銀黃口服液生產(chǎn)工藝研究

1、銀黃口服液小試試驗(yàn)方案一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模壕C合考慮影響銀黃口服液的穩(wěn)定因素和含量、ph值的要求，以及生產(chǎn)成本等因素尋找最佳的生產(chǎn)工藝。二、實(shí)驗(yàn)方案：采用傳統(tǒng)正交設(shè)計法優(yōu)先成品的綠原酸的含量、ph值的最佳條件，考慮影響因素有金銀花提取工藝、綠原酸投料量、配制液ph值、檸檬酸鈉用量、滅菌方法，根據(jù)各因素的取值范圍和及實(shí)驗(yàn)要求設(shè)計成4水平5因素水平表，具體見表：因素水平表（表1）因素水平金銀花提取工藝綠原酸投料量(g/l)配制液ph值檸檬酸鈉用量(g/l)滅菌方法1飲片水提2.45.50不滅菌2飲片80溫浸3.45.82.94輻照滅菌3飲片60溫浸4.86.014.7100，30min4提取物6.87.2

2、29.4100，20min三、實(shí)驗(yàn)方法：1、飲片水提：將金銀花中藥飲片采用熱投的方法（即先將飲用水煮沸，再將中藥飲片投入進(jìn)去）,分兩次微沸，第一次加10倍飲用水，微沸2小時；第二次加10倍飲用水，微沸1小時。（飲片投入量根據(jù)金銀花中藥飲片綠原酸含量按提取率為30%計算投料）2、飲片80溫浸：將金銀花中藥飲片分兩次溫浸，第一次加10倍飲用水，加熱至80時后溫浸2小時，第二次加10倍飲用水，加熱至80時后溫浸1小時。（飲片投入量根據(jù)金銀花中藥飲片綠原酸含量按提取率為30%計算投料）3、飲片60溫浸：將金銀花中藥飲片分兩次溫浸，第一次加10倍飲用水，加熱至60時后溫浸2小時，第二次加10倍飲用水，加

3、熱至60時后溫浸1小時。（飲片投入量根據(jù)金銀花中藥飲片綠原酸含量按提取率為30%計算投料）10倍飲用水10倍60飲用水4、提取物：直接使用金銀花提取物進(jìn)行配制，金銀花提取物投入量按實(shí)際檢測的綠原酸含量計算投料。藥渣（棄掉）金銀花飲片60溫浸1小時溫浸2小時5、生產(chǎn)工藝：中藥材提取液提取液合并離心過濾低溫濃縮金銀花提取物（冷藏備用）純化水熱水溶解黃芩提取物離心過濾18%naoh調(diào)節(jié)ph值離心過濾2混合均勻（粗配液）中間品檢測（ph值、密度）山梨酸鉀、蔗糖溶解加入混合液中瓶子（用灌封退回的）檸檬酸鈉溶解加入混合液中滅菌灌封銀黃工藝處方：（100ml）物料名稱金銀花提液黃芩提取物蔗糖山梨酸鉀檸檬酸鈉

4、氫氧化鈉數(shù)量適量2.8g10g0.13 g適量適量方案一（1-1-2-2-1）：金銀花水提，投入2.4g/l，添加2.94g/l檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.8，不滅菌的樣品方案二（1-1-2-2-3）：金銀花水提，投入2.4g/l，添加2.94g/l檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.8，滅菌30min的樣品注：方案一和方案二各制得100ml，即取用51.6g的金銀花中藥飲片（3.1%）用水提方法提取，一起配制成200ml，最終分裝成20支，10支100滅菌30min，10支不滅菌。方案三（2-1-2-2-1）：金銀花80溫浸提取，投入2.4g/l，添加2.94g/l檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.8，不滅菌的

5、樣品方案四（2-1-2-2-3）：金銀花80溫浸提取，投入2.4g/l，添加2.94g/l檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.8，滅菌30min的樣品注：方案三和方案四各制得100ml，即取用51.6g的金銀花中藥飲片（3.1%）用80溫浸提取方法提取，一起配制成200ml，最終分裝成20支，10支100滅菌30min，10支不滅菌。方案五（3-1-2-2-1）：金銀花60溫浸提取，投入2.4g/l，添加2.94g/l檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.8，不滅菌的樣品方案六（3-1-2-2-3）：金銀花60溫浸提取，投入2.4g/l，添加2.94g/l檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.8，滅菌30min的樣品方案七（3

6、-2-2-1-1）：金銀花60溫浸提取，投入3.4g/l，不添加檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.8，不滅菌的樣品方案八（3-2-2-1-3）：金銀花60溫浸提取，投入3.4g/l，不添加檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.8，滅菌30min的樣品方案九（3-2-2-2-3）：金銀花60溫浸提取，投入3.4g/l，添加2.94g/l檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.8，滅菌30min的樣品方案十（3-1-2-2-3）：金銀花60溫浸提取，投入4.8g/l，添加2.94g/l檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.8，滅菌30min的樣品方案十一（3-4-2-2-3）：金銀花60溫浸提取，投入6.8g/l，添加2.94g/l檸檬酸鈉，

7、配制液調(diào)節(jié)至5.8，滅菌30min的樣品注：方案五至方案十一各制得100ml，即取用286g的金銀花中藥飲片（3.1%）用60溫浸提取方法提取，提取液量用總體積，最后再按相應(yīng)投料量分配，各方案配制成100ml，分別分裝成10支。方案十二（4-1-1-1-3）：使用金銀花提取物加1/3量的純凈水溶解，投入2.4g/l，不添加檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.5，滅菌30min的樣品方案十三（4-1-1-2-3）：使用金銀花提取物加1/3量的純凈水溶解，投入2.4g/l，添加2.94g/l檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.5，滅菌30min的樣品方案十四（4-1-2-2-3）：使用金銀花提取物加1/3量的純凈水溶

8、解，投入2.4g/l，添加2.94g/l檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.8，滅菌30min的樣品方案十五（4-2-1-2-3）：使用金銀花提取物加1/3量的純凈水溶解，投入3.4g/l，不添加檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.5，滅菌30min的樣品方案十六（4-2-2-2-3）：使用金銀花提取物加1/3量的純凈水溶解，投入3.4g/l，添加2.94g/l檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.8，滅菌30min的樣品方案十七（4-2-3-2-3）：使用金銀花提取物加1/3量的純凈水溶解，投入3.4g/l，添加2.94g/l檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至6.0，滅菌30min的樣品方案十八（4-2-4-2-3）：使用金銀花提取物

9、加1/3量的純凈水溶解，投入3.4g/l，添加2.94g/l檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至7.2，滅菌30min的樣品方案十九（4-2-2-3-3）：使用金銀花提取物加1/3量的純凈水溶解，投入3.4g/l，添加14.7g/l檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.8，滅菌30min的樣品方案二十（4-2-2-4-3）：使用金銀花提取物加1/3量的純凈水溶解，投入3.4g/l，添加29.4g/l檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.8，滅菌30min的樣品方案二十一（4-2-2-2-1）：使用金銀花提取物加1/3量的純凈水溶解，投入3.4g/l，添加2.94g/l檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.8，不滅菌的樣品方案二十二（4-2-2

10、-2-2）：使用金銀花提取物加1/3量的純凈水溶解，投入3.4g/l，添加2.94g/l檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.8，輻照滅菌的樣品方案二十三（4-2-2-2-4）：使用金銀花提取物加1/3量的純凈水溶解，投入3.4g/l，添加2.94g/l檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.8，100滅菌20min的樣品方案二十四（4-3-2-2-3）：使用金銀花提取物加1/3量的純凈水溶解，投入4.8g/l，添加2.94g/l檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.8，滅菌30min的樣品方案二十五（4-3-2-2-1）：使用金銀花提取物加1/3量的純凈水溶解，投入4.8g/l，添加2.94g/l檸檬酸鈉，配制液調(diào)節(jié)至5.8，不

11、滅菌的樣品注：1、方案16、21、22、23是比較不同滅菌條件的滅菌效果及產(chǎn)品的穩(wěn)定性。2、方案13、14、16、17、18是比較配制液的ph值不同時對產(chǎn)品的穩(wěn)定性作用大小。3、方案16、19、20是比較不同檸檬酸鈉的添加量對產(chǎn)品的穩(wěn)定性作用大小。4、方案12、13是比較添不添加檸檬酸鈉對產(chǎn)品的穩(wěn)定性（ph值和含量）作用大小。5、方案24、25是比較當(dāng)金銀花提取物添加量為藥典處方量的2倍時，產(chǎn)品的穩(wěn)定性（ph值和含量），滅菌前后的變化。四、樣品檢測分析：1、綠原酸檢測測方法：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.4%磷酸溶液（10:90）為流動相；檢測波長為32

12、7nm。理論板數(shù)按綠原酸峰計算應(yīng)不低于2000。對照品溶液的制備 取綠原酸對照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每1ml含40g的溶液，即得。供試品溶液的制備 精密量取本品1ml，置50ml棕色量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，以0.45m微孔濾膜濾過，即得。測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10l，注入液相色譜儀，測定，即得。 2、黃芩苷檢測測方法：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-磷酸（50:50:0.2）為流動相；檢測波長為274nm。理論板數(shù)按黃芩苷峰計算應(yīng)不低于2500。對照品溶液的制備 取黃芩苷對照品約

13、10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置10ml量瓶中,加水稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml含黃芩苷50g)。供試品溶液的制備 精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取3ml，置25ml量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，以0.45m微孔濾膜濾過，即得。測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10l，注入液相色譜儀，測定，即得。方案金銀花提取工藝綠原酸投料量(g/l)配制液ph值檸檬酸鈉用量(g/l)滅菌方法成品檢測結(jié)果ph值綠原酸(mg/ml)黃芩苷(mg/ml)一112215.716.7319

14、.80二112235.445.1420.53三212215.677.6221.05四212235.855.4620.25五312215.697.4319.61六312235.516.3919.05七322115.7210.3819.46八322135.478.1219.24九322235.458.8219.63十312215.4010.8718.40十一312235.3315.7319.43十二411135.322.0120.92十三411235.372.3721.16十四412235.432.2119.93十五421235.352.9718.54十六422235.632.8320.81十七4

15、23235.832.8519.92十八424236.831.8119.12十九422335.712.4220.01二十422435.732.0719.99二十一422215.663.3720.30二十二422225.603.2020.28二十三422245.622.9820.89二十四432235.693.7319.54二十五432215.604.5419.44五、結(jié)論：1、分析比較方案一、三、五實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，中藥飲片提取方法提取率分別為84%、95%、93%，由此可見，采用飲片80溫浸提取方法提取率最高，同時考慮到大生產(chǎn)中提取液的濃縮溫度為6080，由于綠原酸的熱穩(wěn)定性不好，所以濃縮中溫度608

16、0不會影響提取率，所以金銀花的最佳提取工藝為：將金銀花中藥飲片分兩次溫浸，第一次加10倍飲用水，加熱至80時后溫浸2小時，第二次加10倍飲用水，加熱至80時后溫浸1小時。2、分析比較方案六、九、十、十一、十四、十六、二十四等實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，綠原酸投料量與最終產(chǎn)品綠原酸含量比例系數(shù)，可以得出綠原酸的投料量越大最終綠原酸含量比例系數(shù)越小，即綠原酸的投料量越大，在制劑過程中的損失率越大。3、分析比較方案十三、十四、十五、十六、十七、十八等實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，配制液的ph值越高，制劑過程中綠原酸的損失率越大，但實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)配制過程中，當(dāng)ph值低于5.5時黃芩提取物溶解性較差，而制得成品后ph值在5.35.5時比較穩(wěn)

17、定，由于考慮到2010版中國藥典中銀黃的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為5.57.0，所以配制過程中，配制液的ph值控制在5.86.0時綠原酸的利用率較高。4、分析比較方案十六、二十一、二十二、二十三等實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，比較不同滅菌條件的滅菌效果及產(chǎn)品的穩(wěn)定性，綠原酸滅菌損失率分別為：5.04%、17.82%、17.51%，以此看來綠原酸的熱穩(wěn)定性較差，三種滅菌后的產(chǎn)品細(xì)菌檢測均合格，相對來說co60輻照滅菌綠原酸有效成份損失較小，但成本較高而且需要送到外面去滅菌操作不方便；100流通蒸汽滅菌20min和30min有效成份損失差別不大，故生產(chǎn)可行的方法可選擇100流通蒸汽滅菌30min。5、分析比較方案七、八、九及方案十二、十三等實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，可以看出添加檸檬酸鈉緩沖劑有利于ph值和綠原酸有效成份的穩(wěn)