骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的影響因素

1、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的影響因素#管常東，黃艷，樊瑜波*510（北京航空航天大學(xué)生物與醫(yī)學(xué)工程學(xué)院，生物力學(xué)與力生物學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100191）摘要：背景：目前以骨移植為基本理念的骨組織工程在骨損傷臨床治療中被廣泛應(yīng)用，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞作為骨組織工程研究領(lǐng)域最重要的種子細(xì)胞，其向成骨細(xì)胞方向分化的誘導(dǎo)成為該領(lǐng)域的一個(gè)研究熱點(diǎn)。研究現(xiàn)狀：許多研究已經(jīng)證實(shí)了在體外可以誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞方向分化，當(dāng)前的研究熱點(diǎn)集中在該誘導(dǎo)條件的優(yōu)化，以期體外獲得大量性狀穩(wěn)定的成骨細(xì)胞。研究用途：有助于解決骨組織工程中細(xì)胞來源的問題，在骨科疾病的臨床治療領(lǐng)域有重要的研究意義。關(guān)鍵詞：生

2、物醫(yī)學(xué)工程；骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；成骨細(xì)胞；分化；生物化學(xué)因素；物理因素中圖分類號(hào)：r31815influence factors on osteogenic differentiation of bonemarrow-derived mesenchymal stem cellsguan changdong, huang yan, fan yubo(key laboratory for biomechanics and mechanobiology of ministry of education, school of2025303540biological science and medical

3、 engineering, beihang university, beijing 100191)abstract: background: with the basic concept of bone graft, bone tissue engineering was widelyused in the field of bone injury clinical treatment. bone marrow mesenchymal stem cells (bmscs)were shown as the most important seed cells of bone tissue eng

4、ineering, and received extensiveattention because they could be induced to differentiate into osteoblasts. research progresses:many studies have already confirmed that bmscs could be induced to differentiate intoosteoblasts in vitro, nowadays many researchers focus on the optimization of the conditi

5、ons duringthe process of induction, in order to get numerous osteoblasts. research purposes: the aim of thosestudies were to get enough cells for bone tissue engineering, which showed significance in thefield of clinical treatment for orthopedic diseases.keywords: biomedical engineering; bone marrow

6、-derived mesenchymal stem cells; osteoblasts;differentiation; biochemical factors; physical factors0 引言骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells，bmscs）是源于骨髓的多能干細(xì)胞，因具有取材容易、機(jī)體損傷小、易于體外培養(yǎng)增殖、有多向分化潛能、組織相容性好、易于外源基因的導(dǎo)入等優(yōu)點(diǎn)，成為組織工程和基因工程理想的靶細(xì)胞，在細(xì)胞生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域有著越來越重要的研究價(jià)值。體外培養(yǎng)條件下，bmscs 容易被多種環(huán)境因素誘導(dǎo)分化，不同的

7、環(huán)境因子可誘導(dǎo) bmscs 向成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、骨骼肌細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞、心肌細(xì)胞等方向分化。隨著成體干細(xì)胞研究的不斷普及，bmscs 在干細(xì)胞研究領(lǐng)域展現(xiàn)了越來越重要的價(jià)值。骨組織工程需要大量的種子細(xì)胞，近年來國內(nèi)外學(xué)者和臨床工作者對誘導(dǎo)干細(xì)胞成骨向基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目資助（10925208，11120101001）；高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金資助（20091102110031）作者簡介：管常東，（1987-），女，碩士研究生，力生物學(xué)。通信聯(lián)系人：樊瑜波，（1965-），男，教授，生物力學(xué)及力生物學(xué)、醫(yī)療器械、康復(fù)工程、航空航天醫(yī)學(xué)工程、空

8、間生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)工程管理。e-mail: yubofan-1-分化進(jìn)行了大量的研究，bmscs 以其獨(dú)特的優(yōu)越性引起了普遍關(guān)注。定向誘導(dǎo) bmscs 向成骨細(xì)胞方向分化對骨組織工程的研究提供重要的理論指導(dǎo)，進(jìn)而為臨床上骨質(zhì)疏松、骨損傷等骨科疾病的攻克提供了新思路。目前有大量文獻(xiàn)報(bào)道了關(guān)于體外定向誘導(dǎo) bmscs 向成4550556065707580骨細(xì)胞方向分化的研究，應(yīng)用的技術(shù)手段包括以添加生物活性因子或化學(xué)試劑為主的生物化學(xué)方法以及施加應(yīng)力為主的物理方法誘導(dǎo)其向成骨細(xì)胞方向分化。本文綜述了近年來體外誘導(dǎo) bmscs 向成骨細(xì)胞方向分化的研究方法及最新進(jìn)展，并對該領(lǐng)域進(jìn)一步的研究方向進(jìn)行了展

9、望。1 生物化學(xué)因素對 bmscs 成骨向分化的影響通過向 bmscs 的培養(yǎng)體系中添加生物化學(xué)試劑來誘導(dǎo)細(xì)胞的成骨向分化是比較常用的研究方法，目前研究已證實(shí)可誘導(dǎo) bmscs 成骨向分化的因子包括地塞米松、磷酸甘油、抗壞血酸、骨形態(tài)發(fā)生蛋白、胰島素樣生長因子、成纖維細(xì)胞生長因子、抗炎類藥物、淫羊藿黃酮類化合物、辛伐他汀類藥物等1,2,3,4。wen 等5利用成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基（含有 10nm 地塞米松，10mm-甘油磷酸，50m 抗壞血酸）誘導(dǎo)鼠 bmscs 的成骨向分化。chen 等6在該成骨誘導(dǎo)體系中加入 10-10m 的成骨生長肽，結(jié)果證明其對 bmscs 的成骨向分化有促進(jìn)作用。piek

10、 等7的研究發(fā)現(xiàn)維生素 d 促進(jìn)bmscs 的成骨向分化。chang8等在體外分離的 bmscs 培養(yǎng)體系中分別加入 10-8-10-7m 的地塞米松、10-5-10-4m 的 nsaids（nonsteroidal antiinflammatory drugs，主要成分包括：吲哚美辛、酮咯酸、雙氯芬酸、吡羅昔康）、塞來昔布、羅非昔布的類似物，認(rèn)為該培養(yǎng)液體系可以誘導(dǎo) bmscs 的成骨向分化。mathews 等9認(rèn)為細(xì)胞外基質(zhì)中的 i 型膠原酶、纖連蛋白、層粘連蛋白以及玻璃體結(jié)合蛋白都具有誘導(dǎo) bmscs 成骨向分化的作用。wan 等10研究發(fā)現(xiàn)金黃色葡萄球菌腸毒素 c 注射液與抗壞血酸共同

11、作用可促進(jìn) bmscs 的成骨向分化。yoon 等11則發(fā)現(xiàn)提取自枳殼、具有抗菌消炎作用的黃酮苷對 bmscs 的成骨向分化有一定的促進(jìn)作用。kim 等12研究尼古丁對人 bmscs 增殖和成骨向分化的影響，結(jié)果顯示 2mm的尼古丁明顯抑制人 bmscs 的成骨向分化，1-2mm 的尼古丁可使骨鈣素明顯降低。barhanpurkar 等13研究認(rèn)為具有造血調(diào)節(jié)功能的細(xì)胞因子白介素-3 具有促進(jìn)人 mscs 成骨向分化的作用。platt 等14研究發(fā)現(xiàn)一定濃度的共軛亞油酸可以增加 bmscs 的鈣含量以及堿性磷酸酶活性從而促進(jìn)其成骨向分化。you 等15證實(shí)了一氧化氮合成酶可促進(jìn) mscs 的成

12、骨向分化。dubose16的研究則發(fā)現(xiàn)凝血栓蛋白可以通過調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)化生長因子的活性的方式來抑制 bmscs 的成骨向分化。目前已證實(shí)生物化學(xué)因素體外可以誘導(dǎo) bmscs 向成骨細(xì)胞方向分化，這對在體骨組織修復(fù)有非常重要的臨床意義，但對于其誘導(dǎo)條件的進(jìn)一步優(yōu)化、分子機(jī)制探討以及體內(nèi)誘導(dǎo)修復(fù)等問題還有待于進(jìn)一步的研究。2 物理因素對 bmscs 成骨向分化的影響通過物理因素誘導(dǎo) bmscs 的成骨向分化目前也有諸多的文獻(xiàn)報(bào)道，其中對細(xì)胞施加力學(xué)刺激是該領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。力學(xué)因素存在于一切的細(xì)胞微環(huán)境中，體外構(gòu)建工程化組織時(shí)，缺乏力學(xué)刺激可導(dǎo)致種子細(xì)胞功能不能完全發(fā)揮，使構(gòu)建組織生物活性較低，許多研究表明

13、力學(xué)因素可以影響 bmscs 的增殖、凋亡、細(xì)胞骨架形態(tài)以及細(xì)胞的分化情況。利用適當(dāng)?shù)臋C(jī)械力學(xué)因素結(jié)合各種化學(xué)誘導(dǎo)因子等使 bmscs 向成骨細(xì)胞方向分化，在骨組織工程的研究領(lǐng)域具有重要現(xiàn)實(shí)意義，同時(shí)也為臨床應(yīng)用機(jī)械應(yīng)力刺激的治療提供理論依據(jù)。骨細(xì)胞體內(nèi)生長的微環(huán)境中受力主要包括骨髓內(nèi)液流產(chǎn)生的剪切應(yīng)力、機(jī)體運(yùn)動(dòng)等產(chǎn)生的正應(yīng)力和牽-2-張應(yīng)力以及重力作用，目前許多文獻(xiàn)報(bào)道成骨細(xì)胞對上述力學(xué)刺激較為敏感，并且在干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化時(shí)期力學(xué)刺激的誘導(dǎo)作用尤為重要17,18，因此體外研究 bmscs 的分化誘導(dǎo)的物理因素主要從這幾個(gè)方面來研究。852.1剪切應(yīng)力對 bmscs 成骨向分化的影響已有諸

14、多研究表明剪切應(yīng)力對在體骨細(xì)胞的生長是一個(gè)重要的環(huán)境信號(hào)，在骨細(xì)胞生長過程中起到一定的誘導(dǎo)、調(diào)控作用19,20。隨著骨組織工程的發(fā)展，剪切應(yīng)力也被逐漸應(yīng)用到bmscs 成骨向誘導(dǎo)中來，近年來的諸多研究已證實(shí)適當(dāng)大小的剪切應(yīng)力可誘導(dǎo) bmscs 的成骨向分化21,22。目前體外加載剪切應(yīng)力的裝置主要包括錐板流室、板板流室、平行平板流動(dòng)腔、圓柱管流室和徑向流裝置等23。大量的研究顯示在剪切應(yīng)力促進(jìn) bmscs 成骨向分化9095100105110的過程中，wnt、erk 等信號(hào)通路都被激活并同時(shí)激活下游蛋白或基因，因此許多研究者認(rèn)為 bmscs 細(xì)胞是通過響應(yīng)這些信號(hào)通路來調(diào)控其成骨向分化的。ka

15、pur 等24對 bmscs 施加 20dyn/cm2 的流體剪切應(yīng)力，結(jié)果表明切應(yīng)力可以誘導(dǎo)其向成骨細(xì)胞分化。li 等25也證明剪切應(yīng)力作用 bmscs 后上調(diào)了其成骨基因的表達(dá)，并認(rèn)為ca2+通道可能在細(xì)胞對力學(xué)信號(hào)的響應(yīng)中起到一定的作用。liu 等26研究顯示 4.2dyne/cm2的剪切應(yīng)力誘導(dǎo)了 bmscs 的成骨向分化，證實(shí)剪切應(yīng)力激活了細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶 1/2，從而進(jìn)一步激活了 runx2 和 1 整合素，誘導(dǎo) bmscs 的成骨向分化，并且認(rèn)為細(xì)胞核因子nf-b 參與了該信號(hào)通路的調(diào)控。glossop 等27對人 bmscs 分別施加 1、5 和 10 dyne/cm2的流體

16、剪切應(yīng)力，并檢測了絲裂原活化蛋白激酶信號(hào)通路在細(xì)胞誘導(dǎo)分化中的參與作用，結(jié)果顯示它參與調(diào)控眾多分化基因的表達(dá)。yeatts 等28,29進(jìn)一步證實(shí)了他們的觀點(diǎn)，研究利用生物反應(yīng)器對 bmscs 加載流體剪切應(yīng)力后，mapk、wnt、smad 等信號(hào)通路的變化。離子通道在剪切應(yīng)力誘導(dǎo) bmscs 成骨向分化過程中的參與作用還有待于進(jìn)一步的研究。kreke等30將大鼠 bmscs 細(xì)胞培養(yǎng)于成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液（含地塞米松、抗壞血酸、-磷酸甘油），隔天分別給予重復(fù) 5、30 和 120 分鐘的流體剪切力，給予細(xì)胞成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液后第 2 天和第4 天施加剪切力，并在第 6 天檢測，結(jié)果顯示細(xì)胞堿性磷酸酶的

17、活性增高。細(xì)胞在第 6、8、10、12 天受力并在第 20 天被檢測時(shí)，120 分鐘的力學(xué)加載能最有效地增加骨橋蛋白和骨涎蛋白的 mrna 表達(dá)水平，從而證明，重復(fù)給予流體剪切應(yīng)力可以更好地促進(jìn) bmscs 的成骨向分化。剪切應(yīng)力誘導(dǎo) bmscs 成骨向分化的機(jī)制尚不十分清楚，可能是剪切應(yīng)力促進(jìn)bmscs 表達(dá)某些蛋白多糖、細(xì)胞胞外基質(zhì)、細(xì)胞因子，從而誘導(dǎo) bmscs 進(jìn)行選擇性分化。目前剪切應(yīng)力對體外培養(yǎng)的 bmscs 成骨向分化的研究仍然存在很多問題，如何更加科學(xué)有效地對 bmscs 進(jìn)行力學(xué)加載，尋找最佳的機(jī)械力學(xué)條件，以及 bmscs 響應(yīng)力學(xué)信號(hào)的具體途徑，尚需進(jìn)一步的探索。2.2壓

18、應(yīng)力對 bmscs 成骨向分化的影響在體內(nèi)骨細(xì)胞的生長環(huán)境中，壓應(yīng)力是不可缺少一個(gè)物理因素，因此體外研究 bmscs成骨向分化的過程中，很多研究者試圖分析壓應(yīng)力在其中起到的作用。目前研究中應(yīng)用到的115壓應(yīng)力加載裝置主要是氣相靜壓裝置和液體靜壓裝置，向密閉的細(xì)胞培養(yǎng)容器內(nèi)通過氣體或液體施加正壓力或負(fù)壓力。靜水壓對 bmscs 成骨向的誘導(dǎo)與壓力的大小有直接的關(guān)系，研究顯示 1-50kpa 大小的靜水壓有助于 bmscs 的成骨向分化，而施加 0.1-10mpa 的靜水壓力則有助于 bmscs 的軟骨向分化31。kim 等32對 bmscs 加載 0.2mpa 的動(dòng)態(tài)壓力，施壓 1 分鐘、放壓

19、14 分鐘，證-3-120125實(shí)了動(dòng)態(tài)壓應(yīng)力促進(jìn)了細(xì)胞的成骨向分化，同時(shí)認(rèn)為信號(hào)通路細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶 1/2 可能參與了該分化誘導(dǎo)過程的調(diào)控作用。何川等33通過靜水壓裝置對 bmscs 施加 40kpa 的靜壓力連續(xù)刺激 7、14 天，每天 4 小時(shí)，組織化學(xué)和定量分析結(jié)果顯示靜水壓力刺激作用 7 天能促進(jìn) bmscs 的成骨向分化，而作用 14 天后則促進(jìn)其成脂向分化，從而認(rèn)為一定強(qiáng)度和作用時(shí)間的靜水壓力刺激有助于 bmscs 的成骨向分化。胡小毅等 34對 bmscs 施加了0.098mpa，加壓 15 分鐘、放壓 15 分鐘，連續(xù) 9 天的壓應(yīng)力，實(shí)驗(yàn)結(jié)果認(rèn)為間斷性壓力加快了細(xì)胞成骨

20、向分化的速度。以上結(jié)果證明適度的壓應(yīng)力會(huì)刺激 bmscs 的成骨向分化，并且誘導(dǎo)作用與應(yīng)力大小有關(guān)。2.3牽張應(yīng)變對 bmscs 成骨向分化的影響牽張應(yīng)變的加載是通過細(xì)胞生長基底膜的彈性形變來實(shí)現(xiàn)的，常用的力學(xué)加載系統(tǒng)為130135140145flexer cell 加載系統(tǒng)。諸多研究表明，牽張應(yīng)變的大小和頻率的不同會(huì)對 bmscs 的成骨向分化有不同的影響。simmons 等35對 bmscs 施加 3%、0.25 赫茲的牽張應(yīng)變，并未引起明顯的成骨向分化，但抑制 p38 絲裂原活化蛋白激酶信號(hào)通路的活性后發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有明顯的成骨向分化，從而認(rèn)為牽張應(yīng)變激活了 p38 信號(hào)通路，而該通路具有抑制

21、 bmscs 成骨向分化的作用。koike 等36則采用 0.8%-15%大小的牽張應(yīng)變，發(fā)現(xiàn)堿性磷酸酶的活性在拉伸應(yīng)變大小為 0.8%和 5%時(shí)有明顯的增加，而在 10%和 15%則為降低趨勢，結(jié)論認(rèn)為低強(qiáng)度的牽張有利于 bmscs 的成骨向分化。friedl 等37分離培養(yǎng)了 10 位捐贈(zèng)者的 bmscs，其中有 5 位男性和 5 位女性，并對這些細(xì)胞施加了最大應(yīng)變值為 3000um 的應(yīng)變 3 天，利用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測成骨標(biāo)志性基因的表達(dá)，結(jié)果顯示該應(yīng)變有助于 bmscs 的成骨向分化。jagodzinski 等38對 7 個(gè)捐贈(zèng)者的 bmscs 進(jìn)行體外分離培養(yǎng)，并加載了 10

22、%、0.5 赫茲的牽張應(yīng)變，觀察 3 周的時(shí)間，結(jié)果顯示在 1、2 和 3 周中成骨標(biāo)志基因 runx2 都有明顯的上升，同時(shí)骨鈣素的表達(dá)也明顯高于對照組，結(jié)論認(rèn)為該大小的牽張應(yīng)變有利于 bmscs 的成骨向分化。steinmetz 等39的研究中應(yīng)用的是 15%、0.3hz 的牽張應(yīng)變，14 天后發(fā)現(xiàn)對 bmscs 的成骨向分化有明顯的抑制作用。綜合以上的研究可以看出牽張應(yīng)變的大小對 bmscs 的成骨向分化有一定的影響，較小的牽張應(yīng)變可能更有助于成骨向分化。2.4微重力對 bmscs 成骨向分化的影響無論在體內(nèi)還是體外，細(xì)胞都不可避免地會(huì)受到重力的作用，因此重力因素在 bmscs成骨向誘導(dǎo)

23、的過程中也起到不可或缺的作用，細(xì)胞微重力模擬加載裝置通常為旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)體系。150155早在 20 世紀(jì) hughes-fulford 等40就研究發(fā)現(xiàn)小鼠成骨細(xì)胞系在空間飛行中細(xì)胞數(shù)量減少。dai 等41研究發(fā)現(xiàn)通過回轉(zhuǎn)模擬微重力效應(yīng)可以抑制 bmscs 的增殖，細(xì)胞微絲骨架對微重力敏感，微重力下使 f-肌動(dòng)蛋白發(fā)生改變并阻止細(xì)胞生長。zayzafoon 等42對 bmscs進(jìn)行了 7 天的模擬微重力培養(yǎng)，結(jié)果認(rèn)為微重力培養(yǎng)體系抑制了 bmscs 的成骨向分化。meyers 等43也對 bmscs 微重力條件下培養(yǎng) 7 天，證明了同樣的結(jié)果，并認(rèn)為細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶參與了調(diào)控。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明模

24、擬微重力效應(yīng)抑制 bmscs 的成骨向分化，說明模擬微重力可能作用于干細(xì)胞水平，影響成骨細(xì)胞的數(shù)量和功能，導(dǎo)致成骨細(xì)胞缺乏必要的機(jī)械應(yīng)力刺激作用，增殖受到抑制，骨形成減少。-4-2.5誘導(dǎo) bmscs 成骨向分化的其他物理因素細(xì)胞生長環(huán)境的復(fù)雜化使得干細(xì)胞的分化受多種環(huán)境因素的影響，除了力學(xué)因素，超聲160165170175180185190195200205波和脈沖電場等物理因素也會(huì)影響 bmscs 的成骨向分化。超聲波對 bmscs 的影響與靜水壓處理細(xì)胞的原理類似，它的作用會(huì)使細(xì)胞產(chǎn)生一定程度的形變，從而對細(xì)胞施加一定的作用力。一般認(rèn)為 25-35mw/cm2 的低強(qiáng)度超聲波處理bmsc

25、s，有助于其成骨向分化，而強(qiáng)度在 30-200mw/cm2 的超聲波則偏向于誘導(dǎo) bmscs 的軟骨向分化44。moinnes 等45對 bmscs 進(jìn)行低強(qiáng)度超聲處理，每 3 周超聲刺激 20 分鐘，結(jié)果顯示低強(qiáng)度超聲可加速 bmscs 的成骨向分化。王寶剛等46對 bmscs 施加 8.5kv、脈沖 120 次的工作電壓，結(jié)果顯示 45 分鐘的刺激時(shí) c-fos 與 c-jun 基因的表達(dá)達(dá)到峰值，并且檢測到細(xì)胞向成骨向分化，認(rèn)為該沖擊波對 bmscs 成骨向分化的誘導(dǎo)可能與這兩個(gè)基因的表達(dá)有關(guān)。趙敏等47在實(shí)驗(yàn)中用 12 赫茲、1.1mt 場強(qiáng)的脈沖電場刺激 bmscs 6 天，每天 8

26、小時(shí)，結(jié)果顯示明顯誘導(dǎo)了 bmscs 的成骨向分化。3 結(jié)論與展望綜上所述，近年來的大量研究表明生物化學(xué)因素和物理因素體外可以影響 bmscs 向成骨細(xì)胞方向分化，但尚存在許多問題。目前該項(xiàng)研究的熱點(diǎn)集中在理論層面上的 bmscs 細(xì)胞響應(yīng)相關(guān)信號(hào)的機(jī)制，尋找參與分化調(diào)控的信號(hào)通路及通道蛋白分子等目標(biāo)分子的研究；以及實(shí)驗(yàn)層面上的如何選擇最佳的力學(xué)參數(shù)，從而最好地促進(jìn)干細(xì)胞的成骨向分化等的研究，為 bmscs 在臨床上的應(yīng)用提供理論依據(jù)和參考；另外由于骨組織工程中有生物材料的參與，因此生物材料對 bmscs 成骨向分化的影響也成為該領(lǐng)域的又一熱點(diǎn)問題；眾所周知在體內(nèi)細(xì)胞的生長受到多種環(huán)境因素的影

27、響，因此聯(lián)合應(yīng)用多種不同影響因素也許可以進(jìn)一步提高 bmscs 向成骨細(xì)胞的定向分化效率。這些問題的解決需要組織工程技術(shù)及材料學(xué)、工程學(xué)和生物化學(xué)相關(guān)學(xué)科的發(fā)展和合作，進(jìn)行更加深入細(xì)致的研究，為提高臨床基于bmscs 的骨缺損治療效果提供理論基礎(chǔ)及優(yōu)化方案。參考文獻(xiàn)1 戴白云, 吳紹華. 骨髓基質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞影響因子的研究進(jìn)展 j. 瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào) ,2010(4): 459-461.2 jianzhong wang, zhihong yu, kunzheng wang, et al. an experiment study of osteogenesis of ad-vegf16

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33、. c. wu, et al. effects of anti-inflammatory drugs on proliferation, cytotoxicity andosteogenesis in bone marrow mesenchymal stem cellsj. biochem pharmacol, 2007, 74(9): 1371-1382.10 s. mathews, r. bhonde, p. k. gupta, et al. extracellular matrix protein mediated regulation of the osteoblast-5-diffe

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