紫外可見分光光度法習題與答案

1、紫外-可見分光光度法 習題精選一、選擇題（其中114題為單選，1524題為多選）1以下四種化合物，能同時產(chǎn)生b吸收帶、k吸收帶和r吸收帶的是（ ） a. b. c. d. 2在下列化合物中，p®p*躍遷所需能量最大的化合物是（ ）a. 1,3-丁二烯 b. 1,4-戊二烯 c. 1,3-環(huán)已二烯 d. 2,3-二甲基-1,3-丁二烯3符合朗伯特-比耳定律的有色溶液稀釋時，其最大吸收峰的波長位置（ ）a. 向短波方向移動 b. 向長波方向移動c. 不移動，且吸光度值降低d. 不移動，且吸光度值升高4雙波長分光光度計與單波長分光光度計的主要區(qū)別在于（ ）a. 光源的種類及個數(shù) b. 單色

2、器的個數(shù)c. 吸收池的個數(shù) d. 檢測器的個數(shù)5在符合朗伯特-比爾定律的范圍內(nèi)，溶液的濃度、最大吸收波長、吸光度三者的關(guān)系是（ ）a. 增加、增加、增加 b. 減小、不變、減小c. 減小、增加、減小 d. 增加、不變、減小6雙波長分光光度計的輸出信號是（ ）a. 樣品吸收與參比吸收之差 b. 樣品吸收與參比吸收之比c. 樣品在測定波長的吸收與參比波長的吸收之差d. 樣品在測定波長的吸收與參比波長的吸收之比7在紫外可見分光光度法測定中，使用參比溶液的作用是（ ）a. 調(diào)節(jié)儀器透光率的零點b. 吸收入射光中測定所需要的光波c. 調(diào)節(jié)入射光的光強度d. 消除試劑等非測定物質(zhì)對入射光吸收的影響8掃描k

3、2cr2o7硫酸溶液的紫外-可見吸收光譜時，一般選作參比溶液的是（ ）a. 蒸餾水 b. h2so4溶液c. k2cr2o7的水溶液 d. k2cr2o7的硫酸溶液9在比色法中，顯色反應(yīng)的顯色劑選擇原則錯誤的是（ ）a. 顯色反應(yīng)產(chǎn)物的e值愈大愈好 b. 顯色劑的e值愈大愈好c. 顯色劑的e值愈小愈好d. 顯色反應(yīng)產(chǎn)物和顯色劑，在同一光波下的e值相差愈大愈好10某分析工作者，在光度法測定前用參比溶液調(diào)節(jié)儀器時，只調(diào)至透光率為95.0%，測得某有色溶液的透光率為35.2%，此時溶液的真正透光率為（ ）a. 40.2% b. 37.1% c. 35.1% d. 30.2% 11用分光光度法測定kc

4、l中的微量i時，可在酸性條件下，加入過量的kmno4將i氧化為i2，然后加入淀粉，生成i2-淀粉藍色物質(zhì)。測定時參比溶液應(yīng)選擇（ ）a. 蒸餾水 b. 試劑空白c. 含kmno4的試樣溶液 d. 不含kmno4的試樣溶液12常用作光度計中獲得單色光的組件是（ ）a. 光柵(或棱鏡)+反射鏡 b. 光柵(或棱鏡)+狹縫c. 光柵(或棱鏡)+穩(wěn)壓器 d. 光柵(或棱鏡)+準直鏡13某物質(zhì)的吸光系數(shù)與下列哪個因素有關(guān)（ ） a. 溶液濃度 b. 測定波長 c. 儀器型號 d. 吸收池厚度14假定t=±0.50 a=0.699 則測定結(jié)果的相對誤差為（ ） a. ±1.55 b.

5、±1.36 c. ±1.44 d. ±1.6315今有a和b兩種藥物的復(fù)方制劑溶液，其吸收曲線相互不重疊，下列有關(guān)敘述正確的是（ ）a. 可不經(jīng)分離，在a吸收最大的波長和b吸收最大的波長處分別測定a和bb. 可用同一波長的光分別測定a和bc. a吸收最大的波長處測得的吸光度值包括了b的吸收d. b吸收最大的波長處測得的吸光度值不包括a的吸收16用標準曲線法測定某藥物含量時，用參比溶液調(diào)節(jié)a=0或t=100%，其目的是( )a. 使測量中c-t成線性關(guān)系b. 使標準曲線通過坐標原點c. 使測量符合比耳定律，不發(fā)生偏離d. 使所測吸光度a值真正反應(yīng)的是待測物的a值17

6、某藥物的摩爾吸光系數(shù)（e）很大，則表明（ ）a. 該藥物溶液的濃度很大b. 光通過該藥物溶液的光程很長c. 該藥物對某波長的光吸收很強 d. 測定該藥物的靈敏度高18為提高分光光度法測定的靈敏度可采用（ ）；為提高分光光度法的準確度可采用（ ）；為提高分光光度法測定的精密度可采用（ ）；為提高分光光度法測定的選擇性可采用（ ）a. 顯色反應(yīng)產(chǎn)物e 大的顯色劑b. lmax作測定波長c. 選擇適當?shù)膮⒈纫篸. 控制比色皿厚度及有色溶液濃度19分光光度法中，選用lmax進行比色測定原因是（ ）a. 與被測溶液的ph有關(guān)b. 可隨意選用參比溶液c. 濃度的微小變化能引起吸光度的較大變化，提高了測定的

7、靈敏度d. 儀器讀數(shù)的微小變化不會引起吸光度的較大變化，提高了測定的精密度20等吸收雙波長消去法定量分析的理論依據(jù)是（ ）a. 溶液對兩波長的吸光度之和為定值b. 溶液對兩波長的吸光度之差與待測物濃度成正比c. 吸光度具有加和性d. 干擾物質(zhì)和被測物質(zhì)有等吸收點21下列基團或分子中，能發(fā)生n®p*躍遷的基團是（ ）a. c=c b. c=o c. cºn d. ch3oh22酸度對顯色反應(yīng)影響很大，這是因為酸度的改變可能影響（ ）a. 反應(yīng)產(chǎn)物的穩(wěn)定性b. 被顯色物的存在狀態(tài)c. 反應(yīng)產(chǎn)物的組成 d. 顯色劑的濃度和顏色23在比色法中，顯色反應(yīng)應(yīng)選擇的條件有( )a. 顯色

8、時間 b. 入射光波長 c. 顯色的溫度 d. 顯色劑的用量24. 紅外光譜與紫外吸收光譜的區(qū)別是（ ）a. 前者使用廣泛，后者適用范圍小b. 后者是由分子外層價電子躍遷引起c. 前者譜圖信息豐富，后者則簡單d. 前者是分子振動轉(zhuǎn)動能級躍遷引起 二、填空題1在以波長為橫坐標，吸光度為縱坐標的濃度不同kmno4溶液吸收曲線上可以看出_未變，只是_改變了。2不同濃度的同一物質(zhì)，其吸光度隨濃度增大而_，但最大吸收波長_。3符合光吸收定律的有色溶液，當溶液濃度增大時，它的最大吸收峰位置_，摩爾吸光系數(shù)_。4為了使分光光度法測定準確，吸光度應(yīng)控制在0.20.8范圍內(nèi)，可采取措施有_和_。5摩爾吸光系數(shù)是

9、吸光物質(zhì)_的度量，其值愈_，表明該顯色反應(yīng)愈_。6分子中的助色團與生色團直接相連，使p®p*吸收帶向_方向移動，這是因為產(chǎn)生_共軛效應(yīng)。7一有色溶液，在比色皿厚度為2cm時，測得吸光度為0.340。如果濃度增大1倍時，其吸光度a=_，t=_。8分光光度法測定鈦，可用(1)h2o2法(e =7.2´102 l×mol-1×cm-1)，也可用(2)二胺替比啉甲烷法(e =1.8´104 l×mol-1×cm-1)。當測定試樣中鈦含量較低時，用_法較好。9各種物質(zhì)都有特征的吸收曲線和最大吸收波長，這種特性可作為物質(zhì) 的依據(jù)；同種物

10、質(zhì)的不同濃度溶液，任一波長處的吸光度隨物質(zhì)的濃度的增加而增大，這是物質(zhì)_的依據(jù)。10朗伯特-比耳定律表達式中的吸光系數(shù)在一定條件下是一個常數(shù)，它與_、_及_無關(guān)。 11符合朗伯特-比耳定律的fe2+-鄰菲羅啉顯色體系，當fe2+濃度c變?yōu)?c時，a將_；t將_；e將_。12某溶液吸光度為a1，稀釋后在相同條件下，測得吸光度為a2，進一步稀釋測得吸光度為a3。已知a1-a2=0.50，a2-a3=0.25，則為_。13光度分析中，偏離朗伯特-比耳定律的重要原因是入射光的_差和吸光物質(zhì)的_引起的。14在分光光度法中，入射光波一般以選擇_波長為宜，這是因為_。 15如果顯色劑或其他試劑對測量波長也有

11、一些吸收，應(yīng)選_為參比溶液；如試樣中其他組分有吸收，但不與顯色劑反應(yīng)，則當顯色劑無吸收時，可用_作參比溶液。16r帶是由_躍遷引起，其特征是波長_；k帶是由 躍遷引起，其特征是波長_。17在紫外-可見分光光度法中，工作曲線是_和_之間的關(guān)系曲線。當溶液符合比耳定律時，此關(guān)系曲線應(yīng)為_。18在光度分析中，常因波長范圍不同而選用不同材料制作的吸收池。可見分光光度法中選用_吸收池；紫外分光光度法中選用_吸收池；紅外分光光度法中選用_吸收池。三、判斷對錯1某物質(zhì)的摩爾吸光系數(shù)越大，則表明該物質(zhì)的濃度越大。2在紫外光譜中，同一物質(zhì)，濃度不同，入射光波長相同，則摩爾吸光系數(shù)相同；同一濃度，不同物質(zhì)，入射光

12、波長相同，則摩爾吸光系數(shù)一般不同。3有色溶液的透光率隨著溶液濃度的增大而減小，所以透光率與溶液的濃度成反比關(guān)系；有色溶液的吸光度隨著溶液濃度的增大而增大，所以吸光度與溶液的濃度成正比關(guān)系。4朗伯特-比耳定律中，濃度c與吸光度a之間的關(guān)系是通過原點的一條直線。5朗伯特-比耳定律適用于所有均勻非散射的有色溶液。6有色溶液的最大吸收波長隨溶液濃度的增大而增大。7在光度分析法中，溶液濃度越大，吸光度越大，測量結(jié)果越準確。8物質(zhì)摩爾吸光系數(shù)e的大小，只與該有色物質(zhì)的結(jié)構(gòu)特性有關(guān)，與入射光波長和強度無關(guān)。9若待測物、顯色劑、緩沖溶液等有吸收，可選用不加待測液而其他試劑都加的空白溶液為參比溶液。10摩爾吸光

13、系數(shù)e是吸光物質(zhì)在特定波長和溶劑中的特征常數(shù)，e值越大，表明測定結(jié)果的靈敏度越高。11吸光度的讀數(shù)范圍不同，讀數(shù)誤差不同，引起最大讀數(shù)誤差的吸光度數(shù)值約為0.434。12在進行紫外分光光度測定時，可以用手捏吸收池的任何面。13今有1.0 mol/lcuso4溶液，若向該溶液中通nh3時，其摩爾吸光系數(shù)不發(fā)生改變。14分光光度計檢測器直接測定的是吸收光的強度。15丙酮在已烷中的紫外吸收lmax為279 nm，emax為14.8 l×mol-1×cm-1。引起該吸收帶躍遷是p®p*。16分光光度法測定的相對誤差約為2%5%。使用這類方法可進行微量組分分析，因為它能滿足

14、測定微量組分對準確度的要求。17雙波長分光光度法和雙光束分光光度法都是以試劑空白作參比。四、有關(guān)概念及名詞解釋1*2*3n*4n*5電荷遷移6配位場躍遷7吸收光譜(absorption spectrun)即吸收曲線8lambert-beer定律9透光率(transmitiance) 10吸光度(absorbance) 11摩爾吸光系數(shù)12百分吸光系數(shù) 13生色團14助色團15紅移16藍移17r帶18k帶19b帶20e帶21強帶22弱帶23雙波長分光光度法24導(dǎo)數(shù)光譜法25光電比色法26透光率的測量誤差五、計算題1安絡(luò)血的相對摩爾質(zhì)量為236，將其配成100 ml含安絡(luò)血 0.4300 mg的溶

15、液，盛于1 cm吸收池中，在max55 nm處測得a值為0.483，試求安絡(luò)血的和值。2稱取維生素c 0.0500 g溶于100 ml的5 mol/l硫酸溶液中，準確量取此溶液2.00 ml稀釋至100 ml，取此溶液于1 cm吸收池中，在max245 nm處測得a值為0.498。求樣品中維生素c 的百分質(zhì)量分數(shù)。（ml/g×cm）3精密稱取試樣0.0500 g，用0.02 mol/l hcl 稀釋，配制成250 ml。準確吸取2.00 ml，稀釋至100 ml，以0.02 mol/l hcl為空白，在253 nm處用1 cm吸收池測得t41.7，其12000 l/mol×

16、cm)，被測組分的分子質(zhì)量100.0，試計算（263 nm）和試樣中被測組分的百分質(zhì)量分數(shù)。4測定血清中的磷酸鹽含量時，取血清試樣5.00ml于100ml量瓶中，加顯色劑顯色后，稀釋至刻度。吸取該試液25.00ml，測得吸光度為0.582；另取該試液25.00ml，加1.00ml0.0500mg磷酸鹽，測得吸光度為0.693。計算每毫升血清中含磷酸鹽的質(zhì)量。5稱取某藥物一定量，用0.1 mol/l的hcl溶解后，轉(zhuǎn)移至100 ml容量瓶中用同樣hcl稀釋至刻度。吸取該溶液5.00 ml，再稀釋至100 ml。取稀釋液用2 cm吸收池，在310 nm處進行吸光度測定，欲使吸光度為0.350。問需

17、稱樣多少克？（已知：該藥物在310 nm處摩爾吸收系數(shù)e=6130 l/mol×cm，摩爾質(zhì)量m=327.8）6精密稱取vb12對照品20.0 mg，加水準確稀釋至1000 ml，將此溶液置厚度為1 cm的吸收池中，在361 nm處測得a0.414。另取兩個試樣，一為vb12的原料藥，精密稱取20.0 mg，加水準確稀釋至1000 ml，同樣條件下測得a0.390，另一為vb12注射液，精密吸取1.00 ml，稀釋至10.00 ml，同樣條件下測得a0.510。試分別計算vb12原料藥的百分質(zhì)量分數(shù)和注射液的濃度。 7測定廢水中的酚，利用加入過量的有色的顯色劑形成有色絡(luò)合物，并在57

18、5nm處測量吸光度。若溶液中有色絡(luò)合物的濃度為1.0×10-5mol/l，游離試劑的濃度為1.0×10-4mol/l測得吸光度為0.657：在同一波長下，僅含1.0×10-4mol/l游離試劑的溶液，其吸光度只有0.018，所有測量都在2.0cm吸收池和以水作空白下進行，計算在575nm時，（1）游離試劑的摩爾吸光系數(shù)；（2）有色絡(luò)合物的摩爾吸光系數(shù)。8今有a、b兩種藥物組成的復(fù)方制劑溶液。在1 cm吸收池中，分別以295 nm和370 nm的波長進行吸光度測定，測得吸光度分別為0.320和0.430。濃度為0.01 mol/l的a對照品溶液，在1 cm的吸收池中

19、，波長為295 nm和370 nm處，測得吸收度分別為0.08和0.90；同樣條件，濃度為0.01 mol/l的b對照品溶液測得吸收度分別為0.67和0.12。計算復(fù)方制劑中a和b的濃度（假設(shè)復(fù)方制劑其他試劑不干擾測定）。9a與b兩種物質(zhì)的對照品溶液及樣品溶液，用等厚度的吸收池測得吸光度如下表。（1）求被測混合物中a和b含量。（2）求被測混合物在300nm處的吸光度。波長238nm282 nm300 nma對照 3.0g/ml0.1120.2160.810b對照 5.0g/ml1.0750.3600.080a+b樣品0.4420.27810在光度分析中由于單色光不純，在入射光l2中混入雜散光l

20、1。l1和l2組成強度比為:=1:5，吸光化合物在l1處的=5.0´103 l/mol×cm，在l2處的=1.0´104 l/mol×cm。用2 cm吸收池進行吸光度測定。（1）若吸光物質(zhì)濃度為5´10-6 mol/l，計算其理論吸光度a；（2）若濃度為1´10-5 mol/l，a又為多少？該吸光物溶液是否服從朗伯特-比耳定律？11某有色溶液在2.0 cm厚的吸收池中測得透光度為1.0%，儀器的透光度讀數(shù)t有±0.5%的絕對誤差。試問：（1）測定結(jié)果的相對誤差是多少？（2）欲使測量的相對誤差為最小，溶液的濃度應(yīng)稀釋多少倍？（

21、3）若濃度不變，問應(yīng)用多厚的吸收池較合適？（4）濃度或吸收池厚度改變后，測量結(jié)果誤差是多少? 12有一個兩色酸堿指示劑，其酸式（ha）吸收420 nm的光，摩爾吸光系數(shù)為325 l/mol×cm。其堿式（a）吸收600 nm的光，摩爾吸光系數(shù)為120 l/mol×cm。ha在600 nm處無吸收，a在420 nm處無吸收?，F(xiàn)有該指示劑的水溶液，用1 cm比色皿，在420 nm處測得吸光度為0.108，在600 nm處吸光度為0.280。若指示劑的pka為3.90，計算該水溶液的ph值。13某一元弱酸的酸式體在475 nm處有吸收， = 3.4×104 l/mol&

22、#215;cm，而它的共軛堿在此波長下無吸收，在ph =3.90的緩沖溶液中，濃度為2.72×10-5 mol/l的該弱酸溶液在475 nm處的吸光度為0.261（用1 cm比色杯）。計算此弱酸的ka值。14某弱酸ha總濃度為2.0´10-4 mol/l。于l520 nm處，用1 cm比色皿測定，在不同ph值的緩沖溶液中，測得吸光度值如下：ph0.881.172.993.413.954.895.50a0.8900.8900.6920.5520.3850.2600.260求：（1）在520 nm處，ha和a的eha, ea-；（2）ha的電離常數(shù)ka。15絡(luò)合物nib在395

23、nm下有最大吸收（此條件時，ni及b無吸收），當絡(luò)合劑濃度比ni2+過量5倍時，ni2+完全形成絡(luò)合物。根據(jù)下列數(shù)據(jù)，求ni2+ +2bnib 的穩(wěn)定常數(shù)k。溶液組成及濃度(mol/l)吸光度(=395nm)ni2+ (2.50×10-4 ) , b(2.20×10-1 )0.765ni2+ (2.50×10-4 ) , b(1.00×10-3 )0.360 習題答案與解析一、選擇題（其中112題為單選，1321題為多選）1c。苯環(huán)可產(chǎn)生b吸收帶和e吸收帶，羰基可產(chǎn)生r吸收帶。羰基和苯環(huán)共軛b帶、e帶和r帶都發(fā)生紅移，同時吸收增強。共軛后的e帶也可稱之為

24、k帶。所以四種化合物中只有苯乙酮能同時產(chǎn)生b吸收帶、k吸收和r吸收帶。2b。在紫外光譜中，雙鍵發(fā)生共軛后，p軌道進行重新整合，p軌道的最高成鍵軌道（p）能量升高，p軌道的最低反鍵軌道（p*）能量降低，使p®p*躍遷所需能量減小。雙鍵共軛越大，p®p*躍遷所需能量越小，吸收波長發(fā)生紅移。四種化合物中，1,3-丁二烯，1,3-環(huán)已二烯，2,3-二甲基-1,3-丁二烯都含有共軛體系，p®p*躍遷所需能量減小。因此，p®p*躍遷所需能量最大的化合物是1,4-戊二烯。3c。lambert-beer定律描述的是在一定條件下，當一束平行的單色光通過均勻的非散射樣品時，

25、樣品對光的吸光度與樣品濃度及液層厚度成正比。符合lambert-beer定律的有色溶液稀釋時，吸光物質(zhì)的吸光度降低，但最大吸收峰波長位置即lmax不變。4b。單波長分光光度計方框圖：單 色 器吸 收 池檢 測 器顯 示 器光 源雙波長分光光度計方框圖：光 源單 色 器 1吸 收 池檢 測 器顯 示 器單 色 器 15b。6c。由雙波長分光光度計方框圖可知：光源發(fā)出的復(fù)光交替通過單色器1和單色器2，得到測定波長l2和參比波長l1，測定波長l2和參比波長l1交替通過吸收池并通過檢測器檢測，使得干擾組分a在測定波長l2和參比波長l1下有：使得測定組分b在l2和l1有：因此，雙波長分光光度計的輸出信號

26、是樣品在測定波長的吸收與參比波長的吸收之差（設(shè)a和b的吸收光譜有等吸收點）。7d。在配制被測組分分光光度法測定溶液時，常加入的反應(yīng)試劑、緩沖溶液、溶劑等都可能對入射光產(chǎn)生吸收，因為物質(zhì)對光的吸收具有加和性。因此，在紫外-可見分光光度法測定中，必須選擇一種合適的溶液作為參比溶液，以消除試劑等非測定物質(zhì)對入射光吸收的影響。8b。k2cr2o7硫酸溶液的配制的一般操作過程：稱取固體k2cr2o7一定量，于小燒杯中，用一定濃度的硫酸溶液溶解，待k2cr2o7完全溶解后，轉(zhuǎn)移至一定體積的容量瓶中，用硫酸溶液稀釋至刻度，配制成適宜濃度的k2cr2o7硫酸溶液。由此可見：溶液的配制過程只加入了硫酸溶液，因此

27、，掃描k2cr2o7硫酸溶液的紫外-可見吸收光譜時，參比溶液選用h2so4溶液即可。9b。在比色法中，顯色反應(yīng)的顯色劑選擇原則是：（1）被測物與生成的有色物有確定的定量關(guān)系；（2）生成的有色物應(yīng)有足夠的穩(wěn)定性；（3）顯色反應(yīng)產(chǎn)物和顯色劑吸收峰的位置應(yīng)有顯著的差別或在同一光波下的e值相差足夠大；（4）顯色反應(yīng)產(chǎn)物的e足夠大；（5）顯色反應(yīng)的選擇性要高。因此，顯色反應(yīng)的顯色劑選擇原則不正確的是顯色劑的e值愈大愈好。10b。在光度法測定前，為了保證入射光強度完全被待測物質(zhì)所吸收，需用參比溶液調(diào)節(jié)儀器吸光度a=0或透光率t=100%，如果透光率只調(diào)至了95.0%，滿量程為t=0%95.0%，而不是t=

28、0%100%。在光度法測定前，如果透光率只調(diào)至95.0%，測得某有色溶液的透光率為35.2%，此時溶液的真正透光率為： 11b。該法是通過氧化還原反應(yīng)用分光光度法間接測定kcl中的微量i-。在測定中一切可吸光的物質(zhì)或影響氧化還原反應(yīng)的物質(zhì)均應(yīng)在測定中扣除，扣除的辦法就是選擇合適的參比溶液，該法選擇的參比溶液應(yīng)包括除i-以外所有與樣品相同的酸、kmno4及淀粉，稱為試劑空白。12b。一般分光光度計有5部分組成：光源、單色器、吸收池、檢測器和顯示器。其中單色器是將連續(xù)光按波長順序色散，并從中分離出一定寬度的波帶的裝置。單色光的組件主要包括光柵或棱鏡、狹縫。13b。物質(zhì)的吸光系數(shù)不僅與物質(zhì)的結(jié)構(gòu)有關(guān)

29、，而且與測定波長有關(guān)。因為物質(zhì)對光的吸收具有選擇性，同一物質(zhì)在不同波長光下測定吸收能力不同，吸光系數(shù)不同。14a。根據(jù)：求得：15由吸收曲線可見：a正確，可不經(jīng)分離，在a組分吸收最大的波長處和b吸收最大的波長處分別測定a和b；d正確，b組分吸收最大的波長處測得的吸光度值不包括a的吸收。16bcd。a錯，在lambert beer定律中，c-t之間沒有線性關(guān)系；b正確，參比溶液（即試劑空白）的干擾屬于系統(tǒng)誤差。若不使用參比溶液調(diào)節(jié)a=0，就等于沒有消除方法的系統(tǒng)誤差，這時標準曲線不通過原點；c正確，若假設(shè)參比溶液中僅有一種吸光物質(zhì)，有關(guān)系式：a與c樣不成正比，即吸光度與c樣的關(guān)系偏離lamber

30、t beer定律。d正確，用參比溶液調(diào)節(jié)a=0就是扣除了被測組分以外其它物質(zhì)對入射光的吸收的干擾，使所測吸光度a值真正反應(yīng)的是待測物的a值。17cd。摩爾吸光系數(shù)（e）是指在一定波長下，溶液中吸光物質(zhì)濃度為1 mol/l，液層厚度為1 cm的吸光度。e與吸光物質(zhì)濃度和液層厚度無關(guān)。e是吸光物質(zhì)對光吸收強弱的表征，反映了吸光物質(zhì)測定時的靈敏度。因此，某藥物的摩爾吸光系數(shù)越大，表明該藥物對某波長的光吸收越強，測定該藥物的靈敏度越高。18（1）ab?；衔锏奈展庾V反映化合物的特性。在以波長為橫坐標，吸光度為縱坐標的吸收光譜上，任意一點都對應(yīng)化合物的同一濃度。同樣濃度下測定，吸光度a越大，靈敏度越高

31、，因此，使用顯色反應(yīng)產(chǎn)物e 大的顯色劑和以lmax作測定波長均可提高測定的靈敏度。（2）cd。選擇正確的參比液可以扣除干擾物質(zhì)對待測組分的影響，消除系統(tǒng)誤差?？刂票壬蠛穸燃叭芤簼舛瓤梢允菧y定吸光度值在0.20.7之間，因此cd均為提高分光光度法的準確度的方法。（3）b。同一濃度下，測定的吸光度值越大，由儀器讀數(shù)的微小變化引起吸光度的相對誤差變化很小，即方法的精密度越好。（4）c。選擇適當?shù)膮⒈热芤?，避開參比溶液中干擾成分對測定的影響，即提高了分析方法的選擇性。19cd。20bc。等吸收雙波長消去法定量分析是根據(jù)被測組分b和干擾組分a的吸收光譜，選擇測定波長l2和參比波長l1（如下圖所示）。根

32、據(jù)吸光度的加和性，使得a組分在測定波長l2和參比波長l1下有：，使得b組分在l2和l1有：。因此等吸收雙波長消去法定量分析的理論依據(jù)是溶液對兩波長的吸光度之差與待測物濃度成正比和吸光度具有加和性。 21bc。含有雜原子的不飽和化合物，由雜原子空軌道（n）躍遷到反鍵軌道(*)稱為n®p*躍遷。此類躍遷需要的能量低，n*吸收波長落在近紫外區(qū)或可見區(qū)，但吸收較弱（=10100）。能發(fā)生n®p*躍遷的基團是c=o和cºn。22abcd。顯色反應(yīng)是指不吸收紫外光或可見光化合物，通過與顯色劑反應(yīng)轉(zhuǎn)化成能吸收紫外光或可見光化合物，從而進行比色法測定。為了達到測定的精密度和準確度

33、，對于顯色反應(yīng)有嚴格的條件要求，特別是溶液的酸度對顯色反應(yīng)影響很大，酸度的改變可能影響（1）顯色劑的濃度和顏色。因為顯色劑一般都是有機酸或堿指示劑，酸度的改變不但影響酸型體或堿型體存在的狀態(tài)，還影響其濃度和顏色；（2）被顯色物的存在狀態(tài)；（3）反應(yīng)產(chǎn)物的穩(wěn)定性和組成。23acd。在光電比色法中，為了達到測定的精密度和準確度，對于顯色反應(yīng)要進行嚴格的條件選擇，顯色反應(yīng)應(yīng)選擇的條件有（1）溶劑；（2）顯色劑的用量；（3）溶液的酸度；（4）顯色時間；（5）顯色的溫度等。b不屬于顯色反應(yīng)應(yīng)選擇的條件，為測定條件。 24abcd。二、填空題1最大吸收峰的位置(或lmax) ；吸光度 2增大；不變3不變；

34、不變4改變?nèi)芤簼舛?；改變比色皿厚?吸光能力；大（小）；靈敏（不靈敏）6長波長；n®p7 0.680；20.9%8二胺替比啉甲烷9定性分析；定量分析10溶液濃度；光程長度；入射光的強度 11增至3倍；降至t 3倍；不變125.6213單色性；化學變化14被測物質(zhì)的最大吸收；最大吸收波長處摩爾吸光系數(shù)最大，測定時靈敏度最高15空白溶液；試樣溶液16 n®p*；較長；共軛雙鍵的p®p*；較短，但隨共軛鍵增長而增長17濃度；吸光度；一條直線18玻璃；石英；巖鹽三、判斷對錯1×。吸光系數(shù)是指在一定波長下，溶液中吸光物質(zhì)濃度為1，液層厚度為1cm的吸光度。常用摩爾

35、吸光系數(shù)和百分吸光系數(shù)表示。吸光系數(shù)是吸光物質(zhì)的特性參數(shù)，是吸光物質(zhì)定性的重要參數(shù)，與吸光物質(zhì)的濃度無關(guān)。2。摩爾吸光系數(shù)與吸光物質(zhì)的結(jié)構(gòu)特性、吸收光的波長有關(guān)。同一物質(zhì)，入射光波長不同，摩爾吸光系數(shù)不同。但紫外光譜反映的是分子母體的性質(zhì)，母體相同而取代基不同摩爾吸光系數(shù)可能相同也可能不同。所以同一物質(zhì)，濃度不同，入射光波長相同，則摩爾吸光系數(shù)相同；同一濃度，不同物質(zhì)，入射光波長相同，則摩爾吸光系數(shù)一般不同。3×。有色溶液的透光率與溶液濃度之間的關(guān)系為： 或 由此可見：有色溶液的吸光度隨著溶液濃度的增大而增大，所以吸光度與溶液的濃度成正比關(guān)系。透光率隨著溶液濃度的增大而減小，有色溶液

36、的透光率與溶液濃度之間成指數(shù)關(guān)系，但不成反比關(guān)系。4。朗伯特-比耳定律表明在一定條件下，當一束平行的單色光通過均勻的非散射樣品時，樣品對光的吸光度與樣品濃度及液層厚度成正比。即： 所以，從理論上講符合朗伯特-比耳定律吸光物質(zhì)濃度c與吸光度a之間的關(guān)系是通過原點的一條直線。5。朗伯特-比耳定律是指在一定條件下，當一束平行的單色光通過均勻的非散射樣品時，樣品對光的吸光度與樣品濃度及液層厚度成正比。朗伯特-比耳定律不僅適用于均勻非散射的有色溶液，而且適用于均質(zhì)的固體。6×。有色溶液的最大吸收波長是吸光物質(zhì)的特性參數(shù)，是吸光物質(zhì)定性的重要參數(shù)，與吸光物質(zhì)的濃度無關(guān)。所以，有色溶液的最大吸收波

37、長不隨溶液濃度的變化而變化。7×。在光度分析法中測量結(jié)果的準確度可推導(dǎo)如下：由lambert-beerlaw： 對上式求導(dǎo)并除以上式，得結(jié)果的相對誤差：如暗噪音： 結(jié)果的相對誤差最小值： 所以，在光度分析法中，溶液濃度要適中，吸光度讀數(shù)，測量結(jié)果準確度最高。一般要求之間即可滿足光度分析法測定準確度的要求。8×。摩爾吸光系數(shù)不僅與吸光物質(zhì)的結(jié)構(gòu)特性有關(guān)，還與入射光的波長有關(guān)。同一物質(zhì)，入射光波長相同，摩爾吸光系數(shù)相同；同一物質(zhì)，入射光波長不同，摩爾吸光系數(shù)不同。9。在配制被測組分光度法測定溶液時，常加入的顯色劑、緩沖溶液、溶劑等都可能對入射光產(chǎn)生吸收。因此，在紫外-可見分光光

38、度法測定中，必須選擇一種合適的溶液作為參比溶液，以消除試劑等非測定物質(zhì)對入射光吸收的影響，提高測定結(jié)果的準確度。所以，待測物、顯色劑、緩沖溶液等都對所選擇的波長有吸收時，可選用不加待測液而其他試劑都加的空白溶液為參比溶液。10。由朗伯特-比耳定律可知：在一定條件下，在一定的液層厚度l時，吸光度與溶液的濃度成正比關(guān)系，e 值越大，溶液濃度的微小改變，可引起吸光度較大變化，所以，e 值越大，測定結(jié)果的靈敏度越高。同時摩爾吸光系數(shù)e是吸光物質(zhì)在特定波長和溶劑中的特征常數(shù)，是物質(zhì)定性的重要指標。11×。見3.7答案的解釋。12×。紫外分光光度配有一對石英吸收池，吸收池的兩相對面是光

39、面透光的，另兩相對面是毛面不透光的。在進行紫外分光光度測定時，要對吸收池進行清洗并盛放待測溶液。在進行這些操作時，手不能捏吸收池的光面，只能捏吸收池的毛面，這是因為吸收池的光面是入射光的透過面，用手捏吸收池的光面，會在光面粘上汗?jié)n或其他污物而玷污，對入射光的強度產(chǎn)生影響，使測定結(jié)果的準確度降低。13×。在cuso4溶液中通nh3時將發(fā)生以下反應(yīng)：cu2+ 4nh3 cu(nh3)42+ 摩爾吸光系數(shù)是吸光物質(zhì)的特性參數(shù)，不同物質(zhì)具有不同摩爾吸光系數(shù)。由此可見向1.0mol/lcuso4溶液中通nh3時，吸光質(zhì)點由cu2+（淺藍色）變成了cu(nh3)42+（藍色變深），其摩爾吸光系數(shù)

40、必然發(fā)生改變。14×。分光光度計方框圖：光 源單 色 器吸 收 池檢 測 器顯 示 器 分光光度計光路是：由分光光度計光源發(fā)出連續(xù)光譜，經(jīng)單色器分光后，得到所需要的單色光，單色光經(jīng)過吸收池被吸光物質(zhì)所吸收，剩余的光透過吸收池，進入檢測器進行檢測。由此可見，分光光度計檢測器直接測定的是透過光強度，而不是吸收光的強度。15×。*是不飽和化合物由基態(tài)（）躍遷到激發(fā)態(tài)(*)。此類躍遷需要的能量降較低，孤立的*吸收波長一般200nm；共軛的*吸收波長200nm。共軛體系越長，向長波長方向移動的程度越大，吸收強度越強，*的吸收強度=103104。丙酮結(jié)構(gòu)中有羰基c=o，沒有共軛體系，可

41、以產(chǎn)生孤立的*和n*躍遷，n*躍遷需要的能量低，吸收波長落在近紫外區(qū)或可見區(qū)，吸收較弱=10100。故丙酮在已烷中的紫外吸收lmax=279nm，emax=14.8l×mol-1×cm-1的吸收帶不是p®p*躍遷，而是n*躍遷。16。常量分析對方法的準確度要求高（一般相對誤差約為0.1%），對方法的靈敏度要求低；微量分析則對方法的準確度要求低，而對方法的靈敏度要求高。分光光度法具有較高的靈敏度，但測定的相對誤差約為2%5%。所以，分光光度法可進行微量組分分析。17×。雙波長分光光度計方框圖：光 源單 色 器 1吸 收 池檢 測 器顯 示 器單 色 器 1

42、雙光束分光光度計方框圖：光 源單 色 器吸 收 池檢 測 器顯 示 器參 比 池 由此可見，雙波長分光光度法是以波長（l1）作參比，雙光束分光光度法是以試劑空白作參比。四、有關(guān)概念及名詞解釋答案1*：飽和烴類化合物由基態(tài)()躍遷到激發(fā)態(tài)(*)。此類躍遷需要的能量較高，一般吸收波長150 nm。2*：不飽和化合物由基態(tài)()躍遷到激發(fā)態(tài)(*)。此類躍遷需要的能量較低，孤立的*吸收波長一般200 nm；共軛的*吸收波長200 nm。共軛體系越長，躍遷所需能量越小，向長波長方向移動的程度越大，吸收強度越強（= 103 104）。3n*：含有雜原子的不飽和化合物由雜原子空軌道(n)躍遷到反鍵軌道(*)。

43、此類躍遷需要的能量低，n*吸收波長落在近紫外區(qū)或可見區(qū)，但吸收較弱（= 10 100）。4n*： 含有雜原子的飽和化合物由雜原子空軌道(n)躍遷到反鍵軌道(*)。此類躍遷需要的能量較高，n*吸收波長一般落在遠紫外區(qū)。5電荷遷移：指用電磁輻射照射給體化合物時，電子從給體軌道向受體相關(guān)軌道躍遷，此類躍遷吸收很強（104），吸收波長較長。6配位場躍遷：在配位場理論中，過渡元素的d軌道或f軌道發(fā)生分裂，當他們吸收電磁輻射后，電子由低能級的d軌道或f軌道躍遷，此類躍遷吸收較弱（102），吸收波長較長，一般位于可見區(qū)。7吸收光譜(absorption spectrun)即吸收曲線，以波長（）為橫坐標，吸光

44、度（a）為縱坐標所繪制的曲線。吸收光譜是化合物的特征。8lambert-beer定律：在一定條件下，當一束平行的單色光通過均勻的非散射樣品時，樣品對光的吸光度與樣品濃度及液層厚度成正比。即： 或 9透光率(transmittance；t)：一束平行的單色光強度為i0，通過均勻的非散射樣品后，出射光強度為i，出射光強度i與入射光強度i0的比，即。10吸光度(absorbance；a)：透光率的負對數(shù)為吸光度，即。11摩爾吸光系數(shù)：在一定波長下，溶液中吸光物質(zhì)濃度為1 mol/l，液層厚度為1cm的吸光度。用表示，單位：l/cm×mol。12百分吸光系數(shù)：在一定波長下，溶液中吸光物質(zhì)濃度

45、為1%（w/v），液層厚度為1 cm的吸光度。用表示，單位：ml/cm×g。 13生色團：有機化合物結(jié)構(gòu)中含有* 或n* 躍遷的基團，即能在紫外或可見區(qū)產(chǎn)生吸收的基團。14助色團：有機化合物結(jié)構(gòu)中雜原子的飽和基團，與生色團或飽和烴相連時，使相連生色團或飽和烴紫外吸收向長波長方向移動或產(chǎn)生紫外吸收，并使吸收強度增加的基團。15紅移：由于結(jié)構(gòu)或?qū)嶒灄l件的變化，使吸收峰向長波長方向移動的現(xiàn)象，亦稱長移。16藍移：由于結(jié)構(gòu)或?qū)嶒灄l件的變化，使吸收峰向短波長方向移動的現(xiàn)象，亦稱紫移或短移。17r帶：n*躍遷引起的吸收帶，波長長（約300 nm），強度弱（<100），隨著溶劑極性增加，r帶

46、藍移。18k帶：*躍遷引起的吸收帶，波長短（1,3-丁二烯吸收217 nm），強度強（104），極性*隨著溶劑極性增加，k帶紅移。19b帶：*躍遷引起的吸收帶，是芳香族化合物的特征吸收。苯蒸氣在波長230270 nm（中心頻率254 nm）出現(xiàn)精細結(jié)構(gòu)的吸收光譜，溶液或取代苯精細結(jié)構(gòu)消失，254 nm出現(xiàn)吸收。強度中等。20e帶：*躍遷引起的吸收帶，也是芳香族化合物的特征吸收，分為e1帶和e2帶。e1帶（苯環(huán)的不共軛雙鍵）吸收波長為180 nm，為4.7×104，e2帶（苯環(huán)的共軛雙鍵）吸收波長為203 nm，為7000，二者都是強吸收。21強帶：紫外可見吸收光譜中，化合物摩爾吸光系

47、數(shù)104的吸收峰。如：k帶、e1帶。22弱帶：紫外可見吸收光譜中，化合物摩爾吸光系數(shù)102的吸收峰。如：r帶。23雙波長分光光度法：雙波長分光光度法包括等吸收雙波長消去法和系數(shù)倍率法。利用在選擇的波長下，使得：等吸收雙波長消去法：， 系數(shù)倍率法：，利用雙波長分光光度法可以測定混濁溶液和混合組分的單獨測定。（a為被測組分）24導(dǎo)數(shù)光譜法：利用吸光度對波長求導(dǎo)后的導(dǎo)數(shù)值與吸光物質(zhì)濃度成正比關(guān)系的原理建立起來的光度分析方法。即。導(dǎo)數(shù)光譜結(jié)構(gòu)精細，可進行定性分析；譜線寬度變窄，分辨率增加，可進行多組分的同時測定；可以有效的扣除背景。25光電比色法：光電比色法是對能吸收可見光的有色溶液或能轉(zhuǎn)化成吸收可見

48、光的有色溶液的無色溶液進行測定的方法。26透光率測量誤差：是測量中的隨機誤差，來自儀器的噪音。一類為暗噪音與光訊號無關(guān)；另一類為散粒噪音隨光訊號強弱而變化。暗噪音： 散粒噪音： 五、計算題1解：由(ml/g×cm)(l/mol×cm)2解：由維生素c 的百分質(zhì)量分數(shù)=3解：由 (ml/g×cm)組分的百分質(zhì)量分數(shù)=4解：在25.00ml試液中加1.00ml0.0500mg磷酸鹽，溶液體積為26.00ml，校正到25.00ml的吸光度為：加入1.00ml0.0500mg磷酸鹽所產(chǎn)生的吸光度為：由：，25.00ml磷酸鹽質(zhì)量=0.2094(mg)每毫升血清中含磷酸鹽的質(zhì)量=(mg)5解：由 解得：6 解：由vb12對照品計算361 nm的百分吸收系數(shù)：(ml/g×cm)vb12原料藥的百分質(zhì)量分數(shù)：vb12% =注射液vb12的濃度：(g/ml)=0.246(mg/ml)7解： （1）由lambert-beer定律：，當僅含顯色劑c游離=1.0×10-4mol/l時，a=0.018 游離試劑的摩爾吸光系數(shù)：(l/mol