微生物培養(yǎng)基的配制課件

1、LOGO微生物培養(yǎng)基的配制微生物培養(yǎng)基的配制微生物培養(yǎng)基的配制v一、培養(yǎng)基一、培養(yǎng)基v二、培養(yǎng)基配制原則二、培養(yǎng)基配制原則v三、培養(yǎng)基的種類三、培養(yǎng)基的種類v四、培養(yǎng)基配制的一般程序四、培養(yǎng)基配制的一般程序LOGO微生物培養(yǎng)基的配制一、培養(yǎng)基：一、培養(yǎng)基：v為人工培養(yǎng)微生物而制備的、提供適合微生為人工培養(yǎng)微生物而制備的、提供適合微生物生長、繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。物生長、繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。LOGO微生物培養(yǎng)基的配制二、培養(yǎng)基配制原則：二、培養(yǎng)基配制原則：v（1）目的要明確：根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)）目的要明確：根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的等確定配制培養(yǎng)基的種類，因為不同的目的等確

2、定配制培養(yǎng)基的種類，因為不同的微生物對培養(yǎng)物質(zhì)的需求不同。微生物對培養(yǎng)物質(zhì)的需求不同。v （2）營養(yǎng)要協(xié)調(diào)：注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃）營養(yǎng)要協(xié)調(diào)：注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例。度和比例。v （3）pH要適宜：各種微生物適宜生長的要適宜：各種微生物適宜生長的pH范圍不同。范圍不同。v 細菌細菌pH為：為：6.5-7.5；v 放線菌放線菌pH為：為：7.5-8.5；v 真菌真菌pH為：為：5.0-6.0。LOGO微生物培養(yǎng)基的配制v 微生物正常代謝過程中微生物正常代謝過程中pH會不會改變？會不會改變？v 如何維持培養(yǎng)基中如何維持培養(yǎng)基中pH的相對恒定？的相對恒定？v微生物在生長代謝過程中，由于營養(yǎng)物質(zhì)

3、的微生物在生長代謝過程中，由于營養(yǎng)物質(zhì)的利用和代謝產(chǎn)物的形成，往往會改變環(huán)境中利用和代謝產(chǎn)物的形成，往往會改變環(huán)境中的的pH。v可在培養(yǎng)基中加入可在培養(yǎng)基中加入緩沖劑緩沖劑，最常用的緩沖劑，最常用的緩沖劑是是KHPO4/KH2PO4LOGO微生物培養(yǎng)基的配制三、培養(yǎng)基的種類三、培養(yǎng)基的種類v據(jù)組成成分可分為: 1.合成培養(yǎng)基：合成培養(yǎng)基：由各種純化學(xué)物質(zhì)按一定比例配制而成。 v2.半合成培養(yǎng)基：半合成培養(yǎng)基：有一部分純化學(xué)物質(zhì)和另一部分天然物質(zhì)配制而成。 3.天然培養(yǎng)基：天然培養(yǎng)基：利用天然來源的有機物配制而成。v從培養(yǎng)基的物理狀態(tài)可分為 1.液體培養(yǎng)基：液體培養(yǎng)基：不加凝固劑的液體狀態(tài)培養(yǎng)基

4、。 2.固體培養(yǎng)基：固體培養(yǎng)基：在液體培養(yǎng)基中加入2%左右的凝固劑的固體狀態(tài)的培養(yǎng)基或農(nóng)副產(chǎn)品培養(yǎng)基。 3.半固體培養(yǎng)基：半固體培養(yǎng)基：在液體培養(yǎng)基中加入0.20.5%凝固劑而成的半固體狀培養(yǎng)基。LOGO微生物培養(yǎng)基的配制v天然培養(yǎng)基是用化學(xué)成分并不十分清楚或化學(xué)成分不恒定的天然有機物質(zhì)配制而成培養(yǎng)基。常用的有機物有牛肉膏、酵母膏、蛋白胨、麥芽汁、豆芽汁、玉米粉、麩皮、牛奶、血清等。如實驗室常用于培養(yǎng)細菌的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，及培養(yǎng)酵母菌的麥芽汁培養(yǎng)基等就屬于此類培養(yǎng)基。LOGO微生物培養(yǎng)基的配制按用途不同分為：按用途不同分為：v1基礎(chǔ)培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基:含有一般細菌生長繁殖需要的基本的營養(yǎng)物質(zhì)

5、。最常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基是上面提及的天然培養(yǎng)基中的牛肉膏蛋白胨培牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。養(yǎng)基。v2營養(yǎng)培養(yǎng)基（加富培養(yǎng)基）營養(yǎng)培養(yǎng)基（加富培養(yǎng)基）:在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營養(yǎng)物質(zhì)，如血液、血清、血液、血清、酵母浸膏或生長因子酵母浸膏或生長因子等。用以培養(yǎng)對營養(yǎng)要求高的微生物，如培養(yǎng)百日咳桿菌需要含有血液的培養(yǎng)基。在研究致病微生物致病微生物時常采用加富培養(yǎng)基。LOGO微生物培養(yǎng)基的配制v3鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基:是一類含有某種特定化合物或試劑的培養(yǎng)基。主要用于不同類型微生物的快速鑒定，如糖發(fā)酵管管。v4選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基:利用微生物對某種或某些化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同，在培養(yǎng)基中加入這類物質(zhì)，抑制不需要

6、的微生物生長，而利于所需分離的微生物生長，從而達到分離或鑒別某種微生物的目的，如分離真菌的馬丁氏培馬丁氏培養(yǎng)基養(yǎng)基。LOGO微生物培養(yǎng)基的配制 選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基v加入青霉素的培養(yǎng)基：v 分離酵母菌、霉菌等真菌分離酵母菌、霉菌等真菌v加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基：v 分離金黃色葡萄球菌分離金黃色葡萄球菌v不加氮源的無氮培養(yǎng)基：v 分離固氮菌分離固氮菌v不加含碳有機物的無碳培養(yǎng)基：v 分離自養(yǎng)型微生物分離自養(yǎng)型微生物v加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基：v 分離導(dǎo)入的目的基因的受體細胞分離導(dǎo)入的目的基因的受體細胞v加入氨基嘌呤、次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培養(yǎng)基： v 分離雜交瘤細胞分離雜交瘤細胞LOGO微生物

7、培養(yǎng)基的配制四、培養(yǎng)基配制的一般程序四、培養(yǎng)基配制的一般程序v 稱量：稱量：按照配方正確稱取各種原料放于搪瓷杯中。v 溶化：溶化：在搪瓷杯中加入所需水量，玻棒攪勻，加熱溶解。v 調(diào)調(diào)pH值：值：用1N NaOH或1N HCl調(diào)pH，用pH試紙對照。v 加瓊脂溶化加瓊脂溶化：加熱過程中要不斷攪拌，可適當補水。v 過濾過濾v 分裝：分裝：注意不要污染棉塞。v 包扎成捆包扎成捆，掛上標簽（必須用鉛筆寫），注明何種培養(yǎng)基。v 滅菌滅菌v 擺斜面擺斜面v 檢查：檢查：培養(yǎng)基滅菌后必須在370C下恒溫培養(yǎng)24h，確定無菌生長，方可使用。按培養(yǎng)基按培養(yǎng)基配方稱量配方稱量加水加加水加熱熔化熱熔化調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)pH值

8、值過濾過濾分裝分裝包裝包裝滅菌滅菌檢查滅菌檢查滅菌徹底與否徹底與否LOGO微生物培養(yǎng)基的配制v 牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基（用于分離和培養(yǎng)細菌，是一種天牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基（用于分離和培養(yǎng)細菌，是一種天然培養(yǎng)基）然培養(yǎng)基）屬基礎(chǔ)培養(yǎng)基屬基礎(chǔ)培養(yǎng)基v 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基是營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基是天然培養(yǎng)基，屬基礎(chǔ)培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基，屬基礎(chǔ)培養(yǎng)基v 馬鈴薯（或豆芽汁）蔗糖（或葡萄糖）瓊脂培養(yǎng)基（用于分馬鈴薯（或豆芽汁）蔗糖（或葡萄糖）瓊脂培養(yǎng)基（用于分離和培養(yǎng)真菌之用，是一種離和培養(yǎng)真菌之用，是一種半合成培養(yǎng)基半合成培養(yǎng)基）選選擇性合成培養(yǎng)擇性合成培養(yǎng)基?； 淀粉瓊脂培養(yǎng)基（高氏一號淀粉瓊脂培養(yǎng)基（高氏一號G

9、ause 1），用于分離和培養(yǎng)放），用于分離和培養(yǎng)放線菌，是一種線菌，是一種合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基。用于放線菌培養(yǎng)。選用于放線菌培養(yǎng)。選擇性合成培擇性合成培養(yǎng)基。養(yǎng)基。v 伊紅美蘭培養(yǎng)基（伊紅美蘭培養(yǎng)基（EMB培養(yǎng)基培養(yǎng)基）用于分離和）用于分離和鑒別鑒別大腸菌群。大腸菌群。v 用于分離、培養(yǎng)土壤真菌的用于分離、培養(yǎng)土壤真菌的馬丁氏培養(yǎng)基馬丁氏培養(yǎng)基：屬選：屬選擇性合成培擇性合成培養(yǎng)基。養(yǎng)基。v 乳糖膽鹽發(fā)酵管用于分離和培養(yǎng)大腸菌群屬乳糖膽鹽發(fā)酵管用于分離和培養(yǎng)大腸菌群屬選擇性培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基LOGO微生物培養(yǎng)基的配制v牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（用于用于細菌細菌培養(yǎng)培養(yǎng)） v高氏高

10、氏1號培養(yǎng)基號培養(yǎng)基(用于用于放線菌放線菌培養(yǎng)培養(yǎng)) v馬丁氏（馬丁氏（Martin）培養(yǎng)基（）培養(yǎng)基（用于從土壤中分離用于從土壤中分離真菌真菌） v馬鈴薯培養(yǎng)基馬鈴薯培養(yǎng)基(PDA)(用于用于霉菌或酵母菌霉菌或酵母菌培養(yǎng)培養(yǎng)) v察氏培養(yǎng)基察氏培養(yǎng)基(蔗糖硝酸鈉培養(yǎng)基蔗糖硝酸鈉培養(yǎng)基)(用于用于霉菌霉菌培養(yǎng)培養(yǎng)) v葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基(用于用于甲基紅甲基紅試驗試驗) v蛋白胨水培養(yǎng)基蛋白胨水培養(yǎng)基(用于用于吲哚吲哚試驗試驗)v糖發(fā)酵培養(yǎng)基糖發(fā)酵培養(yǎng)基(用于細菌用于細菌糖發(fā)酵糖發(fā)酵試驗試驗) v乳酸菌培養(yǎng)基乳酸菌培養(yǎng)基(用于用于乳酸乳酸發(fā)酵發(fā)酵)LOGO微生物培養(yǎng)基的配制v酒精發(fā)酵培養(yǎng)基酒精發(fā)酵培養(yǎng)基(用于用于酒精酒精發(fā)酵發(fā)酵)v乳糖蛋白胨半固體培養(yǎng)基乳糖蛋白胨半固體培養(yǎng)基(用于水體中用于水體中大腸菌群大腸菌群測定測定) v乳糖蛋白胨培養(yǎng)液乳糖蛋白胨培養(yǎng)液(用于多管發(fā)酵法