辣椒紅色素的提取與分離

1、實(shí)驗(yàn)七辣椒紅色素的分離提取一、 綜述辣椒紅色素別名辣椒紅、辣椒色素、椒紅素、辣紅素，是一種存在于成熟紅辣椒果實(shí)中的四萜類橙紅色色素，屬類胡蘿卜素類色素。辣椒紅色素是辣椒的主要顯色物質(zhì)，其中主要含辣椒紅素和辣椒玉紅素，具有辣椒香氣味的深紅色粘性油狀液體，色澤鮮艷，著色力強(qiáng)，耐光、熱、酸、堿，且不受金屬離子影響；溶于油脂和乙醇。1.辣椒紅色素結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)純的辣椒紅色素是有光澤的深紅色針狀結(jié)晶，呈橙紅、橙黃色調(diào)，屬類胡蘿卜素類色素，主要成分及含量為：辣椒紅素約50 ，辣椒玉紅素約8.3，玉米黃質(zhì)約14，-胡蘿卜素約13.9，隱辣椒質(zhì)約5.5，此外還有辣椒黃素、辣椒色素脂肪酸酯、辣椒紅素乙二酸酯、辣

2、椒紅素二軟脂酸酯等，可用作食用紅色色素，未酯化辣椒紅素的生物利用率高于酯化辣椒紅素。辣椒果實(shí)在成熟過程的不同時(shí)期，各種類胡蘿卜素（-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)、辣椒紅素）含量不同，其中在其生長過程的第9周時(shí)（自開花起計(jì)算），辣椒紅素的含量為19 000 g100 g，占總類胡蘿卜素的60%。純的辣椒紅色素熔點(diǎn)為175 左右，易溶于極性大的有機(jī)溶劑，如：丙酮、三氯甲烷、植物油、乙醚，溶于乙醇，不溶于甘油和水。與濃無機(jī)酸作用顯藍(lán)色。具有較好的分散性，在p H為312，溫度在2570較為穩(wěn)定，在糖類溶液中穩(wěn)定性較好，耐還原性好，耐氧化性差，金屬離子K+、C a2+、N a+、M g2+、Z n2+對(duì)

3、其無影響，可以與這些添加劑一起使用，而A l3+、F e3+對(duì)其影響不大，C u2+、F e2+對(duì)其有顯著影響，使用時(shí)應(yīng)注意避免。辣椒紅素耐光性差，暴露于室外強(qiáng)光下易褪色。辣椒紅色素各成分的分子結(jié)構(gòu)如下:辣椒紅素( capsan thin) (C40H56O3 = 584.85)辣椒玉紅素( capsorubin) (C40H56O4 = 600.85)玉米黃質(zhì)( zeaxan thin) - 胡蘿卜素(- carotenone2.辣椒紅色素的應(yīng)用及前景辣椒紅素是天然紅色素的一種，可從成熟的茄科紅辣尖椒中提取。作為一種天然著色劑,辣椒紅色素不僅色澤鮮艷,色價(jià)高,著色力強(qiáng),保色效果好,安全無毒，

4、而且具有抗癌美容的功效，因此被廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)品、肉類、糕點(diǎn)、色拉罐頭、飲料等各類食品的著色,還可以有效地延長仿真食品的貨架期;而且安全性高,具有營養(yǎng)保健作用,并被現(xiàn)代科學(xué)證明有抗癌、抗輻射等功能,還應(yīng)用于化妝品和兒童玩具等領(lǐng)域?，F(xiàn)已成為國內(nèi)外食品和食品添加劑行業(yè)開發(fā)研究和消費(fèi)關(guān)注的熱點(diǎn)之一。由于市場(chǎng)前景較好,需求量逐年上升,各國競(jìng)相開發(fā)生產(chǎn)。我國是一個(gè)辣椒資源相當(dāng)豐富的國家,幾乎全國各地都有種植,特別是山東、河北、四川、山西、河南、云南、廣西等省區(qū)均有大面積種植,年總產(chǎn)量也難以精確統(tǒng)計(jì)。由此可知我國辣椒產(chǎn)量豐富、價(jià)格低廉，所以開發(fā)應(yīng)用辣椒紅色素具有很大的經(jīng)濟(jì)效益和廣闊的國內(nèi)外市場(chǎng)前景。3.現(xiàn)有

5、的辣椒紅色素提取方法目前辣椒紅色素的提取方法大致可歸為油溶法, 溶劑提取法, 超臨界CO2流體萃取法, 超聲波溶劑提取法, 溶劑微波提取法和酶法提取六類。其中,前兩種為常規(guī)方法。（1） 油溶法油溶法是在常溫下呈液狀的食用油如棉籽油、豆油、菜籽油等浸漬辣椒果皮或干辣椒粉，使辣椒紅素溶解在食用油中, 然后通過一定方法從油中提取出辣椒紅素的一種方法。用油溶法提取辣椒紅色素存在油與色素分離困難的缺點(diǎn), 難以得到濃稠的色素, 現(xiàn)已基本停止使用。（2） 溶劑法溶劑法是將去除壞椒雜質(zhì)的干辣椒磨成粉后, 用有機(jī)溶劑如丙酮、乙醇、乙醚、氯仿、二氯乙烷、正己烷等進(jìn)行浸提, 將浸提液濃縮得到粗辣椒油樹脂,減壓蒸餾得

6、產(chǎn)品。但此法所得產(chǎn)品含雜質(zhì)多, 同時(shí)還帶有辣椒特有的異味, 使其應(yīng)用范圍大大減小, 為此,需采用多種改進(jìn)方法以消除其雜質(zhì)和異味。（3） 超臨界CO2 流體萃取法目前,國內(nèi)外已經(jīng)開始研究應(yīng)用超臨界CO2 流體技術(shù)萃取辣椒紅色素。超臨界流體萃取技術(shù)是以超臨界狀態(tài)下的流體作為溶劑,利用該狀態(tài)下流體所具有的高滲透能力和高溶解能力萃取分離混合物的過程。超臨界流體的溶解能力隨體系參數(shù)(溫度和壓力)而發(fā)生連續(xù)性變化,因此通過改變操作條件(稍微提高溫度或降低壓力)便可方便地調(diào)節(jié)組分的溶解度和萃取的選擇性。此方法生產(chǎn)的辣椒紅色素,色價(jià)達(dá)到220。（4）超聲波溶劑提取法辣椒粉是片狀凹凸不平的纖維組織結(jié)構(gòu),辣椒素及

7、其他脂溶性成分存在于纖維組織之內(nèi),采用傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑提取法需要耗費(fèi)大量有機(jī)溶劑和時(shí)間才能提取完全。超聲提取過程產(chǎn)生強(qiáng)烈的振動(dòng)、空化、攪拌,與傳統(tǒng)提取方式比較具有收率高、生產(chǎn)周期短、無需加熱、有效成分不被破壞等優(yōu)點(diǎn)。（5） 溶劑微波提取法微波是電磁波的一種，其波長為1mm1m,其波長介于短波和遠(yuǎn)紅外之間，故稱微波。將微波應(yīng)用于提取，其對(duì)物質(zhì)的作用表現(xiàn)在：當(dāng)被提取物溶媒共同處于微波場(chǎng)下時(shí)，目標(biāo)組分分子受到高頻電磁波的作用，產(chǎn)生劇烈振蕩，分子本身獲得了巨大的能量以掙脫周邊環(huán)境的束縛，當(dāng)環(huán)境存在一定的濃度差時(shí)，可以在非常短的時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)分子自內(nèi)向外的遷移達(dá)到一個(gè)平衡點(diǎn)，這就是微波可以短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)提取色素

8、的原因。（6） 酶法提取周旭章等研究提出醇-酶脫脂二步法精制辣椒紅色素粗制品的新工藝,脫辣最佳工藝條件:溫度為室溫;脫辣劑(乙醇)濃度70% ,投料比121513,萃取次數(shù)34次。脫脂劑(Mix酶)濃度1015mg/L,反應(yīng)時(shí)間50min。邵學(xué)軍等實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用NaOH溶液浸泡辣椒粉脫出辣素的最佳操作條件為:辣椒粉( g) 與15% NaOH 溶液(mL ) 之比為1 9, 90浸泡1.5h。4. 影響辣椒紅色素穩(wěn)定性的因素辣椒紅色素在被提取前是貯存在辣椒果實(shí)的完整細(xì)胞組織中,由于受到細(xì)胞膜及細(xì)胞內(nèi)某些成分的保護(hù)并形成脂類,對(duì)光熱等具有較高的穩(wěn)定性。但當(dāng)辣椒紅色素被提取出來以后,由于失去了細(xì)胞膜

9、等的生物保護(hù)機(jī)制,各種外部條件對(duì)其均可產(chǎn)生不同的影響,破壞其穩(wěn)定性。辣椒紅色素穩(wěn)定性是指其在各種可能的環(huán)境中是否保持原有的色澤，即是否褪色或變色。近年來，國內(nèi)外的各種研究表明影響辣椒紅色素穩(wěn)定性的因素大致有以下幾類。（1） 光對(duì)辣椒紅色素穩(wěn)定性的影響國內(nèi)外的各種研究表明辣椒紅色素的耐光性較差在油性介質(zhì)中避光保存的辣椒紅色素是比較穩(wěn)定的。配制濃度為01005%的丙酮色素溶液,溶液呈橙紅色,在色素在370530nm之間有強(qiáng)烈的吸收峰,最大吸收波長為470nm。根據(jù)張志強(qiáng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,暗室和室內(nèi)光線下,色素?zé)o褪色現(xiàn)象,且損失較小, 6天后仍有96%以上保留,在日光下不到半天的時(shí)間,色素幾乎損失殆盡,幾

10、乎為無色,紫外光對(duì)色素有明顯的影響, 3天左右?guī)缀醵紦p失。（2） 溫度對(duì)辣椒紅色素穩(wěn)定性的影響 據(jù)周國海的研究結(jié)果,溫度對(duì)辣椒紅色素有一定影響。溫度越高，辣椒紅色素?fù)p失越多。主要在70以上加熱損失較明顯。辣椒紅色素在2580時(shí)穩(wěn)定性較好, 色素變化不大，當(dāng)溫度升高到80100時(shí),穩(wěn)定性下降,當(dāng)超過100時(shí),色素極不穩(wěn)定,所以提取過程中應(yīng)避免長時(shí)間處于80以上的高溫。（3） 金屬離子對(duì)辣椒紅色素穩(wěn)定性的影響 銅離子、亞鐵離子對(duì)辣椒紅色素有明顯的破壞作用,而鋁離子在濃度較高,即大于400mg/ kg時(shí),對(duì)色素的色價(jià)有影響,而鐵離子、鉀離子、鈉離子、鎂離子等對(duì)色素的影響均可以忽略。（4） 氧化劑對(duì)辣

11、椒紅色素穩(wěn)定性的影響張志強(qiáng)等將不同濃度(0.0、0.1、0.2、0.3、0.5mol /L )體積分?jǐn)?shù)為30%的H2O2 加到已配好的色素溶液中,定容至10mL,搖勻470nm 處測(cè)定其吸光度,靜置2h后,再次測(cè)定其吸光度。比較兩次色素的損失率發(fā)現(xiàn),辣椒紅素對(duì)氧化劑不穩(wěn)定,濃度越高穩(wěn)定性越差。因此在辣椒紅色素提取過程中要避免與氧化劑接觸。（5）空氣中的氧對(duì)辣椒紅色素穩(wěn)定性的影響夏楓耿等分別向液體及固體辣椒紅色素中以2.33mL / s的速度通入空氣2h,測(cè)定吸光度,發(fā)現(xiàn):液體辣椒紅色素對(duì)空氣中氧比較敏感,接觸氧氣褪色較快,而固體紅色素因?yàn)槭艿桨癖Ｗo(hù),對(duì)氧氣不太敏感。二、 實(shí)驗(yàn)1. 實(shí)驗(yàn)原理辣

12、椒紅色素為脂溶性色素，選用適當(dāng)?shù)姆椒ㄌ崛『?，可采用不同的分離技術(shù)進(jìn)行色素的分離。上文已經(jīng)提及國內(nèi)外提取辣椒紅色素的各種方法，由于辣椒粉是片狀凹凸不平的纖維組織結(jié)構(gòu),辣椒素及其他脂溶性成分存在于纖維組織之內(nèi),采用傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑提取法需要耗費(fèi)大量有機(jī)溶劑和時(shí)間才能提取完全。超聲提取過程產(chǎn)生強(qiáng)烈的振動(dòng)、空化、攪拌,與傳統(tǒng)提取方式比較具有收率高、生產(chǎn)周期短、無需加熱、有效成分不被破壞等優(yōu)點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)以丙酮為提取溶劑，采用超聲法對(duì)辣椒紅色素進(jìn)行提取。分離過程中，本實(shí)驗(yàn)采用硅膠為吸附劑，石油醚/丙酮為流動(dòng)相的柱層析法。硅膠柱層析法的分離原理是根據(jù)物質(zhì)在硅膠上的吸附力不同而使各組分分離。一般情況下極性較大的物

13、質(zhì)易被硅膠吸附，極性較弱的物質(zhì)不易被硅膠吸附。當(dāng)采用溶劑洗脫時(shí)，發(fā)生一系列“吸附解吸再吸附再解吸”過程，吸附力較強(qiáng)的組分，移動(dòng)的距離小，后出柱；吸附力較弱的組分，移動(dòng)的距離大，先出柱。薄層層析又叫薄層色譜，是色譜法中的一種，是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，是近年來發(fā)展起來的一種微量、快速而簡單的色譜法，它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點(diǎn)。一方面適用于小量樣品（幾到幾十微克，甚至0.01g）的分離；另一方面若在制作薄層板時(shí)，把吸附層加厚，將樣品點(diǎn)成一條線，則可分離多達(dá)500mg的樣品。因此又可用來精制樣品。故此法特別適用于揮發(fā)性較小或在較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物資。

14、此外，在進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)時(shí)，常利用薄層色譜觀察原料斑點(diǎn)的逐步消失來判斷反應(yīng)是否完成。薄層色譜是在被洗滌干凈的玻板（10×3cm左右）上均勻的涂一層吸附劑或支持劑，帶干燥、活化后將樣品溶液用管口平整的毛細(xì)管滴加于離薄層板一端約1cm處的起點(diǎn)線上，涼干或吹干后置薄層板于盛有展開劑的展開槽內(nèi)，浸入深度為0.5cm。待展開劑前沿離頂端約1cm附近時(shí)，將色譜板取出，干燥后噴以顯色劑，或在紫外燈下顯色。2. 實(shí)驗(yàn)材料干紅辣椒（去籽研磨備用）3. 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器試劑：石油醚，丙酮，柱層析用硅膠，報(bào)層層析用硅膠，0.5%羥甲基纖維素鈉等儀器：碎機(jī)，超聲波清洗器，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，烘箱，柱層析，層析缸等4. 操

15、作過程a) 色素提取 （超聲法）i. 超聲準(zhǔn)確稱量1.00g辣椒粉，放入錐形瓶，加入50mL丙酮，充分搖勻混合。在瓶口蒙上膜，并在薄膜表面戳破幾個(gè)洞，是錐形瓶通過小口與外界想通，然后放入超聲波清洗器的水槽中，超聲15min。ii. 過濾將經(jīng)過15min超聲的溶液通過漏斗進(jìn)行常壓過濾，收集濾液與圓底蒸餾瓶中。iii. 蒸發(fā)濃縮使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將濾液蒸發(fā)濃縮，回收有機(jī)溶劑；向濃縮后的圓底蒸餾瓶中滴加微量石油醚，溶解濃縮物，成待分離原液。b) 色素的粗分離（柱層析）i. 制備硅膠柱取適量柱層析用硅膠，干法裝柱，直至距離頂端2.5cm處停止（裝填過程中需壓實(shí)硅膠）。然后在硅膠柱上方放置一個(gè)圓形小濾紙片，

16、并將填裝好的硅膠柱固定在鐵架臺(tái)上。ii. 淋洗將流動(dòng)相石油醚緩慢傾倒入柱，淋洗層析柱，同時(shí)打開活塞；當(dāng)上方小濾紙片幾乎快干又未干時(shí)（石油醚已淋洗整個(gè)柱子）關(guān)閉活塞。iii. 添加原液繼續(xù)添加待分離原液（0.5-1mL），然后繼續(xù)添加提前配好的提取液（石油醚/丙酮=1：10）。一段時(shí)間偶，可明顯觀察到硅膠柱自上而下分出幾層不同顏色的區(qū)域，表明提起液中的各種色素已經(jīng)被分離。iv. 收集分離液當(dāng)?shù)谝徊糠钟猩后w即將流出層析柱的時(shí)候，立即換用離心管收集。第二部分可用另外一只離心管收集。c) 色素分離 （薄層層析）i. 薄層板的制備（傾注法）提前一天制備。稱取10-15g薄層層析用硅膠，量取35-40m

17、L羥甲基纖維素鈉，將兩者混合在研缽中，混合均勻并研成勻漿。一只手握持玻璃板的一端并使板與水平面成約30°的角度；另一只手用研杵蘸取勻漿并點(diǎn)到玻璃板上，并使勻漿沿著玻璃板表面在重力作用下向另一側(cè)流動(dòng)，當(dāng)流至另一側(cè)時(shí)，立即用手平托玻璃板并前后左右輕輕晃動(dòng)使得薄層表面均勻光滑，厚度一致。按照相同方法制備4-5塊薄層板，放置于室溫晾干，然后置于烘箱內(nèi)加熱活化?；罨说谋影逡４嬖诟稍锏牡胤揭詡涫褂?。ii. 層析分離用吹風(fēng)機(jī)或者用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將離心管里的提取液進(jìn)行蒸發(fā)濃縮；配制不同比例的展開劑（石油醚，丙酮混合液）于層析缸中；在距離薄層板一段0.5cm的地方用微量毛細(xì)管點(diǎn)樣，每個(gè)板點(diǎn)兩個(gè)樣，一

18、個(gè)來自分離濃縮后所得的原液，另一個(gè)來自柱層析分離得到的提取液；將點(diǎn)樣后的薄層板放置在層析缸中，蓋上蓋子，色素自行展開，至色素帶最前沿距離薄層板上沿0.5-1.0cm終止層析并取出薄板晾干，觀察比較不同比例展開劑的分離效果。三、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果丙酮/石油醚=1：9（左側(cè)提取液，右側(cè)原液）丙酮/石油醚=5：95（左側(cè)提取液，右側(cè)原液）丙酮/石油醚=1.5：9.5（左側(cè)原液，右側(cè)提取液）丙酮/石油醚=1：10（左側(cè)原液，右側(cè)提取液）四、 討論與分析1. 圖中三塊板對(duì)應(yīng)的展開劑比例分別（丙酮/石油醚）為1/9，5/95，1.5/9.5，1/10。三種比例的展開劑展開效果均比較理想，不過相比較而言，1/9展開

19、劑展開效果比其他兩種比例的效果略差，色素未完全展開，中間色素仍有大團(tuán)聚集。效果最好的比例是5/95和1.5/9.5。兩個(gè)薄層板色帶充分展開，顏色分布界限明顯，5/95上沿還展開出了四種類胡蘿卜素色帶。2. 剛開始選擇的比例為1/9，雖然大部分實(shí)驗(yàn)所需色素已被展開，但是效果不是很理想，換用5/95重新展開，效果好很多，而且色帶中出現(xiàn)了類胡蘿卜素的顏色，色帶自上而下分別為胡蘿卜素，葉黃素，胡蘿卜素a，胡蘿卜素b，辣椒紅色素，辣椒玉紅素，辣素。3. 硅膠柱層析分離辣椒色素屬分配層析法，是根據(jù)色素和辣素的結(jié)構(gòu)差異在束縛與硅膠上的固定相和洗脫液中的溶解度不同，因此在固定相和洗脫液之間的分配系數(shù)不同而達(dá)到

20、分離效果。這個(gè)操作簡單，設(shè)備條件要求不高，分離效果很好，去除辣味完全。內(nèi)蒙古工業(yè)大學(xué)有研究，其柱層析法采用100-200目硅膠為填料，石油醚與丙酮（體積比為10：1）復(fù)合液為洗脫液；色素回收率為67.2%，而且色價(jià)較高為65；可以形成橙黃、紅色與淡黃色%條帶，有利于紅辣椒中有效成分的精細(xì)分離。4. 辣椒粉是片狀凹凸不平的纖維組織結(jié)構(gòu),辣椒素及其他脂溶性成分存在于纖維組織之內(nèi),采用傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑提取法需要耗費(fèi)大量有機(jī)溶劑和時(shí)間才能提取完全。超聲波溶劑提取法在提取過程中, 通過產(chǎn)生強(qiáng)烈的振動(dòng),空化, 攪拌, 從辣椒粉中提取出辣椒紅色素。與傳統(tǒng)的提取方法比較, 此法具有收率高, 生產(chǎn)周期短, 無需加

21、熱, 有效成分不破壞等優(yōu)點(diǎn)。5. 實(shí)驗(yàn)說明： 1.丙酮容易揮發(fā)且有毒害，實(shí)驗(yàn)中注意避免吸入過多；2.超聲提取中應(yīng)保證錐形瓶直立，切勿斜倒讓水流入；3.加入石油醚在茄形瓶后來回震蕩，盡量溶解附著在壁上的辣椒紅素；4.旋蒸的作用就是蒸去溶劑，比一般的方法效率高。 原理：一是靠減壓；二是靠旋轉(zhuǎn)時(shí)，使溶液形成液膜，擴(kuò)大蒸發(fā)面。 5.操作旋蒸儀中注意：（1）安裝接口部分要加少量礬士林，避免抽真空的時(shí)候，接口部分漏氣真空度上不去。 （2）在盛裝樣品的茄型瓶順利與旋蒸儀端口連接好后，應(yīng)先開動(dòng)旋轉(zhuǎn)按鈕檢查一下旋轉(zhuǎn)是否靈活，更重要是的看旋蒸樣品是否全部或大部分浸沒于水浴鍋的液面內(nèi)，這樣才能保證旋蒸效率。 （3）

22、在茄型瓶中盛裝的樣品最多不要超過75%，否則在減壓時(shí)會(huì)出現(xiàn)倒吸。 （4）減壓過程中要調(diào)整好水浴鍋內(nèi)水的溫度，使其與你所旋蒸的樣品的沸點(diǎn)相適應(yīng)，這可以從回流管的回流液狀態(tài)看出，當(dāng)回流液呈滴狀而非呈水流時(shí)最佳。 （5）在旋蒸接近結(jié)束時(shí)，應(yīng)先打開通氣閥門，使旋蒸儀內(nèi)外氣壓一致，然后關(guān)閉旋轉(zhuǎn)開關(guān)，取下茄型瓶。6. 吸附劑一般應(yīng)滿足下列幾個(gè)基本要求: 對(duì)樣品組分和洗脫劑都不會(huì)發(fā)生任何化學(xué)反應(yīng)，在洗脫劑中也不會(huì)溶解； 顆粒形狀均勻，大小適當(dāng)，以保證洗脫劑能夠以一定的流速 (一般為1.5 mLmin-1)通過色譜柱；材料易得，價(jià)格便宜而且是無色的，以便于觀察?？捎糜谖絼┑奈镔|(zhì)有氧化鋁、硅膠、聚酰胺、硅酸鎂

23、、滑石粉、氧化鈣 (鎂)、淀粉、纖維素、蔗糖和活性炭等。7. 樣品在色譜柱中的移動(dòng)速度和分離效果取決于吸附劑對(duì)樣品各組分的吸附能力大小和洗脫劑對(duì)各組分的解吸能力大小，因此，吸附劑的選擇和洗脫劑的選擇常常是結(jié)合起來進(jìn)行的：首先，根據(jù)待分離物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)和性質(zhì)，結(jié)合各種吸附劑的特性，初步選擇一種吸附劑。然后根據(jù)吸附劑和待分離物質(zhì)之間的吸附力大小，選擇出認(rèn)為適宜的洗脫劑。最后，采用薄層色譜法進(jìn)行試驗(yàn)。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，再進(jìn)一步?jīng)Q定是調(diào)節(jié)吸附劑的活性，還是更換吸附劑的種類，或是改變洗脫劑的極性。直到確定出合適的吸附劑和洗脫劑為止。 物質(zhì)與吸附劑之間的吸附能力大小既與吸附劑的活性有關(guān)，又與物質(zhì)的分子極性有關(guān)

24、。分子極性越強(qiáng)，吸附能力越大，分子中所含極性基團(tuán)越多，極性基團(tuán)越大，其吸附能力也就越強(qiáng)。具有下列極性基團(tuán)的化合物，其吸附能力按下列次序遞增： -Cl，-Br，-I<-C=C-<-OCH3<-CO2R<-CO-<-CHO<-SH<-NH2<-OH<-COOH8. 薄層層析注意事項(xiàng)：（1）研磨要細(xì)、調(diào)和均勻，鋪板要注意避免氣泡、厚薄均勻；（2）硅膠和羧甲基纖維素鈉的比例要合適:2.5-4.5最佳.根據(jù)自己點(diǎn)樣的粘稠度調(diào)節(jié)；（3）鋪板時(shí)手要平穩(wěn)，否則容易不均勻。室內(nèi)溫度不能太潮濕；（4）活化不充分的話板易裂且斑點(diǎn)無法分開；（5）如需重復(fù)點(diǎn)樣，則應(yīng)待前次點(diǎn)樣的溶劑揮發(fā)后方