細菌病的一搬診斷程序課件

1、細菌病的一搬診斷程序1第三節(jié)第三節(jié) 細菌的人工培養(yǎng)細菌的人工培養(yǎng) 是指把細菌生長繁殖所需的各種營養(yǎng)物質是指把細菌生長繁殖所需的各種營養(yǎng)物質 合理地調配在一起制成的營養(yǎng)基質。合理地調配在一起制成的營養(yǎng)基質。 一、一、培養(yǎng)基的概念培養(yǎng)基的概念細菌病的一搬診斷程序2二、培養(yǎng)基種類二、培養(yǎng)基種類 液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基三三種。種。液體培養(yǎng)基：液體培養(yǎng)基：含有各種營養(yǎng)成分的水溶液。含有各種營養(yǎng)成分的水溶液。 固體培養(yǎng)基：固體培養(yǎng)基：在液體培養(yǎng)基中加入在液體培養(yǎng)基中加入2 23%3%瓊脂瓊脂即為固體培養(yǎng)基。即為固體培養(yǎng)基。半固體培養(yǎng)基：半固體培養(yǎng)基：加入加

2、入0.0.3 3 0.5% 0.5%瓊脂即為半固瓊脂即為半固體培養(yǎng)基。體培養(yǎng)基。( (一一) )按其物理性狀分為按其物理性狀分為細菌病的一搬診斷程序3 1 1、基礎培養(yǎng)基、基礎培養(yǎng)基 含有培養(yǎng)一般細菌的最基本成分。含有培養(yǎng)一般細菌的最基本成分?？晒┐罂晒┐蠖鄶导毦斯づ囵B(yǎng)用。如肉湯培養(yǎng)基、普通瓊脂多數細菌人工培養(yǎng)用。如肉湯培養(yǎng)基、普通瓊脂培養(yǎng)基和蛋白胨水等。培養(yǎng)基和蛋白胨水等。( (二二) )按其用途分為按其用途分為細菌病的一搬診斷程序42 2、營養(yǎng)培養(yǎng)基、營養(yǎng)培養(yǎng)基 于基礎培養(yǎng)基中加入于基礎培養(yǎng)基中加入高營養(yǎng)物質如葡萄高營養(yǎng)物質如葡萄糖、血液、血清、腹水、生長因子糖、血液、血清、腹水、生長因

3、子等，以等，以滿足營養(yǎng)要求較高的細菌生長需要。有的滿足營養(yǎng)要求較高的細菌生長需要。有的細菌還需加入特殊物質，如結核桿菌需加細菌還需加入特殊物質，如結核桿菌需加入雞蛋清、馬鈴薯、甘油等才能良好生長。入雞蛋清、馬鈴薯、甘油等才能良好生長。細菌病的一搬診斷程序53 3、選擇培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基 在培養(yǎng)基中加入某些化學物質，而選在培養(yǎng)基中加入某些化學物質，而選擇性地擇性地讓欲分離的細菌旺盛生長的培養(yǎng)基，讓欲分離的細菌旺盛生長的培養(yǎng)基，使用后可以達到選擇分離的目的。如膽鹽使用后可以達到選擇分離的目的。如膽鹽和薔薇色酸可以選擇性地抑制和薔薇色酸可以選擇性地抑制g+g+菌的生長，菌的生長，而不影響而不影響gg

4、菌的生長。在培養(yǎng)基中加入菌的生長。在培養(yǎng)基中加入二藥后可選擇性地分離出腸道桿菌。二藥后可選擇性地分離出腸道桿菌。細菌病的一搬診斷程序6 利用細菌分解底物及其代謝產物的利用細菌分解底物及其代謝產物的不同，可不同，可在培養(yǎng)基中加入某種物質和指在培養(yǎng)基中加入某種物質和指示劑示劑，即制為鑒別培養(yǎng)基，目的是使得，即制為鑒別培養(yǎng)基，目的是使得混合在一起的多種細菌在同一種培養(yǎng)基混合在一起的多種細菌在同一種培養(yǎng)基上生長時，表現出不同的、肉眼可鑒別上生長時，表現出不同的、肉眼可鑒別的變化，從而達到鑒別細菌的目的。的變化，從而達到鑒別細菌的目的。 4 4、鑒別培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基細菌病的一搬診斷程序75.5.厭氧培

5、養(yǎng)基厭氧培養(yǎng)基 厭氧菌不能在有氧環(huán)境中生長。厭氧菌不能在有氧環(huán)境中生長。將培養(yǎng)基與空將培養(yǎng)基與空氣隔絕，或向培養(yǎng)基中加入一些物質，使培養(yǎng)氣隔絕，或向培養(yǎng)基中加入一些物質，使培養(yǎng)基中的氧氣耗盡基中的氧氣耗盡，則可用于培養(yǎng)厭氧菌。如肝則可用于培養(yǎng)厭氧菌。如肝片肉湯培養(yǎng)基，應用時于液體表面加蓋液體石片肉湯培養(yǎng)基，應用時于液體表面加蓋液體石蠟以隔絕空氣。蠟以隔絕空氣。細菌病的一搬診斷程序8區(qū)分選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基區(qū)分選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基 選擇培養(yǎng)基上的菌類，有選擇培養(yǎng)基上的菌類，有2種或兩種以上種或兩種以上時，時，只有適應環(huán)境（選擇培養(yǎng)基的基底）只有適應環(huán)境（選擇培養(yǎng)基的基底）的菌種才能存活的菌種

6、才能存活。 鑒別培養(yǎng)基上的菌類，有兩種或兩種以鑒別培養(yǎng)基上的菌類，有兩種或兩種以上時，在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學上時，在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學藥品，使培養(yǎng)后會發(fā)生某種變化，從而藥品，使培養(yǎng)后會發(fā)生某種變化，從而區(qū)別不同類型的微生物（但區(qū)別不同類型的微生物（但培養(yǎng)基上的培養(yǎng)基上的各個菌種均不死亡各個菌種均不死亡）。）。 細菌病的一搬診斷程序9三、制備培養(yǎng)基的基本程序三、制備培養(yǎng)基的基本程序配料配料溶化溶化測定及矯正測定及矯正phph過濾過濾分裝分裝滅菌滅菌無菌檢驗無菌檢驗備用備用培養(yǎng)基的基本要求培養(yǎng)基的基本要求1.含有豐富的營養(yǎng)物質，不含任何抑菌物質。2.具有適當的ph值和水分。3.均勻透

7、明，易于觀察。4.經過滅菌和無菌檢驗。細菌病的一搬診斷程序101 1、細菌在固體培養(yǎng)基上的生長現象：、細菌在固體培養(yǎng)基上的生長現象： 觀察細菌在平板上的菌落特征：觀察細菌在平板上的菌落特征： 菌落：細菌接種在固體培養(yǎng)基上，經過一菌落：細菌接種在固體培養(yǎng)基上，經過一定時間的培養(yǎng)后，表面可出現肉眼可見的單個定時間的培養(yǎng)后，表面可出現肉眼可見的單個細菌集團，稱為菌落。細菌集團，稱為菌落。四、細菌在培養(yǎng)基上的生長情況四、細菌在培養(yǎng)基上的生長情況形態(tài)、大小、邊緣、表面構造（濕潤度和光滑形態(tài)、大小、邊緣、表面構造（濕潤度和光滑度）、隆起度、透明度、顏色等，及在血平板度）、隆起度、透明度、顏色等，及在血平板

8、上的溶血現象（上的溶血現象（溶血、溶血、溶血）。溶血）。細菌病的一搬診斷程序112、細菌在半固體培養(yǎng)基中的生長現象 有鞭毛的細菌，沿有鞭毛的細菌，沿穿剌線呈模糊穿剌線呈模糊羽毛羽毛狀狀生長。生長。 無鞭毛的細菌，沿無鞭毛的細菌，沿穿剌線呈穿剌線呈清晰清晰的線的線狀生長狀生長。細菌病的一搬診斷程序123、細菌在液體培養(yǎng)基中的生長現象 觀察肉湯培養(yǎng)物的觀察肉湯培養(yǎng)物的混濁度、管底沉淀、混濁度、管底沉淀、肉湯表面菌膜或菌肉湯表面菌膜或菌環(huán)，以及有無汽泡環(huán)，以及有無汽泡等。等。 細菌病的一搬診斷程序13臨床標本預處理增 菌接種培養(yǎng)基，分離單個菌落各種鑒定試驗涂片染色快速診斷試驗生化試驗血清學實驗涂片染

9、色藥敏試驗動物試驗初步診斷報告最終診斷報告第四節(jié)第四節(jié) 細菌病的一般診斷程序細菌病的一般診斷程序細菌病的一搬診斷程序14 一、病料的采集、保存及運送一、病料的采集、保存及運送細菌病的一搬診斷程序15細菌病的一搬診斷程序16二、細菌的形態(tài)檢查二、細菌的形態(tài)檢查 1.1.單染色法單染色法 2.2.復染色法復染色法革蘭氏（革蘭氏（g）染色法染色法 革蘭氏陽性菌（革蘭氏陽性菌（g g+ +菌）藍紫色菌）藍紫色革蘭氏陰性菌（革蘭氏陰性菌（g g- -菌菌）紅色紅色細菌病的一搬診斷程序17細菌病的一搬診斷程序18細菌的接種培養(yǎng)方法 1.傾注平皿接種法 2.平板劃線分離法 3.斜面接種法 4.穿刺接種法 5.液體培養(yǎng)基接種法三、細菌的分離培養(yǎng)三、細菌的分離培養(yǎng)細菌病的一搬診斷程序19必須用純培養(yǎng)物鑒定必須用純培養(yǎng)物鑒定選用單個菌落選用單個菌落細菌病的一搬診斷程序20四、細菌的生化試驗四、細菌的生化試驗 1.1.糖分解試驗糖分解試驗 2.2.維維- -培試驗培試驗 3.3.甲基紅試驗甲基紅試驗 4.4.枸櫞酸鹽利用試驗枸櫞酸鹽利用試驗 5.5.吲哚試驗吲哚試驗 6.6.硫化氫試驗硫化氫試驗 7.7.觸媒試驗觸媒