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1、LOGO實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一 PT PT測定測定手工法手工法原理原理 體外模擬外源性凝血過程的全部條件,在貧血小板血漿中加入組織因子和鈣離子后,血漿發(fā)生凝固的時間即為凝血酶原時間(PT)凝血酶原時間測定凝血酶原時間測定Prothrombin time ,PT一、原理一、原理 Ca2+腦磷脂腦磷脂PT組織因子組織因子Ca2+ 磷脂磷脂器材、試劑器材、試劑1. 1.水浴箱、試管、試管架、加樣槍、離心機(jī)、秒表水浴箱、試管、試管架、加樣槍、離心機(jī)、秒表2. 2.氯化鈣凝血活酶試劑氯化鈣凝血活酶試劑標(biāo)本采集標(biāo)本采集109mmol/L109mmol/L枸櫞酸鈉抗凝的靜脈血(枸櫞酸鈉抗凝的靜脈血(1 1:9 9)1
2、.8ml1.8ml血液和血液和0.2ml0.2ml抗凝劑抗凝劑操作步驟操作步驟 1. 1.采血采血 取空腹靜脈血取空腹靜脈血1.8ml1.8ml加入含有加入含有0.2ml 109mmol/L0.2ml 109mmol/L枸枸櫞酸鈉的塑料管或真空負(fù)壓管采集。櫞酸鈉的塑料管或真空負(fù)壓管采集。 2. 2.分離血漿分離血漿 抗凝血以抗凝血以3000r/min3000r/min離心離心10min10min,分離貧血小,分離貧血小板血漿備用板血漿備用 3. 3.溶解試劑溶解試劑 4. 4.預(yù)溫預(yù)溫 將鈣凝血活酶試劑、待檢血漿置于將鈣凝血活酶試劑、待檢血漿置于3737水浴箱內(nèi)水浴箱內(nèi)預(yù)溫。預(yù)溫。 5. 5.測定測定 取待檢血漿取待檢血漿0.1ml0.1ml加入預(yù)熱好的試管內(nèi),在加入凝加入預(yù)熱好的試管內(nèi),在加入凝血活酶試劑血活酶試劑0.2ml0.2ml混勻并開動秒表?;靹虿㈤_動秒表。8s8s后,不時取出試管后,不時取出試管觀察混合液的流動狀態(tài),當(dāng)流動停止時終止計(jì)時,記錄秒觀察混合液的流動狀態(tài),當(dāng)流動停止時終止計(jì)時,記錄秒數(shù),即為待檢血漿的數(shù),即為待檢血漿的PTPT秒數(shù)。秒數(shù)。血漿血漿0.1ml0.1mlPTPT試劑試劑0.0.2 2ml ml 混勻計(jì)時混勻計(jì)時 結(jié)果觀察:緩慢傾斜試管,觀察液體流動狀態(tài),流動結(jié)果觀察:緩慢傾斜試管,觀察液體流動狀態(tài),流動 停止后停
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