固氮菌、解磷菌的分離篩選.doc

1、精品文檔固氮菌、解磷菌的分離篩選一、目的要求 :1、掌握選擇培養(yǎng)基的篩選原理。2、掌握固氮菌、解磷菌的分離方法。3、學(xué)習(xí)平板劃線分離法。二、實(shí)驗(yàn)原理：選擇培養(yǎng)基是根據(jù)某一種或某一類微生物的特殊營養(yǎng)要求或?qū)σ恍┪锢砘瘜W(xué)抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基， 利用這種培養(yǎng)基可以將所需的微生物從混雜的微生物中分離出來。固氮菌可以利用空氣中的氮作為氮源進(jìn)行自身代謝， 根據(jù)這一原理可以利用無氮培養(yǎng)基將固氮菌從混合菌中分離出來。 解磷菌可以在含有難溶性磷酸鹽或有機(jī)磷的固體培養(yǎng)基產(chǎn)生溶磷圈，根據(jù)這一特性可以分離出解磷菌。同樣，可以根據(jù)解鉀菌的生理特性選擇合適的培養(yǎng)基將其分離出來。在本實(shí)驗(yàn)中，分離固氮菌我們采用阿須貝氏（ As

2、hby）培養(yǎng)基，分離解磷菌采用無機(jī)磷培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基的配方如下Ashby 培養(yǎng)基：磷酸二氫鉀 (KH2PO4)0.2 g硫酸鎂 (MgSO4 7H2O)0.2 g氯化鈉 (NaCl)0.2 g碳酸鈣 (CaCO3)5.0 g甘露醇 (C6H14O6)10.0 g硫酸鈣 (CaSO4 2H2O)0.1 g瓊脂18.0 g蒸餾水1000 mLpH6.8 7.0無機(jī)磷培養(yǎng)基：葡萄糖10.0 g(NH?) ?SO?0.5 gNaCl0.3 gKCl0.3 gMgSO?7H?O0.3 gFeSO?7H?O0.03 gMnSO? 4H?O0.03 gCa?(PO?) ?10 g瓊脂18 g蒸餾水1000

3、 ml三、實(shí)驗(yàn)材料 :1、試劑及樣品： Ashby 培養(yǎng)基、無機(jī)磷培養(yǎng)基、無菌水、土壤樣品（自帶）。2、儀器及其它用具：培養(yǎng)皿、玻璃棒、燒杯、量筒、天平、高壓蒸汽滅菌鍋、生化培養(yǎng)箱、超凈工作臺、接種環(huán)、酒精燈、 PH試紙等。1 歡迎下載精品文檔四、方法步驟 :培養(yǎng)基的配制1、根據(jù)要求，配置好三種培養(yǎng)基，115條件下高壓滅菌25min。2、將滅菌后的培養(yǎng)基在超凈工作臺倒平板，備用。樣品處理3、在離心管中，將自帶土壤樣品按5g 土樣 10ml 無菌水 的比例溶解，土壤樣品要充分溶解，使土壤中的微生物全部溶解在無菌水中。4、樣品溶解后，將離心管放在離心機(jī)中，3000rmin ，離心 5min。接種5、在超凈工作臺，用滅菌的接種環(huán)蘸取離心后上清液，用平板劃線分離法分別在 Ashby 培養(yǎng)基和無機(jī)磷培養(yǎng)基上接種土樣各一個(gè)平板。6、接種完成后在培養(yǎng)基上貼上標(biāo)簽，注明培養(yǎng)基名稱和樣品編號，接種日期。如 Ashby， 2011.8.27 ；無機(jī)磷 2011.8.27 。7、將培養(yǎng)皿放在恒溫培養(yǎng)箱中 28培養(yǎng)。2 歡迎下載精品文檔歡迎您的下