熒光顯微鏡操作手冊SIBCB

1、熒光顯微鏡操作手冊olympus bx51物鏡： 4 ×0.16 （無dic） 10×0.40 20×0.75 40×1.00 oil 100×1.40 oil 熒光濾色塊轉(zhuǎn)盤： 1. wu 藍(lán) 2. wib 綠（長通）3. wiba 綠（帶通）4. wig 紅5. cfp 青6. yfp 黃操作步驟：（注意：樣品須在低倍鏡下放置和取下）dic觀察：1. 打開明場電源開關(guān)（“”為開，“”為關(guān)）2. 將樣品置于載物臺上，用樣品夾夾好3. 將起偏器、檢偏器、dic棱鏡推入光路，熒光濾塊轉(zhuǎn)盤撥到“1”位置，dic棱鏡應(yīng)與相應(yīng)的物鏡倍數(shù)相匹配4. 先選

2、用低倍物鏡（“10×”）5. 調(diào)節(jié)透射光的強度，調(diào)節(jié)焦距，找到視野6. 換到高倍鏡頭，觀察樣品7. dic觀察時，光路選擇拉桿拉到中間位置，既可觀察，也可拍照 熒光觀察：1. 打開明場電源開關(guān)2. 打開汞燈電源開關(guān)3. 將樣品置于載物臺上，用樣品夾夾好4. 檢偏器、dic棱鏡在光路外5. 將熒光光路shutter打開（“”為開，“”為關(guān)），需保護(hù)樣品時關(guān)閉shutter6. 光路選擇拉桿推至最里邊7. 根據(jù)樣品的標(biāo)記情況將熒光濾塊轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)到相應(yīng)的位置8. 通過兩組減光濾片調(diào)節(jié)激發(fā)光強度9. 從低倍鏡開始觀察，調(diào)焦，找到預(yù)觀察視野，10. 依次換到高倍鏡頭，觀察樣品11. 拍照時光路選擇

3、拉桿完全拉出普通明場觀察：1. 打開明場電源開關(guān)（“”為開，“”為關(guān)）2. 將樣品置于載物臺上，用樣品夾夾好3. 起偏器、檢偏器、dic棱鏡在光路外，熒光濾塊轉(zhuǎn)盤撥到“1”位置，dic棱鏡撥到明場（bf）位置4. 先選用低倍物鏡（“4×”）5. 調(diào)節(jié)透射光的強度，調(diào)節(jié)焦距，找到視野6. 依次換到高倍鏡頭，觀察樣品7. 光路選擇拉桿拉到中間位置既可觀察，也可拍照關(guān)機(jī)：1. 關(guān)閉汞燈電源（注意：汞燈需使用半小時以上方可關(guān)閉，關(guān)閉半小時以后方可再次開啟）2. 將透射光調(diào)到最小，關(guān)閉明場電源開關(guān)3. 將鏡頭轉(zhuǎn)到低倍鏡，取出樣品，若使用過油鏡用干凈的擦鏡紙擦拭鏡頭4. 確認(rèn)數(shù)據(jù)已經(jīng)保存，關(guān)閉軟

4、件5. 使用光盤拷貝數(shù)據(jù)（禁止使用移動儲存設(shè)備拷貝數(shù)據(jù)）6. 關(guān)閉電腦，登記使用時間、熒光數(shù)字等使用情況olympus ix71物鏡： 物鏡倍數(shù) 相差環(huán)4 ×0.13 phl 10×0.30 ph1 20×0.45 ph1 40×0.60 ph2 60×1.35 oil （無相差） 熒光濾色塊轉(zhuǎn)盤： 1. wu 藍(lán) 2. wib 綠（長通）3. wiba 綠（帶通）4. wiga 紅5. cfp6. yfp操作步驟： 相差觀察：1. 打開明場電源開關(guān)（“”為開，“”為關(guān)）2. 將樣品置于載物臺上3. 將光路選擇旋鈕調(diào)至觀察位置4. 從低倍鏡開始

5、觀察，調(diào)節(jié)到與鏡頭相匹配的相差環(huán)，熒光濾塊轉(zhuǎn)盤撥到 “1”的位置5. 調(diào)節(jié)透射光光強，調(diào)節(jié)焦距，找到預(yù)觀察視野6. 依次換到高倍鏡，（注意調(diào)節(jié)相差環(huán)）觀察樣品7. 拍照時將光路選擇旋鈕調(diào)至相機(jī)位置 熒光觀察：1. 打開明場電源開關(guān)2. 打開汞燈開關(guān)3. 將樣品置于載物臺上4. 將熒光光路shutter打開（“”為開，“”為關(guān)），需保護(hù)樣品時關(guān)閉shutter5. 將光路選擇旋鈕調(diào)至觀察位置6. 根據(jù)樣品的標(biāo)記情況將熒光濾塊轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)到相應(yīng)的位置7. 通過兩組減光濾片調(diào)節(jié)激發(fā)光強度8. 從低倍鏡開始觀察，調(diào)焦，找到預(yù)觀察視野，9. 依次換到高倍鏡頭，觀察樣品10. 拍照時將光路選擇旋鈕調(diào)至相機(jī)位置普

6、通明場觀察：1. 打開明場電源開關(guān)（“”為開，“”為關(guān)）2. 將樣品置于載物臺上3. 將光路選擇旋鈕調(diào)至觀察位置4. 從低倍鏡開始觀察，相差環(huán)撥到明場（bf）位置，熒光濾色塊轉(zhuǎn)盤撥到“1”的位置5. 調(diào)節(jié)透射光光強，調(diào)焦，找到預(yù)觀察視野6. 依次換到高倍鏡，觀察樣品7. 拍照時將光路選擇旋鈕調(diào)至相機(jī)位置關(guān)機(jī)： 1. 關(guān)閉汞燈電源（注意：汞燈需使用半小時以上方可關(guān)閉，關(guān)閉半小時以后方可再次開啟）2. 將透射光強調(diào)到最小，透射光選擇按鈕按出3. 關(guān)閉明場電源開關(guān)4. 將鏡頭轉(zhuǎn)到低倍鏡，取出樣品，若使用過油鏡用干凈的擦鏡紙擦拭鏡頭5. 確認(rèn)數(shù)據(jù)已經(jīng)保存，關(guān)閉軟件6. 使用光盤拷貝數(shù)據(jù)（禁止使用移動儲

7、存設(shè)備拷貝數(shù)據(jù)）7. 關(guān)閉電腦，登記使用時間、熒光數(shù)字等使用情況olympus szx16物鏡： 1×變倍： 0.711.5熒光濾色塊轉(zhuǎn)盤： uv 藍(lán) gfphq 綠 rfp2 紅 操作步驟： 明場觀察：1. 將樣品置于載物臺上2. 推入光路選擇拉桿，熒光濾塊轉(zhuǎn)盤撥到空位3. 選擇合適的光源1 冷光源觀察 使用不透明的底板（黑或白），打開環(huán)形光電源開關(guān)（“”為開，“”為關(guān)），調(diào)節(jié)光強度，找到預(yù)觀察視野，調(diào)節(jié)變倍比，觀察樣品2 底光源觀察 使用透明玻璃底板，打開底座電源開關(guān)（“”為開，“”為關(guān)），將lbd濾片推入光路，調(diào)節(jié)反光鏡方向、對比度和光強度，找到預(yù)觀察視野，調(diào)節(jié)變倍比，觀察樣品

8、4. 拍照時將光路選擇拉桿拉出熒光觀察：1. 將樣品置于載物臺上2. 一般選擇黑色不透明底板3. 打開汞燈電源開關(guān)4. 熒光光路擋板推出5. 根據(jù)樣品的標(biāo)記情況將熒光濾塊轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)到相應(yīng)的位置6. 找到預(yù)觀察視野，調(diào)節(jié)變倍比7. 觀察樣品8. 拍照時將光路選擇拉桿拉出關(guān)機(jī)：1. 關(guān)閉汞燈電源（注意：汞燈需使用半小時以上方可關(guān)閉，關(guān)閉半小時以后方可再次開啟）2. 將明場光強調(diào)到最小，關(guān)閉明場電源開關(guān)3. 取出樣品，將變倍比調(diào)到最小4. 確認(rèn)數(shù)據(jù)已經(jīng)保存，關(guān)閉軟件5. 使用光盤拷貝數(shù)據(jù)（禁止使用移動儲存設(shè)備拷貝數(shù)據(jù)）6. 關(guān)閉電腦，登記使用時間、熒光數(shù)字等使用情況軟 件 應(yīng) 用1. 雙擊打開dp co

9、ntroller軟件2. 點擊預(yù)覽鍵，選擇image size(一般1360 x 1024)、objective、iso sensitivity(明場拍照選擇iso200，熒光拍照選擇iso400)、exposure mode(一般選擇manual)，調(diào)節(jié)exposure time3. 調(diào)節(jié)黑/白平衡（明場拍照用白平衡，熒光拍照用黑平衡）。點擊color面板，點擊one touch 在圖片背景位置選個小框，軟件自動做好平衡4. 若需添加標(biāo)尺，點擊scale面板，選中show scale，選擇標(biāo)尺顯示模式和長度，選中free size，改變標(biāo)尺長度5. 若需調(diào)整圖象色階，點擊level面板，拖動小滑塊調(diào)整色階，可以改變圖象對比度6. 點擊capture面板，還可再次調(diào)節(jié)曝光時間、圖象亮度及對比度。點擊拍照鍵，獲取圖象7. 此時彈出dp manager軟件，選擇保存圖象格式保存圖象到硬盤上8. 若需將不同通道圖象合成，可點擊dp manager軟件中imageimage composition，選擇需合成圖片的名稱，點擊apply，merging image生成，保存合成圖象9. 若需拍攝timelapse,點擊timelapse/movie面板，選擇拍攝模式，選擇拍攝時間、間隔時間等參數(shù)，再點擊