30300之間，46103與295102比值為1.6。應(yīng)取二者平均數(shù)(46103295102)23.775104。若所有稀釋倍數(shù)的菌落數(shù)均不在30300之間，則應(yīng)以最接近300或30的平均菌落乘以稀釋倍數(shù)。4AC解析 經(jīng)選擇培養(yǎng)后，再經(jīng)稀釋，才能將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上；富集培養(yǎng)可省略；經(jīng)稀釋培養(yǎng)后，用剛果紅染色，設(shè)置對照能證明經(jīng)富集培養(yǎng)的確得到了欲分離的微生物。5C解析 在液體培養(yǎng)基中生活的細菌，無論是一個還是許多，肉眼都是不可見的。在固體培養(yǎng)基上的細菌，當數(shù)目較少時也是不可見的。當固體培養(yǎng)基上有許多細菌

14、并且集中在較小范圍時，肉眼可見。而菌落是一個細菌或幾個細菌的子細胞群體，形成于固體培養(yǎng)基上，有一定的形態(tài)結(jié)構(gòu)，所以肉眼可見。同種細菌形成的菌落，形態(tài)結(jié)構(gòu)是相同的。如果有許多細菌形成的菌落，就不可能有比較標準的形態(tài)，因為這許多細菌第一不可能是同一種細菌，第二不可能在培養(yǎng)基的同一個點上。6C解析 平板劃線法或稀釋涂布平板法都使用固體培養(yǎng)基；平板劃線法采用接種環(huán)進行操作，而稀釋涂布平板法采用涂布器進行操作；純化時，要進行無菌操作，需要在火焰旁接種，避免空氣中的微生物混入培養(yǎng)基；平板劃線法一般用于分離而不是計數(shù)。7A解析 根據(jù)題意，固氮細菌的生長不需要從培養(yǎng)基上獲得氮源，可在缺乏氮源的培養(yǎng)基上正常生長

15、；加入青霉素的培養(yǎng)基上不能生長細菌和放線菌，則可收獲霉菌和酵母菌；加入酚的培養(yǎng)基使細菌和霉菌不能正常生長，而放線菌卻能利用酚作原料合成自身的產(chǎn)物。8A解析 選擇培養(yǎng)基是根據(jù)某種微生物對特定營養(yǎng)成分的“嗜好”，專門在該培養(yǎng)基中加入該營養(yǎng)物，使其成為一種加富培養(yǎng)基，目的是增加該微生物的濃度，如纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基，屬于液體培養(yǎng)基，可增大菌體與營養(yǎng)物的接觸，選擇培養(yǎng)可省略，但培養(yǎng)的菌體可能較少，也可以重復(fù)操作。9A解析 微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基進行滅菌，而不是消毒；測定土壤樣品中的細菌數(shù)目，常用菌落計數(shù)法而一般不用活菌計數(shù)；分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度以便能從中選擇出菌落數(shù)在303

16、00間的平板進行計數(shù)；分離能分解尿素的細菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源。10A解析 篩選微生物應(yīng)該用選擇培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基的含義是：在培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進需要的微生物的生長，目的是從眾多微生物中分離所需要的微生物。在全營養(yǎng)的培養(yǎng)基中，達不到篩選大腸桿菌的目的。11BD解析 本題考查微生物的營養(yǎng)要素以及理解應(yīng)用能力、判斷能力。CO2可為自養(yǎng)型微生物提供碳源，但不能提供能源。水也是該微生物的營養(yǎng)要素之一。12AC解析 土壤微生物有多種，在提取和培養(yǎng)時，土壤的稱取和土壤溶液的稀釋都應(yīng)該在火焰旁操作；配制培養(yǎng)基時，要根據(jù)不同的微生物特點配制，自養(yǎng)型可不添加碳源

17、，固氮菌可不添加氮源；適宜條件下，某培養(yǎng)基上的大腸桿菌還是會受到空間和資源的限制，只能呈“S”型增長；平板劃線法是通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面的。涂布平板法則要進行一系列的梯度稀釋。13(1)垃圾場(2)梯度稀釋菌落(3)選擇稀釋涂布平板法碳源和氮源凝固劑(或瓊脂)(4)高壓蒸汽滅菌酒精燈火焰旁解析 本題考查微生物培養(yǎng)，屬于考綱規(guī)定的理解運用層次。 (1)要分離出能分解特定物質(zhì)的目的菌，應(yīng)該在富含該物質(zhì)的場所取土，一般垃圾場塑料袋較多。(2)從“目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞”可推知，土壤懸浮液應(yīng)進行一系列濃度梯度的稀釋。在培養(yǎng)皿中可得

18、到由單個細菌形成的菌落。(3)號培養(yǎng)基能篩選出分解聚乙烯塑料的目的菌，所以號培養(yǎng)基從功能上屬于選擇培養(yǎng)基。圖中接種的方法經(jīng)歷多次濃度稀釋，所以接種方法為稀釋涂布平板法。號培養(yǎng)基的目的是使目的菌數(shù)目增多，即擴大培養(yǎng)，所以培養(yǎng)基中除了水和無機鹽外，還應(yīng)加入氮源和碳源等營養(yǎng)成分。一般擴大培養(yǎng)用的是液體培養(yǎng)基，所以不能添加凝固劑(或瓊脂)。(4)培養(yǎng)基在接種前要用高壓蒸汽進行滅菌，完成實驗后為了防止雜菌污染，還要用高壓蒸汽進行滅菌，并且接種時為了防止空氣的雜菌污染培養(yǎng)基，應(yīng)在酒精燈火焰旁進行。14(1)平板劃線稀釋(2)滅菌(3)D BD篩選出能分解尿素的細菌酚紅(4)ABC解析 (1)根據(jù)圖示可知接種的方法為平板劃線法，操作上應(yīng)注意每次劃線前要灼燒，冷卻后從上一區(qū)劃線末端開始劃 首尾區(qū)不重疊。(2)灼燒接種環(huán)，目的是對接種環(huán)進行滅菌。(3)根據(jù)教材可知制備培養(yǎng)基的操作順序：bdcea；該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，也屬于選擇培養(yǎng)基；使用該培養(yǎng)基的目的是篩選出能分解尿素的細菌；在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，可初步鑒定出該種細菌能分解尿素。(4)A同學的實驗結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有：由于土樣不同，由于培養(yǎng)基污染，由于操作失誤。15(1) 碳源氮源 (2)(高壓蒸汽)滅菌倒置 (3)單個菌落菌落數(shù)(4)E (5)擴大培養(yǎng)解析