檢測方法驗證和確認程序

1、內(nèi)部文件標題：SOP-QC-025-00檢測方法驗證和確認程序培訓講義1 目的 PURPOSE本規(guī)程規(guī)定了XXXXXXX藥業(yè)有限公司檢測方法驗證和確認程序、格式和要求。2 范圍 SCOPE2.1 本規(guī)程適用于XXXXXXXX藥業(yè)有限公司QC實驗室的檢測方法的確認。2.2 本規(guī)程適用于美國藥典/國家處方集、歐洲藥典或其它藥典中記載的檢測方法，和來自于公司內(nèi)部或外部的已經(jīng)驗證的檢測方法。2.3 本規(guī)程注重在鑒別、純度和含量的檢測方法。2.4 本規(guī)程將作為2.3提及的檢測方法驗證的常規(guī)指引，也適用于最常用的檢測方法的驗證，如：2.4.1 鑒別測試2.4.2 有關(guān)物質(zhì)和降解產(chǎn)物的含量的定量測試。2.4

2、.3 控制有關(guān)物質(zhì)和降解產(chǎn)物的限度測試。2.4.4 原料藥、起始物料、中間體及其他物料的含量測定。2.5 微生物和生物檢測方法不在本規(guī)程范圍內(nèi)。3 參考 REFERENCE3.1 ICH Q2(R1)分析方法驗證的文本及方法學3.2 現(xiàn)行美國藥典<1225>藥典方法的驗證3.3 現(xiàn)行美國藥典<1226>藥典方法的確認3.4 ICHQ7原料藥的良好質(zhì)量管理規(guī)范（2000年11月）3.5 FDA行業(yè)指南“分析方法和方法驗證”（2000年8月）4 職責 RESPONSIBILITIES4.1 QC負責人或指定人員負責參與本規(guī)程的起草、審閱、修訂和更新。4.2 QA負責人或指定

3、人員負責本規(guī)程的審核和保證其被正確地、準確地執(zhí)行。4.3 QC負責市售產(chǎn)品的檢測方法驗證，確認這些方法在實際條件下適用于本實驗室的測試。4.4 QC負責人或指定人員負責審核確認方案和確認報告4.5 QC負責正確地記錄實驗數(shù)據(jù)。4.6 QC負責歸納數(shù)據(jù)、撰寫報告并遞交給QC負責人或指定人員審閱。4.7 QC、QA負責人或其指定人員負責審核并審計所有實驗室相關(guān)文件及規(guī)程以確保其準確和有效。4.8 質(zhì)量部負責批準本規(guī)程及驗證、確認方案和驗證、確認報告。5 定義 DEFINITION5.1 檢測方法使用者使用檢測方法的部門、實驗室或人員。5.2 系統(tǒng)適用性它是用來驗證系統(tǒng)能滿足預(yù)期分析的測試。當適用時

4、，系統(tǒng)適用性應(yīng)在方法用于檢測或分析樣品之前執(zhí)行。指定的數(shù)據(jù)，比如響應(yīng)值和保留時間的相對標準偏差（RSD）、拖尾因子、分離度和理論塔板等，將從重復(fù)進樣得到。5.3 檢測方法指進行檢測的方式，應(yīng)詳細描述進行每個檢測實驗所必需的步驟。它可以包括：試劑、對照品及樣品溶液的配制，儀器的參數(shù)、標準曲線的繪制、計算公式的運用、可接受標準等。5.4 檢測方法驗證為了證明所使用的檢測方法（新的或改進過的）與其預(yù)期目的相適應(yīng)而進行的一系列實驗。5.5 對照品和樣品溶液穩(wěn)定性用來評價對照品和供試品的穩(wěn)定性而進行的檢測。5.6 原料藥任何用于藥品生產(chǎn)的物質(zhì)或混合物，并在藥品生產(chǎn)的過程中成為藥物的活性成分。這類物質(zhì)提供

5、藥物活性或其他的直接效應(yīng)應(yīng)用于診斷、治療、緩和、處理或預(yù)防疾病、或影響身體的機結(jié)構(gòu)或功能。5.7 鑒別測試鑒別試驗旨在確認樣品中的一種被測物的特性。通常將樣品的性質(zhì)（如光譜、色譜行為、化學反應(yīng)等）與參比對照品的性質(zhì)進行比對。5.8 雜質(zhì)檢查指樣品中雜貨的定量檢測或限度檢測，兩種檢測均是為了準確反映樣品的純度。定量試驗所需驗證的項目與限度試驗相比是不同的。5.9 含量測定指測定樣品中被分析物的含量。5.10 專屬性指在可能存在某些干擾組分（如雜質(zhì)、降解物、基質(zhì)等）時，對被分析物準確可靠測定的能力。5.11 精密度指在規(guī)定條件下對均質(zhì)樣品多次取樣進行一系列檢測，檢測結(jié)果的接近程度（離散程度）。5.

6、12 重復(fù)性指在同樣的操作條件下，較短時間間隔內(nèi)的精密度。5.13 中間精密度指實驗室內(nèi)部條件改變，如：不同日期、不同分析者、不同儀器等情況下的精密度。5.14 重現(xiàn)性指不同實驗室之間的精密度（合作研究，通常用于方法學的標準化）。5.15 檢測限（LOD）指樣品中的被分析物能夠被檢測到的最低量，但不必要準確定量。5.16 定量限（LOQ）指在適當?shù)臏蚀_性和精密度下，能夠定量測定的樣品中被分析物的最低量。5.17 線性指在給定的范圍內(nèi)檢測結(jié)果與樣品中被分析物的濃度（量）成比例關(guān)系的能力。5.18 準確度指真實值或認可的參考值與測量值之間的相近程度。準確度有時也稱真實度。5.19 范圍指樣品中被分

7、析物的濃度（量）上限和濃度（量）下限之間的一個區(qū)間，并已證實在此區(qū)間內(nèi)，該檢測方法具有適當?shù)木芏取蚀_性和線性。5.20 耐用性指在實驗參數(shù)被故意地發(fā)生細小改變時，檢測不受影響的能力，用以說明所驗證的方法在正常使用時的可靠性。5.21 加標向標準品、樣品或空白劑中加入已知量的已知物質(zhì)，用于確定檢測方法的性能或進行儀器的校驗。5.22 響應(yīng)因子分析物產(chǎn)生的信號與產(chǎn)生該信號的分析物的量的比值。5.23 可接受標準測試結(jié)果可接受的數(shù)值限度、范圍或其它合適的度量標準。5.24 相關(guān)系數(shù)（R）研究變量之間線性相關(guān)程度的量。5.25 信噪比（S/N）5.26 糾正與預(yù)防措施（CAPA）6 程序 RROC

8、EDURE6.1 檢測方法使用者應(yīng)該經(jīng)過培訓，具有相應(yīng)的經(jīng)驗和知識，以理解檢測方法并能夠執(zhí)行它。確認應(yīng)當由使用者執(zhí)行，其結(jié)果將為檢測方法能像預(yù)期的那樣地執(zhí)行增加信心。6.2 檢測方法確認和驗證的目的是說明該方法適用于其擬定用途，它包括試驗過程中計劃的、系統(tǒng)的和記錄的數(shù)據(jù)，以證明方法能滿足其擬定分析用途的要求。6.2.1 于藥典檢測方法，如果確認不成功，并且經(jīng)藥典人員的協(xié)助也未能解決問題，則可斷定此方法不適合在該實驗室用于該樣品。然后，可能有必要按照藥典或相關(guān)法規(guī)開發(fā)和驗證一個替代的方法。6.2.2 確認的要求應(yīng)該基于方法的復(fù)雜性和應(yīng)用此法的物質(zhì)的復(fù)雜性兩方面來進行的評估。只有那些適合特定方法的

9、確認特性才需要做評估。確認程序的程度與層次取決于使用者的培訓經(jīng)歷及經(jīng)驗水平、方法種類和與其相關(guān)的設(shè)備/儀器、具體的方法步驟、和/或被測的物質(zhì)。6.2.3 除非有跡象表明基本藥典方法不適合檢測該樣品，日常執(zhí)行的基本藥典檢測方法無需確認?；舅幍錂z測方法的例子包括但不限于，干燥失重、熾灼殘渣、多種濕化學方法比如酸度、簡單儀器方法比如pH值測定等。6.2.4 檢測方法驗證的進行程度應(yīng)能反映檢測的目的和生產(chǎn)工藝所處的階段。6.2.5 非藥典檢測方法的建立和現(xiàn)行方法的改變必須進行驗證。6.2.6 SOP-QC-025/A01顯示了檢測方法驗證的流程。6.3 在檢測臨床試驗批次的樣品時，雖然檢測方法可能尚

10、未驗證，但檢測方法須具有科學性。并應(yīng)顯示檢測方法的適用性。6.3.1 應(yīng)提供驗證結(jié)果的表格概要（例如：專屬性、線性、范圍、準確度、精密度、LOD和LOQ的結(jié)果或數(shù)值）。6.3.2 此時不需要提供完整的驗證報告，可在放行檢測同時進行分析方法驗證。6.4 檢測方法確認和驗證方案6.4.1 在確認或驗證工作開展前需有已經(jīng)批準的確認或驗證方案。方案內(nèi)容應(yīng)包括但不限于下列項目：6.4.1.1 目的 PURPOSE應(yīng)包括：背景介紹和方法描述。6.4.1.2 范圍 SCOPE6.4.1.3 參考 REFERENE6.4.1.4 職責 RESPONSIBILITIES6.4.1.5 定義 DEFINITION

11、6.4.1.6 方法學METHODOLOGY程序部分應(yīng)列出確認特性。6.4.1.7 偏差 DEVIATION6.4.1.8 附件 ATTACHMENTS6.4.1.9 修訂歷史 DOCUMENT REVISE HISTORY6.4.2 確認和驗證中所有的原始記錄和得到的結(jié)果必須記錄在執(zhí)行方案或已編號的檢測記錄本上，以方便與其它文件的相互查詢。6.4.3 確認和驗證過程中若有偏差，需按偏差處理相關(guān)規(guī)程和調(diào)查方法相關(guān)規(guī)程執(zhí)行。6.4.4 檢測方法根據(jù)變化需決定是否要進行再次驗證，再次驗證也需依據(jù)本SOP執(zhí)行，包括方案和報告的批準。下列變化情況需進行再次驗證：6.4.4.1 相關(guān)指南變化，例如：IC

12、H或藥典6.4.4.2 原料藥的合成工藝變化6.4.4.3 檢測方法和/或設(shè)備變化6.5 檢測方法確認和驗證報告Test Method Validation and verification Report6.5.1 確認和驗證方案完成后必須準備相應(yīng)的方法確認和驗證報告，并由質(zhì)量部批準生效。6.5.2 推薦的方法驗證報告中可以包括下列內(nèi)容：6.5.2.1 總結(jié) SUMMARY OF RESULTS6.5.2.2 目的 PURPOSE6.5.2.3 范圍 SCOPE6.5.2.4 物料和設(shè)備 MATERIAL ANDEQUIPMENT6.5.2.5 方法METHOD6.5.2.6 結(jié)果和討論RES

13、ULTSAND DISCUSSIONS結(jié)果部分應(yīng)包括驗證項目、可接受標準和結(jié)果等。6.5.2.7 偏差 DEVIATION任何偏差均應(yīng)進行調(diào)查和報告。6.5.2.8 結(jié)論 CONCLUSTION6.5.2.9 建議 RECOMMENDATIONS6.5.2.10 參考 REFERENCE6.5.2.11 附件 ATTACHMENTS可以包括所有參與人員的資格或培訓記錄、儀器校驗證書、試劑檢驗報告單、實驗記錄，原始數(shù)據(jù)、圖譜和結(jié)果的一覽表等。6.5.2.12 修訂歷史 DOCUMENT REVISE HISTORY6.6 檢驗方法確認需確認的特性通常所要求的確認特性包括但不限于下表中提及的。表1

14、：進行檢測方法確認要求確認的特性特性Characteristics分析方法的類型Type of analytical procedures鑒別Identification雜質(zhì)檢測Testing for impurities含量分析Assay定量檢測Quantitative test限度檢測Limit test含量/效價Content/Potency準確度Accuracy-專屬性Specificity +-重復(fù)性Repeatability-+中間精密度Intermediate precision-+-+檢測限LOD+-+-定量限LOQ-系統(tǒng)適用性System suitability-注：-表明通

15、常不需評估的特性+表明通常需評估的特性缺乏該項目的分析方法，應(yīng)由其他分析方法來補充表明有些情況下需要6.7 檢測方法驗證需驗證的特性6.7.1 驗證的程度取決于相應(yīng)的驗證方案中規(guī)定的檢測的性質(zhì)及其用途。6.7.2 檢測方法驗證常用的驗證特性包括但不限于表2內(nèi)容。表2：檢測方法驗證所需的驗證特性特性Characteristics檢測方法類型Type of test methods鑒別Identification有關(guān)物質(zhì)和降解物測試Testing for related compounds and degradants含量（僅限測試）·Assay (measurement only)定量

16、測試Quantitative test限度測試Limit tests專屬性Specificity+線性Linearity-+-+范圍Range-+-+準確度Accuracy-+-+精密度Precision重復(fù)性Repeatability-+-+中間精密度Intermediate precision-+-+重現(xiàn)性Reproducibility-檢測限LOD-+-定量限LOQ-+-耐用性Robustness-+-+系統(tǒng)適用性（如有）Systems Suitability (if any)+注：-表示該特性通常不需評估+表示該特性通常需評估當一種檢測方法不能滿足專屬性的要求時，可由其他輔助檢測方法作

17、補充。如果已經(jīng)評價了重現(xiàn)性，就不需要再評價中間精密度?；跈z測的性質(zhì)可能需要。依據(jù)所研究方法的類型，在開發(fā)階段考慮評估耐用性。下述6.86.17對具體驗證特性進行逐個描述，以對每一種檢測方法的各種驗證特性提供指導和/或建議。6.8 專屬性用于證明專屬性的方式取決與檢測方法的預(yù)期目的。一般一種檢測方法不太可能對某一特定的被分析物具有專屬性（完全辨別）。在這種情況下，推薦使用兩種或多種檢測方法的組合以達到所需的辨別程度。6.8.1 鑒別的專屬性試驗6.8.1.1 合適的鑒別測試應(yīng)能區(qū)別出可能存在的結(jié)構(gòu)相似的化合物。6.8.1.2 通過對從含有被分析物的樣品中得到的正結(jié)果（可以通過與已知參比物比較）

18、，和對不含被分析物的樣品中得到的負結(jié)果來證明方法的分辨能力。6.8.1.3 對與分析物結(jié)構(gòu)相似或相近的物質(zhì)進行鑒別試驗，證明沒有得到正響應(yīng)。6.8.2 含量和雜質(zhì)檢查的專屬性試驗6.8.2.1 可獲得的有關(guān)物質(zhì)和降解物l 對含量測定來說，專屬性應(yīng)能辨別被分析物與有關(guān)物質(zhì)和降解產(chǎn)物。實際操作中可以在純物質(zhì)中加入適當量的有關(guān)物質(zhì)和降解物，與未加有關(guān)物質(zhì)和降解物的樣品測定結(jié)果相比較，以證明其含量測定結(jié)果不受這些物質(zhì)的影響。l 對有關(guān)物質(zhì)測試，可以向原料藥中加入含有適當量的有關(guān)物質(zhì)，通過證明這些有關(guān)物質(zhì)之間能相互分離，并也能與樣品基質(zhì)中其他組分分離，以此來證明測試方法的辨別能力。6.8.2.2 無法獲

19、得的有關(guān)物質(zhì)和降解物l 如果有關(guān)物質(zhì)或降解物的對照品不能得到，專屬性可以通過將含一定量的有關(guān)物質(zhì)或降解產(chǎn)物的樣品測定結(jié)果與另一種成熟的方法測定結(jié)果比較，例如與藥典方法或已經(jīng)驗證的其他方法（獨立的方法）進行比較。必要時，應(yīng)包括對強力破壞試驗條件下（即光、熱、濕度、酸/堿破壞及氧化條件下）獲得的樣品的測定。l 對于含量，需要比較兩種方法的結(jié)果；對于雜質(zhì)檢查，需要比較雜質(zhì)的概況。l 峰的純度試驗對顯示被測物色譜峰是單個還是多個成分是很有用的（如二極管陣列）。6.8.2.3 對色譜方法，應(yīng)用典型的色譜圖來證明專屬性，并在圖上恰當?shù)貥顺雒恳环N成分。其他分離技術(shù)也應(yīng)有類似的考慮。6.8.2.4 在色譜方法

20、中，應(yīng)在一定程度上考察臨界分離。對臨界分離，可用兩個洗脫程度最接近的化合物的分離度來證明其專屬性。6.9 線性 Linearity測試線性的目的是為了證明整個分析系統(tǒng)（包括檢測器和數(shù)據(jù)采集）有線性的響應(yīng)和/或在相應(yīng)的分析物濃度范圍內(nèi)直接成正比。6.9.1 線性關(guān)系是在檢測方法的范圍內(nèi)（見第6.10節(jié)）對方法進行評價。可用所建議的檢測方法，直接對原料藥（用標準儲備溶液稀釋）進行測定，以證明其線性。對于低濃度的溶液，可通過稀釋儲備液配制。6.9.2 線性應(yīng)通過目測一組信號與被分析物的濃度或含量做圖的關(guān)系來評價。6.9.2.1 如果有線性關(guān)系，可用適當?shù)慕y(tǒng)計方法對測試結(jié)果進行評估，如用最小二乘法計算

21、回歸線。6.9.2.2 由線性回歸估算所測得的數(shù)據(jù)本身有助于數(shù)學評價線性的程度。6.9.2.3 一些檢測方法無論經(jīng)過何種轉(zhuǎn)換都不顯示線性。在這種情況下，分析的響應(yīng)值應(yīng)用樣品中被分析物的濃度（含量）的適當函數(shù)來表示。6.9.3 應(yīng)提交回歸線的相關(guān)系數(shù)、y軸上的截距、回歸線的斜率。還應(yīng)提交數(shù)據(jù)圖表。也可包括其他的統(tǒng)計參數(shù)。另外，分析真值與回歸線的偏差也有助于對線性作評價。6.9.4 為建立線性，建議至少用5個濃度。若用其他方法則應(yīng)證明其合理性。6.10 范圍6.10.1 特定的范圍一般是從線性研究中得到的，并由檢測方法期望的應(yīng)用目 的決定。6.10.2 范圍是通過檢測方法在指定的范圍內(nèi)或在范圍的極

22、限時都達到可接受程度的準確性、精密度來建立的。6.10.3 應(yīng)考慮如下的最小規(guī)定范圍：6.10.3.1 對原料藥的含量測定：通常至少應(yīng)涵蓋測試濃度的80%120%內(nèi)；6.10.3.2 對于有關(guān)物質(zhì)測定：應(yīng)至少涵蓋有關(guān)物質(zhì)的報告限至標準的120%。6.10.3.3 對已知有異常功效的、有毒的或有意外藥理作用的有關(guān)物質(zhì)，其檢測限和定量限應(yīng)與該有關(guān)物質(zhì)必須被控制的水平相對應(yīng)。在研制階段進行雜質(zhì)檢查方法驗證時，有必要根據(jù)建議（可能）的限度來考慮范圍。6.10.3.4 如果用一個實驗同時進行含量測定和純度檢查，且僅使用100%的標準，線性范圍應(yīng)至少涵蓋從雜質(zhì)的報告水平至含量標準的120%。6.11 準確

23、度 應(yīng)在檢測方法規(guī)定的范圍內(nèi)建立準確度。6.11.1 原料藥含量 Drug Substance Assay有多種方法可用于測定準確度：6.11.1.1 用該檢測方法去測定已知純度的被分析物（例如：標準物質(zhì)）；6.11.1.2 將建議采用的檢測方法的結(jié)果與另一種成熟的、準確度已經(jīng)確定和/或定義了的檢測方法（獨立的方法）的結(jié)果相比較；6.11.1.3 準確度可以在精密度、線性和專屬性建立后，推論而得。6.11.2 有關(guān)物質(zhì)（定量） 6.11.2.1 準確度應(yīng)通過分析加入了已知量有關(guān)物質(zhì)的樣品的方式來評價。6.11.2.2 在不能獲得某種有關(guān)物質(zhì)和（或）降解產(chǎn)物的樣品情況下，可以考慮與另一種獨立的方

24、法測得的結(jié)果相比較。6.11.2.3 應(yīng)明確單個或總的有關(guān)物質(zhì)是如何測定，例如：在任何情況下，可用與主要被分析物所占的重量百分比或面積百分比。6.11.3 建議的數(shù)據(jù)6.11.3.1 準確度的評價應(yīng)至少涵蓋所規(guī)定的線性范圍的3種濃度水平的、不少于9次的測定（例如：按完整檢測步驟對3種濃度分別測定3次）。6.11.3.2 加入已知量的原料藥或有關(guān)物質(zhì)：回收率應(yīng)報告百分回收率（與已知加入量的結(jié)果進行比較）。6.11.3.3 用檢測方法分析已知純度的樣品（標準物質(zhì)）：回收率應(yīng)報告測得的平均值與可接受的真實值之間的差異及其置信區(qū)間。6.11.3.4 將檢測方法與另一種已良好定性的方法（參照方法）進行比

25、較：回收率應(yīng)報告測得的平均值與用參照方法測得的結(jié)果之間的差異及其置信區(qū)間。6.12 精密度 Precision精密度包括重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性。6.12.1 重復(fù)性Repeatability6.12.1.1 至少測試6份100%濃度的樣品溶液或9份覆蓋方法規(guī)定范圍的樣品溶液。6.12.1.2 推薦使用真實樣品，并對每個重復(fù)分析進行完全的測試。6.12.1.3 可用有代表性的樣品進行含量的重復(fù)性測試。6.12.1.4 如果是有關(guān)物質(zhì)測試，僅在無法得到含某種有關(guān)物質(zhì)的樣品時可向樣品中加入有關(guān)物質(zhì)?；蛘?，可使用強制降解樣品或未加樣的原料藥樣品。6.12.2 中間精密度6.12.2.1 應(yīng)確定隨機

26、事件對檢測方法精密度的影響。6.12.2.2 影響因素通常指不同的日期、不同的分析員、不同的設(shè)備等，這些因素不需要進行單獨的評估。6.12.2.3 中間精密度可在影響因素變化時重復(fù)測試得到。6.12.2.4 不需要單獨考慮這些影響。（例如：可通過2名分析員在不同的日期或用不同的設(shè)備重復(fù)重復(fù)性或線性或準確度試驗，以得到精密度）。6.12.3 重現(xiàn)性 重現(xiàn)性通過在不同實驗室間進行測試的平均值進行評估。6.12.4 建議的數(shù)據(jù)在研究每一種精密度時，都應(yīng)報告標準偏差、相對標準偏差（變異系數(shù)）和置信區(qū)間。6.13 檢測限和定量限6.13.1 檢測限的測定是通過對一系列已知濃度分析物的樣品進行分析，并以能

27、可靠地測得被分析物的最小量來建立。6.13.2 定量限的測定一般通過對一系列含有已知濃度被分析物的樣品分析，在準確度和精密度都符合要求的情況下，來確定被分析物能被定量測得的最小量。6.13.3 根據(jù)信噪比（S/N）測定6.13.3.1 該方法僅適用于出現(xiàn)基線噪音的檢測方法，例如色譜法。6.13.3.2 信噪比的測定是通過比較含有已知低濃度被分析物的樣品與空白樣品的測定信號，來建立檢測限和定量限。6.13.3.3 對于估計LOD，信噪比在3：1或2：1之間通常是可接受的；對于估計LOQ，典型的信噪比為10：1。6.13.4 根據(jù)響應(yīng)值的標準差和斜率6.13.4.1 該方法適用于滴定、紫外和原子吸

28、收光譜法等。6.13.4.2 檢測限和定量限判定方法如下：LOD =3.3/SLOQ =10/S以上公式中，是響應(yīng)值的標準差，S是校正曲線的斜率。斜率S可從被分析物的校正曲線來估算，的值可用下面的方法估算：a) 基于空白的標準差，通過分析適當數(shù)量的空白樣品，然后計算其響應(yīng)值的標準差，測出分析背景響應(yīng)值的大小。b) 基于校正曲線，研究含有檢測限或定量限范圍內(nèi)的被分析物的樣品以得到特定的標準曲線，回歸線的剩余標準差或回歸線的y軸截距標準偏差都可作為標準偏差。6.13.5 建議的數(shù)據(jù)6.13.5.1 必須提供檢測限/定量限和測定檢測限/定量限的方法。6.13.5.2 如果檢測限是根據(jù)信噪比得來的，應(yīng)

29、提供相關(guān)的色譜圖作為證明。6.13.5.3 如果是通過計算或外推法得到檢測限的估算值，可對一系列接近或等于檢測限度樣品的逐個檢測來論證這一估算值。6.13.5.4 可通過分析適當數(shù)量，已知濃度的接近或等于定量限的樣品來證明定量限。6.14 耐用性 需測試此參數(shù)的方法包括含量和純度。6.14.1 依據(jù)所研究的檢測方法的類型，應(yīng)在開發(fā)檢測方法階段評估耐用性。6.14.1.1 與所描述的方法比較，以一系列變動的條件來分析相應(yīng)的溶液進行評估。6.14.1.2 通過分析一系列被處理過的試液來評估。6.14.2 耐用性評估的結(jié)果應(yīng)是建立一系列的系統(tǒng)適用性參數(shù)（如分離度試驗），以確保在任何時候使用該檢測方法

30、都是有效的。6.14.3 應(yīng)展示典型的圖譜。6.14.4 對于液相色譜，典型的變量是流動相的pH、溫度和流速、流動相的組成、不同批號或不同供應(yīng)商的色譜柱等。6.14.5 對于氣相色譜，典型的變量是不同批號或不同供應(yīng)商的色譜柱、溫度和流速。6.14.6 如果樣品制備時需過濾，應(yīng)證明過濾前后樣品的一致性。6.14.7 如果樣品需要超聲和/或混合時，應(yīng)評估樣品制備時的超聲和/或混合時間。6.14.8 當溶液放置時間超過24小時或指定時間時，應(yīng)評估檢測方法的分析物的溶液穩(wěn)定性。6.15 穩(wěn)定性指示性質(zhì) 6.15.1 在對穩(wěn)定性指示方法進行驗證時應(yīng)評估穩(wěn)定性指示方法（強制降解），應(yīng)包括表3中列出的空白劑

31、、活性成分和配方顆粒的強迫降解條件。表3：穩(wěn)定性指示分析的強降解條件處理Treatment極端強降解條件Extreme stressed condition酸Acid樣品/2N HCl，回流4小時Sample/2N HCl, reflux 4 hours堿Base樣品/2N NaOH，回流4小時Sample/2N NaOH, reflux 4 hours氧化劑Oxidative樣品/3% H2O2/室溫，24小時Sample/3% H2O2/room temperature, 24 hours熱Thermal樣品/干燥/烘箱內(nèi)105加熱，5天Sample/dry/heat in oven at

32、 105, 5 days熱/濕度Thermal/Humidity樣品/頂空濕度飽和（MSH）/烘箱內(nèi)90，48小時Sample/ Moisture Saturated Headspace/ oven at 90, 48 hours濕度Humidity樣品/干燥器內(nèi)加水/室溫，5天Sample/desiccators with water/room temperature, 5 days陽光測試Sun test樣品/UV/5天Sample/UV/5 days光穩(wěn)定性Photo stability樣品/干燥/UV下5天Sample/dry/under UV, 5 days樣品溶液/UV下，5天，無色燒瓶Sample solution/ under UV, 5 days, clear flask樣品溶液/UV下，5天，棕色燒瓶Sample solution/ under UV, 5 days, amber flask6.15.2 按