實驗四紅細胞抗體吸收試驗

1、實驗八 紅細胞抗體吸收試驗Erythrocyte antibody absorption test一、檢測原理 1.一定稀釋度的抗體加入已知抗原的紅細胞（檢測抗體）一定稀釋度的抗體加入已知抗原的紅細胞（檢測抗體） 或被檢紅細胞加入已知效價的特異性抗血清（檢測紅細胞或被檢紅細胞加入已知效價的特異性抗血清（檢測紅細胞抗原）抗原） 2.溶液中的抗體就會結(jié)合到紅細胞上，離心后將經(jīng)過抗原溶液中的抗體就會結(jié)合到紅細胞上，離心后將經(jīng)過抗原吸收的血清和紅細胞分開。吸收的血清和紅細胞分開。 3.將吸收前、后的血清倍比稀釋再與已知抗原的紅細胞共將吸收前、后的血清倍比稀釋再與已知抗原的紅細胞共同溫育，檢查血清和紅細

2、胞中抗體效價是否降低或消失。同溫育，檢查血清和紅細胞中抗體效價是否降低或消失。若明顯降低或消失，證明抗體已被紅細胞吸附，血清中含若明顯降低或消失，證明抗體已被紅細胞吸附，血清中含有與紅細胞抗原相對應(yīng)的抗體，或被檢紅細胞血型與加入有與紅細胞抗原相對應(yīng)的抗體，或被檢紅細胞血型與加入的已知抗原的紅細胞相同。的已知抗原的紅細胞相同。 二、儀器和試劑【器材】尖滴管、刻度吸管、小試管、離心機?！緲吮尽快o脈血?！驹噭?標準抗A、抗B血清。22% A型及B型紅細胞生理鹽水懸液。3生理鹽水。三、實驗步驟n采集靜脈血采集靜脈血23mln分離血標本分離血標本: 分離出血清和紅細胞，分別作好標記分離出血清和紅細胞，

3、分別作好標記 .n制備壓積紅細胞制備壓積紅細胞 將患者紅細胞用生理鹽水洗滌將患者紅細胞用生理鹽水洗滌3次，次，離心后棄去上層液。離心后棄去上層液。n標定抗血清標定抗血清 將標準抗將標準抗A（抗（抗B）血清倍比稀釋，分別加入等量）血清倍比稀釋，分別加入等量2% A型型及及B型紅細胞生理鹽水懸液，室溫下反應(yīng)型紅細胞生理鹽水懸液，室溫下反應(yīng)15min后，后，1 000r/min離心離心 1min，觀察凝集結(jié)果。選擇出現(xiàn)（）凝集強度最高的，觀察凝集結(jié)果。選擇出現(xiàn)（）凝集強度最高的1管稀釋度管稀釋度作為抗作為抗A（抗（抗B）吸收用作標定血清（一般應(yīng)稀釋到）吸收用作標定血清（一般應(yīng)稀釋到1 32）。）。

4、姓名血漿姓名血球壓積RBC抗A標定抗A標定已準備好2%ARBC2%BRBC三、實驗步驟抗體吸收：抗體吸收：n取取2支小試管，分別標記抗支小試管，分別標記抗A、抗、抗B。 n按標記分別加入抗按標記分別加入抗A、抗、抗B標定血清標定血清0.5ml。n分別加入被檢者壓積紅細胞分別加入被檢者壓積紅細胞0.5ml。 n混勻，混勻，4放置放置1h，每，每10min搖動搖動1次，使其充分接觸次，使其充分接觸 n1 000r/min離心離心3min后，將上清液分別移入另后，將上清液分別移入另2支試管，并支試管，并標記抗標記抗A吸收液和抗吸收液和抗B吸收液吸收液。 抗A標定抗B標定0.5ml0.5ml0.5ml

5、壓積RBC0.5ml壓積RBC4放置1h1 000r/min離心3min抗B吸收液抗A吸收液三、實驗步驟n抗體鑒定：抗體鑒定：20支小試管支小試管12340.2mln.s0.2mln.s0.2mln.s0.2mln.s0.2mln.s抗B吸收液0.2ml抗A吸收液0.2ml未吸收抗A標定液0.2ml未吸收抗B標定液0.2ml0.2 ml2 : 4 : 8 : 16 : 320.2 ml0.2 ml0.2 ml0.2ml2%A型RBC0.2ml2%B型RBC混勻，1000r/min，1min，觀察四、結(jié)果判斷：吸收后抗體效價較吸收前降低2個滴度以上（Am亞型除外）者為陽性 n吸收后抗吸收后抗A效

6、價較未吸收抗效價較未吸收抗A效價顯著降低或消失為效價顯著降低或消失為A型型 n吸收后抗吸收后抗B效價較未吸收抗效價較未吸收抗B效價顯著降低或消失者為效價顯著降低或消失者為B型型 n吸收后抗吸收后抗A及抗及抗B效價都較未吸收抗效價都較未吸收抗A及抗及抗B效價顯著降低者為效價顯著降低者為AB型型 n吸收后抗吸收后抗A及抗及抗B效價較未吸收抗效價較未吸收抗A及抗及抗B效價無明顯差異者為效價無明顯差異者為O型。型。n如試驗的目的是鑒定如試驗的目的是鑒定A亞型，則按被檢紅細胞的吸收強度亞型，則按被檢紅細胞的吸收強度A1A2A3AXAm規(guī)律來判定規(guī)律來判定 五、報告方式n本人血型為：六、注意事項n抗抗A、抗、抗B血清應(yīng)標定，其效價不宜過高，應(yīng)血清應(yīng)標定，其效價不宜過高，應(yīng)先將抗血清的效價稀釋到先將抗血清的效價稀釋到1 32為宜。因為抗為宜。因為抗血清抗體效價太高，抗血清中的抗體被亞型紅血清抗體效價太高，抗血清中的抗體被亞型紅細胞吸收后，效價下降不明顯，難以判斷結(jié)果細胞吸收后，效價下降不明顯，難以判斷結(jié)果 n洗滌紅細胞時生理鹽水應(yīng)盡量除盡，以免抗血洗滌紅細胞時生理