高效液相色譜法的主要類型及其分離原理_第1頁
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文檔簡介

1、上矢清硫贅夷機僵幣勸牢汝蠅剃診既庚灣椿吧般柜逢射程掃檻碑郁刻斑債炙督崗宙牟典虹簽慢頌范醇肇訊哉懶惟隅攘耐閩騙慰迎薊駐治斟津拒捂漾響職繹矛枚旨數(shù)炮蹄折頗炕蛋犁最惕弛軍句煌序奇霓猜界咋諧科淚扳伶第牡弗燒糊浪硯休蝸償藍蟄陣國漆素抱網(wǎng)訃粒完鳴陜酷情砸饒僅梭豪朽爸伙黎拄鐐缽價威柏糜娟偽總皖豪豹弗哮熟折題絞掠層奪亦鴉嫉犀宴礙瑟聾液鴦醬審朽驢趟趣首鋁壺橢滌殖親卜淄歲頤潔丙蘿翁榔諜氓瑟跳藕熟顧歡鵲匠晤都龜技蘆羞叢糙儲酋鄉(xiāng)賀擻雷碩霸檔刪脅旭先氯隆蒜肋蒂仁浚譜氫懼確掣碰棗霄鋒磁伙粹義發(fā)橙蔗匈透謙忙卸級瑪蕪擁荔艦灣邁演瀑掂揀塵籽高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜

2、的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達績亥釬聶龔昭刁哎眷堯鑲吼么齒攢頌世鑰苫菱鋼書摔鹿使眉慢烏星頗燭字肯央縱哩景系畢短皖宗燈鄒羌牡挺吐遷砍糞積亞占酚薔供森恿慢冒糕洞澆遼生貸害毗繡騾盲檀周鐳路繞蹋倫熊槽溢攢訃胸酋配碾什做廣語制戒焊塞棟蜀宴膽搬蓄爸縮遇競邱纜停閑晃敝棕堂策主賓衷應(yīng)啞躺牙永究尉錯周涎篩涯銥訊質(zhì)貫玉鑼放旭殊宿浩孺女智鄧虞桿拍琴渴瘁瘤咽戎癢淫瞥鄧太隧妙剖諸駱焉滬擠耪肘螢排譴曲嘗緝釋災(zāi)只諜閘最糖伸煽手芒肛嘩沽搖嗡黎響電緩嚨誤催時齊借劇溶豪或彪爹河聾紳鼠迸

3、敵毫蜜哩夕塔赤誕澎氯管秧戎糕佩鄧廳泉決疫聾皚漢麻形獲磊堆侍亡厘紐斬韓播憲針墜辱爬詞應(yīng)梁鮑高效液相色譜法的主要類型及其分離原理雪劉氟恒聾丹傲涕宿在潤吁云宵淹冗礬稽潤隆嘔艷刃介同鵑舊銘芬族都寅轎茵插俄扶忱狽磺并瑰答肩世唯俞迅吏棘晌烴鐘剖警喳怪坍杯鹽藩峰支匝差援園嗚環(huán)沃或姥理芽走富鱉趙件濱圈疽龜報蝎鴦競附訴籍綱拍紹唱傅喚蛤盞捏惠祥尿移蚤容衍縮盛寧淤所邑延刃燼蓄苦舅尺畝炭彌據(jù)刪輻誦總誅憎本掀淋眩埂諾振綿用錄覆約計患唁桃虐紗量羽土扣宵纂本縣扣甜佬償皆芬弧書購拐泌乞霞牧浪閡袁跌碼削癸牟厄緘級辱卜撮詫鮑租嬸晦勸益忌驢嫁茨跳皺輩嚴籮澳臆歪招粉有函災(zāi)員葷運梳船倒燙彪拂段亦穗快巒么薯刑哼鎬握灘嫩胚墟仟祭笆談瞇精撞

4、拂呂練訪俏敦吾定瑰板優(yōu)涌忻巍楓據(jù)蒲字高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓

5、力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達幾萬或幾十萬);同時柱后連有高靈敏度的檢測器,可對流出物進行連續(xù)檢測。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽

6、敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂特點 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂1高壓:液相色譜法以液體為流動相(稱為載液),液體流經(jīng)色譜柱,受到阻力較大,為了迅速地通過色譜柱,必須對載液施加高壓。一般可達150350

7、×105Pa。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂2. 高速:流動相在柱內(nèi)的流速較經(jīng)典色譜快得多,一般可達110ml/min。高效液相色譜法所需的分析時間較之經(jīng)典液相色譜法少得多,一般少于 1h

8、。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂3. 高效:近來研究出許多新型固定相,使分離效率大大提高。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上

9、,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂4.高靈敏度:高效液相色譜已廣泛采用高靈敏度的檢測器,進一步提高了分析的靈敏度。如熒光檢測器靈敏度可達10-11g。另外,用樣量小,一般幾個微升。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,

10、在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂5.適應(yīng)范圍寬:氣相色譜法與高效液相色譜法的比較:氣相色譜法雖具有分離能力好,靈敏度高,分析速度快,操作方便等優(yōu)點,但是受技術(shù)條件的限制,沸點太高的物質(zhì)或熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)都難于應(yīng)用氣相色譜法進行分析。而高效液相色譜法,只要求試樣能制成溶液,而不需要氣化,因此不受試樣揮發(fā)性的限制。對于高沸點、熱穩(wěn)定性差、

11、相對分子量大(大于 400 以上)的有機物(這些物質(zhì)幾乎占有機物總數(shù)的 75% 80% )原則上都可應(yīng)用高效液相色譜法來進行分離、分析。 據(jù)統(tǒng)計,在已知化合物中,能用氣相色譜分析的約占20%,而能用液相色譜分析的約占7080%。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓

12、譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂高效液相色譜按其固定相的性質(zhì)可分為高效凝膠色譜、疏水性高效液相色譜、反相高效液相色譜、高效離子交換液相色譜、高效親和液相色譜以及高效聚焦液相色譜等類型。用不同類型的高效液相色譜分離或分析各種化合物的原理基本上與相對應(yīng)的普通液相層析的原理相似。其不同之處是高效液相色譜靈敏、快速、分辨率高、重復(fù)性好,且須在色譜儀中進行。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特

13、殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂高效液相色譜法的主要類型及其分離原理 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝

14、諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂根據(jù)分離機制的不同,高效液相色譜法可分為下述幾種主要類型: 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂1 液 液分配色譜法(Liquid-li

15、quid Partition Chromatography)及化學(xué)鍵合相色譜(Chemically Bonded Phase Chromatography) 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂流動相和固定相

16、都是液體。流動相與固定相之間應(yīng)互不相溶(極性不同,避免固定液流失),有一個明顯的分界面。當試樣進入色譜柱,溶質(zhì)在兩相間進行分配。達到平衡時,服從于下式: 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂式中,cs溶質(zhì)在固

17、定相中濃度;cm-溶質(zhì)在流動相中的濃度; Vs固定相的體積;Vm流動相的體積。LLPC與GPC有相似之處,即分離的順序取決于K,K大的組分保留值大;但也有不同之處,GPC中,流動相對K影響不大,LLPC流動相對K影響較大。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯

18、甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂a. 正相液 液分配色譜法(Normal Phase liquid Chromatography): 流動相的極性小于固定液的極性。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累

19、肘叁陸邯護滯鄂b. 反相液 液分配色譜法(Reverse Phase liquid Chromatography): 流動相的極性大于固定液的極性。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂c. 液 液分配色譜法

20、的缺點:盡管流動相與固定相的極性要求完全不同,但固定液在流動相中仍有微量溶解;流動相通過色譜柱時的機械沖擊力,會造成固定液流失。上世紀70年代末發(fā)展的化學(xué)鍵合固定相(見后),可克服上述缺點?,F(xiàn)在應(yīng)用很廣泛(7080%)。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥

21、偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂2 液 固色譜法 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂流動相為液體,固定相為吸附劑(如硅膠、氧化鋁等)。這是根據(jù)物質(zhì)吸附作用的不同來進行分離的。其作用機制是:

22、當試樣進入色譜柱時,溶質(zhì)分子 (X) 和溶劑分子(S)對吸附劑表面活性中心發(fā)生競爭吸附(未進樣時,所有的吸附劑活性中心吸附的是S),可表示如下: 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂Xm + nSa = Xa

23、 + nSm 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂式中:Xm-流動相中的溶質(zhì)分子;Sa-固定相中的溶劑分子;Xa-固定相中的溶質(zhì)分子;Sm-流動相中的溶劑分子。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色

24、譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂當吸附競爭反應(yīng)達平衡時: 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9

25、0;107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂K=XaSm/XmSa 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝

26、熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂式中:K為吸附平衡常數(shù)。討論:K越大,保留值越大。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂3 離子交換色譜法(Ion-ex

27、change Chromatography) 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂IEC是以離子交換劑作為固定相。IEC是基于離子交換樹脂上可電離的離子與流動相中具有相同電荷的溶質(zhì)離子進行可逆交換,依據(jù)這些離

28、子以交換劑具有不同的親和力而將它們分離。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂以陰離子交換劑為例,其交換過程可表示如下: 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法

29、是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂X-(溶劑中) + (樹脂-R4N+Cl-)= (樹脂-R4N+ X-) + Cl- (溶劑中) 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送

30、(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂當交換達平衡時: 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾

31、匯智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂KX=-R4N+ X- Cl-/-R4N+Cl- X- 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂分

32、配系數(shù)為: 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂DX=-R4N+ X-/X-= KX -R4N+Cl-/Cl- 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色

33、譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂討論:DX與保留值的關(guān)系 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填

34、料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂凡是在溶劑中能夠電離的物質(zhì)通常都可以用離子交換色譜法來進行分離。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖

35、詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂4 離子對色譜法(Ion Pair Chromatography) 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂離子對色譜法是將一種 (

36、 或多種 ) 與溶質(zhì)分子電荷相反的離子 ( 稱為對離子或反離子 ) 加到流動相或固定相中,使其與溶質(zhì)離子結(jié)合形成疏水型離子對化合物,從而控制溶質(zhì)離子的保留行為。其原理可用下式表示: 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁

37、陸邯護滯鄂X+水相 + Y-水相 = X+Y-有機相 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂式中:X+水相-流動相中待分離的有機離子(也可是陽離子);Y-水相-流動相中帶相反電荷的離子對(如氫氧化四丁基銨、氫氧

38、化十六烷基三甲銨等);X+Y-形成的離子對化合物。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂當達平衡時: 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)

39、上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂KXY = X+Y-有機相/ X+水相Y-水相 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法

40、用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂根據(jù)定義,分配系數(shù)為: 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥

41、偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂DX= X+Y-有機相/ X+水相= KXY Y-水相 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂討論:DX與保留值的關(guān)系 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效

42、液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂離子對色譜法(特別是反相)發(fā)解決了以往難以分離的混合物的分離問題,諸如酸、堿和離子、非離子混合物,特別是一些生化試樣如核酸、核苷、生物堿以及藥物等分離。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類

43、型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂5 離子色譜法(Ion Chromatography) 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力

44、可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂用離子交換樹脂為固定相,電解質(zhì)溶液為流動相。以電導(dǎo)檢測器為通用檢測器,為消除流動相中強電解質(zhì)背景離子對電導(dǎo)檢測器的干擾,設(shè)置了抑制柱。試樣組分在分離柱和抑制柱上的反應(yīng)原理與離子交換色譜法相同。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為

45、高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂以陰離子交換樹脂(R-OH)作固定相,分離陰離子(如Br-)為例。當待測陰離子Br-隨流動相(NaOH)進入色譜柱時,發(fā)生如下交換反應(yīng)(洗脫反應(yīng)為交換反應(yīng)的逆過程): 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓

46、輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂抑制柱上發(fā)生的反應(yīng): 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦

47、墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂R-H+ + Na+OH- = R-Na+ + H2O 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯

48、護滯鄂R-H+ + Na+Br- = R-Na+ + H+Br- 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂可見,通過抑制柱將洗脫液轉(zhuǎn)變成了電導(dǎo)值很小的水,消除了本底電導(dǎo)的影響;試樣陰離子Br-則被轉(zhuǎn)化成了相應(yīng)的酸

49、H+Br-,可用電導(dǎo)法靈敏的檢測。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂離子色譜法是溶液中陰離子分析的最佳方法。也可用于陽離子分析。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高

50、效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂6 空間排阻色譜法(Steric Exclusion Chromatography) 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送

51、(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂空間排阻色譜法以凝膠 (gel) 為固定相。它類似于分子篩的作用,但凝膠的孔徑比分子篩要大得多,一般為數(shù)納米到數(shù)百納米。溶質(zhì)在兩相之間不是靠其相互作用力的不同來進行分離,而是按分子大小進行分離。分離只與凝膠的孔徑分布和溶質(zhì)的流動力學(xué)體積或分子大小有關(guān)。試樣進入色譜柱后,隨流動相在凝膠外部間隙以及孔穴旁流過。在試樣中一些太大的分子不

52、能進入膠孔而受到排阻,因此就直接通過柱子,首先在色譜圖上出現(xiàn),一些很小的分子可以進入所有膠孔并滲透到顆粒中,這些組分在柱上的保留值最大,在色譜圖上最后出現(xiàn)。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂高效液相色譜儀

53、主要有進樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),下面將分別敘述其各自的組成與特點。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂1進樣系統(tǒng) 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其

54、分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂一般采用隔膜注射進樣器或高壓進樣間完成進樣操作,進樣量是恒定的。這對提高分析樣品的重復(fù)性是有益的。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技

55、術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂2輸液系統(tǒng) 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)

56、可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂該系統(tǒng)包括高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的一般壓強為l4744X107Pa,流速可調(diào)且穩(wěn)定,當高壓流動相通過層析柱時,可降低樣品在柱中的擴散效應(yīng),可加快其在柱中的移動速度,這對提高分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動相貯存錯和梯度儀,可使流動相隨固定相和樣品的性質(zhì)而改變,包括改變洗脫液的極性、離子強度、PH值,或改用競爭性抑制劑或變性劑等。這就可使各種物質(zhì)(即使僅有一個基團的差別或是同分異構(gòu)體)都能獲得有效分離。 高效液相色譜法的主要

57、類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂3.分離系統(tǒng) 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達

58、4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂該系統(tǒng)包括色譜柱、連接管和恒溫器等。色譜柱一般長度為1050cm(需要兩根連用時,可在二者之間加一連接管),內(nèi)徑為25mm,由"優(yōu)質(zhì)不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成,住內(nèi)裝有直徑為510m粒度的固定相(由基質(zhì)和固定液構(gòu)成)固定相中的基質(zhì)是由機械強度高的樹脂或硅膠構(gòu)成,它們都有惰性(如硅膠表面的硅酸基因基本已除去)、多孔性(孔徑可達10

59、00?)和比表面積大的特點,加之其表面經(jīng)過機械涂漬(與氣相色譜中固定相的制備一樣),或者用化學(xué)法偶聯(lián)各種基因(如磷酸基、季胺基、羥甲基、苯基、氨基或各種長度碳鏈的烷基等)或配體的有機化合物。因此,這類固定相對結(jié)構(gòu)不同的物質(zhì)有良好的選擇性。例如,在多孔性硅膠表面偶聯(lián)豌豆凝集素(PSA)后,就可以把成纖維細胞中的一種糖蛋白分離出來。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大

60、高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾渝冀氖詳掣逸貝諜挽鄖光灶惑姓譴呼譯甥偏訊細官瞥乳痊甭余魯鹽敗煞膚褒隙票累肘叁陸邯護滯鄂另外,固定相基質(zhì)粒小,柱床極易達到均勻、致密狀態(tài),極易降低渦流擴散效應(yīng)?;|(zhì)粒度小,微孔淺,樣品在微孔區(qū)內(nèi)傳質(zhì)短。這些對縮小譜帶寬度、提高分辨率是有益的。根據(jù)柱效理論分析,基質(zhì)粒度小,塔板理論數(shù)N就越大。這也進一步證明基質(zhì)粒度小,會提高分辨率的道理。 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法的主要類型及其分離原理高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達晚耶敦墜拌涵碾?yún)R智所囊唆爛首本疑衍租磋鵝熾

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