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1、第第二二講講微生物的培育與運(yùn)用微生物的培育與運(yùn)用NO.1雙基落實(shí) 系統(tǒng)化問(wèn)題化NO.3NO.2考點(diǎn)突破 題點(diǎn)化重點(diǎn)化演練提能 真題集訓(xùn)驗(yàn)才干NO.3演練提能 課下檢測(cè)查缺漏雙基落實(shí) 系統(tǒng)化問(wèn)題化NO.1NO.1基礎(chǔ)知識(shí)系統(tǒng)化基本技能問(wèn)題化編號(hào)編號(hào)成分成分(NH4)2SO4KH2PO4FeSO4CaCl2H2O含量含量0.4 g4.0 g0.5 g0.5 g100 mL考點(diǎn)突破 題點(diǎn)化重點(diǎn)化NO.2NO.2考點(diǎn)一考點(diǎn)一培育基及微生物的純化培育技術(shù)培育基及微生物的純化培育技術(shù)解析解析前往前往解析解析前往前往重難點(diǎn)撥重難點(diǎn)撥伊紅伊紅美藍(lán)培育基可以鑒別大腸桿菌美藍(lán)培育基可以鑒別大腸桿菌(菌落呈黑色菌落
2、呈黑色)鑒別培鑒別培育基育基培育基放在高溫環(huán)境中培育只能得到耐高溫的微生物培育基放在高溫環(huán)境中培育只能得到耐高溫的微生物石油是獨(dú)一碳源時(shí),可以抑制不能利用石油的微生物石油是獨(dú)一碳源時(shí),可以抑制不能利用石油的微生物的生長(zhǎng),使可以利用石油的微生物生存,到達(dá)分別能的生長(zhǎng),使可以利用石油的微生物生存,到達(dá)分別能消除石油污染的微生物的目的消除石油污染的微生物的目的不添加氮源的培育基用于分別固氮微生物不添加氮源的培育基用于分別固氮微生物以尿素作為獨(dú)一氮源的培育基用于分別分解尿素的細(xì)以尿素作為獨(dú)一氮源的培育基用于分別分解尿素的細(xì)菌菌培育基中參與高濃度的食鹽用于分別得到金黃色葡萄培育基中參與高濃度的食鹽用于分
3、別得到金黃色葡萄球菌球菌培育基中參與青霉素分別得到酵母菌和霉菌培育基中參與青霉素分別得到酵母菌和霉菌選擇培選擇培育基育基實(shí)例實(shí)例類(lèi)型類(lèi)型解析解析前往前往重難點(diǎn)撥重難點(diǎn)撥運(yùn)用范圍運(yùn)用范圍常用方法常用方法結(jié)果結(jié)果條件條件培育基及容器培育基及容器高壓蒸汽高壓蒸汽滅菌法滅菌法玻璃器皿、玻璃器皿、金屬器具金屬器具干熱滅菌法干熱滅菌法接種工具接種工具灼燒滅菌法灼燒滅菌法殺死物體內(nèi)殺死物體內(nèi)外一切的微外一切的微生物,包括生物,包括芽孢和孢子芽孢和孢子劇烈的劇烈的理化要理化要素素滅滅菌菌用酒精擦拭雙手,用酒精擦拭雙手,用氯氣消毒水源用氯氣消毒水源化學(xué)藥劑化學(xué)藥劑消毒法消毒法不耐高溫的液體不耐高溫的液體巴氏消毒
4、法巴氏消毒法日常用品日常用品煮沸消毒法煮沸消毒法僅殺死物體僅殺死物體外表或內(nèi)部外表或內(nèi)部的部分微生的部分微生物物較為溫較為溫暖的物暖的物理或化理或化學(xué)方法學(xué)方法消消毒毒管號(hào)管號(hào)123456苯酚濃度苯酚濃度(mg/L)1重難點(diǎn)撥重難點(diǎn)撥稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法平板劃線法平板劃線法比較工程比較工程操作復(fù)雜,需求涂布多個(gè)平板操作復(fù)雜,需求涂布多個(gè)平板不能對(duì)微生物計(jì)數(shù)不能對(duì)微生物計(jì)數(shù)缺陷缺陷既可以獲得單細(xì)胞菌落,又能既可以獲得單細(xì)胞菌落,又能對(duì)微生物計(jì)數(shù)對(duì)微生物計(jì)數(shù)可以根據(jù)菌落的特點(diǎn)可以根據(jù)菌落的特點(diǎn)獲得某種微生物的單獲得某種微生物的單細(xì)胞菌落細(xì)胞菌落優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)適用于厭氧菌和兼性厭氧菌適用于厭氧菌和
5、兼性厭氧菌適用于好氧菌適用于好氧菌適用范圍適用范圍從適宜稀釋度的平板上的菌落從適宜稀釋度的平板上的菌落中挑取菌體中挑取菌體在具有顯著的菌落特在具有顯著的菌落特征的區(qū)域菌落中挑取征的區(qū)域菌落中挑取菌體菌體菌體獲取菌體獲取稀釋度要足夠高,為確保實(shí)驗(yàn)稀釋度要足夠高,為確保實(shí)驗(yàn)勝利可以添加稀釋度的范圍勝利可以添加稀釋度的范圍每次劃線前后均需灼每次劃線前后均需灼燒接種環(huán)燒接種環(huán)本卷須知本卷須知一系列的梯度稀釋一系列的梯度稀釋涂布平板法操作涂布平板法操作接種環(huán)在固體平板培接種環(huán)在固體平板培育基外表延續(xù)劃線育基外表延續(xù)劃線關(guān)鍵操作關(guān)鍵操作解析解析前往前往重難點(diǎn)撥重難點(diǎn)撥不能區(qū)分死菌與活菌不能區(qū)分死菌與活菌缺
6、陷缺陷用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)方法方法利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,在顯微利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量原理原理設(shè)置反復(fù)組,加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的壓服力與準(zhǔn)確性。同時(shí)設(shè)置反復(fù)組,加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的壓服力與準(zhǔn)確性。同時(shí)為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,普通選擇菌落數(shù)在為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,普通選擇菌落數(shù)在30300的的平板進(jìn)展計(jì)數(shù)平板進(jìn)展計(jì)數(shù)操作操作每克樣品中的菌株數(shù)每克樣品中的菌株數(shù)(CV)M,其中,其中,C代表代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù),某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù),V代表涂代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積布平板時(shí)所用的稀釋液的
7、體積(mL),M代表稀釋代表稀釋倍數(shù)倍數(shù)計(jì)算計(jì)算公式公式當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培育基外表生長(zhǎng)的一當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培育基外表生長(zhǎng)的一個(gè)菌落,來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌,經(jīng)過(guò)個(gè)菌落,來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌,經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測(cè)出樣品中大約含統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌有多少活菌原理原理酵母膏酵母膏無(wú)機(jī)鹽無(wú)機(jī)鹽淀粉淀粉纖維素粉纖維素粉瓊脂瓊脂CR溶液溶液水水培育基甲培育基甲培育基乙培育基乙重難點(diǎn)撥重難點(diǎn)撥利用鑒別培育基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的利用鑒別培育基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特征,然后挑選目的微生物特征,然后挑選目的微生物鑒定鑒定培育法培
8、育法利用選擇培育基對(duì)微生物進(jìn)展選擇培育,直接利用選擇培育基對(duì)微生物進(jìn)展選擇培育,直接獲得目的微生物獲得目的微生物選擇選擇培育法培育法利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固體利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固體平板培育基外表,直接根據(jù)微生物菌落的特征平板培育基外表,直接根據(jù)微生物菌落的特征利用單菌落挑取的方法獲得目的微生物利用單菌落挑取的方法獲得目的微生物單菌落單菌落挑取法挑取法如利用剛果紅染色法,根據(jù)培育基中出現(xiàn)以纖維如利用剛果紅染色法,根據(jù)培育基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈來(lái)挑選分解纖維素的微素分解菌為中心的透明圈來(lái)挑選分解纖維素的微生物生物染色染色鑒別法鑒別法如培育基中參與酚紅指示劑,培育某種微生物后,如培育基中參與酚紅指示劑,培育某種微生物后,培育基變紅闡明該種微生物可以分解尿素培育基變紅闡明該種微生物可以分解尿素指示劑指示劑鑒別法鑒別法根據(jù)微生物在固體平板培育基外表構(gòu)成的菌落的根據(jù)微生物
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