3.2月季的花藥培養(yǎng)課件辛越權(quán)

1、 植物的花藥培養(yǎng)在育種上有什植物的花藥培養(yǎng)在育種上有什么意義？么意義？花粉粒（花粉粒（1n）單倍體植株單倍體植株（1n）二倍體純合子二倍體純合子植株（植株（2n）花的結(jié)構(gòu)花的結(jié)構(gòu)花絲花絲花藥：花藥：囊狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)有很多花粉囊狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)有很多花粉 花粉是由花粉母細(xì)胞（即小孢子母細(xì)胞）花粉是由花粉母細(xì)胞（即小孢子母細(xì)胞）經(jīng)過經(jīng)過而形成的，因此，花粉是而形成的，因此，花粉是。 花粉的發(fā)育要經(jīng)歷：花粉的發(fā)育要經(jīng)歷：時期、單核時期、單核期、雙核期期、雙核期等階段。等階段。雄蕊雄蕊（一）被子植物的花粉發(fā)育（一）被子植物的花粉發(fā)育1花粉母花粉母細(xì)胞（細(xì)胞（2n）4個小孢子個小孢子(小孢子小孢子四分體四分體)（

2、n）減分減分有分有分1個花粉管細(xì)胞核（個花粉管細(xì)胞核（n）1個生殖細(xì)胞核（個生殖細(xì)胞核（n）有分有分2個精子個精子單核居中期（單核居中期（n）單核靠邊期（單核靠邊期（n）注意： 二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉花粉管細(xì)胞核和生殖細(xì)胞核管細(xì)胞核和生殖細(xì)胞核。（精子在花粉管中。（精子在花粉管中形成）形成） 三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖細(xì)胞進(jìn)行一次有絲分裂，形成兩個精子，生殖細(xì)胞進(jìn)行一次有絲分裂，形成兩個精子，這樣的花粉在成熟時，含有這樣的花粉在成熟時，含有一個營養(yǎng)核和兩一個營養(yǎng)核和兩個精子。個精子。 兩個精子和

3、一個營養(yǎng)核的兩個精子和一個營養(yǎng)核的基因型基因型相同。相同。（二）產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑二）產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑形成原因：主要形成原因：主要取決于培養(yǎng)基中取決于培養(yǎng)基中的激素的種類及的激素的種類及其濃度的配比其濃度的配比體細(xì)胞胚（胚狀體）：體細(xì)胞胚（胚狀體）： 在組織培養(yǎng)過程中，某些體細(xì)胞在在組織培養(yǎng)過程中，某些體細(xì)胞在形態(tài)上轉(zhuǎn)變?yōu)榕c合子發(fā)育成的胚非常相形態(tài)上轉(zhuǎn)變?yōu)榕c合子發(fā)育成的胚非常相似的結(jié)構(gòu)，發(fā)育過程亦與合子胚類似，似的結(jié)構(gòu)，發(fā)育過程亦與合子胚類似，被稱為被稱為。（三）影響花藥培養(yǎng)的因素（三）影響花藥培養(yǎng)的因素1、材料的選擇、材料的選擇 不同植物不同植物 同一植物的不同生理狀況同一植物的不

4、同生理狀況（花期早期初花期花期早期初花期） 合適的花粉發(fā)育期合適的花粉發(fā)育期（單核居中期與靠邊期之間單核居中期與靠邊期之間） 此外，植株生長條件、材料低溫預(yù)處理、接種此外，植株生長條件、材料低溫預(yù)處理、接種密度等密度等2、培養(yǎng)基的組成、培養(yǎng)基的組成實(shí)驗(yàn)操作實(shí)驗(yàn)操作材料選取材料選取材料和材料和消毒消毒接種和接種和培養(yǎng)培養(yǎng)（一）材料選?。ㄒ唬┎牧线x取 通過鏡檢來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。通過鏡檢來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。 最常用的方法：最常用的方法：醋酸洋紅法。醋酸洋紅法。 某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色，某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色， 采用采用焙花青焙花青-鉻礬法鉻礬法，這種

5、方法能將，這種方法能將花粉細(xì)胞核花粉細(xì)胞核染成染成藍(lán)黑色藍(lán)黑色。月季的初花期月季的初花期。 選擇合適的花粉發(fā)育時期也是提高誘導(dǎo)成功率的選擇合適的花粉發(fā)育時期也是提高誘導(dǎo)成功率的重要因素。一般來說，重要因素。一般來說，在單核期，細(xì)胞核由中央移向在單核期，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時期細(xì)胞一側(cè)的時期，花藥培養(yǎng)成功率最高。，花藥培養(yǎng)成功率最高。 為什么花瓣松動會給材料的為什么花瓣松動會給材料的消毒帶來困難？消毒帶來困難？答：花瓣松動后，微生物就答：花瓣松動后，微生物就可能侵入到花藥，給材料可能侵入到花藥，給材料的消毒帶來困難。的消毒帶來困難。二、材料的消毒：二、材料的消毒：花花蕾蕾（70酒精）酒精）

6、大約大約30s（無（無菌水）菌水）清洗清洗（無菌（無菌吸水紙）吸水紙）吸干水吸干水分分（1氯化氯化汞溶液）汞溶液）24min（無（無菌水）菌水）沖洗沖洗 月季花蕾的消毒與菊花外植體的消月季花蕾的消毒與菊花外植體的消毒相比較，二者有何不同？毒相比較，二者有何不同？ 在酒精消毒前，花藥不需要預(yù)先用流在酒精消毒前，花藥不需要預(yù)先用流水沖洗、洗衣粉洗滌和軟刷刷洗水沖洗、洗衣粉洗滌和軟刷刷洗 三、接種和培養(yǎng)三、接種和培養(yǎng)剝?nèi)』ㄋ巹內(nèi)』ㄋ幗臃N花藥接種花藥培養(yǎng)培養(yǎng)分化培養(yǎng)基培養(yǎng)分化培養(yǎng)基培養(yǎng)鑒定和篩選鑒定和篩選不要損傷花藥？不要損傷花藥？要徹底除去花絲？要徹底除去花絲？常常會出現(xiàn)染色體倍性的變化？常常會出現(xiàn)

7、染色體倍性的變化？每個培養(yǎng)瓶接種每個培養(yǎng)瓶接種 （7 710 10 ） 個花藥？個花藥？花藥長出愈傷組織還要轉(zhuǎn)移到哪？花藥長出愈傷組織還要轉(zhuǎn)移到哪？主要原因是主要原因是營養(yǎng)核和生營養(yǎng)核和生殖核融合殖核融合造造成的成的植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的異同點(diǎn)異同點(diǎn)項目項目相同點(diǎn)相同點(diǎn)不同點(diǎn)不同點(diǎn)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)技術(shù)技術(shù)離體的植物離體的植物組織經(jīng)脫分組織經(jīng)脫分化形成愈傷化形成愈傷組織，再分組織，再分化成叢芽，化成叢芽，誘導(dǎo)出根，誘導(dǎo)出根，然后進(jìn)行移然后進(jìn)行移栽。栽。外植體為體細(xì)胞，外植體為體細(xì)胞，染色體數(shù)染色體數(shù)無無需加倍。需加倍?；ㄋ幣囵B(yǎng)技術(shù)花藥培養(yǎng)技術(shù)取材

8、為花藥，培養(yǎng)的為取材為花藥，培養(yǎng)的為單倍體幼苗單倍體幼苗，植株，植株弱小，弱小，高度不育高度不育，必須用，必須用秋水秋水仙素處理仙素處理，使染色體加，使染色體加倍，恢復(fù)正常植株的染倍，恢復(fù)正常植株的染色體數(shù)，而且為純種。色體數(shù)，而且為純種。2、基因型為、基因型為aabb的水稻（條染色體）的花藥通的水稻（條染色體）的花藥通過無菌操作，接入試管后，在一定條件下培養(yǎng)成試管過無菌操作，接入試管后，在一定條件下培養(yǎng)成試管苗。苗。（）愈傷組織是花粉細(xì)胞分裂形成的不規(guī)則的細(xì)胞（）愈傷組織是花粉細(xì)胞分裂形成的不規(guī)則的細(xì)胞團(tuán)，愈傷組織必須從培養(yǎng)基中獲得（）（團(tuán)，愈傷組織必須從培養(yǎng)基中獲得（）（ ）和小分子有機(jī)物

9、等營養(yǎng)物質(zhì)。和小分子有機(jī)物等營養(yǎng)物質(zhì)。（）要促進(jìn)花粉細(xì)胞的分裂分化，培養(yǎng)基中應(yīng)有（）要促進(jìn)花粉細(xì)胞的分裂分化，培養(yǎng)基中應(yīng)有（）（）（ ）兩種激素。）兩種激素。愈傷組織分化是指愈傷組織形成芽和根，由芽發(fā)育成愈傷組織分化是指愈傷組織形成芽和根，由芽發(fā)育成葉莖。這一過程必須給予光照，其原因是（）葉莖。這一過程必須給予光照，其原因是（）利用光能制造有機(jī)物促進(jìn)試管苗生長發(fā)育。利用光能制造有機(jī)物促進(jìn)試管苗生長發(fā)育。（）試管苗的細(xì)胞核中有（）條脫氧核苷酸（）試管苗的細(xì)胞核中有（）條脫氧核苷酸鏈。試管苗的基因型有：鏈。試管苗的基因型有： 水水無機(jī)鹽無機(jī)鹽生長素生長素細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素葉葉24ab ab ab

10、 ab3（9分）草莓生產(chǎn)上傳統(tǒng)的繁殖方式易將所感染的病分）草莓生產(chǎn)上傳統(tǒng)的繁殖方式易將所感染的病毒傳播給后代，導(dǎo)致產(chǎn)量降低。品質(zhì)變差。運(yùn)用微型繁殖毒傳播給后代，導(dǎo)致產(chǎn)量降低。品質(zhì)變差。運(yùn)用微型繁殖技術(shù)可以培育出無病毒幼苗。草技術(shù)可以培育出無病毒幼苗。草 莓微型繁殖的基本過程莓微型繁殖的基本過程如下：如下：外植體外植體 愈傷組織愈傷組織 芽、根芽、根 植株植株請回答：請回答：（1）微型繁殖培育無病毒草莓苗時，一般選?。┪⑿头敝撑嘤裏o病毒草莓苗時，一般選取_ 作為外植體，其依據(jù)是作為外植體，其依據(jù)是_ _ 。（2）在過程）在過程中，常用的中，常用的ms培養(yǎng)基主要成分包括大量培養(yǎng)基主要成分包括大量元素、微量元素和元素、微量元素和_，在配制好的培養(yǎng)基中，常常，在配制好的培養(yǎng)基中，常常需要添加需要添加_，有利于外植體啟動細(xì)胞分裂形成愈，有利于外植體啟動細(xì)胞分裂形成愈傷組織。接種后傷組織。接種后25d，若發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染，原，若發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染，原因可能是因可能是_ 。（3）在過程）在過程中，愈傷組織在誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中