高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類

1、最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類第三節(jié)第三節(jié) 高效液相色譜儀高效液相色譜儀 高效液相色譜儀由高效液相色譜儀由 高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、記錄系統(tǒng) 等五大部分組成等五大部分組成。最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類HPLC儀器結(jié)構(gòu)示意圖儀器結(jié)構(gòu)示意圖貯液器輸液泵梯度裝置進(jìn)樣裝置分離柱控溫裝置檢測(cè)器最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類 首先高壓泵將貯液器中流動(dòng)相溶劑經(jīng)首先高壓泵將貯液器中流動(dòng)相溶劑經(jīng)過(guò)進(jìn)樣器送入色譜柱，然后從控制器的出過(guò)進(jìn)樣器送入色譜柱，然后從控制器的出口流出。當(dāng)注入欲分離的樣品時(shí)

2、，流經(jīng)進(jìn)口流出。當(dāng)注入欲分離的樣品時(shí)，流經(jīng)進(jìn)樣器貯液器的流動(dòng)相將樣品同時(shí)帶入色譜樣器貯液器的流動(dòng)相將樣品同時(shí)帶入色譜柱進(jìn)行分離，然后依先后順序進(jìn)入檢測(cè)器，柱進(jìn)行分離，然后依先后順序進(jìn)入檢測(cè)器，記錄儀將檢測(cè)器送出的信號(hào)記錄下來(lái)，由記錄儀將檢測(cè)器送出的信號(hào)記錄下來(lái)，由此得到液相色譜圖。此得到液相色譜圖。工作過(guò)程：工作過(guò)程：最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類一、高壓輸液系統(tǒng)一、高壓輸液系統(tǒng) 高壓輸液系統(tǒng)由高壓輸液系統(tǒng)由 溶劑貯存器、高壓泵、溶劑貯存器、高壓泵、梯度洗脫裝置和壓力表梯度洗脫裝置和壓力表 等組成。等組成。 最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類1.1.溶劑貯存器溶劑貯存器 溶劑貯存器一般由玻

3、璃、不銹鋼或氟溶劑貯存器一般由玻璃、不銹鋼或氟塑料制成，容量為塑料制成，容量為1到到2 L，用來(lái)貯存足夠，用來(lái)貯存足夠數(shù)量、符合要求的流動(dòng)相。數(shù)量、符合要求的流動(dòng)相。最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類2.2.高壓輸液泵高壓輸液泵 高壓輸液泵是高效液相色譜儀中關(guān)鍵部件高壓輸液泵是高效液相色譜儀中關(guān)鍵部件之一，其功能是之一，其功能是 將溶劑貯存器中的流動(dòng)相以高將溶劑貯存器中的流動(dòng)相以高壓形式連續(xù)不斷地送入液路系統(tǒng)，使樣品在色譜壓形式連續(xù)不斷地送入液路系統(tǒng)，使樣品在色譜柱中完成分離過(guò)程。柱中完成分離過(guò)程。對(duì)泵的要求：輸出壓力高、流量范圍大、流量恒定、無(wú)脈動(dòng)，流量精度和重復(fù)性為0.5%左右。此外，還應(yīng)

4、耐腐蝕，密封性好。最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類 高壓輸液泵，按其性質(zhì)可分為高壓輸液泵，按其性質(zhì)可分為恒壓泵和恒壓泵和恒流泵恒流泵兩大類。兩大類。恒流泵是能給出恒定流量的泵，其流量與流動(dòng)相粘度和柱滲透無(wú)關(guān)。最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類 最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類 恒壓泵恒壓泵是保持輸出壓力恒定，而流量隨外是保持輸出壓力恒定，而流量隨外界阻力變化而變化，如果系統(tǒng)阻力不發(fā)生界阻力變化而變化，如果系統(tǒng)阻力不發(fā)生變化，恒壓泵就能提供恒定的流量。變化，恒壓泵就能提供恒定的流量。最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類3. 3. 梯度洗脫裝置梯度洗脫裝置 梯度洗脫梯度洗脫就是在分離過(guò)程中使兩種

5、或兩就是在分離過(guò)程中使兩種或兩種以上不同極性的溶劑按一定程序連續(xù)改種以上不同極性的溶劑按一定程序連續(xù)改變它們之間的比例，從而使流動(dòng)相的強(qiáng)度、變它們之間的比例，從而使流動(dòng)相的強(qiáng)度、極性、極性、pHpH值或離子強(qiáng)度相應(yīng)地變化，達(dá)到值或離子強(qiáng)度相應(yīng)地變化，達(dá)到提高分離效果，縮短分析時(shí)間的目的。提高分離效果，縮短分析時(shí)間的目的。最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類僅用弱溶劑僅用強(qiáng)溶劑梯度洗提最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類梯度洗脫裝置分類梯度洗脫裝置分類 一類是一類是外梯度裝置外梯度裝置（又稱低壓梯度），（又稱低壓梯度），流動(dòng)相在常溫常壓下混合，用高壓泵壓至柱流動(dòng)相在常溫常壓下混合，用高壓泵壓至柱系統(tǒng)

6、，僅需一臺(tái)泵即可。系統(tǒng)，僅需一臺(tái)泵即可。 一類是一類是內(nèi)梯度裝置內(nèi)梯度裝置（又稱高壓梯度），（又稱高壓梯度），將兩種溶劑分別用泵增壓后，按電器部件設(shè)將兩種溶劑分別用泵增壓后，按電器部件設(shè)置的程序，注入梯度混合室混置的程序，注入梯度混合室混合，再輸至柱合，再輸至柱系統(tǒng)。系統(tǒng)。 最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類二、進(jìn)樣系統(tǒng)二、進(jìn)樣系統(tǒng) 進(jìn)樣系統(tǒng)包括進(jìn)樣口、注射器和進(jìn)樣閥進(jìn)樣系統(tǒng)包括進(jìn)樣口、注射器和進(jìn)樣閥等，它的作用是把分析試樣有效地送入色譜等，它的作用是把分析試樣有效地送入色譜柱上進(jìn)行分離。柱上進(jìn)行分離。最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類通常使用耐高壓的六通閥進(jìn)樣裝置,其結(jié)構(gòu)如圖所示：最新高效液

7、相色譜儀組成及檢測(cè)器種類三、分離系統(tǒng)三、分離系統(tǒng) 色譜柱是液相色譜的色譜柱是液相色譜的心臟部件心臟部件，它包，它包括柱管與固定相兩部分。柱管材料有玻璃、括柱管與固定相兩部分。柱管材料有玻璃、不銹鋼、鋁、銅及內(nèi)襯光滑的聚合材料的不銹鋼、鋁、銅及內(nèi)襯光滑的聚合材料的其他金屬。其他金屬。最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類柱管材料：柱管材料：耐腐蝕耐壓耐腐蝕耐壓內(nèi)徑：內(nèi)徑：2.0、3.0、4.1、4.6mm長(zhǎng)度：長(zhǎng)度：5、10、15、25cm等等固定相：固定相：顆粒細(xì)、圓、均一、剛性強(qiáng)顆粒細(xì)、圓、均一、剛性強(qiáng)最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類 一般在分離前備有一個(gè)前置

8、柱，前置一般在分離前備有一個(gè)前置柱，前置柱內(nèi)填充物和分離柱完全一樣，這樣可使柱內(nèi)填充物和分離柱完全一樣，這樣可使淋洗溶劑由于經(jīng)過(guò)前置柱為其中的固定相淋洗溶劑由于經(jīng)過(guò)前置柱為其中的固定相飽和，使它在流過(guò)分離柱時(shí)不再洗脫其中飽和，使它在流過(guò)分離柱時(shí)不再洗脫其中固定相，保證分離技的性能不受影響固定相，保證分離技的性能不受影響。 柱子裝填得好壞對(duì)柱效影響很大。柱子裝填得好壞對(duì)柱效影響很大。對(duì)于細(xì)粒度的填料（對(duì)于細(xì)粒度的填料（20m）一般采用）一般采用勻漿填充法裝柱勻漿填充法裝柱，先將填料調(diào)成勻漿，然，先將填料調(diào)成勻漿，然后在高壓泵作用下，快速將其壓入裝有洗后在高壓泵作用下，快速將其壓入裝有洗脫液的色譜

9、柱內(nèi)，經(jīng)沖洗后，即可備用。脫液的色譜柱內(nèi)，經(jīng)沖洗后，即可備用。 柱溫一般為室溫或接近室溫。柱溫一般為室溫或接近室溫。最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類四、檢測(cè)系統(tǒng)四、檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)器是液相色譜儀的關(guān)鍵部件之一。檢測(cè)器是液相色譜儀的關(guān)鍵部件之一。對(duì)檢測(cè)器的要求是：對(duì)檢測(cè)器的要求是：靈敏度高，重復(fù)性好、靈敏度高，重復(fù)性好、線性范圍寬、死體積小以及對(duì)溫度和流量的線性范圍寬、死體積小以及對(duì)溫度和流量的變化不敏感等變化不敏感等。 最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類在液相色譜中，有兩種類型的檢測(cè)器：在液相色譜中，有兩種類型的檢測(cè)器： 一類是一類是溶質(zhì)性檢測(cè)器溶質(zhì)性檢測(cè)器，它僅對(duì)被分，它僅對(duì)被分離組分的物理或

10、物理化學(xué)特性有響應(yīng)。屬離組分的物理或物理化學(xué)特性有響應(yīng)。屬于此類檢測(cè)器的有紫外、熒光、電化學(xué)檢于此類檢測(cè)器的有紫外、熒光、電化學(xué)檢測(cè)器等；測(cè)器等； 一類是一類是總體檢測(cè)器總體檢測(cè)器，它對(duì)試樣和洗，它對(duì)試樣和洗脫液總的物理和化學(xué)性質(zhì)響應(yīng)。屬于此類脫液總的物理和化學(xué)性質(zhì)響應(yīng)。屬于此類檢測(cè)器有示差折光檢測(cè)器等。檢測(cè)器有示差折光檢測(cè)器等。最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類紫外光度檢測(cè)器紫外光度檢測(cè)器最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類作用原理作用原理 依據(jù)被分析試樣組分對(duì)待定波長(zhǎng)紫外依據(jù)被分析試樣組分對(duì)待定波長(zhǎng)紫外光的選擇吸收性，組分濃度與吸光率的關(guān)光的選擇吸收性，組分濃度與吸光率的關(guān)系遵守比爾定律。系

11、遵守比爾定律。最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類工作過(guò)程工作過(guò)程 透鏡將光源射來(lái)的光束變成平行光，透鏡將光源射來(lái)的光束變成平行光，經(jīng)過(guò)遮光板變成一對(duì)細(xì)小的平行光束，分經(jīng)過(guò)遮光板變成一對(duì)細(xì)小的平行光束，分別通過(guò)測(cè)量池與參比池，然后用紫外濾片別通過(guò)測(cè)量池與參比池，然后用紫外濾片濾掉非單色光，通過(guò)雙紫外光敏電阻，根濾掉非單色光，通過(guò)雙紫外光敏電阻，根據(jù)輸出信號(hào)差進(jìn)行檢測(cè)。據(jù)輸出信號(hào)差進(jìn)行檢測(cè)。最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類特點(diǎn)特點(diǎn)靈敏度高，檢測(cè)濃度可達(dá)到靈敏度高，檢測(cè)濃度可達(dá)到10-9g/ml；結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，對(duì)溫度和流速不敏感；結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，對(duì)溫度和流速不敏感；溶劑的選用受限制。溶劑的選用受限制。最新高

12、效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類熒光檢測(cè)器熒光檢測(cè)器 物質(zhì)受紫外光激發(fā)后，能輻射出比紫外物質(zhì)受紫外光激發(fā)后，能輻射出比紫外光波長(zhǎng)較長(zhǎng)的熒光，可用熒光檢測(cè)器檢測(cè)，光波長(zhǎng)較長(zhǎng)的熒光，可用熒光檢測(cè)器檢測(cè)，而某些不發(fā)射熒光的物質(zhì)也可通過(guò)化學(xué)衍生而某些不發(fā)射熒光的物質(zhì)也可通過(guò)化學(xué)衍生轉(zhuǎn)變成能發(fā)射熒光德物質(zhì)而得到檢測(cè)。轉(zhuǎn)變成能發(fā)射熒光德物質(zhì)而得到檢測(cè)。最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類 優(yōu)點(diǎn)：是一種選擇性強(qiáng)、靈敏度高，比紫優(yōu)點(diǎn)：是一種選擇性強(qiáng)、靈敏度高，比紫外檢測(cè)器高外檢測(cè)器高2 3個(gè)數(shù)量級(jí)，可達(dá)個(gè)數(shù)量級(jí)，可達(dá)pg量級(jí)或量級(jí)或更低，可用于梯度淋洗。更低，可用于梯度淋洗。 缺點(diǎn)：樣品適用范圍有限，定量分析的線缺點(diǎn)：樣品適用范圍有限，定量分析的線性范圍較窄性范圍較窄(104-105)。最新高效液相色譜儀組成及檢測(cè)器種類示差折光檢測(cè)器示差折光檢測(cè)器 借連續(xù)測(cè)定流通池中溶液折射率德方法來(lái)測(cè)定借連續(xù)測(cè)定流通池中溶液折射率德方法來(lái)測(cè)定試樣濃度的檢測(cè)器。分為偏轉(zhuǎn)式和反射式兩種類型。試樣濃度的檢測(cè)器。分為偏轉(zhuǎn)式和反射式兩種類型。 是一種通用型檢測(cè)器，靈敏度可達(dá)是一種通用型檢測(cè)器，靈敏度可達(dá)10-7 g cm-3。缺點(diǎn)是對(duì)溫度變化敏