體外診斷試劑分析性能準確度-回收

1、體外診斷試劑分析性能評估（準確度 - 回收實驗）指導原則一、前言 準確度評估資料是評價擬上市產(chǎn)品有效性的重要依據(jù)， 也是產(chǎn)品注冊所需的重要申報資料之一。定量檢測方法的回 收實驗是評估準確度的方法之一，用于評估定量檢測方法準 確測定待測分析物的能力，結果用回收率表示。本指導原則基于國家食品藥品監(jiān)督管理局體外診斷試 劑注冊管理辦法（試行） 的有關要求，參考有關標準，對 采用回收實驗進行準確度評估的實驗方法和數(shù)據(jù)處理方法 進行了原則性要求。其目的是為生產(chǎn)企業(yè)采用回收實驗方法 進行準確度評估并準備準確度評估資料提供原則性指導，也 為注冊管理部門審核該部分分析性能評估資料提供技術參 考。由于體外診斷試劑

2、產(chǎn)品發(fā)展速度快、專業(yè)跨度大，國家 食品藥品監(jiān)督管理局將根據(jù)體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時 對本指導原則進行修訂。二、適用范圍 本指導原則適用于首次申請注冊、申請許可事項變更的 用于定量檢測的體外診斷產(chǎn)品。因體外診斷產(chǎn)品評價是將儀 器、試劑、質(zhì)控品、校準品等作為一個系統(tǒng)進行評價，因此回收實驗的評價采用系統(tǒng)的概念進行描述。如特殊產(chǎn)品不適 用于本指導原則，可進行詳細說明并采用適當?shù)姆椒ㄟM行準 確度評價。三、基本要求（一）回收實驗的基本要求1. 操作者應熟悉待評價系統(tǒng)的操作。2. 編寫系統(tǒng)標準操作規(guī)程，其中包括校準程序和室內(nèi)質(zhì) 控程序，采用合適的校準品、質(zhì)控品并保持系統(tǒng)處于正常狀 態(tài)。3. 待評價系統(tǒng)的

3、處理進行回收實驗前，應該對待評價系統(tǒng)進行初步評價，并 且對待評價系統(tǒng)進行精密度及線性評價（參考相關標準） 只有在以上評價完成并且符合相關標準要求后，才可進行回 收實驗。（二）回收實驗的評估及數(shù)據(jù)處理方法1.實驗樣本的基本要求和制備方法（1 ）選擇合適濃度的常規(guī)檢測樣本，分為體積相同的 3-4 份。（2 ）在其中 2-3 份樣本中加入不同濃度相同體積的待 測物標準液制備待回收分析樣本，加入體積小于原體積的 10% ，制成 2-3 個不同加入濃度的待回收分析樣本，計算加 入的待測物的濃度。(3)在另一份樣本中加入同樣體積的無待測物的溶劑， 制成基礎樣本。2. 實驗過程用待評價系統(tǒng)對待回收分析樣本和

4、基礎樣本進行測定，通常對樣本進行3次重復測定，計算均值，取其均值進行下 述計算。3. 數(shù)據(jù)處理及結果報告(1 )加入濃度n=標準液濃度n X標準液加入體積/(樣本 體積+標準液體積)(2)計算回收率：回收率X 100%測定待回收分析樣本羅度均臣n-測定墓礎樣本濃度均值 加入戒度鞏(3)計算平均回收率:平均回收率鮒率嚴收率古卄化)X100%n(4 )計算每個樣本回收率與平均回收率的差值：每個樣本回收率與平均回收率的差值=回收率n 平均回收率；如差值超過土 10%，應查找原因并糾正，重新進行評估。(5) 計算比例系統(tǒng)誤差：比例系統(tǒng)誤差 =|100% - 平均回收率|(6) 結果評估:結果至少應滿足

5、相關國際及國家標準，同時滿足臨床需求。4. 范例一一某法測定血清葡萄糖回收率(1)樣本制備： 基礎樣本血清：血清1ml (葡萄糖濃度 5.5mmol/L )+蒸餾水0.1ml;基礎樣本濃度= 5.5/(1+0.1)=5 mmol/L 回收樣本1:血清1ml+0.1ml葡萄糖水溶液(濃度22mmol/L ); 回收樣本2 :血清1ml+0.1ml葡萄糖水溶液(濃度55mmol/L );(2 )計算加入濃度：加入濃度 1 = 22 x0.1/(0.1 + 1.0) = 2mmol/L加入濃度 2 = 55 x0.1/(0.1 + 1.0) = 5mmol/L(3 )采用待評價系統(tǒng)，按照從低到高的濃

6、度順序，每個樣本測定3次，取平均值，填入表 1表1測定濃度加入濃度回收濃度回收mmol/Lmmol/Lmmol/L率%基礎樣本5.00分析樣本17.062.002.06103分析樣本29.955.004.9599回收濃度 1 = 7.06-5 = 2.06mmol/L回收濃度 2 = 9.95-5 = 4.95mmol/L7.06-5回收率 1 =I = 103 %9.9S-5 一 g回收率 2 =_1- - = 99 %(4)計算平均回收率：平均回收率103+992X100%101%。(5 )計算每個樣本回收率與平均回收率的差值：分析樣本 1:103 %- 101 %= 2%分析樣本 2 :

7、 99 %- 101 % = - 2%兩個樣本回收率與平均回收率的差值小于土 10%,(6) 計算比例系統(tǒng)誤差：比例系統(tǒng)誤差 =1100% - 101%| = 1%(7) 結果評估：1% 二5 -(CLIA 88 )，該方法的回收實驗(準確度)可接受。四、其它應注意的問題：(一) 加入體積：加入的待測物標準液體積一般在樣本 體積的10%以內(nèi)，如果高濃度的待測物標準液不易得到，加入體積亦不得超過原樣本體積的20%。加入的待測物標準液體積量不應影響樣本基質(zhì)；并且保證在加樣過程中的取樣準確度。（二）加入的溶劑應不影響對待測物的測定。（三）加入待測物標準液的濃度：保證總濃度在系統(tǒng)分 析測量范圍內(nèi)，盡量使加入標準液后樣本中的被測物濃度達 到醫(yī)學決定水平。（四）待測物標準液濃度：因為待測物標準液溶液加入 體積不到 10% ，為保證得到不同濃度的待回收分析樣本， 標 準液的濃度應該足夠高。五、名詞解釋（一）待評價系統(tǒng)：擬進行性能評估的產(chǎn)品。（二）待測物標準液 :待測物與相應的溶劑混合后制備的