常用溶劑物理常數(shù)精制

1、 附錄2 常用溶劑物理常數(shù)和精制方法溶劑沸點解電常數(shù)比重一般精制處理備注石油醚3060609090120 工業(yè)石油醚1公斤用工業(yè)硫酸80毫升充分振搖,放置,分出下層,可根據(jù)硫酸層顏色的深淺,酌情振搖二到三次,石油醚用少量稀氫氧化鈉洗,再用水洗至中性,無水氯化鈣干燥,重蒸,按沸程收集.一般國外沸程3070稱為石油醚Petrolcum ether5070稱Petroleum bonyino 75120 稱Ligroin苯79處理同上乙醚10工業(yè)乙醚用硫酸亞鐵或10%亞硫酸氫鈉溶液振搖(除去過氯化物和水溶性雜質(zhì))13次,無水氯化鈣干燥,重蒸.氯仿61.25.2

2、1.439以稀氫氧化鉀洗滌,再用水洗23次,以無水氯化鈣干燥,重蒸.氯仿不能用金屬鈉干燥,用容易引起爆炸.乙酸乙酯02工業(yè)用乙酸乙酯用50%碳酸鈉洗至2次 ,以無水氯化鈣干燥,重蒸.丙酮90工業(yè)丙酮加0.1%高錳酸鉀,搖勻,放12天(或回流4小時,至高錳酸鉀顏色不褪,以無水硫酸鈉干燥,重蒸)不宜用金屬鈉,五氧化二磷脫水,不宜用于處理氧化鋁.經(jīng)高錳酸鉀處理后,重蒸時務必小心,蒸至小體積即可,不得蒸干.因有時候能產(chǎn)生過氧化物,引起爆炸.乙醇78.826.80.794*工業(yè)酒精加生石灰回流24小時,重蒸.甲醇54.631.20.742一般重蒸即可,如含有醛酮

3、,可以用高錳酸鉀大致測定醛酮含量,加過量的 鹽酸羥胺回流4小時后,重蒸.重蒸吡啶115.40.787*用氫氧化鉀干燥重蒸注本表所列重蒸一般可收集沸點上下2的餾出部分20，*者為15測定。 附錄5 共沸混合溶劑序號溶劑（重量比）沸點 770mmHg介電常數(shù)0.05251乙酸乙酯環(huán)己烷46.054.071.63.952異丙醇二異丙醚16.383.766.25.753乙酸甲酯環(huán)乙烷83.017.054.95.804乙醇氯仿8.092.059.46.055乙醇四氯化碳16.084.065.06.306乙醇苯31.7068.368.07.507乙醇庚烷48.052.072.09.508甲醇氯仿12.68

4、7.453.49.809甲醇二氯甲烷7.392.737.810.5010乙醇苯環(huán)己烷30.410.858.865.056.5611甲醇乙酸乙酯環(huán)己烷17.848.633.650.88.3512甲醇丙酮環(huán)己烷16.043.540.551.113.2513甲醇乙酸乙酯17.782.353.910.7514丁酮庚烷73.027.077.010.7515甲醇苯39.160.957.513.4016丙酮環(huán)己烷67.532.558.013.7517乙醇甲苯68.032.076.517.2518丁酮氯仿83.017.079.917.3019丙酮四氯化碳87.412.656.019.3020甲醇丙酮12.08

5、8.056.422.0521水乙醇4.096.078.225.4022甲醇乙酸甲酯氯仿21.627.051.456.413.6523乙醇丙酮氯仿10.424.365.363.213.9024甲醇丙酮氯仿23.030.047.057.519.30附錄4 分離各類成分的溶劑系統(tǒng)和顯色劑化合物類型溶劑系統(tǒng)顯色劑脂肪酸及其酯類乙醚乙烷甲醇(25:74:1)乙醚乙烷(30:100)二乙醚石油醚(5:95)己烷苯(65:35)己烷苯(5:5)50%硫酸5%鄰鉑酸的4%鹽酸醇溶液蠟酯類二乙醚乙醚(5:95)膽固醇類石油醚二乙醚(4:1)二乙醚5%硫酸含氧脂肪酸二乙醚石油醚(4:1)甾醇類異丙醇氯仿(1.5:

6、98.5)氯仿己烷乙醚(4:1)己烷苯(5:3)石油醚苯(5:3)石油醚氯仿醋酸(75:25:0.5)50%硫酸五環(huán)三萜苯5%鹽酸醋酸乙酯苯5%硫酸和5%醋酸單甾烴類己烷苯五氯化銻氯仿溶液萜醇類己烷乙醚(4:1)己烷苯(5:3)石油醚氯仿醋酸(75:25:0.5)50%硫酸三氯化銻氯仿溶液揮發(fā)油己烷醋酸氯仿(6:2:2)甲苯醋酸乙酯(7:3)1%香英蘭醛濃硫酸溶液內(nèi)酰胺衍生物醋酸乙酯碘雌性激素異辛烷氯仿乙醇(40:70:10)50%硫酸.吡啶同系物附錄3 常用溶劑性質(zhì)表溶劑名稱及結構沸點介電常數(shù)溶解度(2025)溶劑在水中水在溶劑中正己烷C6H1430651.80不溶不溶石油醚691.580.

7、00095%0.0111%環(huán)己烷812.020.010%0.0055%二氧六環(huán)1012.21任意混溶四氯化碳CCL4772.240.077%0.010%苯802.290.1780%0.063%甲苯1112.370.1515%0.0334%間二甲苯1372.380.0176%0.5402%二硫化碳CS2462.640.294%0.005%乙醚C2H50C2H5354.346.04%1.468%醋酸戊酯CH3COOC5H111494.750.17%1.15%氯仿CHCL3614.810.815%0.072%醋酸乙酯CH3COOC2H5776.028.08%2.94%醋酸CH3COOH1186.15

8、任意混溶苯胺1846.893.38%4.76%四氫呋喃667.58任意混溶苯酚1809.78(60)8.66%28.72%1,1二氯乙烷CH3CHCL257106.03%321;0代表不燃.*用有機溶劑萃取水溶液時會形成乳濁液,即使有可能分離也會變得很困難.溶液呈堿性時,這種乳濁液更易形成;加烯硫酸(如果可以的話)可以破壞這種乳濁液;將水相用鹽飽和(NaCL,Na2SO4等);加幾滴醇或醚(尤其當有機層是CHCL3時);將混合物經(jīng)行離心,這是最成功的方法之一. 附錄9 用于有機液體較強的去水劑試劑*與水形成的化合物注Na*NaOH,H2用于烴和醚的去水很出色;不得用于人和鹵代烴CaH2Ca(O

9、H)2 , H2最佳去水劑之一;比LiALH4緩慢但效率高相對較安全.用于烴,醚,胺,酯,C4和更高級的 醇(勿用于C1,C2,C3醇),不得用于醛和活潑羧基化合物LiALH4*LiOH,AL(OH)3,H2只使用于惰性溶劑烴基,芳基鹵(不能用于烷基鹵),醚;能與任何酸性氫和大多數(shù)功能團(鹵,?基,硝基,等等)反應.使用時要小心;多余者可慢慢加入乙酸乙酯加以破壞.BaO或CaoBa(OH)2或Ca(OH)2慢而有效;主要適用于醇類和醚類,但不易用于對強堿敏感的 化合物P2O5HPO3,H3PO4,H4P2O7非?？於倚矢?高度耐酸,建議先預干燥.僅用于惰性化合物(尤其適用于烴,醚,鹵代烴,

10、酸,酐) *最佳的去水劑應是能和水反應且是不可逆的(且不與溶劑溶質(zhì)反應);他們也是極其危險的,故先經(jīng)不太好的去水劑(見下)粗略干燥后才準使用這類去水劑，這類去水劑幾乎總是在蒸餾溶劑之前或在蒸餾過程中對他經(jīng)行去水。盡管MgCLO4是一種最有效的干燥劑之一，但不推薦，因為操作時會爆炸參考下列文獻：D.R.Burfield，K.H.Lee，and R.H Smither,J.Org.Chem,42,3060,(1977),以了解干燥劑的效率*J.T.Baker公司出售一種稱為Dri-Na的合金,含Na10%,Pb90%;這種干的,粒狀試劑只與空氣慢慢反應,但其干燥醚等溶劑的效率和Na相同.參考L.F

11、.Fieser and M.Fieser,Reagents，Vol.2（Wiley,New York，1969），P，385。*另一種危險性較小,但效率相當?shù)母稍飫┦荖a(CH3OCH2O)2ALH2,稱為Vitride(RealcoChemica)Campany出品,可自Eastman Kodak公司購得.附錄附錄1 薄層層析及紙層析常用顯色劑配制及顯色方法通用試劑(1) 重絡酸鉀-硫酸:檢查一般有機物.噴灑劑:5克重絡酸鉀溶于100毫升40%硫酸中.薄層檢查:噴灑后加熱到150至班點出現(xiàn)(2) 熒光素-溴:檢查不飽和化合物噴灑劑:0.1克熒光素溶于100毫升乙醇中溴試劑:5%的溴的四氯化碳

12、溶液噴灑后處理:噴灑熒光素溶液后,放置存有溴溶液的缸內(nèi),可于紫外線分析燈下檢查熒光,熒光素與溴化和成曙紅(Eosin)(無螢光),而不飽和化合物則成溴加成物,保留了原有熒光;若點樣較多,則呈黃色斑點,底板呈紅色.(3) 碘:檢查一般有機物. 方法:a 層析譜放密閉缸內(nèi)或瓷盤內(nèi)，缸內(nèi)預先放有碘結晶少許，大部分有機化合物呈棕色斑點。B 層析譜放碘蒸氣中5分鐘（或噴5碘的氯仿溶液）取出置空氣中待過量的碘蒸氣全部揮發(fā)后，噴1淀粉的水溶液，斑點轉成藍色。（4）硫酸：通用噴灑劑：5的濃硫酸乙醇溶液，或15濃硫酸正丁醇溶液，或濃硫酸醋酸（1：1）噴灑后處理：空氣中干燥15分鐘，再熱至110直至出現(xiàn)顏色或熒光

13、。（5）硝酸銀氫氧化銨（Tollen-Zaffaroni）試劑：檢查還原性物質(zhì)。溶液I : 0.1%N硝酸銀; 溶液II: 5N氫氧化銨噴灑劑: I和II以1:5混合(臨用前混合)噴灑后處理: 105加熱510分鐘,至深黑色斑點出現(xiàn). (6)磷鉬酸或磷鎢酸,硅鎢酸:檢查還原性物質(zhì),類脂體,生物堿,甾體噴灑劑: 510%磷鉬酸或磷鎢酸或硅鎢酸乙醇溶液噴灑后處理: 120加熱至斑點出現(xiàn).沉淀試劑: 1克硅鎢酸溶于20毫升水中,加10%鹽酸至強堿性. 生物堿 (7)硫酸?=硫酸:檢查生物堿及含碘化合物 噴灑劑: 0.1克硫酸?混懸于4毫升水中,加入1克三氯醋酸,加熱至沸,逐滴加入濃硫酸至澄清. 噴灑

14、后處理: 110加熱數(shù)分鐘至斑點出現(xiàn). (8)碘化鉍鉀(Dragendorff)試劑:檢查生物堿及其他含氟化合物.溶液I: 0.85克次硝酸鉍溶于10毫升冰醋酸40毫升水中溶劑II: 8克碘化鉀溶于20毫升水中.制備液I+II,等體積混合.可用于棕色瓶中保存較長時間,一般制備液可作沉淀試劑用.噴灑液: 制備液1毫升與2毫升醋酸,10毫升水混合即得(9).碘化汞鉀(Mayer)試劑: 檢查生物堿.制備液: 13.55克氯化汞和49.8克碘化鉀各溶于20毫升水中,等體積混合并用水稀釋至1000毫升.噴灑液: 制備液加1/10體積的17%鹽酸.噴灑后處理: 觀察斑點,并于紫外線熒光分析燈下檢出.(1

15、0) ?酸納-濃硫酸(Mandelin)試劑:檢查生物堿.1%酸納的濃硫酸溶液.與多種生物堿呈不同顏色.(11)碘碘化鉀(Wagner)試劑:檢查生物堿.1克碘及10克碘化鉀,溶于50毫升水中,加熱,加2毫升醋酸,再用水稀釋至100毫升.可作紙層板顯色劑,液可作沉淀試劑.酚類,鞣質(zhì) (12)三氯化鐵:檢查酚類及?酸. 噴灑劑:15%三氯化鐵的水溶液或乙醇溶液.并加鹽酸少許.?酸呈紅色斑點,酚類稱藍色或綠色斑點. (13)鐵氰化鉀-三氯化鉀:檢查酚類,芳香胺類及還原性物質(zhì).噴灑劑: 1%鐵氰化鉀水溶液,2%三氯化鐵水溶液.臨用前等體積混合.噴灑后處理: 噴灑后酚性物質(zhì)呈藍色斑點.再噴2N鹽酸,能

16、使顏色加深,紙譜可用烯鹽酸洗去噴灑液.(14) 4-胺基安替比林-鐵氰化鉀(Emerson反應): 檢查酚類.噴灑劑: I . 2%4-氨基安替比林乙醇溶液; II. 8%鐵氰化鉀水溶液. 或用0.9%4-氨基安替比林和5.4%鐵氰化鉀水溶液方法: 先噴灑I,再噴灑II,即顯色,或再放入密閉缸中,缸內(nèi)放25%氫氧化銨,即產(chǎn)生橙色至深紅色.(15) 對氨基苯磺酸,重氮鹽(Pauly試劑): 檢查酚類,芳香胺類及能偶合的雜環(huán)化合物. 噴灑劑: 4.5克對氨基苯磺酸,加熱溶于45毫升12N鹽酸中,用水稀釋至500毫升,取10毫升稀釋液用冰冷卻,加10毫升冷4.5%亞硝酸鈉水溶液,0放15分鐘(此試劑

17、于0可保存3天),用前加等體積1%碳酸鈉水溶液.一般重氮化試劑,也可用聯(lián)苯胺,對硝基苯胺等.(16) 對甲苯磺酸: 檢查甾體,黃酮,鞣質(zhì).噴灑劑: 20%對甲苯磺酸氯仿溶液.噴灑后處理: 100加熱數(shù)分鐘,紫外線分析燈下檢查熒光斑點.含氧雜環(huán)及蒽醌類*(17) 三氯化鋁: 檢查黃酮體.噴灑1%三氯化鋁乙醇液于紫外線熒光分析燈下檢示,呈黃色熒光(18)堿式醋酸鉛: 檢查黃酮體.噴灑劑: 飽和堿式醋酸鉛(或飽和醋酸鉛)水溶液.于紫外線熒光分析燈下檢查熒光斑點.(19)醋酸鎂: 檢查蒽醌甙,甙元及黃酮體噴灑劑: 0.5%醋酸鎂甲醇溶液方法: 90加熱5分鐘,呈紅色至紫色斑點.(20)氫氧化鉀: 檢查

18、香豆素,蒽醌甙及甙元噴灑劑: 510%氫氧化鉀的甲醇溶液.于日光及紫外線熒光分析燈下檢示斑點.萜類,甾體(21) 三氯化銻(Carr-Price試劑): 檢查甾體,萜類,皂類.噴灑劑: 25克三氯化銻溶于75克氯仿中(亦可以用氯仿或四氯化碳的飽和溶液).噴灑后處理: 100加熱5分鐘,于紫外線熒光分析燈下檢示熒光.(22) 五氯化銻: 檢查甾體,萜類,皂甙.噴灑劑: 五氯化銻-氯仿或四氯化碳(1:4),用前新鮮配制.噴灑后處理: 120加熱至斑點出現(xiàn),并于紫外線熒光分析燈下檢示.(23)香蘭醛-硫酸: 檢查高級醇類,酚類,甾體,萜類,芳香油.噴灑劑: 1克香蘭素溶于100毫升濃硫酸,或0.5克

19、香蘭醛溶于100毫升硫酸-乙醇(4:1)中.噴灑后處理: 室溫或120加熱觀察顯色斑點.(24) 4-二甲氨基苯甲醛,醋酸,磷酸(E.P.試劑): 檢查? Azulene 及?前體 Proazulene.噴灑劑: 0.25克4-二甲氨基苯甲醛,溶于50毫升醋酸5克85磷酸和20毫升水的混合液中(棕色瓶中保存數(shù)月) ?:烴室溫即成藍紫色斑點,前體于80加熱10分鐘出現(xiàn)藍紫色斑點. (25) 氯胺T三氯醋酸: 檢查強心甙. 噴灑劑: I. 3%氯仿T水溶液新鮮制備. II. 25%三氯醋酸乙醇溶液(能保存數(shù)天). 10毫升I加40毫升II,用前混合. 噴灑后處理: 110加熱7分鐘,紫外線熒光分析

20、燈下檢示呈藍色或黃色熒光. (26) 亞硝酸基鐵氰化鈉-氫氧化鈉(Legal試劑): 檢查不飽和內(nèi)酯;甲基酮或活性次甲基,常用于強心甙噴灑劑: 1克亞硝基鐵氰化鈉溶于100毫升2N氫氧化鈉-乙醇(1:1)的水溶液.顯紅色或紫色斑點. (27) 3,5-二硝基苯甲酸(Legal試劑): 檢查強心甙,-不飽和內(nèi)酯.噴灑劑: 1克3,5-二硝基苯甲酸溶于50毫升甲醇,加入1N氫氧化鉀50毫升.強心甙呈紫紅色斑點. 糖類(28) 鄰苯二甲基苯胺: 檢查還原糖. 噴灑劑: 0.93克苯氨,1.66克鄰苯二甲酸溶于100毫升水飽和的正丁醇中. 噴灑后處理: 105加熱10分鐘.(29) 2,3,5-Tri

21、phenyl-tetrazolium chloride (T.T.C.)：檢查還原糖及其他還原物質(zhì)。 溶液I：4（T.T.C.）甲醇溶液； 溶液II：1N氫氧化鈉。噴灑液：I，II，臨用前等體積混合。噴灑后處理：100加熱510分鐘，得紅色斑點。（30）Keller-Kiliani試劑：檢查去氧糖，常用于強心甙。試液：100毫升冰醋酸加三氯化鐵試液0.5毫升混合均勻.試樣1毫克加試液2毫克溶解后,沿試官管壁滴入濃硫酸2毫升,接觸面即顯棕色,漸變淺綠,藍色.最后冰醋酸層全部燃呈藍色.(31) 1,3-二羥基萘-磷酸: 檢查糖類.噴灑液: 0.2%1,3-二羥基萘(Naphthoresorcino

22、l)乙醇溶液100毫升,與10毫升85%磷酸混合.(32) 費林溶液(Fehling): 檢查還原糖.溶液I: 69.3克結晶硫酸銅溶于1000毫升水中.上述二溶液如不清可濾過.臨用前等體積混合. 氨基酸(33) 茚三酮: 檢查氨基酸及氨基糖.噴灑劑: 0.3克茚三酮溶于100毫升正丁醇,加入3毫升醋酸;或0.2克茚三酮溶于100毫升乙醇(或丙酮中).噴灑后處理: 110加熱至斑點出現(xiàn).(34) 吲哚醌: 檢查氨基酸和一些肽.噴灑劑: 0.2%吲哚醌(Isatin)丙酮溶液,含4%醋酸;或用100毫升1%吲哚醌丙酮溶液加10毫升醋酸.噴灑后處理: 100110加熱10分鐘.(35) 1,2-萘

23、醌-4-硫磺酸(Folin試劑): 檢查氨基酸.噴灑劑: 新鮮制備0.02克1,2-萘醌-4-磺酸鈉,溶于100毫升5%碳酸鈉中.噴灑后處理: 室溫放于,不同氨基酸出現(xiàn)不同顏色.有機酸(36) 酸堿指示劑: 檢查有機酸.噴灑劑: 0.05%溴酚藍(或溴甲酚綠,或溴麝香草酚藍)的乙醇溶液.(37) 氧化還原顯色劑: 檢查有機酸.噴灑劑: I. 0.075%溴甲酚綠及0.025%溴酚藍的無水乙醇液.II. 0.5%高錳酸鉀及1%碳酸鈉.10H2O的蒸餾水液.臨用前,取I和II按1:1混合后噴酒.噴酒后處理: 穩(wěn)定時間為510分鐘.對不同的有機酸在紙譜上呈現(xiàn)不同顏色.(38) ? (Acridine

24、): 檢查酸.噴灑劑: 0.005%的?乙醇溶劑.紫外線分析燈下呈黃色熒光.(39) 芳香胺-還原糖: 檢查酸.噴灑劑: 芳香胺(如苯氨5克)和還原糖(如木質(zhì)糖5克)溶于50%含水乙醇中.噴灑后處理: 125130加熱出現(xiàn)棕色斑點.實驗16 氧化苦參堿的提取和鑒定 中藥苦參是豆科植物苦參(Sophors Flavescens Ait)的干燥根,味苦,性寒,有清熱燥濕,殺蟲等作用.臨床上用于治療痢病,黃膽和皮膚瘙癢癥.近年還發(fā)現(xiàn)具有抗腫瘤,升白,抗病毒性肝炎等藥理作用,苦參中主要含生物堿,此外還有黃銅類成分.一, 苦參中主要已知生物堿的結構和性質(zhì)1.氧化苦參堿（oxymarrine）C12H24

25、N2O2，白色棱晶，易溶于水，甲醇，乙醇，氯仿，不溶于乙醚，苯。溶點：207208（不含結晶水）162163（含一個結晶水）7778（含多個結晶水）結晶水可在1451500。002mmHg下除去，可于許多金屬離子如Fe2 Cu2+ Cr3+等生成沉淀，？47.7(乙醇).2.苦參堿(matrine)C15H24N2O在輕石油醚中結晶時，由于溫度等條件不同，可以得到三種結晶（溶點分別為76 87 84）和一種流體即型。通常室溫下結晶得到的是型，易溶于水，甲醇，乙醇，氯仿，溶于苯，在乙醚中溶解度小。？39.11乙醇3.脫氫苦參堿(槐果堿)（sophocarpine）C15H24N2O白色棱晶。溶點

26、8081，易溶于甲醇乙醇氯仿，略溶于苯和乙醚，在水中溶解度小。？-29.44(乙醇)4.槐定(sophoridine)C15H24N2O白色棱晶，溶點106108，為苦參堿的一種空間異構體。二實驗目的與要求（1） 通過苦參生物堿的提取掌握用滲濾法和離子交換法提取生物堿的方法。（2） 掌握沙氏提取器的使用方法。（3） 掌握氧化鋁吸附薄層層離法和柱層層離法鑒定和分離生物堿的方法。三原理 氧化苦參堿為喹諾里西汀類生物堿，叔胺氮氧化合物與酸成鹽溶于水與非生物堿分開，提取的生物堿鹽的陽離子部分與H+型樹脂發(fā)生交換生物堿吸附在柱上，吸附有生物堿的樹脂，堿化呈游離生物堿，可被氯仿等有機溶劑提取。 R-SO3

27、-Na+ H+CL- R-SO3-H+ + NaCL SO3Na + H2O 生物堿 四. 實驗方法.1 酸水提取和離子交換（1） 滲漉法 取苦參堿400克,加入適量0.5%(g/v)的鹽酸濕潤后放置一小時，裝入滲濾液的PH值及生物堿反應，使?jié)B濾液通過離子交換脂柱，待經(jīng)過樹脂柱的濾液生物堿反應或微弱的反應時，停止交換，將樹脂倒入燒杯中，酮蒸餾水洗滌幾次，濾干，樹脂放入搪瓷盤中自然晾干。（2） 浸提法 300克？0.5HCL(g/v) 6倍量浸泡48小時，浸出浸液，。在處理12次，2次浸液全體合并。2 總生物堿的洗脫 將晾干的樹脂放入燒杯中，加14氨水，攪勻，使溫度適宜（樹脂充分膨脹，但又無過剩

28、的水）約用氨水3060毫升，靜置20分鐘后，裝入沙氏提取器中，用400毫升95的乙醇回流洗脫45小時（或用氯仿回流提取58小時）回收溶劑至干，所得浸膏用7080毫升氯仿溶解，并轉入分液漏斗，充分靜置后，棄掉上層油狀物，過濾氯酚溶液后用無水硫酸鈉干燥，回收氯仿至干，殘留物用23倍量丙酮處理，即析出固體粉末，放置，過濾，得生物堿粗品，丙酮重結晶一次得淺黃色產(chǎn)品。3 苦參生物堿的氧化鋁薄層鑒定。樣品：氧化苦參堿標準品，粗品，母液溶劑系統(tǒng)：氯仿：甲醇19：1（二次展開） 石油醚：乙醚：甲醇9：9：1顯色劑：改良碘化鉍鉀（改良Dragendorff）4 氧化苦參堿的分離與純制（1） 取0.2克氧化苦參堿

29、粗品用少量氧化鋁攪伴,30克氧化鋁(80120目,IIII)裝柱(145),先加30毫升氯仿洗脫,再用氯仿和甲醇(99:1)混合溶劑洗脫.速度控制在1毫升/分左右,每10毫升收集一份,經(jīng)薄層檢識,將氧化苦參堿的流份合并,回收溶劑至干,用少量丙酮溶解,放置吸晶,得氧化苦參堿純品,薄層檢識后,干燥,側溶點.（2） 苦參總堿0.1克進行低壓柱層析吸附劑:薄層用硅膠15克(已用NH4OH減活)洗脫劑:CHCL3 50毫升,CHCL3-MeOH(98:2)100毫升,(95:5)100毫升,MeOH100毫升流速1毫升/分 10毫升收集一份. 5. 氧化苦參堿的還原 取氧化苦參堿粗品1.0克,溶于15毫

30、升10%鹽酸水溶液中,放入1.0克鋅粉,室溫放置,不時搖動,放置24小時后過濾,濃度調(diào)到PH=910,用500毫升乙醚分多次提取.合并乙醚溶液,無水硫酸鈉干燥過夜,回收乙醚淡黃色粘稠體放置于冰箱中,得淺黃色固體,石油醚重結晶后得白色結晶,測熔點. 薄層檢識 氧化鋁干板(120目以上) 樣品:苦參堿標準品,氧化苦參堿標準品,苦參堿 溶劑系統(tǒng):氯仿:甲醇=8:2 顯色劑:改良碘化鉍鉀溶液 附:陽離子交換樹脂的處理(1) 預處理及轉型: 將100克聚苯乙烯磺酸鈉型樹脂(交聯(lián)度17%粒度范圍1650目)放入燒杯中,用80蒸餾水溫熱使之充分膨脹1小時,后加入2N鹽酸300毫升洗,水洗至PH57,5%Na

31、OH浸泡1H?浸泡過夜(注意開始要攪動幾次).次日把樹脂裝入層離柱,并使全部酸液流過樹脂柱,用蒸餾水洗至中性至無氯離子反應為止,可用于無生物堿交換.(2) 再生 將已洗去生物堿的樹脂,置滲濾筒中,加2倍的2N鹽酸浸泡過夜,次日樹脂上面的鹽酸慢慢流過樹脂,用水洗至中性,然后用5%的氫氧化鈉浸泡12小時,時常攪伴,傾倒出上層堿液,用餾水洗至中性,在空氣中晾干,留作下一次使用. 四. 思考題1. 酸水法及離子交換樹脂法提取分離生物堿的原理.2. 應如何檢查 (1)滲濾液中是否含有生物堿?(2)滲濾液中生物堿是否可以被交換在樹脂上? (3)離子交換樹脂是否已達到飽和? 3. 氧化鋁薄層層析的原理是什么

32、?適用于什么成分的分離鑒定?4. 當用硅膠薄層板層析時應如何操作?五. 參考文獻.1. 江蘇中醫(yī)學院:中藥大辭典 上海人民出版社 1977年2. 張寧芳: 中草藥通訊1977(1):38 1977(2):39. 19773. 中國醫(yī)科院第五研究室: 放射醫(yī)學 1977(1):1.19774. 白世澤等: 中草藥 13(4);8.19825. Shigenobu Okuda : Chem Pharm Bull 13:485.1965 實驗13 蘆丁的提取,分離及鑒定蘆丁(Rutin)亦稱蕓香苷（Rstinoside），廣泛存在于植物界中，其中以槐米和蕎麥葉的含量較高，可作為提取蘆丁的原料?；被?/p>

33、系豆科植物，Sophora japonica的花蕾，自古作為止血藥?；被字兴饕煞质|香苷有減少毛細血管的通透性作用，臨床上主要為防止高血壓病的輔助治療藥物。此外，蘆丁對于放射性傷害所引起的出血癥亦有一定作用。一實驗的目的和要求1 以蘆丁為實例學習黃酮類成分的提取分離方法。2 掌握黃酮類成分的主要性質(zhì)及黃酮苷，甙元和糖部分的鑒定方法。3 通過？皮素紫外吸收光譜的測定及應用化學位移確定黃酮類烴基位量的方法。4 通過？皮素與其五乙酰化合物的紅外光譜測定該化合物的功能團并與標準譜對照。二槐花米中已知主要成分的理化性質(zhì)： 槐花米中蘆丁的含量可高達20，另含少量的皂苷，皂苷水解后，可得到樺皮醇（Be

34、tulin C30H50O2）及槐二醇（Sophoradiol，C30H50O2）。1 蘆?。ㄊ|香苷 Rutin）本品為淡黃色細小針狀結晶，C27H36O16。3H2O，MP為177178，無水物MP190（不完全），214215發(fā)泡分解。蘆丁溶于熱水（1：200），難溶于冷水（1：8000）；溶于熱乙醇（1：7），冷乙醇（1：100）；熱乙醇（1：30）。冷乙醇（1：300），難溶于乙酸乙酯，丙酮，不溶于苯，氯仿，乙醚，及石油醚等溶劑。易溶于堿液中呈黃色，酸化后又析出。2？皮素（Quercettin）即云香苷苷元，為黃色結晶，C13H10O7，MP313314，無水溶點316。？皮素溶于熱乙

35、醇（1：23），冷乙醇（1：300）?？扇苡诒姿幔拎?，乙酸乙酯，丙酮等溶劑。不溶于石油醚，苯，乙醚，氯仿和水中。3 皂苷 易溶于水，吡啶，能溶于甲醇。經(jīng)酸水解后得樺皮醇及槐二醇，均溶于苯，乙醚，氯仿，丙酮，乙酸乙酯，乙醇，甲醇。 三自槐花米中提取蘆?。? 提取方法：方法1 ：取槐花米40克（完整），置于100毫升燒杯中，用冷水快速清洗去泥沙等雜質(zhì)瀝干水，加0.4硼砂水沸熔液400毫升,直火加熱微沸,即時側PH值,當PH數(shù)值改變成微酸性時,以石灰乳調(diào)至PH8,繼續(xù)加熱微沸30分鐘,隨時補充水份,同時保持PH8,靜置約510分鐘,傾出上清液,用尼龍布過濾,重復提取一次,合并濾液,將濾液用鹽酸調(diào)

36、至PH3左右,再加泥泊金,放置過夜,抽濾用水洗34次,空氣自然干燥得粗蘆丁.方法2：取槐花米20克,置于500毫升圓底燒瓶中,加乙醇150毫升,加熱回流1小時,稍冷后抽濾,濾渣再加乙醇100毫升回流1小時,合并乙醇提取液,放冷,析出絮狀沉淀.過濾,濾液濃縮至50毫升,放置過夜,析出結晶,濾去母液繼續(xù)濃縮一半,放置又析出結晶.合并結晶,用乙醚3050毫升分次洗去脂溶性成分(油脂,葉綠素等),再用丙酮10毫升洗滌一次,得粗蘆丁.2 重結晶方法方法一：取粗蘆丁2克，加乙醇5060毫升加熱溶解，呈熱抽濾，將濾液濃縮至2030毫升，放置，析出結晶，母液再濃縮一半，又析出結晶。合并結晶再用乙醇重結晶一次。

37、方法二：取粗蘆丁2克，加去離子水或蒸餾水400毫升，加熱煮沸，趁熱煮沸，趁熱抽濾（以滑石粉助濾）；放置過夜析晶（或放冷析晶）。抽濾。得精制蘆丁。思考題：提取蘆丁工藝中影響產(chǎn)量和質(zhì)量的因素是什么？為什么藥加硼砂水溶液？記錄：粗蘆丁得率多少？精制蘆丁得率多少？溶點？3 蘆丁的水解取蘆丁1克，加2H2SO4 80毫升，小火加熱微沸回流30分鐘至1小時。開始加熱10分鐘為澄清溶液，逐漸析出黃色小針狀結晶，即？皮素，抽濾取結晶（保留濾液20毫升，以檢查其中所含單糖），加50乙醇（按1克90毫升量）加熱回流使？皮素粗晶溶解，趁熱抽濾，放置結晶，抽濾得精制品，在減壓下110干燥可得？皮素無水物。測熔點，進行

38、紙層析法鑒定。思考題：蘆丁水解不完全時將產(chǎn)生什么結果？記錄：蘆丁的水解產(chǎn)物是什么？主要產(chǎn)物得率？溶點？四蘆丁，？皮素，糖及？皮素衍生物的鑒定：1 紙層析：新華一號層析濾紙樣品：自制蘆丁，？皮素對照品：蘆丁，？皮素展開劑：（1）正丁醇醋酸水（4：1：5上層或4：1：1）（2）25醋酸水溶液（3）85醋酸水溶液顯色： （1）可見光下觀察，再在紫外燈下觀察 （2）經(jīng)氨氣熏后再觀察 （3）噴三氯化鋁試劑后再觀察2 蘆丁和？皮素的聚酰胺薄層鑒定：樣品：同紙層析展開劑：乙醇水（7：3）顯色：同紙層析3 糖的檢出紙層析法取上述濾出？皮素時保留的水解濾液200毫升，加Ba(OH)2細粉（約2.克）中和至PH7

39、,濾除生成的BaSO4沉淀(可用滑石粉助濾),濾液濃縮至1毫升,供紙層析法點樣用.展開劑：正丁醇醋酸水（4：1：5上層或4：1：1）對照品：葡萄糖，鼠李糖水溶液顯色劑：苯氨鄰苯二甲酸試劑噴后，105烘10分鐘，顯棕色或棕紅色斑點。4 紅外光譜測定：5 ？皮素五甲醚的制備：??？皮素結晶400Mg置于150毫升三頸瓶中，加50毫升無水丙酮，裝上電動攪拌器，冷凝管及溫度計，加熱回流攪拌，每間隔一適當時間加入無水碳酸鉀0.2克和硫酸二甲醇0.2毫升,大約1.5小時后加完4克無水碳酸二甲酮,繼續(xù)加熱回流攪拌直至溶液黃色完全消退為止,約需45小時,停止加熱,取下燒杯,反應液經(jīng)過濾,沉淀用熱丙酮洗滌數(shù)次,合

40、并系,濾液,蒸餾回收部分丙酮,留存1015毫升,放置,漸漸析出無色結晶,表示過?的硫酸二甲酯存在,應加5%NaOH數(shù)滴,振搖使硫酸二甲酯水解,此時又可析出一小部分結晶(檢查所析出結晶對1%FeCL3的反應,甲基化完全者呈負反應),合并,以乙醇重結晶,得?皮素五甲醚(MP152153).甲基化不完全者時對三氯化鐵出呈正反應,主要產(chǎn)品為3,7,3”,4”甲醚,MP161161.5.6？皮素的降解 ??？皮素50Mg，置于50毫升的圓底燒瓶中，加水50毫升，乙醇6毫升，KOH？，置水浴上加熱回流10小時，蒸去乙醇，加水50毫升溶解，用稀鹽酸酸化至PH23，用乙醚萃取3次，合并乙醚液，回收乙醚，蒸滯小體

41、積供薄層層析點樣用。7？皮素降解產(chǎn)物的薄層層析：硅膠CMCNa薄層對照品：原兒茶酸（Protocatechuic acid），間苯三酚9Phlorogluoinol)。展開劑：氯仿丙酮醋酸（8：2：0.5）顯色劑：三氯化鐵試劑思考題：（1） 蘆丁和？皮素用不同展開劑系統(tǒng)展開層將出現(xiàn)什么結果？為什么？（2） 蘆丁和？皮素聚酰胺薄層將出現(xiàn)什么結果？為什么？（3） 試比較？皮素紅外光譜圖和五?；?？皮素紅外光譜圖的差異。記錄：（1） 蘆丁和？皮素的紙層析，聚酰胺薄層層析結果。（2） 糖的檢出紙層析結果。8紫外吸收光譜測定？皮素（一） 原理 利用紫外吸收光譜，測定黃酮化合物在加入各種電解質(zhì)或絡合劑后吸收

42、峰的位移，根據(jù)位移的情況，以判斷該化合物烴基的額位置。（二） 試劑配制1 無水乙醇：用分析純的甲醇，加入10CaO，放置24小時后并加熱回流1小時，回流時冷凝管頂端應安裝CaCL2干燥管，然后蒸餾得無水甲醇。2 甲醇鈉溶液：取0.25克金屬鈉,剪碎,小心的加入無水甲醇50毫升中,放置24小時后全溶.3 氫氧化鈉溶液：取2.5克無水三氯化鋁,加10毫升水溶解.4 三氯化鋁溶液：2.5克無水三氯化鋁(呈黃綠色)小心的加入無水甲醇50毫升中,放置24小時后全溶.5 醋酸鈉：用水粉狀醋酸鈉。6 硼酸飽和液：將無水硼酸加入適量無水甲醇，制成飽和溶液。依照上述方法制備的貯備液可放置6個月。 (三)測定方法

43、： 酮烴基位置的測定：精密稱取黃酮樣品（？皮素）約.mg，用無水甲醇溶解，在稀釋至100毫升。（1） 黃酮光譜：取樣品溶液約3毫升置于石英杯（1CM）中，在200300nm波段內(nèi)進行掃描。重測一次，視光譜的再現(xiàn)性。（2） 氫氧化鈉光譜：取樣品溶液約3毫升置于石英杯中，加入氫氧化鈉溶液23滴立即測定。放置5分鐘后，在進行測定。（3） 甲醇鈉光譜：取樣品溶液約3毫升置于石英杯中，加入甲醇鈉溶液57滴后，立即測定。放置5分鐘后，再進行測定。（4） 三氯化鋁光譜：在盛有約3毫升樣品溶液的石英杯中，加入三氯化鋁溶液6滴，放置1分鐘后進行測定。測定后，加入3滴鹽酸溶液（濃鹽酸：水1：1），再進行測定。（5

44、） 醋酸鈉光譜：取樣品溶液約3毫升置于石英杯中，加入過量的無水醋酸鈉固體，搖勻；杯底剩有2mm的醋酸鈉后，二分內(nèi)進行測定。 （三） 測定結果：？皮素加位移試劑結界表（）加入試劑編號II峰I峰位移值羥基無水甲醇1256371NaOH2430I峰594OHNaOH 52分解分解3，4OHMeONa3416I峰453OHMeONa53分解分解3，4OHALCL4270450I峰793，5及3，4OHALCL，HCL4265425I峰543，4OHNaAc5277387II峰217OHNaOAcH3BO36259385I峰143，4OH 克分子吸收系數(shù)的測定：根據(jù)已測定的黃酮光譜，測量吸收峰的波長和吸

45、收峰前后20nm的波長范圍。然后取樣品溶液約3毫升，置于1cm的石英杯中，用紫外光譜儀，仔細測量在上述波長范圍內(nèi)的各波長的吸收值，反復測定3次。 記錄：（1） 位移測定結果（2） 測定克分子吸收系數(shù)皂吸收峰前后20nm波長范圍內(nèi)，依次測定波長和吸收值，用方格紙作圖，精確的測出吸收峰的波長和吸收值，記錄測定結果。實驗三 薄層層析應用定形點滴反應鑒別天然產(chǎn)物中的化學成分,類別,純度和異同.薄層板上原位化學反應 一.定性點滴反應 1.樣品(1).氨基酸混合液(2).薄荷油 (3).蘆丁甲醇溶液(4)甘草次酸乙醇液(5)原兒茶酸乙醇液(6)小檗堿乙醇液 2.檢出試劑(1).三氯化鐵1%乙醇溶液(2).三氯化鋁1%乙醇溶液(3).茚三酮0.2%乙醇溶液(4).碘化鉍鉀(見附錄I)(5).*香草醛-硫酸 0.5%硫酸-乙醇(4:1)溶液(6)?酸5%乙醇溶液.3.實驗方法. 取硅膠CMC-Na薄層板12塊,用軟鉛筆按下圖劃線,構成方格,將各樣品先滴加于相應的格子中,再將各試劑分別自空白其5逐點點加試劑,觀察并記錄反應變化.具腐蝕性試劑也可用空白磁板. (1)(2)(3)(4)(5)(6)(7)