《動(dòng)物礦物藥》ppt課件

1、第六章第六章 動(dòng)物藥、礦物藥的分析動(dòng)物藥、礦物藥的分析 第一節(jié) 含動(dòng)物藥中藥制劑的分析 二、動(dòng)物藥化學(xué)成分 1、蛋白質(zhì)及其水解產(chǎn)物 2、生物堿類 3、甾類化合物 4、酮類、酸類成分 5、萜類、前列腺素、無機(jī)化合物、鹵素 牛黃及其制劑的分析牛黃及其制劑的分析 一、來源 牛黃為?？苿?dòng)物黃牛或水牛的膽囊、膽管或肝管中的結(jié)石，稱為天然牛黃。具有清心、開竅、鎮(zhèn)驚、熄風(fēng)、解毒等效果。臨床上用于熱病的神昏譫語、焦躁不安、中風(fēng)竅閉等，著名中成藥有牛黃安宮丸、牛黃解毒丸、牛黃清心丸等。組成組成 牛黃主要含有膽汁酸，膽汁酸主要為牛黃主要含有膽汁酸，膽汁酸主要為膽酸、去氧膽酸及其鹽類，并含有膽膽酸、去氧膽酸及其鹽類

2、，并含有膽色素及其鈣鹽、脂類、蛋白質(zhì)、肽、色素及其鈣鹽、脂類、蛋白質(zhì)、肽、氨基酸及無機(jī)元素等。氨基酸及無機(jī)元素等。 人工牛黃是按照天然牛黃的主要成分人工牛黃是按照天然牛黃的主要成分膽紅素、膽酸、膽固醇、無機(jī)鹽等，膽紅素、膽酸、膽固醇、無機(jī)鹽等，人工配制的一種牛黃代用品，其制造工人工配制的一種牛黃代用品，其制造工藝簡單，價(jià)錢還不到天然牛黃的藝簡單，價(jià)錢還不到天然牛黃的0.5，在一定程度上滿足了普通百姓的用藥需在一定程度上滿足了普通百姓的用藥需求。目前，人工牛黃占據(jù)了求。目前，人工牛黃占據(jù)了98的市場的市場份額，成為天然牛黃的主要替代品。但份額，成為天然牛黃的主要替代品。但是，人工牛黃與天然牛黃相

3、比，無論在是，人工牛黃與天然牛黃相比，無論在成分、構(gòu)造還是藥效上都存在著一定差成分、構(gòu)造還是藥效上都存在著一定差距。距。 天然牛黃、人工牛黃成分對(duì)比天然牛黃、人工牛黃成分對(duì)比天然牛黃天然牛黃 ： 人工牛黃：人工牛黃：膽紅素膽紅素 膽紅素膽紅素去氧膽酸去氧膽酸 豬去氧膽酸豬去氧膽酸膽酸膽酸 膽酸膽酸去氧膽酸去氧膽酸 膽固醇膽固醇結(jié)合型膽甾酸鹽結(jié)合型膽甾酸鹽 磷酸三鈣磷酸三鈣牛黃酸牛黃酸 硫酸鎂硫酸鎂膽固醇膽固醇 硫酸亞鐵硫酸亞鐵粘蛋白粘蛋白 淀粉淀粉氨基酸氨基酸肽類、脂肪酸肽類、脂肪酸卵磷脂卵磷脂鈣鹽、無機(jī)鹽鈣鹽、無機(jī)鹽 人工牛黃的質(zhì)量規(guī)范人工牛黃為膽酸、膽紅素、膽固醇與無機(jī)鹽等配合而成，要求膽

4、酸的含量限制應(yīng)為標(biāo)示量的90%以上，總膽酸含量應(yīng)不得少于25%，膽紅素含量應(yīng)為標(biāo)示量的90%以上，人工牛黃應(yīng)為黃色疏松的粉末、味苦、微甘。膽汁酸的化學(xué)反響膽汁酸的化學(xué)反響膽汁酸的主要成分是膽酸膽汁酸的主要成分是膽酸(cholic acid,CA)和去氧膽酸和去氧膽酸(deoxycholic acid,DCA)，較易，較易溶于丙酮與乙醇中，其鈉鹽易溶于水。溶于丙酮與乙醇中，其鈉鹽易溶于水。1、Pettenkofer反響反響原理：蔗糖經(jīng)濃硫酸作用生成羥甲基糠醛，原理：蔗糖經(jīng)濃硫酸作用生成羥甲基糠醛，可與膽汁酸結(jié)合生成紫色物質(zhì)?？膳c膽汁酸結(jié)合生成紫色物質(zhì)。2、 Gregory Pascoe反響反響取

5、膽汁取膽汁1ml參與參與0.3%糠醛溶液糠醛溶液1ml，加，加45%硫酸硫酸6ml，振搖后在，振搖后在65度水浴中放置度水浴中放置30分鐘，分鐘，膽酸存在的溶液顯藍(lán)色膽酸存在的溶液顯藍(lán)色Hammarsten 反響反響20%鉻酸溶液溶解少量樣品，溫?zé)?，膽酸鉻酸溶液溶解少量樣品，溫?zé)幔懰犸@紫色，鵝去氧膽酸不顯色?？蓞^(qū)別膽顯紫色，鵝去氧膽酸不顯色。可區(qū)別膽酸同系物酸同系物如膽酸、阿樸膽酸呈陽性反響，去氧膽如膽酸、阿樸膽酸呈陽性反響，去氧膽酸和鵝去氧膽酸呈陰性反響。酸和鵝去氧膽酸呈陰性反響。膽紅素的化學(xué)反響膽紅素的化學(xué)反響膽紅素不溶于水，溶于苯、氯仿、氯苯、二膽紅素不溶于水，溶于苯、氯仿、氯苯、二硫

6、化碳及堿液中，微溶于乙醇、乙醚。鈉鹽硫化碳及堿液中，微溶于乙醇、乙醚。鈉鹽易溶于水。易溶于水。1、Gmelin反響反響加濃硝酸產(chǎn)生綠、藍(lán)、紫等色環(huán)，機(jī)制是膽色加濃硝酸產(chǎn)生綠、藍(lán)、紫等色環(huán)，機(jī)制是膽色素被氧化成三烯膽素藍(lán)綠色素被氧化成三烯膽素藍(lán)綠色2、Van den bergh反響反響與重氮化的對(duì)氨基苯磺酸巧合成偶氮染料，此與重氮化的對(duì)氨基苯磺酸巧合成偶氮染料，此染料在強(qiáng)酸中呈藍(lán)紫色，染料在強(qiáng)酸中呈藍(lán)紫色，pH2.0-5.5時(shí)呈紅色，時(shí)呈紅色， pH5.5以上呈綠色。以上呈綠色。定性鑒別定性鑒別理化鑒別理化鑒別1、膽紅素反響、膽紅素反響加硫酸與過氧化氫各加硫酸與過氧化氫各2滴，顯綠色滴，顯綠色2

7、、膽酸反響、膽酸反響Gregory Pascoe反響反響3、取牛黃少許，水合氯醛裝片，不加熱，、取牛黃少許，水合氯醛裝片，不加熱，置顯微鏡下察看，由黃棕色或棕紅色小置顯微鏡下察看，由黃棕色或棕紅色小顆粒組成不規(guī)那么團(tuán)塊，加水合氯醛色顆粒組成不規(guī)那么團(tuán)塊，加水合氯醛色素迅速溶解，顯金黃色，久置變綠色。素迅速溶解，顯金黃色，久置變綠色。薄層色譜法吸附劑：常用硅膠分別游離膽汁酸的展開劑分別游離膽汁酸的展開劑異辛烷：異戊醚：冰乙酸：正丁醇：水異辛烷：異戊醚：冰乙酸：正丁醇：水10：5：5：3：1異辛烷：乙酸乙酯：乙酸異辛烷：乙酸乙酯：乙酸5：5：1甲苯：冰醋酸：水甲苯：冰醋酸：水10：10：1氯仿：甲

8、酸：水氯仿：甲酸：水65：25：4異戊醇：冰醋酸：水異戊醇：冰醋酸：水18：5：3正丁醇：冰醋酸：水正丁醇：冰醋酸：水17：2：1異辛烷：異丙醇：醋酸異辛烷：異丙醇：醋酸40：10：1分別結(jié)合膽汁酸的展開劑分別結(jié)合膽汁酸的展開劑氯仿：異丙醇：醋酸：水氯仿：異丙醇：醋酸：水30：30：4：1正丁醇：醋酸：水正丁醇：醋酸：水20：4：3醋酸乙酯：甲醇：醋酸：水醋酸乙酯：甲醇：醋酸：水35：12：2：2正丁醇：水正丁醇：水20：3醋酸乙酯：甲醇：水醋酸乙酯：甲醇：水35：12：2正丁醇：吡啶：水正丁醇：吡啶：水20：4：3甲苯：冰醋酸：水甲苯：冰醋酸：水10：10：0.8顯色劑顯色劑30%硫酸試劑、

9、硫酸乙醇紫外燈下察看硫酸試劑、硫酸乙醇紫外燈下察看10%磷鉬酸乙醇試劑、磷鉬酸乙醇試劑、苯甲酸試劑、茴香醛試劑、苯甲酸試劑、茴香醛試劑、三氯化鐵試劑、三氯化銻試劑、三氯化鐵試劑、三氯化銻試劑、重鉻酸鉀飽和的重鉻酸鉀飽和的80%硫酸試劑等。硫酸試劑等。 含量測定1、膽酸的含量測定 化學(xué)法、比色法、TLC、HPLC2、膽紅素的含量測定、膽紅素的含量測定分光光度法：重氮化試劑顯色分光光度法：重氮化試劑顯色HPLC麝香及其制劑的分析麝香及其制劑的分析麝香是鹿科動(dòng)物林麝、馬麝、原麝中成麝香是鹿科動(dòng)物林麝、馬麝、原麝中成熟雄體香囊中的枯燥分泌物。具有抗炎、熟雄體香囊中的枯燥分泌物。具有抗炎、強(qiáng)心、雄性激素

10、樣作用，是多種中成藥強(qiáng)心、雄性激素樣作用，是多種中成藥的組成成分之一，如牛黃安宮丸、六神的組成成分之一，如牛黃安宮丸、六神丸、蘇合香丸、再造丸等。丸、蘇合香丸、再造丸等。一化學(xué)成分及性質(zhì)一化學(xué)成分及性質(zhì) 1、大環(huán)化合物、大環(huán)化合物 麝香酮麝香酮 含量含量2%以上，是天然麝以上，是天然麝香的主要有效成分之一，也是麝香的香味成分，香的主要有效成分之一，也是麝香的香味成分，有特異劇烈的香氣，對(duì)冠心病有好像硝酸甘油一有特異劇烈的香氣，對(duì)冠心病有好像硝酸甘油一樣的作用、降麝香酮、麝香醇、麝香吡啶和羥樣的作用、降麝香酮、麝香醇、麝香吡啶和羥基麝香吡啶基麝香吡啶A、B 等。等。2、甾族化合物、甾族化合物 含

11、十多種雄甾烷衍生物，如雄性含十多種雄甾烷衍生物，如雄性酮、表雄酮等，麝香的雄性激素樣作用是與麝香酮、表雄酮等，麝香的雄性激素樣作用是與麝香所含的雄甾烷衍生物有關(guān)。所含的雄甾烷衍生物有關(guān)。3、膽固醇、酯和蠟、膽固醇、酯和蠟4、蛋白質(zhì)、肽、氨基酸、蛋白質(zhì)、肽、氨基酸 MPmusk peptide fraction是麝香中含有的一是麝香中含有的一種分子量為種分子量為1000的多肽，有很強(qiáng)的抗炎活性，至的多肽，有很強(qiáng)的抗炎活性，至少是氫化可的松的少是氫化可的松的40倍，另有一種分子量約為倍，另有一種分子量約為5000-6000的多肽，抗炎活性為氫化可的松的的多肽，抗炎活性為氫化可的松的20倍。倍。5、

12、無機(jī)鹽、無機(jī)鹽6、其他成分、其他成分尿囊素消腫有效成分、膽酸和膽紅素樣物質(zhì)、尿囊素消腫有效成分、膽酸和膽紅素樣物質(zhì)、尿素、纖維素等尿素、纖維素等二定性鑒別1、 化學(xué)法化學(xué)法取麝香細(xì)粉，加五氯化銻共研，香氣消逝，取麝香細(xì)粉，加五氯化銻共研，香氣消逝，再加少許氨水共研，香氣恢復(fù)。再加少許氨水共研，香氣恢復(fù)。2、氣相色譜法、氣相色譜法3、紫外光譜法、紫外光譜法乙醇提取液：乙醇提取液：220nm附近有最大吸收、附近有最大吸收、270nm附近有肩峰附近有肩峰乙醚提取液：乙醚提取液：231nm附近有最大吸收、附近有最大吸收、265nm附近有肩峰附近有肩峰正已烷提取液：正已烷提取液：220nm附近有最大吸收

13、、附近有最大吸收、265nm附近有肩峰附近有肩峰4、薄層色譜法、薄層色譜法取麝香取麝香2g，參與硅藻土，參與硅藻土5g，研磨均勻，研磨均勻，置索氏提取器中，用置索氏提取器中，用200ml無水乙醚提取。無水乙醚提取。吸附劑：硅膠吸附劑：硅膠常用展開劑：甲苯常用展開劑：甲苯-丙酮丙酮-乙醇乙醇8：1：0.1二氯甲烷二氯甲烷-乙醚，苯：乙醚，二氯甲烷乙醚，苯：乙醚，二氯甲烷-丙酮等丙酮等顯色劑：顯色劑：30%硫酸乙醇、紫外燈下檢視。硫酸乙醇、紫外燈下檢視。三含量測定三含量測定 1、氣相色譜法、氣相色譜法2、薄層掃描法、薄層掃描法3、高效液相色譜法、高效液相色譜法熊膽及其制劑的分析熊膽及其制劑的分析熊

14、膽：是指棕熊或黑熊的枯燥膽汁。具熊膽：是指棕熊或黑熊的枯燥膽汁。具有清熱、解痙、平肝、明目的效果。有清熱、解痙、平肝、明目的效果。 一熊膽的化學(xué)成分及性質(zhì)一熊膽的化學(xué)成分及性質(zhì)主要為膽汁酸，膽汁酸的成分為?；侵饕獮槟懼幔懼岬某煞譃榕；切苋パ跄懰幔?jīng)堿水解后得熊去氧膽熊去氧膽酸，經(jīng)堿水解后得熊去氧膽酸，并含有鵝去氧膽酸、膽酸及去氧酸，并含有鵝去氧膽酸、膽酸及去氧膽酸等，這些膽酸通常與?；撬?、甘膽酸等，這些膽酸通常與?；撬帷⒏拾彼峤Y(jié)合并構(gòu)成鈉或鈣鹽而存在。氨酸結(jié)合并構(gòu)成鈉或鈣鹽而存在。熊膽的解痙作用主要有效成分就是熊熊膽的解痙作用主要有效成分就是熊去氧膽酸，它也是熊膽特有的成分去氧膽酸，它也

15、是熊膽特有的成分牛磺熊去氧膽酸和?；蛆Z去氧膽酸是牛磺熊去氧膽酸和?；蛆Z去氧膽酸是差向異構(gòu)體同時(shí)存在。差向異構(gòu)體同時(shí)存在。 二熊膽的定性鑒別二熊膽的定性鑒別 化學(xué)法：化學(xué)法：取膽仁粉未在紫外燈下應(yīng)顯黃白色熒光，取膽仁粉未在紫外燈下應(yīng)顯黃白色熒光，而不是顯棕黃色熒光；另取粉末約而不是顯棕黃色熒光；另取粉末約0.2g溶溶于于7%冰醋酸溶液冰醋酸溶液20ml中，溶液不應(yīng)顯淺中，溶液不應(yīng)顯淺藍(lán)色乳濁熒光與牛、羊膽區(qū)別藍(lán)色乳濁熒光與牛、羊膽區(qū)別TLC吸附劑：硅膠吸附劑：硅膠展開劑：展開劑：游離膽酸分別：異辛烷游離膽酸分別：異辛烷-醋酸乙酯醋酸乙酯-醋酸醋酸5：5：1、異辛烷、異辛烷-異戊醚異戊醚-冰醋酸冰

16、醋酸-正正丁醇丁醇-水水15：5：5：3：1分別結(jié)合膽酸：甲苯分別結(jié)合膽酸：甲苯-冰醋酸冰醋酸-水水10：10：1、氯仿、氯仿-甲醇甲醇-水水65：25：4顯色劑：顯色劑：30%硫酸乙醇、碘蒸氣硫酸乙醇、碘蒸氣三熊膽定量分析三熊膽定量分析 比色法：比色法：取膽或膽濃縮液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中枯燥，取膽或膽濃縮液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中枯燥，再真空枯燥，殘?jiān)苡谒∷芤涸僬婵湛菰?，殘?jiān)苡谒?，取水溶?.1ml(約含約含0.2mg膽酸加膽酸加lml0.9%糠醛溶糠醛溶液及液及6ml6N硫酸溶液?；旌弦河诹蛩崛芤??；旌弦河?0度加熱度加熱8min，在冰水中冷卻，于，在冰水中冷卻，于610nm丈量吸收丈量吸收度，

17、于規(guī)范品度，于規(guī)范品0.1-0.3mg膽酸，符合比膽酸，符合比爾定律比較計(jì)算膽中膽酸的含量。爾定律比較計(jì)算膽中膽酸的含量。薄層掃描法薄層掃描法HPLC：常用反相高效液相色譜法常用反相高效液相色譜法流動(dòng)相：常用甲醇流動(dòng)相：常用甲醇-酸水或乙腈酸水或乙腈-酸水酸水檢測：紫外未端檢測檢測：紫外未端檢測GC：衍生化法衍生化法蟾酥及其制劑的分析蟾酥及其制劑的分析 蟾酥為蟾蜍科動(dòng)物中華大蟾酥或黑眶蟾蟾酥為蟾蜍科動(dòng)物中華大蟾酥或黑眶蟾酥的耳下腺及皮膚腺的枯燥分泌物，具酥的耳下腺及皮膚腺的枯燥分泌物，具強(qiáng)心、升壓、抗腫瘤、麻醉、抗炎鎮(zhèn)痛強(qiáng)心、升壓、抗腫瘤、麻醉、抗炎鎮(zhèn)痛等作用，是中成藥六神丸、救心丸、牛等作用

18、，是中成藥六神丸、救心丸、牛黃消炎丸的組成之一。黃消炎丸的組成之一。一化學(xué)成分及性質(zhì)一化學(xué)成分及性質(zhì) 主要含蟾酥甾二烯，具主要含蟾酥甾二烯，具24個(gè)碳原子。蟾酥個(gè)碳原子。蟾酥甾二烯類又分為游離型和結(jié)合型，其游離甾二烯類又分為游離型和結(jié)合型，其游離型稱蟾毒配基，其結(jié)合型多為脂溶性的蟾型稱蟾毒配基，其結(jié)合型多為脂溶性的蟾酥毒素類，蟾酥配基類和精氨酸等結(jié)合的酥毒素類，蟾酥配基類和精氨酸等結(jié)合的酯類。酯類。二定性鑒別二定性鑒別P2081、顯色反響、顯色反響 對(duì)二甲氨基苯甲醛、硫酸對(duì)二甲氨基苯甲醛、硫酸醋酐、硫酸醋酐、硫酸酒石酸、對(duì)二甲氨基苯甲醛蟾酥堿、酒石酸、對(duì)二甲氨基苯甲醛蟾酥堿、蟾酥甲堿中吲哚基反

19、響蟾酥甲堿中吲哚基反響2、紙色譜法、紙色譜法 常用甲酰胺為固定相、苯常用甲酰胺為固定相、苯-氯仿為展氯仿為展開劑、三氯化銻顯色開劑、三氯化銻顯色TLC法法展開劑：環(huán)己烷展開劑：環(huán)己烷- 氯仿氯仿- 丙酮丙酮4：3：3 環(huán)己烷環(huán)己烷- 丙酮丙酮7：3 正己烷正己烷- 乙酸乙酯乙酸乙酯1：9 乙醚乙醚- 乙酸乙酯乙酸乙酯6：4顯色劑：硫酸乙醇溶液顯色劑：硫酸乙醇溶液 4、紫外光譜法、紫外光譜法5、紅外光譜法、紅外光譜法三定量分析三定量分析 方法主要有分光光度法、比色法、薄層方法主要有分光光度法、比色法、薄層掃描法、氣相色譜法、高效液相色譜法掃描法、氣相色譜法、高效液相色譜法 第二節(jié)第二節(jié) 含礦物藥

20、中藥制劑的分析含礦物藥中藥制劑的分析二礦物藥的分析方法二礦物藥的分析方法 取樣取樣試樣分解試樣分解定性定性定量定量其中試樣的分解是將待測組分轉(zhuǎn)入溶液中的重其中試樣的分解是將待測組分轉(zhuǎn)入溶液中的重要步驟，要求試樣要分解完全，分解過程中待要步驟，要求試樣要分解完全，分解過程中待測組分不應(yīng)損失，分解過程中不能引入被測組測組分不應(yīng)損失，分解過程中不能引入被測組分或干擾組分。分或干擾組分。常用的分解方法有溶解法濕法、熔常用的分解方法有溶解法濕法、熔融法干法融法干法 ：溶解法：水、稀酸、濃酸、混合酸溶解法：水、稀酸、濃酸、混合酸熔融法：熔融法： 熔劑熔劑 堿性熔劑碳酸鈉、氫氧化鈉堿性熔劑碳酸鈉、氫氧化鈉

21、酸性熔劑硫酸氫鉀、焦硫酸鉀酸性熔劑硫酸氫鉀、焦硫酸鉀 氧化性熔劑過氧化鈉氧化性熔劑過氧化鈉 復(fù)原性熔劑碳酸鈉加硫復(fù)原性熔劑碳酸鈉加硫A、容量法、容量法 配位滴定法：配位滴定法：EDTA乙二胺四乙酸法乙二胺四乙酸法運(yùn)用最廣，多用于測定含鈣、鋁等的礦運(yùn)用最廣，多用于測定含鈣、鋁等的礦物藥，方法用規(guī)范溶液乙二胺四醋酸二物藥，方法用規(guī)范溶液乙二胺四醋酸二鈉液直接滴定，也有加過量乙二胺四醋鈉液直接滴定，也有加過量乙二胺四醋酸二鈉溶液用鋅液回滴。酸二鈉溶液用鋅液回滴。酸堿滴定法：適用于含碳酸鹽類礦物藥。酸堿滴定法：適用于含碳酸鹽類礦物藥。氧化復(fù)原滴定法：適用于含汞、砷、鐵氧化復(fù)原滴定法：適用于含汞、砷、鐵類礦物藥。類礦物藥。 1、化學(xué)分析法、化學(xué)分析法B、 分量法分量法 分量法實(shí)驗(yàn)要求分量法實(shí)驗(yàn)要求1被測組分要沉淀完全，且沉淀溶解被測組分要沉淀完全，且沉淀溶解度要很小。為促使沉淀完全，普通以超度要很小。為促使沉淀完全，普通以超越越20-50%為宜，過多能夠產(chǎn)生配合反響，為宜，過多能夠產(chǎn)生配合反響，使沉淀溶解度加大。使沉淀溶解度加大。2沉淀要純真，主要是防止沉淀要純真，主要是防止“共沉淀共沉淀。共沉淀的來源有。共沉淀的來源有A：外表吸附。：外表吸附。B：吸留，是由于沉淀速度過快，雜質(zhì)包入其吸留，是由于沉淀速度過快，雜質(zhì)包入其中。中。C：后沉淀，是指在