物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA課件

1、物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA學(xué)案學(xué)案 物質(zhì)提取及應(yīng)用（酶、物質(zhì)提取及應(yīng)用（酶、DNA、蛋白質(zhì)、植物有效成分）蛋白質(zhì)、植物有效成分）核心術(shù)語(yǔ)核心術(shù)語(yǔ)(記準(zhǔn)、寫(xiě)準(zhǔn)、理解透、把握內(nèi)涵和外記準(zhǔn)、寫(xiě)準(zhǔn)、理解透、把握內(nèi)涵和外延延)1.酶的研究（果膠酶、加酶洗衣粉、固定化酶、固酶的研究（果膠酶、加酶洗衣粉、固定化酶、固定化細(xì)胞、凝膠珠）定化細(xì)胞、凝膠珠）2.DNA與蛋白質(zhì)技術(shù)（與蛋白質(zhì)技術(shù)（DNA粗提取、二苯胺、粗提取、二苯胺、PCR、凝膠色譜法、電泳、緩沖溶液）、凝膠色譜法、電泳、緩沖溶液）3.植物有效成分提取（芳香油、胡蘿卜素、水蒸氣植物有效成分提?。ǚ枷阌?、胡蘿卜素、水蒸氣蒸餾法、壓榨、萃?。┱麴s法、壓榨、

2、萃取）物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA 寫(xiě)出探究溫度和寫(xiě)出探究溫度和pH對(duì)果膠酶活性影響、對(duì)果膠酶活性影響、不同種類(lèi)加酶洗衣粉的洗滌效果和制備固定化酵母不同種類(lèi)加酶洗衣粉的洗滌效果和制備固定化酵母細(xì)胞等實(shí)驗(yàn)的大致步驟。細(xì)胞等實(shí)驗(yàn)的大致步驟。答案答案 探究溫度和探究溫度和pH對(duì)果膠酶活性影響的實(shí)驗(yàn)步驟：對(duì)果膠酶活性影響的實(shí)驗(yàn)步驟：酶的研究與應(yīng)用酶的研究與應(yīng)用制備蘋(píng)果泥制備蘋(píng)果泥將分別裝有蘋(píng)果泥和果膠酶的試管在恒溫將分別裝有蘋(píng)果泥和果膠酶的試管在恒溫水浴中保溫水浴中保溫 加入加入果膠酶反應(yīng)一段時(shí)間果膠酶反應(yīng)一段時(shí)間過(guò)濾果汁過(guò)濾果汁若探究最適溫度，應(yīng)準(zhǔn)備一組燒杯，若探究最適溫度，應(yīng)準(zhǔn)備一組燒杯，分別盛有不同溫

3、度的水分別盛有不同溫度的水若探究最適若探究最適pH，應(yīng)準(zhǔn)備一組試管，應(yīng)準(zhǔn)備一組試管，將每個(gè)試管中的反應(yīng)物調(diào)節(jié)至將每個(gè)試管中的反應(yīng)物調(diào)節(jié)至不同不同pH物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA探究不同種類(lèi)加酶洗衣粉的洗滌效果的實(shí)驗(yàn)步驟：探究不同種類(lèi)加酶洗衣粉的洗滌效果的實(shí)驗(yàn)步驟：步驟步驟 燒杯編號(hào)燒杯編號(hào) 注入自來(lái)水注入自來(lái)水 500 mL 500 mL 500 mL 加入物質(zhì)（相同、加入物質(zhì)（相同、等量）等量） 奶漬布奶漬布 奶漬布奶漬布 奶漬布奶漬布 控制水溫控制水溫 37 37 37 加入洗衣粉加入洗衣粉（等量）（等量） 蛋白酶蛋白酶洗衣粉洗衣粉 復(fù)合酶復(fù)合酶洗衣粉洗衣粉 脂肪酶脂肪酶洗衣粉洗衣粉 用玻璃棒攪

4、拌用玻璃棒攪拌 5 min 5 min 5 min 觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象 物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA制備固定化酵母細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)步驟：制備固定化酵母細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)步驟：酵母細(xì)胞的活化酵母細(xì)胞的活化1 g干酵母干酵母+10 mL 蒸餾水蒸餾水50 mL 燒杯燒杯攪拌均勻攪拌均勻放置放置1 h，使之活化。，使之活化。配制配制CaCl2溶液溶液0.83 g CaCl2+150 mL蒸餾水蒸餾水200 mL燒杯燒杯溶解溶解備用。備用。配制海藻酸鈉溶液配制海藻酸鈉溶液0.7 g海藻酸海藻酸+10 mL 水水50 mL燒杯燒杯酒精燈微火酒精燈微火（或間斷）加熱，并不斷攪拌，使之溶化（或間斷）加熱，并不斷攪拌，使之

5、溶化蒸餾水蒸餾水定容到定容到10 mL。物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞的混合海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞的混合將溶化的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，加入活化酵母將溶化的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，加入活化酵母細(xì)胞液，攪拌后吸入到注射器中。細(xì)胞液，攪拌后吸入到注射器中。固定化酵母細(xì)胞固定化酵母細(xì)胞以恒定速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到以恒定速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到CaCl2溶溶液中，形成凝膠珠狀顆粒。液中，形成凝膠珠狀顆粒。 （1）思考前兩個(gè)實(shí)驗(yàn)的自變量和無(wú)關(guān)變量分別是什）思考前兩個(gè)實(shí)驗(yàn)的自變量和無(wú)關(guān)變量分別是什么？么？答案答案 第一個(gè)實(shí)驗(yàn)自變量為溫度（或第一個(gè)實(shí)驗(yàn)自變量為溫度（或pH值）

6、，無(wú)關(guān)變值），無(wú)關(guān)變量為：量為：pH值（或溫度）、酶的種類(lèi)和數(shù)量、底物的值（或溫度）、酶的種類(lèi)和數(shù)量、底物的種類(lèi)和數(shù)量、反應(yīng)時(shí)間；第二個(gè)實(shí)驗(yàn)自變量為不同種類(lèi)和數(shù)量、反應(yīng)時(shí)間；第二個(gè)實(shí)驗(yàn)自變量為不同種類(lèi)的加酶洗衣粉，無(wú)關(guān)變量為：其他條件相同且種類(lèi)的加酶洗衣粉，無(wú)關(guān)變量為：其他條件相同且適宜（如溫度、適宜（如溫度、pH等）。等）。物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA（2）比較分析固定化酶和固定化細(xì)胞。）比較分析固定化酶和固定化細(xì)胞。答案答案類(lèi)型類(lèi)型 固定酶固定酶的種類(lèi)的種類(lèi) 適用方法適用方法 優(yōu)點(diǎn)及不足優(yōu)點(diǎn)及不足 實(shí)例實(shí)例 固定固定化酶化酶 一種一種 化學(xué)結(jié)合、化學(xué)結(jié)合、物理吸附法物理吸附法 可反復(fù)利用，可反復(fù)

7、利用，但只催化一但只催化一種或一類(lèi)化種或一類(lèi)化學(xué)反應(yīng)學(xué)反應(yīng) 固定化葡固定化葡萄糖異構(gòu)萄糖異構(gòu)酶酶 固定化固定化細(xì)胞細(xì)胞 一系列一系列 包埋法包埋法 成本低、操成本低、操作容易，但作容易，但反應(yīng)效果下反應(yīng)效果下降降 固定化酵固定化酵母細(xì)胞母細(xì)胞 物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA .果膠酶能夠分解植物細(xì)胞之間的果膠，果膠酶能夠分解植物細(xì)胞之間的果膠，使榨取果汁變得更容易，果膠被分解后，渾濁的果使榨取果汁變得更容易，果膠被分解后，渾濁的果汁會(huì)變得澄清?，F(xiàn)有磨漿機(jī)、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為汁會(huì)變得澄清?，F(xiàn)有磨漿機(jī)、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的果膠的果膠酶溶液、蒸餾水、一定濃度的鹽酸和氫氧化鈉溶液酶溶液、蒸餾水、一定濃度的鹽酸和氫氧化鈉溶

8、液等實(shí)驗(yàn)材料，下表是某小組利用上述材料進(jìn)行的有等實(shí)驗(yàn)材料，下表是某小組利用上述材料進(jìn)行的有關(guān)實(shí)驗(yàn)（關(guān)實(shí)驗(yàn)（“/”表示不加）。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：表示不加）。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：編號(hào)編號(hào) 項(xiàng)目項(xiàng)目 試管試管 甲甲 乙乙 丙丙 丁丁 1在試管中加入蘋(píng)在試管中加入蘋(píng)果泥果泥 2 mL 2 mL 2 mL 2 mL 2 2 mL /2 mL 2 mL 3加入不同的液體加入不同的液體 2 mL蒸餾水蒸餾水 2 mL蒸餾水蒸餾水 2 mL鹽酸鹽酸 2 mL 氫氧化鈉氫氧化鈉 4搖勻，恒溫處理?yè)u勻，恒溫處理 15分鐘分鐘 15分鐘分鐘 15分鐘分鐘 15分鐘分鐘 物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA（1）表中）表中處的內(nèi)容是處的

9、內(nèi)容是 。（2）若要驗(yàn)證果膠酶的作用，應(yīng)把）若要驗(yàn)證果膠酶的作用，應(yīng)把 兩個(gè)試管同兩個(gè)試管同時(shí)取出并過(guò)濾相同時(shí)間，觀察并比較，預(yù)期的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象時(shí)取出并過(guò)濾相同時(shí)間，觀察并比較，預(yù)期的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象與結(jié)果是與結(jié)果是 。（3）比較試管甲、丙、丁可知，其實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖牵┍容^試管甲、丙、丁可知，其實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖?。為確保實(shí)驗(yàn)成功，請(qǐng)將表中的編。為確保實(shí)驗(yàn)成功，請(qǐng)將表中的編號(hào)正確排序：號(hào)正確排序： 。質(zhì)量分?jǐn)?shù)為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的果膠酶溶液的果膠酶溶液甲與乙甲與乙甲果汁比乙澄清甲果汁比乙澄清探究探究pH對(duì)果膠酶活性的影響對(duì)果膠酶活性的影響2314.在日常洗滌中，普通洗衣粉已經(jīng)逐漸被加酶洗衣在日常洗滌中，普通洗衣粉已經(jīng)逐漸被

10、加酶洗衣粉所代替，加酶洗衣粉中的堿性蛋白酶、纖維素酶、粉所代替，加酶洗衣粉中的堿性蛋白酶、纖維素酶、脂肪酶、淀粉酶等可以將粘附在衣物上的奶漬、汗脂肪酶、淀粉酶等可以將粘附在衣物上的奶漬、汗?jié)n、血漬等快速、徹底地清除掉，因此非常受人們漬、血漬等快速、徹底地清除掉，因此非常受人們的歡迎。的歡迎。物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA（1）某班同學(xué)為探究某復(fù)合加酶洗衣粉的最佳洗滌）某班同學(xué)為探究某復(fù)合加酶洗衣粉的最佳洗滌 ，設(shè)計(jì)了一個(gè)探究實(shí)驗(yàn)，該實(shí)驗(yàn)的自變量應(yīng)，設(shè)計(jì)了一個(gè)探究實(shí)驗(yàn)，該實(shí)驗(yàn)的自變量應(yīng)為溫度。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，不同的小組選用了含不同污為溫度。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，不同的小組選用了含不同污染物的衣物作為實(shí)驗(yàn)材料，最終結(jié)果

11、匯總?cè)缦卤恚喝疚锏囊挛镒鳛閷?shí)驗(yàn)材料，最終結(jié)果匯總?cè)缦卤恚簻囟葴囟炔煌瑴囟认鲁ゲ煌蹪n所需的時(shí)間（不同溫度下除去不同污漬所需的時(shí)間（min）水溫水溫() 51525354555657585植物油植物油 225 110987849352246109牛奶牛奶 200 103704211344991100漿糊漿糊 143 9965312163497148由上表可知，在洗滌含不同污染物的衣物時(shí)要由上表可知，在洗滌含不同污染物的衣物時(shí)要 。使用使用不同溫度的水不同溫度的水物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA（2）從生物體中提取出的酶首先要檢測(cè)）從生物體中提取出的酶首先要檢測(cè) ，以便更好地將酶應(yīng)用于實(shí)踐。以便更好地將酶

12、應(yīng)用于實(shí)踐。（3）加酶洗衣粉中的酶是用特殊的化學(xué)物質(zhì)包裹的，）加酶洗衣粉中的酶是用特殊的化學(xué)物質(zhì)包裹的，遇水后包裹層很快溶解，釋放出來(lái)的酶迅速發(fā)揮催遇水后包裹層很快溶解，釋放出來(lái)的酶迅速發(fā)揮催化作用，請(qǐng)說(shuō)明這是否運(yùn)用了酶的固定化技術(shù)及其化作用，請(qǐng)說(shuō)明這是否運(yùn)用了酶的固定化技術(shù)及其理由。理由。 。酶的活性酶的活性未運(yùn)用酶的固定化技術(shù)，因?yàn)槊肝垂潭ㄔ诓蝗苡谒催\(yùn)用酶的固定化技術(shù)，因?yàn)槊肝垂潭ㄔ诓蝗苡谒妮d體上，也不能重復(fù)利用的載體上，也不能重復(fù)利用關(guān)鍵信息關(guān)鍵信息 “鹽酸鹽酸”、“氫氧化鈉氫氧化鈉”、“果膠酶果膠酶”、“最佳洗滌溫度最佳洗滌溫度”、“復(fù)合酶復(fù)合酶”、“包裹包裹”物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DN

13、A知識(shí)依據(jù)知識(shí)依據(jù) pH對(duì)果膠酶的影響，溫度對(duì)加酶洗衣粉洗對(duì)果膠酶的影響，溫度對(duì)加酶洗衣粉洗滌效果的影響，酶的固定化滌效果的影響，酶的固定化完整分析完整分析 .從題干中的表格上看，甲、乙試管是探從題干中的表格上看，甲、乙試管是探究果膠酶的催化作用；甲、丙、丁三個(gè)試管是探究究果膠酶的催化作用；甲、丙、丁三個(gè)試管是探究pH對(duì)酶活性的影響；操作時(shí)，先將酶分別放在不同對(duì)酶活性的影響；操作時(shí)，先將酶分別放在不同的環(huán)境條件下，然后再加入底物，操作順序若改變，的環(huán)境條件下，然后再加入底物，操作順序若改變，會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。.（1）探究溫度對(duì)酶活性的影響時(shí)，自變量應(yīng)為溫）探究溫度對(duì)酶活性的影響時(shí)

14、，自變量應(yīng)為溫度。由表格可知，清除不同污染物時(shí)所需的最適溫度。由表格可知，清除不同污染物時(shí)所需的最適溫度不同，因此洗滌含不同污染物的衣物時(shí)應(yīng)選用不度不同，因此洗滌含不同污染物的衣物時(shí)應(yīng)選用不同溫度的水。（同溫度的水。（2）只有酶具有活性才能將酶應(yīng)用于）只有酶具有活性才能將酶應(yīng)用于實(shí)踐。（實(shí)踐。（3）固定化酶需要把酶固定在一定載體上，）固定化酶需要把酶固定在一定載體上，使酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離，可以反使酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離，可以反復(fù)利用，本題中未運(yùn)用固定化酶技術(shù)。復(fù)利用，本題中未運(yùn)用固定化酶技術(shù)。物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNADNA粗提取與蛋白質(zhì)提取技術(shù)粗提取與蛋白質(zhì)提取技術(shù)

15、圖示圖示DNA粗提取與鑒定、血紅蛋白提取和分粗提取與鑒定、血紅蛋白提取和分離實(shí)驗(yàn)步驟的文字流程圖。離實(shí)驗(yàn)步驟的文字流程圖。答案答案 （1）DNA粗提取與鑒定：材料的選取粗提取與鑒定：材料的選取破碎細(xì)胞，破碎細(xì)胞，獲得含獲得含DNA的濾液的濾液去除濾液中的雜質(zhì)去除濾液中的雜質(zhì)DNA的析出與的析出與鑒定鑒定（2）血紅蛋白的提取和分離）血紅蛋白的提取和分離樣品處理樣品處理粗分離粗分離透析：除去樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)透析：除去樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)紅細(xì)胞的洗滌紅細(xì)胞的洗滌血紅蛋白的釋放血紅蛋白的釋放分離血紅蛋白溶液分離血紅蛋白溶液物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA純化純化一般采用凝膠色譜法對(duì)血紅蛋白進(jìn)

16、行分離和純化一般采用凝膠色譜法對(duì)血紅蛋白進(jìn)行分離和純化純度鑒定純度鑒定一般用一般用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法來(lái)測(cè)定聚丙烯酰胺凝膠電泳法來(lái)測(cè)定蛋白質(zhì)的分子量蛋白質(zhì)的分子量思考上述兩實(shí)驗(yàn)的原理是什么？思考上述兩實(shí)驗(yàn)的原理是什么？提示提示 DNA粗提取與鑒定的基本原理粗提取與鑒定的基本原理:a.血細(xì)胞在蒸餾水中易吸水而導(dǎo)致細(xì)胞膜和核膜的破裂，據(jù)血細(xì)胞在蒸餾水中易吸水而導(dǎo)致細(xì)胞膜和核膜的破裂，據(jù)此可得出含核此可得出含核DNA的溶液。的溶液。b.DNA在不同濃度的在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，在溶液中溶解度不同，在0.14 mol/L的的NaCl溶液中溶解度最低。溶液中溶解度最低。c.DNA不溶

17、于酒精溶液；不被蛋白酶所水解；可被二苯胺染不溶于酒精溶液；不被蛋白酶所水解；可被二苯胺染成藍(lán)色。成藍(lán)色。物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA血紅蛋白的提取和分離原理：血紅蛋白的提取和分離原理：a.凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)。凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)。b.電泳法是根據(jù)各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本電泳法是根據(jù)各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身大小、形狀的不同來(lái)分離蛋白質(zhì)。身大小、形狀的不同來(lái)分離蛋白質(zhì)。 .某生物興趣小組在學(xué)習(xí)完某生物興趣小組在學(xué)習(xí)完“蛋白質(zhì)的蛋白質(zhì)的提取和分離提取和分離”后，聯(lián)系相關(guān)實(shí)驗(yàn)，準(zhǔn)備從豬肝臟研后，聯(lián)系相關(guān)實(shí)驗(yàn)，準(zhǔn)備從豬肝臟研磨液中初步提取過(guò)氧

18、化氫酶，設(shè)計(jì)的磨液中初步提取過(guò)氧化氫酶，設(shè)計(jì)的“過(guò)氧化氫酶過(guò)氧化氫酶提取、分離流程圖提取、分離流程圖”如下：如下：物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA試回答下列有關(guān)問(wèn)題：試回答下列有關(guān)問(wèn)題：（1）向肝細(xì)胞懸液中加入一定量的）向肝細(xì)胞懸液中加入一定量的pH=7.0的緩沖液的緩沖液并充分?jǐn)嚢?，可以破碎肝?xì)胞，破碎細(xì)胞的原理是并充分?jǐn)嚢?，可以破碎肝?xì)胞，破碎細(xì)胞的原理是 。與使用蒸餾水相比，使。與使用蒸餾水相比，使用緩沖液的優(yōu)點(diǎn)是用緩沖液的優(yōu)點(diǎn)是 。（2）蛋白質(zhì)粗分離階段透析的目的是）蛋白質(zhì)粗分離階段透析的目的是 。（3）電泳利用了待分離樣品中各種分子的）電泳利用了待分離樣品中各種分子的 等的差異，而產(chǎn)生不同遷移

19、等的差異，而產(chǎn)生不同遷移速度，實(shí)現(xiàn)各種分子的分離。速度，實(shí)現(xiàn)各種分子的分離。滲透原理（當(dāng)外界溶液濃度低于動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)液濃度滲透原理（當(dāng)外界溶液濃度低于動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)液濃度時(shí)，細(xì)胞吸水漲破）時(shí)，細(xì)胞吸水漲破）可以保證酶溶液可以保證酶溶液pH基本穩(wěn)定，避免因基本穩(wěn)定，避免因pH變化影響過(guò)氧化氫酶活性變化影響過(guò)氧化氫酶活性除去小分子化除去小分子化合物（雜質(zhì)）合物（雜質(zhì)）帶電性質(zhì)、帶電性質(zhì)、分子大小、形狀分子大小、形狀物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA（4）實(shí)驗(yàn)小組以）實(shí)驗(yàn)小組以3%過(guò)氧化氫溶液和獲得的過(guò)氧化過(guò)氧化氫溶液和獲得的過(guò)氧化氫酶為材料進(jìn)行溫度對(duì)酶催化活性影響的探究，得氫酶為材料進(jìn)行溫度對(duì)酶催化活性影響的探究，

20、得到下圖所示的結(jié)果，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出到下圖所示的結(jié)果，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出“過(guò)氧化氫過(guò)氧化氫酶能耐受酶能耐受100高溫高溫”的結(jié)論，請(qǐng)問(wèn)這一結(jié)論是否可的結(jié)論，請(qǐng)問(wèn)這一結(jié)論是否可靠？為什么？靠？為什么？ 不可靠，高溫也能使過(guò)氧化氫酶分解不可靠，高溫也能使過(guò)氧化氫酶分解 。物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA.多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是一種體外迅速擴(kuò)增）是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。請(qǐng)回答下列有關(guān)片段的技術(shù)。請(qǐng)回答下列有關(guān)PCR技術(shù)的基本技術(shù)的基本原理及應(yīng)用問(wèn)題。原理及應(yīng)用問(wèn)題。（1）DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?，通常將的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?，通常?的末端稱(chēng)為的末端稱(chēng)為5端，當(dāng)引物與端，當(dāng)引物與

21、DNA母鏈通過(guò)堿母鏈通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合后，基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合后，DNA聚合酶就能從引物的聚合酶就能從引物的 開(kāi)始延伸開(kāi)始延伸DNA鏈。鏈。（2）PCR利用了利用了DNA的熱變性原理解決了打開(kāi)的熱變性原理解決了打開(kāi)DNA雙鏈的問(wèn)題，但又導(dǎo)致了雙鏈的問(wèn)題，但又導(dǎo)致了DNA聚合酶失活的新聚合酶失活的新問(wèn)題。到問(wèn)題。到20世紀(jì)世紀(jì)80年代，科學(xué)家從一種年代，科學(xué)家從一種TaqTaq細(xì)菌中分細(xì)菌中分離到離到 ，它的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用解，它的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用解決了上述問(wèn)題；要將決了上述問(wèn)題；要將TaqTaq細(xì)菌從其他普通的微生物中細(xì)菌從其他普通的微生物中分離出來(lái)，所用的培養(yǎng)基叫分離出來(lái)，所用的培養(yǎng)基叫 。磷酸基團(tuán)磷酸基團(tuán)

22、3端端耐高溫的耐高溫的TaqTaq DNA聚合酶聚合酶選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA（3）PCR的每次循環(huán)可以分為的每次循環(huán)可以分為 三三步。假設(shè)在步。假設(shè)在PCR反應(yīng)中，只有一個(gè)反應(yīng)中，只有一個(gè)DNA片段作為模片段作為模板，請(qǐng)計(jì)算在板，請(qǐng)計(jì)算在5次循環(huán)后，反應(yīng)物中大約有次循環(huán)后，反應(yīng)物中大約有 個(gè)這個(gè)這樣的樣的DNA片段。片段。（4）請(qǐng)用簡(jiǎn)圖表示出一個(gè)）請(qǐng)用簡(jiǎn)圖表示出一個(gè)DNA片段片段PCR反應(yīng)中第二反應(yīng)中第二輪的產(chǎn)物。輪的產(chǎn)物。變性、復(fù)性和延伸變性、復(fù)性和延伸32答案答案物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA（5）簡(jiǎn)述）簡(jiǎn)述PCR技術(shù)的主要應(yīng)用。技術(shù)的主要應(yīng)用。 （要求（要求3項(xiàng)以上）。項(xiàng)以上

23、）。關(guān)鍵信息關(guān)鍵信息 “過(guò)氧化氫酶過(guò)氧化氫酶”、“緩沖液緩沖液”、“透析透析”、“PCR”、“反向平行反向平行”、“DNA片段片段”知識(shí)依據(jù)知識(shí)依據(jù) 蛋白質(zhì)的提取與分離，蛋白質(zhì)的提取與分離，PCR技術(shù)技術(shù)遺傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學(xué)、基因克隆遺傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學(xué)、基因克隆和和DNA序列測(cè)定序列測(cè)定完整分析完整分析 .（1）酶的活性受酸堿度、溫度等條件的）酶的活性受酸堿度、溫度等條件的影響。使用緩沖溶液達(dá)到細(xì)胞因吸水而漲破的目的，影響。使用緩沖溶液達(dá)到細(xì)胞因吸水而漲破的目的，又不會(huì)因溶液酸堿度不適宜而影響酶的活性。（又不會(huì)因溶液酸堿度不適宜而影響酶的活性。（2）透）透析去除分

24、子量較小的雜質(zhì)，即樣品的粗分離。（析去除分子量較小的雜質(zhì)，即樣品的粗分離。（3）電）電泳技術(shù)就是在電場(chǎng)的作用下，利用待分離樣品中各種泳技術(shù)就是在電場(chǎng)的作用下，利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)以及分子本身大小、形狀等性質(zhì)的差分子帶電性質(zhì)以及分子本身大小、形狀等性質(zhì)的差物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA異，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而達(dá)到對(duì)樣異，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而達(dá)到對(duì)樣品進(jìn)行分離、鑒定或提純的目的。（品進(jìn)行分離、鑒定或提純的目的。（4）在該實(shí)驗(yàn)中溫）在該實(shí)驗(yàn)中溫度應(yīng)是實(shí)驗(yàn)變量，所以為了確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，度應(yīng)是實(shí)驗(yàn)變量，所以為了確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，應(yīng)該排除其他能導(dǎo)致過(guò)氧化氫酶分解的

25、因素。應(yīng)該排除其他能導(dǎo)致過(guò)氧化氫酶分解的因素。.（1）DNA聚合酶工作時(shí)必須要有一個(gè)引物，它只聚合酶工作時(shí)必須要有一個(gè)引物，它只能把新的核苷酸加到已經(jīng)存在的核酸的能把新的核苷酸加到已經(jīng)存在的核酸的3羥基上，羥基上，與與DNA母鏈結(jié)合的母鏈結(jié)合的RNA引物就提供這個(gè)羥基。（引物就提供這個(gè)羥基。（2）因因PCR利用了利用了DNA的熱變性原理解決了打開(kāi)的熱變性原理解決了打開(kāi)DNA雙鏈，雙鏈，所以用于催化所以用于催化DNA復(fù)制過(guò)程的復(fù)制過(guò)程的DNA聚合酶要具有耐高聚合酶要具有耐高溫的特性。用選擇培養(yǎng)基可將溫的特性。用選擇培養(yǎng)基可將TaqTaq細(xì)菌從其他普通的微細(xì)菌從其他普通的微生物中分離出來(lái)。（生物中

26、分離出來(lái)。（3）DNA復(fù)制的兩條鏈均復(fù)制的兩條鏈均物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA作為模板，進(jìn)行半保留復(fù)制，所以復(fù)制作為模板，進(jìn)行半保留復(fù)制，所以復(fù)制5次后得到的子次后得到的子代代DNA分子數(shù)為分子數(shù)為25=32個(gè)。（個(gè)。（4）新合成的）新合成的DNA鏈帶有鏈帶有引物，而最初的模板引物，而最初的模板DNA的兩條鏈不帶有引物。（的兩條鏈不帶有引物。（5）PCR技術(shù)可以對(duì)技術(shù)可以對(duì)DNA分子進(jìn)行擴(kuò)增，所以可用于遺傳分子進(jìn)行擴(kuò)增，所以可用于遺傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學(xué)、基因克隆和疾病的診斷、刑偵破案、古生物學(xué)、基因克隆和DNA序列測(cè)定等方面。序列測(cè)定等方面。物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA 圖示植物芳香油（玫瑰精

27、油、橘皮精油、胡圖示植物芳香油（玫瑰精油、橘皮精油、胡蘿卜素）的提取步驟。蘿卜素）的提取步驟。答案答案 （1）玫瑰精油的提取實(shí)驗(yàn)流程（水蒸氣蒸餾法）玫瑰精油的提取實(shí)驗(yàn)流程（水蒸氣蒸餾法）鮮玫瑰花鮮玫瑰花+清水（清水（1 4）水蒸氣蒸餾水蒸氣蒸餾油水混合物油水混合物 分離油層分離油層 除水除水 玫瑰油。玫瑰油。（2）橘皮精油的提取實(shí)驗(yàn)流程（壓榨法）橘皮精油的提取實(shí)驗(yàn)流程（壓榨法）石灰水浸泡石灰水浸泡漂洗漂洗壓榨壓榨過(guò)濾過(guò)濾靜置靜置再次過(guò)濾再次過(guò)濾橘橘皮油。皮油。（3）胡蘿卜素的提取實(shí)驗(yàn)流程（萃取法）胡蘿卜素的提取實(shí)驗(yàn)流程（萃取法）胡蘿卜胡蘿卜粉碎粉碎干燥干燥萃取萃取過(guò)濾過(guò)濾濃縮濃縮胡蘿卜素。胡蘿

28、卜素。植物有效成分提取植物有效成分提取加入加入NaCl加入無(wú)水加入無(wú)水Na2SO4過(guò)濾過(guò)濾物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA思考：上述各過(guò)程的原理是什么？思考：上述各過(guò)程的原理是什么？答案答案 （1）水蒸氣蒸餾法：原理是利用水蒸氣將揮）水蒸氣蒸餾法：原理是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來(lái)。發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來(lái)。（2）壓榨法原理是通過(guò)機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的）壓榨法原理是通過(guò)機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油。芳香油。（3）萃取法原理是使提取物溶解在有機(jī)溶劑中，蒸）萃取法原理是使提取物溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)后得到提取物。發(fā)后得到提取物。 生物組織中有機(jī)物的提取方法有很多生物組織中有機(jī)物的提取方

29、法有很多種。例如，凝膠色譜法、電泳法、蒸餾法、壓榨法種。例如，凝膠色譜法、電泳法、蒸餾法、壓榨法和萃取法等，不同的有機(jī)物提取的方法各有不同。和萃取法等，不同的有機(jī)物提取的方法各有不同。物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA（1）玫瑰精油稱(chēng)為）玫瑰精油稱(chēng)為“液體黃金液體黃金”，是世界香料工業(yè)不，是世界香料工業(yè)不可取代的原料，提取出的玫瑰精油要求不含有任何添可取代的原料，提取出的玫瑰精油要求不含有任何添加劑或化學(xué)原料，其提取方法主要是加劑或化學(xué)原料，其提取方法主要是 。（2）杏仁油富含礦物質(zhì)和維生素，是一種質(zhì)地輕柔、）杏仁油富含礦物質(zhì)和維生素，是一種質(zhì)地輕柔、高滲透性的保濕劑，主要通過(guò)高滲透性的保濕劑，主要通過(guò)

30、法提取。法提取。（3）萃取胡蘿卜素前，要將胡蘿卜徹底粉碎的主要目）萃取胡蘿卜素前，要將胡蘿卜徹底粉碎的主要目的是的是 。（4）血紅蛋白的提取方法可以采用）血紅蛋白的提取方法可以采用 ，該，該方法主要是利用血紅蛋白的哪一特性將它與其他物質(zhì)方法主要是利用血紅蛋白的哪一特性將它與其他物質(zhì)分開(kāi)的？分開(kāi)的？ 。水蒸氣蒸餾法水蒸氣蒸餾法壓榨壓榨使原料顆粒變小，提高萃取效率使原料顆粒變小，提高萃取效率相對(duì)分子質(zhì)量的大小相對(duì)分子質(zhì)量的大小凝膠色譜法凝膠色譜法物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA關(guān)鍵信息關(guān)鍵信息 “不含有任何添加劑或化學(xué)原料不含有任何添加劑或化學(xué)原料”、“杏杏仁油仁油”、“徹底粉碎徹底粉碎”、“血紅蛋白血紅蛋

31、白”知識(shí)依據(jù)知識(shí)依據(jù) 有機(jī)物的提取方法（水蒸氣蒸餾法、壓榨有機(jī)物的提取方法（水蒸氣蒸餾法、壓榨法、萃取法、凝膠色譜法）法、萃取法、凝膠色譜法）完整分析完整分析 （1）玫瑰精油不能含有任何化學(xué)原料，）玫瑰精油不能含有任何化學(xué)原料，所以不能用萃取法，而其又具有揮發(fā)性較強(qiáng)等特點(diǎn)，所以不能用萃取法，而其又具有揮發(fā)性較強(qiáng)等特點(diǎn)，適于水蒸氣蒸餾法。（適于水蒸氣蒸餾法。（2）杏仁油的提取原料為種子，）杏仁油的提取原料為種子，一般用于食用，應(yīng)采用壓榨法。（一般用于食用，應(yīng)采用壓榨法。（3）萃取法的萃?。┹腿》ǖ妮腿⌒试谠舷嗤瑫r(shí)決定于萃取劑的性質(zhì)和使用量。效率在原料相同時(shí)決定于萃取劑的性質(zhì)和使用量。（4）血

32、紅蛋白分子大小與成熟紅細(xì)胞中其他成分相）血紅蛋白分子大小與成熟紅細(xì)胞中其他成分相差較大。差較大。物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA1.DNA粗提取與鑒定中各種方法目的粗提取與鑒定中各種方法目的方法方法 目的目的 溶于溶于NaCl溶溶液中并稀釋液中并稀釋 NaCl溶液物質(zhì)的量濃度為溶液物質(zhì)的量濃度為2 mol/L時(shí)，時(shí)，DNA溶溶解，而部分蛋白質(zhì)發(fā)生鹽析而生成沉淀，通過(guò)過(guò)解，而部分蛋白質(zhì)發(fā)生鹽析而生成沉淀，通過(guò)過(guò)濾可除去部分蛋白質(zhì)及不溶于濾可除去部分蛋白質(zhì)及不溶于NaCl溶液的雜質(zhì)溶液的雜質(zhì)當(dāng)當(dāng)NaCl溶液稀釋至溶液稀釋至0.14 mol/L時(shí)，時(shí)，DNA析出，析出，過(guò)濾可除去溶于過(guò)濾可除去溶于NaCl溶液

33、的部分蛋白質(zhì)和其他溶液的部分蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)雜質(zhì) 加入嫩肉粉加入嫩肉粉 嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白質(zhì)嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白質(zhì) 加入冷卻酒精加入冷卻酒精（95%） DNA析出，除去溶于酒精的蛋白質(zhì)析出，除去溶于酒精的蛋白質(zhì) 加入二苯胺，并加入二苯胺，并沸水浴沸水浴 鑒定鑒定DNA 物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA （1）實(shí)驗(yàn)過(guò)程中兩次用到蒸餾水，第一次目的是使）實(shí)驗(yàn)過(guò)程中兩次用到蒸餾水，第一次目的是使成熟的雞血細(xì)胞漲破釋放出成熟的雞血細(xì)胞漲破釋放出DNA，第二次目的是，第二次目的是稀釋稀釋NaCl溶液，使溶液，使DNA從溶液中析出。從溶液中析出。 （2）本實(shí)驗(yàn)用雞血細(xì)胞作實(shí)驗(yàn)材料，不能用哺乳動(dòng)

34、）本實(shí)驗(yàn)用雞血細(xì)胞作實(shí)驗(yàn)材料，不能用哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞，原因是哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞內(nèi)物的成熟紅細(xì)胞，原因是哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞內(nèi)無(wú)細(xì)胞核，但它可以作為血紅蛋白提取和制備細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核，但它可以作為血紅蛋白提取和制備細(xì)胞膜的理想材料。膜的理想材料。物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA2.細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制與復(fù)制與PCR技術(shù)的比較技術(shù)的比較細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制復(fù)制 PCR不不同同點(diǎn)點(diǎn)解旋解旋在解旋酶作用下邊在解旋酶作用下邊解旋邊復(fù)制解旋邊復(fù)制 80100高溫解高溫解旋，雙鏈分開(kāi)旋，雙鏈分開(kāi) 酶酶 DNA解旋酶、解旋酶、DNA聚合酶聚合酶 TaqTaq DNA聚合酶聚合酶 引物引物 RNA DNA或或RNA

35、 溫度溫度 體內(nèi)溫和條件體內(nèi)溫和條件 高溫高溫 相相同同點(diǎn)點(diǎn) 需提供需提供DNA復(fù)制的模板復(fù)制的模板四種脫氧核苷酸作原料四種脫氧核苷酸作原料子鏈延伸的方向都是從子鏈延伸的方向都是從5端到端到3端端都需要酶的催化都需要酶的催化 物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA3.用層析法鑒定時(shí)應(yīng)注意的問(wèn)題用層析法鑒定時(shí)應(yīng)注意的問(wèn)題 （1）選擇干凈的濾紙，為防止操作時(shí)濾紙的污染，）選擇干凈的濾紙，為防止操作時(shí)濾紙的污染，應(yīng)盡量避免用手直接接觸濾紙，可以戴手套應(yīng)盡量避免用手直接接觸濾紙，可以戴手套進(jìn)行操作。進(jìn)行操作。 （2）點(diǎn)樣時(shí)應(yīng)注意點(diǎn)樣圓點(diǎn)不能太大（直徑應(yīng)為）點(diǎn)樣時(shí)應(yīng)注意點(diǎn)樣圓點(diǎn)不能太大（直徑應(yīng)為2 mm左右），如果用吹

36、風(fēng)機(jī)吹干，溫度不宜過(guò)高，左右），如果用吹風(fēng)機(jī)吹干，溫度不宜過(guò)高，否則斑點(diǎn)會(huì)變黃。否則斑點(diǎn)會(huì)變黃。 （3）將點(diǎn)好樣的濾紙卷成圓筒狀，卷紙時(shí)注意濾）將點(diǎn)好樣的濾紙卷成圓筒狀，卷紙時(shí)注意濾紙兩邊不能互相接觸，以免因毛細(xì)管現(xiàn)象導(dǎo)致溶劑紙兩邊不能互相接觸，以免因毛細(xì)管現(xiàn)象導(dǎo)致溶劑沿濾紙兩邊的移動(dòng)加快，使溶劑前沿不齊，影響結(jié)沿濾紙兩邊的移動(dòng)加快，使溶劑前沿不齊，影響結(jié)果。果。物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA一、選擇題一、選擇題1.下列為探究某種加酶洗衣粉所需要的最適溫度的實(shí)驗(yàn)下列為探究某種加酶洗衣粉所需要的最適溫度的實(shí)驗(yàn)方案，其中正確的是方案，其中正確的是（）A.取一系列不同溫度、其他條件相同的水，加入相取一系列不

37、同溫度、其他條件相同的水，加入相 同的污物及等量加酶洗衣粉，看哪一個(gè)溫度中酶同的污物及等量加酶洗衣粉，看哪一個(gè)溫度中酶 的效果最好的效果最好B.在不同溫度的水中，加入不等量洗衣粉，看哪種在不同溫度的水中，加入不等量洗衣粉，看哪種 效果好效果好C.將加酶洗衣粉加入將加酶洗衣粉加入30水中不如加到水中不如加到45的水的水 中洗滌效果好，說(shuō)明中洗滌效果好，說(shuō)明45為最適溫度為最適溫度D.將加酶洗衣粉與普通洗衣粉分別加入將加酶洗衣粉與普通洗衣粉分別加入37的水的水 中洗滌同樣的污物，發(fā)現(xiàn)加酶洗衣粉效果好，說(shuō)中洗滌同樣的污物，發(fā)現(xiàn)加酶洗衣粉效果好，說(shuō) 明加酶洗衣粉的最適溫度為明加酶洗衣粉的最適溫度為37

38、物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA解析解析 探究某種加酶洗衣粉所需要的最適溫度，需探究某種加酶洗衣粉所需要的最適溫度，需要以溫度為實(shí)驗(yàn)變量設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)，觀察指標(biāo)為不要以溫度為實(shí)驗(yàn)變量設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)，觀察指標(biāo)為不同溫度環(huán)境中洗衣粉的去污效果，其他的無(wú)關(guān)變量同溫度環(huán)境中洗衣粉的去污效果，其他的無(wú)關(guān)變量均需控制；均需控制；B中洗衣粉不等量；中洗衣粉不等量；C中溫度變化太少，中溫度變化太少，只能說(shuō)明只能說(shuō)明45比比30酶活性高，而不能說(shuō)明酶活性高，而不能說(shuō)明45就是最適溫度；就是最適溫度；D中實(shí)驗(yàn)變量為酶的有無(wú)，實(shí)驗(yàn)結(jié)中實(shí)驗(yàn)變量為酶的有無(wú)，實(shí)驗(yàn)結(jié)論是加酶洗衣粉比普通洗衣粉有較強(qiáng)的去污能力，論是加酶洗衣粉比普通洗衣粉

39、有較強(qiáng)的去污能力，而不能得到酶的最適溫度。而不能得到酶的最適溫度。答案答案 A物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA2.（09南京調(diào)研）某同學(xué)進(jìn)行南京調(diào)研）某同學(xué)進(jìn)行“加酶洗衣粉和普通加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗滌效果比較洗衣粉的洗滌效果比較”課題研究。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)如下：課題研究。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)如下：設(shè)置設(shè)置2組實(shí)驗(yàn)，分別使用蛋白酶洗衣粉和復(fù)合酶組實(shí)驗(yàn)，分別使用蛋白酶洗衣粉和復(fù)合酶洗衣粉洗衣粉 2組實(shí)驗(yàn)的洗衣粉用量、被洗滌的衣物組實(shí)驗(yàn)的洗衣粉用量、被洗滌的衣物量、衣物質(zhì)地、污染物性質(zhì)和量、被污染的時(shí)間、量、衣物質(zhì)地、污染物性質(zhì)和量、被污染的時(shí)間、洗滌時(shí)間、洗滌方式等全部相同，洗滌溫度都為洗滌時(shí)間、洗滌方式等全部相同，洗滌

40、溫度都為35 根據(jù)污漬去除程度得出結(jié)論根據(jù)污漬去除程度得出結(jié)論這個(gè)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中，錯(cuò)誤的是這個(gè)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中，錯(cuò)誤的是（）A.B.C.D.解析解析 該題考查加酶洗衣粉與普通洗衣粉洗滌效果該題考查加酶洗衣粉與普通洗衣粉洗滌效果的比較。設(shè)置對(duì)照時(shí)，應(yīng)該是加酶洗衣粉和普通洗的比較。設(shè)置對(duì)照時(shí)，應(yīng)該是加酶洗衣粉和普通洗衣粉兩種洗衣粉的比較對(duì)照。衣粉兩種洗衣粉的比較對(duì)照。A物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA3.（改編題）右圖為某同學(xué)利（改編題）右圖為某同學(xué)利用海藻酸鈉固定酵母細(xì)胞的用海藻酸鈉固定酵母細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，出現(xiàn)此結(jié)果的原實(shí)驗(yàn)結(jié)果，出現(xiàn)此結(jié)果的原因，不可能是因，不可能是（）A.海藻酸鈉濃度過(guò)高海藻酸鈉濃度過(guò)高B.酵母

41、細(xì)胞已經(jīng)死亡酵母細(xì)胞已經(jīng)死亡C.注射器中的溶液推進(jìn)速度過(guò)快注射器中的溶液推進(jìn)速度過(guò)快D.注射器距離注射器距離CaCl2溶液液面太近溶液液面太近解析解析 該實(shí)驗(yàn)結(jié)果的出現(xiàn)是因海藻酸鈉濃度過(guò)高該實(shí)驗(yàn)結(jié)果的出現(xiàn)是因海藻酸鈉濃度過(guò)高（或酵母菌濃度過(guò)低）、注射器距離（或酵母菌濃度過(guò)低）、注射器距離CaCl2溶液液溶液液面太近或注射器中的溶液推進(jìn)速度過(guò)快，而不是酵面太近或注射器中的溶液推進(jìn)速度過(guò)快，而不是酵母菌死亡。母菌死亡。B物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA4.（09江蘇四市）下列操作可以達(dá)到目的的選項(xiàng)是江蘇四市）下列操作可以達(dá)到目的的選項(xiàng)是（）選項(xiàng)選項(xiàng) 操作操作 目的目的A溶解海藻酸鈉時(shí)用大溶解海藻酸鈉時(shí)用大火

42、加熱火加熱 海藻酸鈉可以快速海藻酸鈉可以快速溶解溶解 B將裝有蛋白質(zhì)粗制品將裝有蛋白質(zhì)粗制品的透析袋（玻璃紙制的透析袋（玻璃紙制成）放入透析液中成）放入透析液中 蛋白質(zhì)與其他小分蛋白質(zhì)與其他小分子化合物分離子化合物分離 C在在DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中，粗提取實(shí)驗(yàn)中，雞血中加入蒸餾水雞血中加入蒸餾水 稀釋血液，防止凝稀釋血液，防止凝固固 D洋蔥根尖解離后漂洗洋蔥根尖解離后漂洗 使細(xì)胞分散，利于使細(xì)胞分散，利于觀察觀察 物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA解析解析 溶解海藻酸鈉時(shí)微火加熱并不斷攪拌，其目的溶解海藻酸鈉時(shí)微火加熱并不斷攪拌，其目的是防止海藻酸鈉焦煳。在是防止海藻酸鈉焦煳。在DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中，雞血粗提取

43、實(shí)驗(yàn)中，雞血中加入蒸餾水，其目的是促使血細(xì)胞破裂。洋蔥根中加入蒸餾水，其目的是促使血細(xì)胞破裂。洋蔥根尖解離后漂洗是防止根尖過(guò)分解離，對(duì)染色造成影尖解離后漂洗是防止根尖過(guò)分解離，對(duì)染色造成影響。因玻璃紙是半透膜，所以將裝有蛋白質(zhì)粗制品響。因玻璃紙是半透膜，所以將裝有蛋白質(zhì)粗制品的透析袋（玻璃紙制成）放入透析液中，可以將蛋的透析袋（玻璃紙制成）放入透析液中，可以將蛋白質(zhì)與其他小分子化合物分離。白質(zhì)與其他小分子化合物分離。答案答案 B物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA5.（09南通調(diào)研）下圖為南通調(diào)研）下圖為“DNA粗提取和鑒定粗提取和鑒定”實(shí)實(shí)驗(yàn)的相關(guān)操作。這些操作目的正確的是驗(yàn)的相關(guān)操作。這些操作目的正確的

44、是（）物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNAA.是洗滌血細(xì)胞，去除血細(xì)胞表面的雜質(zhì)是洗滌血細(xì)胞，去除血細(xì)胞表面的雜質(zhì)B.是溶解是溶解DNA，去除不溶于酒精的雜質(zhì)，去除不溶于酒精的雜質(zhì)C.是溶解是溶解DNA，去除不溶于，去除不溶于2 mol/L NaCl溶液溶液 的雜質(zhì)的雜質(zhì)D.是稀釋是稀釋NaCl溶液，去除不溶于低濃度溶液，去除不溶于低濃度NaCl溶溶 液的雜質(zhì)液的雜質(zhì)解析解析 考查考查DNA粗提取和鑒定。粗提取和鑒定。是釋放核物質(zhì)，是釋放核物質(zhì)，是提純是提純DNA，去除溶于酒精的雜質(zhì)，去除溶于酒精的雜質(zhì)，稀釋稀釋NaCl溶液，析出溶液，析出DNA。答案答案 C物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA6.（09徐州調(diào)研）已知某

45、樣品中存在甲、乙、丙、丁、徐州調(diào)研）已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì)分子，其分子大小、電荷的性質(zhì)和數(shù)量情戊五種蛋白質(zhì)分子，其分子大小、電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如下圖所示，下列有關(guān)蛋白質(zhì)分離的敘述正確的是況如下圖所示，下列有關(guān)蛋白質(zhì)分離的敘述正確的是（）A.分子甲與分子乙所帶電荷性質(zhì)不同分子甲與分子乙所帶電荷性質(zhì)不同B.若用凝膠色譜柱分離樣品中的蛋白質(zhì)，則分子甲若用凝膠色譜柱分離樣品中的蛋白質(zhì)，則分子甲 移動(dòng)速度最慢移動(dòng)速度最慢物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNAC.若將樣品以若將樣品以2 000 r/min的速度離心的速度離心10 min，分，分 子丁存在于沉淀中，則分子甲也一定存在于沉淀中子丁存在

46、于沉淀中，則分子甲也一定存在于沉淀中D.將樣品裝入透析袋中透析將樣品裝入透析袋中透析12 h，若分子丙保留在袋，若分子丙保留在袋 內(nèi)，則分子乙也一定保留在袋內(nèi)內(nèi)，則分子乙也一定保留在袋內(nèi)解析解析 該題考查蛋白質(zhì)分離技術(shù)。分子甲和乙所帶電荷該題考查蛋白質(zhì)分離技術(shù)。分子甲和乙所帶電荷性質(zhì)相同。甲的分子量小于丁、丙的分子量大于乙，故性質(zhì)相同。甲的分子量小于丁、丙的分子量大于乙，故C、D說(shuō)法不對(duì)。說(shuō)法不對(duì)。答案答案 B物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA7.在制備固定化酵母細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中，在制備固定化酵母細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中，CaCl2溶液的作用溶液的作用是是（）A.用于調(diào)節(jié)溶液用于調(diào)節(jié)溶液pHB.用于進(jìn)行離子交換用于進(jìn)行離

47、子交換C.用于膠體聚沉用于膠體聚沉D.用于為酵母菌提供用于為酵母菌提供Ca2+解析解析 海藻酸鈉膠體在海藻酸鈉膠體在CaCl2這種電解質(zhì)溶液的作用下，這種電解質(zhì)溶液的作用下，發(fā)生聚沉，形成凝膠珠，其作用機(jī)理是無(wú)機(jī)鹽離子的發(fā)生聚沉，形成凝膠珠，其作用機(jī)理是無(wú)機(jī)鹽離子的電荷與膠體微粒電荷相互吸引，形成更大的膠體顆粒，電荷與膠體微粒電荷相互吸引，形成更大的膠體顆粒，類(lèi)似于人體細(xì)胞與抗凝集素之間的凝集反應(yīng)。在制備類(lèi)似于人體細(xì)胞與抗凝集素之間的凝集反應(yīng)。在制備固定化酵母細(xì)胞的過(guò)程中，制備固定化酵母細(xì)胞的過(guò)程中，制備CaCl2溶液用的是無(wú)溶液用的是無(wú)水水CaCl2。C物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA8.關(guān)于關(guān)于DN

48、A的復(fù)制，下列敘述正確的是（的復(fù)制，下列敘述正確的是（）A.DNA聚合酶不能從頭開(kāi)始合成聚合酶不能從頭開(kāi)始合成DNA，只能從，只能從 5端延伸端延伸DNA鏈鏈B.DNA復(fù)制不需要引物復(fù)制不需要引物C.引物與引物與DNA母鏈通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)進(jìn)行結(jié)合母鏈通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)進(jìn)行結(jié)合D.DNA的合成方向總是從子鏈的的合成方向總是從子鏈的3端向端向5端延伸端延伸解析解析 由于由于DNA聚合酶不能從頭開(kāi)始合成聚合酶不能從頭開(kāi)始合成DNA，只，只能從引物的能從引物的3端開(kāi)始即復(fù)制方向由端開(kāi)始即復(fù)制方向由3端向端向5端延伸。端延伸。由于由于DNA分子是反向平行的，子鏈?zhǔn)且罁?jù)堿基互補(bǔ)分子是反向平行的，子鏈?zhǔn)且罁?jù)堿

49、基互補(bǔ)配對(duì)原則，在配對(duì)原則，在DNA聚合酶的作用下合成的，其合成聚合酶的作用下合成的，其合成是從子鏈?zhǔn)菑淖渔?端向端向3端延伸。端延伸。C物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA9.在植物有效成分的提取過(guò)程中，常用萃取法、蒸餾在植物有效成分的提取過(guò)程中，常用萃取法、蒸餾法和壓榨法，下列關(guān)于這三種方法的敘述，錯(cuò)誤的法和壓榨法，下列關(guān)于這三種方法的敘述，錯(cuò)誤的是是（）A.蒸餾法的實(shí)驗(yàn)原理是利用水將芳香油溶解下來(lái)，蒸餾法的實(shí)驗(yàn)原理是利用水將芳香油溶解下來(lái)， 再把水蒸發(fā)掉，剩余的就是芳香油再把水蒸發(fā)掉，剩余的就是芳香油B.壓榨法的實(shí)驗(yàn)原理是通過(guò)機(jī)械加壓，壓榨出果皮壓榨法的實(shí)驗(yàn)原理是通過(guò)機(jī)械加壓，壓榨出果皮 中的芳香油中

50、的芳香油C.萃取法的實(shí)驗(yàn)原理是使芳香油溶解在有機(jī)溶劑萃取法的實(shí)驗(yàn)原理是使芳香油溶解在有機(jī)溶劑 中，蒸發(fā)掉溶劑后就可獲得芳香油中，蒸發(fā)掉溶劑后就可獲得芳香油D.蒸餾法適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的蒸餾法適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的 芳香油芳香油物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA解析解析 蒸餾法是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油蒸餾法是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來(lái)，適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)攜帶出來(lái)，適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油。壓榨法通過(guò)機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的的芳香油。壓榨法通過(guò)機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油，適用于柑橘、檸檬等易焦煳原料的提取。芳香油，適用于柑

51、橘、檸檬等易焦煳原料的提取。萃取法使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)掉溶劑后萃取法使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)掉溶劑后就可獲得芳香油，它的適用范圍廣，要求原料的顆就可獲得芳香油，它的適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶液中。粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶液中。答案答案 A物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA10.（09鹽城鹽城4月）在血紅蛋白的提取和分離實(shí)驗(yàn)中，月）在血紅蛋白的提取和分離實(shí)驗(yàn)中，下列操作正確的是下列操作正確的是（）A.分離紅細(xì)胞時(shí)需去除上層透明的黃色血漿分離紅細(xì)胞時(shí)需去除上層透明的黃色血漿B.紅細(xì)胞釋放出血紅蛋白時(shí)只需加入蒸餾水紅細(xì)胞釋放出血紅蛋白時(shí)只需加入蒸餾水C.

52、分離血紅蛋白溶液是低速短時(shí)間離心分離血紅蛋白溶液是低速短時(shí)間離心D.洗脫時(shí)，待紅色蛋白質(zhì)下移即開(kāi)始收集流出液洗脫時(shí)，待紅色蛋白質(zhì)下移即開(kāi)始收集流出液解析解析 分離紅細(xì)胞時(shí)要及時(shí)除去血漿蛋白。釋放紅分離紅細(xì)胞時(shí)要及時(shí)除去血漿蛋白。釋放紅細(xì)胞時(shí)需要加入蒸餾水和甲苯。分離血細(xì)胞時(shí)，要細(xì)胞時(shí)需要加入蒸餾水和甲苯。分離血細(xì)胞時(shí)，要短時(shí)低速離心，即一般為短時(shí)低速離心，即一般為500 r/min，離心，離心2 min，否則白細(xì)胞會(huì)一同沉淀，達(dá)不到分離效果。分離血否則白細(xì)胞會(huì)一同沉淀，達(dá)不到分離效果。分離血紅蛋白時(shí)要高速長(zhǎng)時(shí)間離心，以紅蛋白時(shí)要高速長(zhǎng)時(shí)間離心，以2 000 r/min的速的速度離心度離心10

53、min。洗脫時(shí)待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜。洗脫時(shí)待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端用試管收集流出液。柱底端用試管收集流出液。A物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA11.（09江蘇生物改編）下列關(guān)于江蘇生物改編）下列關(guān)于DNA和蛋白質(zhì)提和蛋白質(zhì)提取與分離實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的有取與分離實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的有（）A.提取細(xì)胞中的提取細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)都需用蒸餾水漲破和蛋白質(zhì)都需用蒸餾水漲破 細(xì)胞細(xì)胞B.用不同濃度用不同濃度NaCl溶液反復(fù)溶解與析出溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去可去 除蛋白質(zhì)除蛋白質(zhì)C.蛋白質(zhì)提取和分離過(guò)程中進(jìn)行透析可以去除溶液蛋白質(zhì)提取和分離過(guò)程中進(jìn)行透析可以去除溶液 中的中的DNAD.只有蛋白質(zhì)可以用電泳

54、的方法進(jìn)行分離純化，而只有蛋白質(zhì)可以用電泳的方法進(jìn)行分離純化，而 DNA不可以用電泳方法進(jìn)行分離純化不可以用電泳方法進(jìn)行分離純化物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA解析解析 提取提取DNA需用蒸餾水漲破細(xì)胞，提取蛋白質(zhì)需用蒸餾水漲破細(xì)胞，提取蛋白質(zhì)可以直接用豆?jié){或研磨的大豆；透析法不能除去可以直接用豆?jié){或研磨的大豆；透析法不能除去DNA；DNA在不同濃度的在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不溶液中的溶解度不同，在同，在0.14 mol/L的的NaCl溶液中溶液中DNA的溶解度最的溶解度最低，低，DNA可以析出，通過(guò)過(guò)濾可以除去蛋白質(zhì)；可以析出，通過(guò)過(guò)濾可以除去蛋白質(zhì)；用電泳的方法可將蛋白質(zhì)、用電泳的方法可將

55、蛋白質(zhì)、DNA進(jìn)行分離純化。進(jìn)行分離純化。答案答案 B物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA12.下列有關(guān)固定化酶和固定化細(xì)胞的說(shuō)法，正確的是下列有關(guān)固定化酶和固定化細(xì)胞的說(shuō)法，正確的是（）A.某種固定化酶的優(yōu)勢(shì)在于能催化一系列生化反應(yīng)某種固定化酶的優(yōu)勢(shì)在于能催化一系列生化反應(yīng)B.固定化細(xì)胞技術(shù)一次只能固定一種酶固定化細(xì)胞技術(shù)一次只能固定一種酶C.固定化酶和固定化細(xì)胞的共同點(diǎn)是所固定的酶都固定化酶和固定化細(xì)胞的共同點(diǎn)是所固定的酶都 可以反復(fù)使用可以反復(fù)使用D.固定化酶和固定化細(xì)胞都能反復(fù)使用，但酶的活固定化酶和固定化細(xì)胞都能反復(fù)使用，但酶的活 性迅速下降性迅速下降解析解析 某種固定化酶只能催化一種生化反應(yīng)，其

56、優(yōu)勢(shì)某種固定化酶只能催化一種生化反應(yīng)，其優(yōu)勢(shì)是酶可以反復(fù)的使用；固定化細(xì)胞技術(shù)一次能固定多是酶可以反復(fù)的使用；固定化細(xì)胞技術(shù)一次能固定多種酶；固定化酶和固定化細(xì)胞都能反復(fù)使用，而且酶種酶；固定化酶和固定化細(xì)胞都能反復(fù)使用，而且酶的活性不變。的活性不變。C物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA二、非選擇題二、非選擇題13.（09泰安模擬）與普通洗衣粉相比，加酶洗衣粉泰安模擬）與普通洗衣粉相比，加酶洗衣粉能更有效地清除頑漬，同時(shí)減少對(duì)環(huán)境的污染，因能更有效地清除頑漬，同時(shí)減少對(duì)環(huán)境的污染，因此非常受人們的歡迎。請(qǐng)分析回答下列有關(guān)問(wèn)題：此非常受人們的歡迎。請(qǐng)分析回答下列有關(guān)問(wèn)題： （1）為探究洗衣粉加酶后的洗滌效果

57、，在不同溫度）為探究洗衣粉加酶后的洗滌效果，在不同溫度下分別進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：每次都將同種無(wú)酶洗衣粉分下分別進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：每次都將同種無(wú)酶洗衣粉分成成3等份，進(jìn)行等份，進(jìn)行3組實(shí)驗(yàn)。甲、乙組在洗衣粉中加組實(shí)驗(yàn)。甲、乙組在洗衣粉中加入入1種或種或2種酶，丙組不加酶，在不同溫度下清洗種酶，丙組不加酶，在不同溫度下清洗同種化纖布上的同種化纖布上的2種污漬，其他實(shí)驗(yàn)條件均相同，種污漬，其他實(shí)驗(yàn)條件均相同，下表為實(shí)驗(yàn)記錄。下表為實(shí)驗(yàn)記錄。物質(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA水溫水溫/ 1020304050組別組別 甲甲乙乙丙丙甲甲乙乙丙丙甲甲乙乙丙丙甲甲乙乙丙丙甲甲乙乙丙丙清除血漬時(shí)清除血漬時(shí)間間/min 6766885

58、2518336347711123891167清除油漬時(shí)清除油漬時(shí)間間/min 93789587639182468575277769868由上表可知，甲組在洗衣粉中加入了由上表可知，甲組在洗衣粉中加入了 ，乙組在洗衣粉，乙組在洗衣粉中加入了中加入了 。提高洗衣粉去污能力的方法有。提高洗衣粉去污能力的方法有 。如果甲、乙和丙三組均在水溫為。如果甲、乙和丙三組均在水溫為80時(shí)時(shí)洗滌同一種污漬，請(qǐng)比較這三組洗滌效果之間的差異并說(shuō)明理洗滌同一種污漬，請(qǐng)比較這三組洗滌效果之間的差異并說(shuō)明理由：由： 。蛋白酶蛋白酶蛋白酶和脂肪酶蛋白酶和脂肪酶加加酶和適當(dāng)提高溫度酶和適當(dāng)提高溫度沒(méi)有差異，因?yàn)楦邷厥姑甘Щ顩](méi)有差異，因?yàn)楦邷厥姑甘Щ钗镔|(zhì)提取及應(yīng)用酶DNA（2）目前使用的加酶洗衣粉都是一次性的，某大型）目前使用的加酶洗衣粉都是一次性的，某大型洗滌公司為降低成本，他們使用一種技術(shù)將酶固定洗滌公司為降低成本，他們使用一種技術(shù)將酶固定在不溶于水的某種載體上，洗滌完衣物后，經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)在不溶于水的某種載體上，洗滌完衣物后