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文檔簡(jiǎn)介

1、一.名詞解釋。1.細(xì)胞工程;2.細(xì)胞全能性;3、細(xì)胞分化;4、脫分化;5、再分化;6、細(xì)胞培養(yǎng);7、代謝工程;8、代謝流;9、載流途徑;10、植物組織培養(yǎng);11、極性現(xiàn)象;12、玻璃化現(xiàn)象;13、人工種子;14、胚胎工程;15、胚胎移植;16、細(xì)胞核移植;17、體細(xì)胞克??;18、胚胎分割;19、性別控制;20、細(xì)胞重組;21、核體;22、胞質(zhì)體;23、微細(xì)胞;24、細(xì)胞融合;25、體細(xì)胞雜交;26、雌核發(fā)育;27、植物細(xì)胞培養(yǎng);28、看護(hù)培養(yǎng);29、細(xì)胞懸浮化培養(yǎng);30、細(xì)胞固定培養(yǎng);31、原代培養(yǎng);32、傳代培養(yǎng);33、細(xì)胞系;34、細(xì)胞株;35、轉(zhuǎn)基因技術(shù);36、胚胎干細(xì)胞;37、組織工程

2、;38、愈傷組織;39、植物細(xì)胞固定化培養(yǎng);40、干細(xì)胞;41、胚胎嵌合;42、單克隆抗體;43、試管動(dòng)物;44、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng);45、細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng);46、轉(zhuǎn)基因生物反應(yīng)器;47、成體干細(xì)胞。1、細(xì)胞工程:是指以細(xì)胞為對(duì)象,應(yīng)用生命科學(xué)的理論,借助工程學(xué)的原理與技術(shù),有目的地利用或改造生物遺傳性狀,以獲得特定的細(xì)胞、組織產(chǎn)品或新型物種的一門(mén)綜合性科學(xué)技術(shù)。()2、細(xì)胞全能性:指分化細(xì)胞保留著全部的核基因組,具有生物個(gè)體生長(zhǎng)、發(fā)育所需的全部遺傳信息,具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。()3、細(xì)胞分化:是指細(xì)胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過(guò)程,包括時(shí)間上和空間上的分化。()4、脫分化:又稱去分化,是指分

3、化細(xì)胞失去特有的結(jié)構(gòu)和功能變?yōu)榫哂形捶只?xì)胞特性的過(guò)程,即分化的細(xì)胞在適當(dāng)?shù)臈l件下轉(zhuǎn)變?yōu)榕咝誀顟B(tài)而重新獲得分裂能力的過(guò)程。()5、再分化:是指在離體條件下,無(wú)序生長(zhǎng)的脫分化細(xì)胞在適當(dāng)?shù)臈l件下重新進(jìn)入有序生長(zhǎng)和分化狀態(tài)的過(guò)程。6、細(xì)胞培養(yǎng):是指從體內(nèi)組織分離細(xì)胞,模擬體內(nèi)環(huán)境,在無(wú)菌、適當(dāng)?shù)臈l件下使其生長(zhǎng)繁殖的一種技術(shù)。7、代謝工程:又稱途徑工程或者第三代基因工程,是通過(guò)某些特定生化反應(yīng)的修飾來(lái)定向改善細(xì)胞的特性或者運(yùn)用重組DNA技術(shù)來(lái)創(chuàng)造新的化合物。()8、代謝流:在一定環(huán)境條件下的細(xì)胞培養(yǎng)物中,參與代謝的物質(zhì)在代謝網(wǎng)絡(luò)中按一定規(guī)律流動(dòng),形成細(xì)胞的代謝流。9、載流途經(jīng):在一定的生理狀態(tài)下,碳架

4、物質(zhì)在細(xì)胞的代謝網(wǎng)絡(luò)中流經(jīng)的主要途徑。10、植物組織培養(yǎng):是將植物器官、組織、細(xì)胞或原生質(zhì)體等外植體材料無(wú)菌條件下培養(yǎng)在人工培養(yǎng)基上,在適當(dāng)?shù)臈l件下誘發(fā)長(zhǎng)成完整的植株的一種技術(shù)。(|)11、極性現(xiàn)象:細(xì)胞分化早期的一個(gè)最主要的現(xiàn)象是極性的建立,它使細(xì)胞或器官的一端與另一端之間顯示出結(jié)構(gòu)和生理生化上的的差別。()12、玻璃化現(xiàn)象:植物組織培養(yǎng)中,常會(huì)出現(xiàn)一些半透明的畸形試管植物,這類(lèi)植物體稱為“玻璃苗”,這種現(xiàn)象稱為玻璃化現(xiàn)象。()13、人工種子:又稱為合成種子或體細(xì)胞種子,是指將植物離體培養(yǎng)中產(chǎn)生的胚狀體或芽包裹在含有養(yǎng)分和保護(hù)功能的人工胚乳和人工種皮中形成的類(lèi)似種子的顆粒。14、胚胎工程:是

5、對(duì)哺乳動(dòng)物的早期胚胎或配子進(jìn)行顯微操作和處理,讓它繼續(xù)發(fā)育獲得人們所需要的成體動(dòng)物的一種技術(shù)。15、胚胎移植:是指將受精卵或發(fā)育到一定階段的胚胎移植到與供體同時(shí)發(fā)情排卵但未經(jīng)配種的“受體”母畜輸卵管或子宮的技術(shù)。()16、細(xì)胞核移植:是一種利用顯微操作技術(shù)將一種動(dòng)物的細(xì)胞核移入同種或異種動(dòng)物的去核成熟卵細(xì)胞內(nèi)的技術(shù)。()17、體細(xì)胞克?。菏菍?dòng)物體細(xì)胞通過(guò)抑制培養(yǎng)使其處于休眠狀態(tài),利用細(xì)胞核移植技術(shù)將其導(dǎo)入去核卵母細(xì)胞,培育成早起胚胎,將胚胎移植至受體,妊娠產(chǎn)仔培育出核供體一樣的成體動(dòng)物的一種細(xì)胞工程技術(shù)。()18、胚胎分割:是指借助顯微操作儀切割早期胚胎成多等分,再移植給受體,從而制造同卵多

6、仔后代的技術(shù),是一種廣義上的動(dòng)物克隆技術(shù)。()19、性別控制:是指通過(guò)人工操作手段繁殖所需要的性別后代的一門(mén)技術(shù)。20、細(xì)胞重組:是指從活細(xì)胞中分離出細(xì)胞器及其組份在體外進(jìn)行重新裝配成為具有生物活性的細(xì)胞的一種技術(shù)。()21、核體:是與細(xì)胞質(zhì)分離后得到的帶有少量細(xì)胞質(zhì)并包有質(zhì)膜的細(xì)胞核,因此也稱為小型細(xì)胞。()22、胞質(zhì)體:是除去細(xì)胞核后的質(zhì)膜包裹的無(wú)核細(xì)胞。23、微細(xì)胞:又稱為微核體,是指含有一條或幾條染色體,外有一薄層細(xì)胞質(zhì)和一個(gè)完整質(zhì)膜的核質(zhì)體。24、細(xì)胞融合:是指使用人工方法使2個(gè)或2個(gè)以上的細(xì)胞合并成1個(gè)細(xì)胞的技術(shù)。25、體細(xì)胞雜交:是指將不同來(lái)源的體細(xì)胞融合并使之分化再生,形成新品

7、種的技術(shù)。()26、雌核發(fā)育:是指精子雖然正常的鉆入和激活卵子,但精子的細(xì)胞核并未參與卵球的發(fā)育,胚胎的發(fā)育僅在母體遺傳的控制下進(jìn)行的一種發(fā)育方式。()27、植物細(xì)胞培養(yǎng):是指在離體條件下,將分離的植物細(xì)胞通過(guò)繼代培養(yǎng)增殖,獲得大量細(xì)胞群體的一種技術(shù)。()28、看護(hù)培養(yǎng):用一塊活躍生長(zhǎng)的愈傷組織來(lái)看護(hù)單個(gè)細(xì)胞,使其持續(xù)分裂和增殖。29、細(xì)胞懸浮培養(yǎng):是將細(xì)胞接種于液體培養(yǎng)基中并保持良好的分散狀態(tài)的培養(yǎng)方式。30、細(xì)胞固定化培養(yǎng):是指將游離的細(xì)胞包埋在支持物內(nèi)部或表面進(jìn)行培養(yǎng)的技術(shù)。31、原代培養(yǎng):接種組織塊直接長(zhǎng)出單層細(xì)胞或?qū)⒔M織分散成單個(gè)細(xì)胞再進(jìn)行培養(yǎng),在首次傳代前的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。()3

8、2、傳代培養(yǎng):是指原代培養(yǎng)的細(xì)胞繼續(xù)轉(zhuǎn)接培養(yǎng)的過(guò)程。()33、細(xì)胞系:是指原代培養(yǎng)經(jīng)傳代培養(yǎng)純化,獲得的能在體外生存細(xì)胞群體。(|)34、細(xì)胞株:是指從一個(gè)經(jīng)過(guò)生物學(xué)鑒定的細(xì)胞系用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過(guò)篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。()35、轉(zhuǎn)基因技術(shù):是通過(guò)人工方式將外援基因整合到生物體基因組內(nèi),并使該轉(zhuǎn)基因的生物能穩(wěn)定的將此基因遺傳給后代的技術(shù)。36、胚胎干細(xì)胞:是從著床前胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)或原始生殖細(xì)胞經(jīng)體外分化抑制培養(yǎng)分離的一種全能性細(xì)胞,是可以分化成任何一種組織類(lèi)型的細(xì)胞。()37、組織工程:是利用生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、工程學(xué)的原理與技術(shù),利用細(xì)胞、生物材料、細(xì)胞因子實(shí)現(xiàn)組織修復(fù)或再生的一

9、門(mén)技術(shù)。()38、愈傷組織:原指植物在受傷之后于傷口表面形成的一團(tuán)薄壁細(xì)胞。植物組培中,指在人工培養(yǎng)基上由外植體長(zhǎng)出來(lái)的一團(tuán)無(wú)序生長(zhǎng)的薄壁細(xì)胞。()39、植物細(xì)胞固定化培養(yǎng):是將游離的細(xì)胞包埋在惰性支持物內(nèi)部或貼附在它的表面多糖或多聚化合物置備成的網(wǎng)狀支持物中、培養(yǎng)液呈流動(dòng)狀態(tài)進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng)的技術(shù)。()40、干細(xì)胞:是一類(lèi)具有自我復(fù)制能力的多潛能細(xì)胞,在一定條件下,它可以分化成多種功能細(xì)胞。()41、胚胎嵌合:將兩枚或兩枚以上的胚胎的部分或全部細(xì)胞混合在一起,使這發(fā)育成一個(gè)胚胎,然后移植到受體內(nèi)繼續(xù)發(fā)育成嵌合體后代的技術(shù)。()42、單克隆抗體:是指經(jīng)過(guò)免疫哺乳類(lèi)動(dòng)物單一的B淋巴細(xì)胞,可以分泌單一

10、性抗體,這種抗體具有特異性和同質(zhì)性。()43、試管動(dòng)物:也稱體外受精動(dòng)物,是指將供體的精子和卵子在體外受精,體外培養(yǎng)胚胎發(fā)育到一定階段,通過(guò)胚胎移植移入受體完成發(fā)育出生的動(dòng)物。()44、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng):是模擬體內(nèi)生理環(huán)境使分離的動(dòng)物細(xì)胞在體外生存、增殖的一門(mén)技術(shù)。45、細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng):是指在生物反應(yīng)器中高密度大量培養(yǎng)用于生產(chǎn)生物制品的技術(shù)。46、轉(zhuǎn)基因生物反應(yīng)器:將外源基因轉(zhuǎn)入細(xì)胞或植物,利用細(xì)胞增殖或者動(dòng)植物代謝制備外源基因的表達(dá)產(chǎn)物的技術(shù)。47、成體干細(xì)胞:是成體內(nèi)具有進(jìn)一步分化潛能的細(xì)胞,是多能或單能干細(xì)胞。二簡(jiǎn)答。1.簡(jiǎn)述.細(xì)胞工程的應(yīng)用;2.實(shí)驗(yàn)室的基本組成;3.細(xì)胞保存的方法有哪些?

11、4.簡(jiǎn)述細(xì)胞培養(yǎng)的操作方式及其優(yōu)缺點(diǎn);5.植物無(wú)性繁殖過(guò)程中器官發(fā)生方式有哪些?6.植物組織培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)和存在的問(wèn)題;7.植物組織培養(yǎng)再生植株的途徑; 8.試管動(dòng)物的培養(yǎng)一般步驟;9.簡(jiǎn)述細(xì)胞核移植克隆動(dòng)物的技術(shù)路線;10.胚胎冷凍保存;11.細(xì)胞融合的方法有哪些?12.體細(xì)胞雜種植物的鑒定常用方法有哪些?13.細(xì)胞懸浮培養(yǎng)及其優(yōu)點(diǎn);14.細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器設(shè)計(jì)要總體考慮的幾個(gè)重要因素;15.植物細(xì)胞固定化培養(yǎng)的優(yōu)勢(shì);16.固定化培養(yǎng)的方法;17.固定化細(xì)胞培養(yǎng)的生物反應(yīng)器;18.目前采用植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)的藥物成分主要包括哪些?19、理想的微載體應(yīng)具備的特征;20、簡(jiǎn)述微藻的應(yīng)用;21、簡(jiǎn)述利用

12、微載體培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的一般流程;22、微載體生物反應(yīng)器培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn);23、動(dòng)物細(xì)胞體外生長(zhǎng)的特點(diǎn);24動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的方法有哪些?25動(dòng)物細(xì)胞生物制藥包括哪些方面?26轉(zhuǎn)基因的方法有哪些?27干細(xì)胞的特征;28、怎樣的植物細(xì)胞適合作為植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物的細(xì)胞系?29、簡(jiǎn)述植物快速繁殖的技術(shù)路線;30、簡(jiǎn)述植物組織培養(yǎng)存在的主要問(wèn)題及相防治措施;31、胚胎細(xì)胞克隆動(dòng)物與體細(xì)胞克隆動(dòng)物各有什么優(yōu)勢(shì)?32、胚胎工程動(dòng)物培育的關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)有哪些?如何控制成功率?1、簡(jiǎn)述.細(xì)胞工程的應(yīng)用1動(dòng)植物快速繁殖 2新品種培育3細(xì)胞工程生物制品 4細(xì)胞療法與組織修復(fù)2、實(shí)驗(yàn)室的基本組成準(zhǔn)備室;無(wú)菌

13、間;操作間;培養(yǎng)室;分析室。3、細(xì)胞保存的方法有哪些? 1傳代培養(yǎng)保存法2(1)低溫保存;(2)超低溫保存4、簡(jiǎn)述細(xì)胞培養(yǎng)的操作方式及其優(yōu)缺點(diǎn)細(xì)胞培養(yǎng)的操作方式:分批式、流加式、半連續(xù)式、連續(xù)式和灌流式。優(yōu)缺點(diǎn)(略)5、植物無(wú)性繁殖過(guò)程中器官發(fā)生方式有哪些?植物無(wú)性繁殖過(guò)程中器官發(fā)生方式有:不定芽型;器官型;器官發(fā)生型;胚狀體發(fā)生型;原球莖型6、植物組織培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)和存在的問(wèn)題植物組織培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):(1)周期短,便于人工控制培養(yǎng)條件。繁殖快速,經(jīng)濟(jì)效益高(2)占用空間小,不受地區(qū)、季節(jié)限制。(3)繁殖珍稀、瀕危苗木和突變體,是優(yōu)良品種培育的有效途徑(4)利于保持原來(lái)品種的特性。存在的問(wèn)題:玻璃化問(wèn)

14、題;褐變問(wèn)題;微生物污染問(wèn)題;其他問(wèn)題。7、植物組織培養(yǎng)再生植株的途徑; (1)器官發(fā)生途徑(2)體細(xì)胞胚發(fā)生途徑:器官外植體直接發(fā)生途徑;懸浮培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生途徑;愈傷組織發(fā)生途徑;單細(xì)胞發(fā)生途徑;原生質(zhì)體發(fā)生途徑8、試管動(dòng)物的培養(yǎng)一般步驟;(1)精子采集與體外獲能,卵子采集與成熟培養(yǎng)(2)體外受精(3)重組胚激活與體外培養(yǎng)(4)胚胎移植(5)體內(nèi)發(fā)育、出生9、簡(jiǎn)述細(xì)胞核移植克隆動(dòng)物的技術(shù)路線;(1)核供體細(xì)胞獲得與取核(2)受體細(xì)胞去核(3)細(xì)胞核移植(4)重組胚激活(5)重組胚培養(yǎng)和移植(6)體細(xì)胞核移植后代的鑒定10.胚胎冷凍保存;冷凍保護(hù)劑:非滲透型冷凍保護(hù)劑;抗凍蛋白冷凍方法:程序冷凍

15、法;玻璃化冷凍法11.細(xì)胞融合的方法有哪些?(1)生物法:病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合(2)化學(xué)法:NaNO3誘導(dǎo)融合;高pH的高濃度Ca2+誘導(dǎo)融合;PEG誘導(dǎo)融合(3)物理法:電融合誘導(dǎo)法12.體細(xì)胞雜種植物的鑒定常用方法有哪些?形態(tài)學(xué)鑒定;細(xì)胞學(xué)鑒定;同工酶鑒定;DNA分子標(biāo)記鑒定。13.細(xì)胞懸浮培養(yǎng)及其優(yōu)點(diǎn);細(xì)胞懸浮培養(yǎng):是將細(xì)胞接種于液體培養(yǎng)基中并保持良好的分散狀態(tài)的培養(yǎng)方式。優(yōu)點(diǎn):(1)可以增加細(xì)胞與培養(yǎng)液的接觸,促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)的吸收。(2)保證良好的混合狀態(tài),從而獲得良好的氣體傳遞效果(3)可以達(dá)到較高的細(xì)胞濃度,容易放大培養(yǎng)。14.細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器設(shè)計(jì)要總體考慮的幾個(gè)重要因素;(1)采用對(duì)細(xì)胞

16、無(wú)害和耐腐蝕材料制作,耐受蒸汽滅菌(2)結(jié)構(gòu)嚴(yán)密,內(nèi)壁光滑無(wú)死角,內(nèi)部附件盡量減少,嚴(yán)格保證無(wú)菌環(huán)境。(3)能提供均勻理想的混合狀態(tài),保證良好的傳質(zhì)、傳熱效果(4)能精密的控制溫度、酸堿度、溶解氧和二氧化碳濃度等條件。(5)能夠方便、快捷的實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)液的連續(xù)添加、樣品的采集和觀察(6)盡量節(jié)省能源消耗15.植物細(xì)胞固定化培養(yǎng)的優(yōu)勢(shì);(1)細(xì)胞經(jīng)包埋后所受的剪切力減少,維持細(xì)胞的穩(wěn)定性,適合脆弱的植物細(xì)胞的培養(yǎng),同時(shí)也利于采用傳統(tǒng)生物反應(yīng)器大規(guī)模培養(yǎng)(2)細(xì)胞密度高于懸浮培養(yǎng),但不會(huì)改變培養(yǎng)液流體性質(zhì),利于傳質(zhì)(3)大多數(shù)植物次級(jí)代謝查無(wú)在細(xì)胞生長(zhǎng)停止后才大量合成。采用固定化培養(yǎng)可以將細(xì)胞生長(zhǎng)與產(chǎn)

17、物和成兩個(gè)階段分開(kāi)(4)細(xì)胞生長(zhǎng)較為緩慢,利于次級(jí)代謝產(chǎn)物的累積(5)增加了細(xì)胞與細(xì)胞之間的接觸,促進(jìn)了細(xì)胞間信息傳遞,利于代謝物的合成(6)固定化細(xì)胞可以反復(fù)使用,可以方便的進(jìn)行產(chǎn)物的連續(xù)性收獲,降低了成本16.固定化培養(yǎng)的方法;吸附固定法;離子/共價(jià)交聯(lián)法;共價(jià)結(jié)合法;包埋法;微囊法;海藻酸鹽-多聚賴氨酸微囊法17.固定化細(xì)胞培養(yǎng)的生物反應(yīng)器;(1)流化床生物反應(yīng)器(2)固定床生物反應(yīng)器:填充床生物反應(yīng)器;涓流床生物反應(yīng)器18.目前采用植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)的藥物成分主要包括哪些?(1)苷類(lèi):皂苷,強(qiáng)心苷,甘草甜苷等(2)固醇:菜油固醇、豆固醇、谷固醇等(3)生物堿:主要有吡啶、喹啉、異喹啉等(

18、4)蛋白質(zhì)類(lèi):氨基酸、蛋白質(zhì)酶抑制劑等(5)醌類(lèi):萘醌、泛醌等20、簡(jiǎn)述微藻的應(yīng)用;(1)微藻生物能源:微藻生物柴油;微藻生物制氫(2)生物活性物質(zhì)的制備(3)水產(chǎn)餌料(4)微藻基因工程(5)其他應(yīng)用21、簡(jiǎn)述利用微載體培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的一般流程; (1)選擇合適的微載體類(lèi)型 (2)侵泡水化及消毒 (3)接種 (4)培養(yǎng)觀察與細(xì)胞計(jì)數(shù) (5)傳代培養(yǎng) (6)細(xì)胞消化與收獲22、微載體生物反應(yīng)器培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn);(1)模擬了體內(nèi)三維生長(zhǎng)環(huán)境,減輕了接觸性抑制,細(xì)胞可以多層生長(zhǎng)(2)比表面積大,單位體積培養(yǎng)液的細(xì)胞產(chǎn)率高(3)把懸浮培養(yǎng)和貼壁培養(yǎng)融合在一起,兼有兩者的優(yōu)點(diǎn)(4)培養(yǎng)液可以循環(huán)使用,利用率高(

19、5)放大容易,勞動(dòng)強(qiáng)度小(6)細(xì)胞接種、收獲簡(jiǎn)便(7)生物反應(yīng)器空間利用率高,培養(yǎng)系統(tǒng)節(jié)省空間23動(dòng)物細(xì)胞體外生長(zhǎng)的特點(diǎn)(1)動(dòng)物細(xì)胞比微生物細(xì)胞大,無(wú)細(xì)胞壁,對(duì)機(jī)械攪拌或剪切力敏感。(2)動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,易受污染。(3)正常細(xì)胞培養(yǎng)的世代數(shù)有限,只有癌細(xì)胞和發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞才能無(wú)限生長(zhǎng)。(4)動(dòng)物細(xì)胞主要以聚集體形式存在,大多需要貼附在載體表面才能生長(zhǎng)。24動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的方法有哪些?(1)轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)系統(tǒng)(2)微載體培養(yǎng)(3)中空纖維微載體培養(yǎng)(4)大規(guī)模培養(yǎng)方式:流加式培養(yǎng);灌流式培養(yǎng)25動(dòng)物細(xì)胞生物制藥包括哪些方面?(1)病毒疫苗 (2)干擾素 (3)單克隆抗體26轉(zhuǎn)基因的方法有哪些?

20、(1)原核期胚胎顯微注射法。 (2)胚胎干細(xì)胞移植法(3)精子載體導(dǎo)入法 (4)反轉(zhuǎn)錄病毒感染法 (5)卵母細(xì)胞顯微注射法 (6)轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物27干細(xì)胞的特征:(1)自我更新特征:對(duì)稱分裂;不對(duì)稱分裂;(2)增殖特征:增殖的緩慢性;增殖的自穩(wěn)性(3)分化特征28、怎樣的植物細(xì)胞適合作為植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物的細(xì)胞系?(1)分散性好,適合大規(guī)模生產(chǎn)(2)均一性好:大小、生長(zhǎng)周期(3)生長(zhǎng)周期短、利于無(wú)菌操作(4)細(xì)胞中代謝產(chǎn)物含量高(5)細(xì)胞生長(zhǎng)與目的產(chǎn)物穩(wěn)定29、簡(jiǎn)述植物快速繁殖的技術(shù)路線(1)采集材料:受精卵或發(fā)育中的分生組織細(xì)胞(2)消毒:洗凈,切成小塊,消毒液消毒;(3)制

21、備外植體:無(wú)菌環(huán)境下,用無(wú)菌刀剝?nèi)ゲ牧系镊[片、嫩枝的外皮或種皮胚(4)接種和培養(yǎng):無(wú)菌環(huán)境下將外植體接種在培養(yǎng)基上,封口,在適合溫度下培養(yǎng);(5)根的誘導(dǎo):將培養(yǎng)出的不定芽和側(cè)芽轉(zhuǎn)到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng),一個(gè)月后即可獲得健壯根系;(6)煉苗移植:在室內(nèi)自然光照3天,用自來(lái)水洗凈根須后栽入消毒過(guò)的基質(zhì)30、簡(jiǎn)述植物組織培養(yǎng)存在的主要問(wèn)題及相防治措施(1)玻璃化問(wèn)題,即出現(xiàn)一些半透明狀的畸形試管植物,分化能力低,難以增殖成芽,也難以生根成苗。其主要防治措施;適當(dāng)提高光照強(qiáng)度,適當(dāng)降低培養(yǎng)基中NH4濃度,注意通氣,注意細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的配合以及激素和K+之間的配合使用,及適當(dāng)進(jìn)行低溫處理等;(

22、2)褐變問(wèn)題,防止或緩解褐變的方法有:選擇適宜的外植體(生長(zhǎng)旺盛時(shí)期的材料);選擇適宜的培養(yǎng)條件(酸性環(huán)境);使用抑制劑和吸附劑;(3)微生物污染問(wèn)題;(4)其他問(wèn)題,如研究水平,難培養(yǎng)植物,品種退化問(wèn)題等。31、胚胎細(xì)胞克隆動(dòng)物與體細(xì)胞克隆動(dòng)物各有什么優(yōu)勢(shì)?胚胎細(xì)胞克隆動(dòng)物的優(yōu)勢(shì):(1)胚胎細(xì)胞分化程度較低,成功率較高;(2)可能一次性繁殖性狀相同或高度相似的動(dòng)物。體細(xì)胞克隆動(dòng)物的優(yōu)勢(shì):(1)體細(xì)胞數(shù)量豐富,易于獲得;(2)被獲取核供體的動(dòng)物不受性別、年齡限制。32、胚胎工程動(dòng)物培育的關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)有哪些?如何控制成功率?關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié):(1) 體外受精;(2) 人工受精;(3) 核移植;(4)

23、 胚胎移植四個(gè)環(huán)節(jié);控制成功率:(1)要對(duì)各個(gè)環(huán)節(jié)技術(shù)的熟悉了解及掌握,即深化理論知識(shí);(2)對(duì)各個(gè)環(huán)節(jié)的相關(guān)技術(shù)、應(yīng)注意的問(wèn)題進(jìn)行精細(xì)控制。33、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)適合工業(yè)化生產(chǎn)的常用細(xì)胞株有?(1)CHO細(xì)胞 (2)Vero細(xì)胞 (3)BHK-21細(xì)胞(4)WI-38細(xì)胞 (5)雜交瘤細(xì)胞34、試論述轉(zhuǎn)基因生物(微生物、動(dòng)物和植物)反應(yīng)器的各自特點(diǎn)P250頁(yè)表12.135、分析植物組織培養(yǎng)中存在哪些問(wèn)題?試論述如何采取相應(yīng)的措施解決這些問(wèn)題?1、玻璃化問(wèn)題 措施:(1)適當(dāng)提高光照強(qiáng)度; (2)注意通氣,盡量降低培養(yǎng)容器內(nèi)相對(duì)濕度和改善氧氣供應(yīng)狀況;(3)適當(dāng)降低培養(yǎng)基中NH4+濃度;(4)注意細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的配合以及急速和K+之間的配合使用;(5)控制溫度,適當(dāng)進(jìn)行低溫處理,避免過(guò)高的培養(yǎng)溫度。2、褐變問(wèn)題 措施:(1)選擇適宜的外植體;(2)選擇適宜的培養(yǎng)條件;(3)細(xì)胞篩選和材料與處理;(4)使用抑制劑:抗氧化劑等;(5)使用吸附劑:活性炭、PVP等。3、微生物污染問(wèn)題 措施:(1)改進(jìn)外植體消毒方法,結(jié)合常規(guī)消毒方法,采用間隙消

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