纈沙坦手性異構(gòu)體驗證方案20150118

1、頁碼PAGE1 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION題題 目目Title纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證文件編號文件編號Document No.版版 本本 號號Revision00版本歷史記錄版本歷史記錄/ Revision History版本版本 Revision 變更變更 Change 簽名簽名 Signature 日期日期 Date 00新建頁碼PAGE2 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISIONEXECUTION APP

2、ROVAL SIGNATURES批準(zhǔn)執(zhí)行簽名批準(zhǔn)執(zhí)行簽名下面的簽名表示批準(zhǔn)本文件及其附件，可以執(zhí)行方案。These signatures below mean this document and attachment have been approved to perform this protocol.職能職能Responsibility姓名姓名Name部門部門Department簽名簽名/日期日期Signature and Date 編制編制Prepared by質(zhì)量控制部審核審核Reviewed by質(zhì)量控制部審核審核Reviewed by質(zhì)量保證部審核審核Reviewed by質(zhì)量保證

3、部批準(zhǔn)人批準(zhǔn)人Approved by: 質(zhì)量部頁碼PAGE3 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION簽名表簽名表 SIGNATURE TABLE所有執(zhí)行和審核此方案并進行簽名的人員必須填寫以下表格。此表可根據(jù)草簽或簽名追蹤到其人,填寫以下表格表明執(zhí)行測試的人員已經(jīng)理解了方案的要求并且可以執(zhí)行方案。All the personnel to perform and review this protocol must fill in the following form. This form can show th

4、ey have understood the procotol requirement and will strictly implement it. 姓名姓名Name職務(wù)職務(wù)Title簽名簽名Signature日期日期Date驗證小組組長 Validation Team Leader驗證小組成員 Validation Team Member頁碼PAGE4 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION目錄目錄1.概述 INSTRODUCTION .52.目的/PURPOSE.53.范圍/SCOPE.54.檢驗方法描

5、述/ TEST METHOD DESCRIPTION.55.職責(zé)/RESPONSIBILITY.76.參考文件/ REFERANCES .77.縮略語/ABBREVIATIONS.78.測試/TEST.79.偏差列表/DEVATIONS LIST.910. 變更清單/CHANGE LIST.1011. 結(jié)論/建議 CONCLUSION/RECOMMENDATION.1112. 報告的審批/REPORT APPROVAL.1213. 附件/ATTACHMENT.13附件 1SOP 確認(rèn).14附件 2培訓(xùn)的確認(rèn).16附件 3檢測用儀器的確認(rèn).18附件 4試劑、供試品的確認(rèn).19附件 5專屬性測試.

6、20附件 6精密度測試.21附件 7準(zhǔn)確度（回收率）測試.22附件 8檢測限與定量限測試.23附件 9線性測試.24附件 10耐用性測試.25附件 11重復(fù)性測試.32附件 12溶液穩(wěn)定性測試.33附件 13系統(tǒng)適用性測試.35頁碼PAGE5 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION1.概述概述 INSTRODUCTION手性藥物是指分子結(jié)構(gòu)中含有手性中心（也叫不對稱中心）的藥物，它包括單一的立體異構(gòu)體、兩個以上（含兩個）立體異構(gòu)體的不等量的混合物以及外消旋體。不同構(gòu)型的立體異構(gòu)體的生物活性也可能不同，正是由于

7、手性藥物的不同立體異構(gòu)體在藥效、藥代及毒理等方面都可能存在差異，它直接影響了藥物的純度，使得藥物的療效降低，還會產(chǎn)生其他副作用，因此，檢測手性異構(gòu)體、控制異構(gòu)體的量是確保用藥安全、有效，保證藥物質(zhì)量的一個重要方面。還為有效控制其中手性異構(gòu)體的量，特新建其手性異構(gòu)體的檢驗方法，為有效控制其質(zhì)量提供依據(jù)。為使按纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法測試的結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，確保方法可行性，因此對該檢測方法的科學(xué)性、準(zhǔn)確性、可行性進行確認(rèn)，以充分表明此檢驗方法符合檢測的目標(biāo)和要求，特制定了本檢驗方法的驗證方案。2.目的目的/PURPOSE通過驗證，確認(rèn)纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法的可靠性。3.范圍范圍/SCOPE適用于纈

8、沙坦手性異構(gòu)體測定方法的驗證。4.檢驗方法描述檢驗方法描述/ TEST METHOD DESCRIPTION手性異構(gòu)體檢驗方法4.1 儀器和試劑： 4.1.1 儀器名稱型號廠家 高效液相色譜儀Agilent 1260安捷倫科技有限公司 色譜柱OD-H 250mm4.0mm，5um 4.1.2 試劑名稱批號廠家 異丙醇 乙腈甲醇頁碼PAGE6 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION三氟乙酸異丙醇正己烷鹽酸氫氧化鈉雙氧水純化水4.2 測定條件： 色譜柱： OD-H 250mm4.0mm，5um 流動相：正己烷:異

9、丙醇：三氟乙酸=85:15:0.1 流速：0.8mlmL/min 柱 溫：室溫 檢測波長：230nm 進樣體積：10l 稀釋液：流動相4.3 溶液的配制： 供試品溶液: 精密稱取樣品 50.0mg，置于 50mlmL 容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻。平行配制兩份。 對照品溶液：精密量取 1.0mlmL 供試品溶液，置于 100mlmL 容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻。 混合溶液：精密稱取纈沙坦雜質(zhì)對照品溶液（含雜質(zhì) A)5.0mg，置于 5mlmL 容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻。 4.4 系統(tǒng)適用性要求：對照品溶液 st1 5 次進樣的主峰峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差不

10、超過 2.0%；st1與 st2 之間的精密度在 0.981.02 之間；前 5 針 st1 和后 1 針 st1 的精密度在 0.981.02 之間?；旌先芤合到y(tǒng)適用性溶液中纈沙坦與纈沙坦異構(gòu)體的分離度應(yīng)大于 2.0。4.5 測定步驟： 空白溶液 1 針對照品溶液 st1 進樣 5 針頁碼PAGE7 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION 混合溶液 1 針 供試品溶液 sp1 進樣 1 針 對照品溶液 st2 進樣 1 針 供試品溶液 sp2 進樣 1 針 對照品溶液 st1 進樣 1 針 計算公式：纈沙坦

11、異構(gòu)體含量（%）=樣品溶液中纈沙坦異構(gòu)體的峰面積*100% 對照溶液中主峰峰面積*1004.6 可接受標(biāo)準(zhǔn)： 纈沙坦異構(gòu)體含量不得過 1.0%5.職責(zé)職責(zé)/RESPONSIBILITY/RESPONSIBILITY 5.1藥物質(zhì)量研究&注冊部：負(fù)責(zé)驗證用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的準(zhǔn)備；負(fù)責(zé)備品、備件的保存；負(fù)責(zé)設(shè)備儀器的操作；負(fù)責(zé)記錄、計算各種測試結(jié)果；負(fù)責(zé)起草鹽酸達泊西汀纈沙坦異構(gòu)體有關(guān)物質(zhì)檢驗方法的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程；5.2藥物質(zhì)量研究&注冊部：組織協(xié)調(diào)驗證工作，并審核驗證方案及報告。負(fù)責(zé)再驗證周期的確定。 藥物質(zhì)量研究&注冊部部長：負(fù)責(zé)驗證方案及報告的批準(zhǔn)。6.參考文件參考文件/ RE

12、FERANCES中國藥典（2010 版）二部7.縮略語縮略語/ABBREVIATIONS 縮略語Abbreviations定義DefinitionRSDrelative standard deviation 相對標(biāo)準(zhǔn)偏差LODLimit Of Detection 檢測限LOQLimit of Quantity 定量限SOPStandard Operation Procedure 標(biāo)準(zhǔn)操作程序頁碼PAGE8 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISIONARAnalytical reagent 分析純HPLCHigh

13、Performance Liquid Chromatography 高效液相色譜8.測試測試/TEST借助文件附件進行測試。把所有有關(guān)信息記錄在這些表格中。必要時也可向 QA 索取復(fù)印件。執(zhí)行文件的同時記錄結(jié)果和數(shù)據(jù)。未使用的地方用單線劃去，簽名，并注明日期，用“N/A”標(biāo)明不適用的地方，其它相關(guān)要求遵循 MP/QA-034“記錄填寫管理規(guī)程” 。記錄在執(zhí)行文件時發(fā)現(xiàn)的任何偏差或不正常的情況。The Test will be performed using the protocol attachments. All pertinent information will be recorded

14、on these forms. Copies of forms may be obtained from QA department if necessary. all the results and data should be recorded during the implementation of this protocol. Any blank spaces should be marked with ”N/A” through a single line , as well as initial and date. Other relevant requirements are i

15、n accordance with SOP document of .Any deviation or abnormal circumstance should be recorded during implementing this protocol.在下面的表格列出了本方案將要執(zhí)行的測試。The test content, which will be performed in this protocol, are listed in the following form.編號編號 No.名稱名稱 Name1附件1- SOP確認(rèn)2附件 2-培訓(xùn)的確認(rèn)3附件3-檢測用儀器的確認(rèn)4附件 4-試劑

16、、供試品的確認(rèn)5附件5-專屬性原始記錄、數(shù)據(jù)處理及圖譜6附件6-重復(fù)性原始記錄、數(shù)據(jù)處理及圖譜7附件7-精密度原始記錄、數(shù)據(jù)處理及圖譜8附件8-準(zhǔn)確度（回收率）原始記錄、數(shù)據(jù)處理及圖譜9附件9-檢測限和定量限原始記錄、數(shù)據(jù)處理及圖譜10附件10-線性與范圍原始記錄、數(shù)據(jù)處理及圖譜11附件 11-耐用性原始記錄、數(shù)據(jù)處理及圖譜12附件 12-溶液穩(wěn)定性原始記錄、數(shù)據(jù)處理及圖譜13附件 13-手性異構(gòu)體測試原始記錄、數(shù)據(jù)處理及圖譜備注：備注：對本文件中的任何偏差進行完全記錄和/或調(diào)查。只有當(dāng)偏差的原因已經(jīng)確定，或可以歸結(jié)頁碼PAGE9 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT

17、 TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION為特定的原因，且能證明該數(shù)據(jù)不會使文件無效時，這個有偏差數(shù)據(jù)才可以接受，QA 有權(quán)決定是否接受偏差數(shù)據(jù)。NOTE:Any deviation to this protocol must be fully investigated and documented. These deviation data can not be acceptable until these causes are confirmed or specified and no impact on the result of validation .ultima

18、tely, QA person have the right to dermine if these are acceptable or not. 9.偏差列表偏差列表/DEVATIONS LIST記錄方案執(zhí)行過程中產(chǎn)生的每個偏差。Record the deviation during execution頁碼PAGE10 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION10.變更變更清單清單/CHANGE LIST記錄方案執(zhí)行過程中產(chǎn)生的每個變更。Record the change during execution頁碼

19、PAGE11 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION頁碼PAGE12 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION11.結(jié)論結(jié)論/建議建議 CONCLUSION/RECOMMENDATION由驗證小組組長檢查并確認(rèn)所有項目已經(jīng)完成，所有結(jié)果符合規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，真實有效， QA 人員已復(fù)核。最終結(jié)論：The validation leader should verify all the items have been completed

20、, And all the data are effective and real in accordance with defined specification. QA person have also checked all the items. Hence, terminal conclusion is given below: 通過 Pass不通過 FailRepoter/報告人: _ _ _ _ Date/日期: _Approval/批準(zhǔn)人: _ _ _ Date/日期: _ 頁碼PAGE13 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)

21、體檢驗方法驗證版本號REVISION12.報告的審批報告的審批/REPORT APPROVAL 完成文件中所有測試項目，測試結(jié)果及記錄完整，偏差已經(jīng) 糾正或偏差已被證明是可接受的，審批人員在下面的報告審核表上簽字表示已按照文件要求成功的完成。Complete all test items of file, test results and record integrity. Deviations have been amended or deviation has been proved to be acceptable. All the personnel to review this pr

22、ocotol should sign their name in the following form to show that all the validation activities are in accordance with the approved document.報告審批表報告審批表Report Approval Form職能職能Responsibilities姓名姓名Name部門部門Department簽名簽名/日期日期Signature and Date 編制編制Prepared by審核審核Reviewed by審核審核Reviewed by審核審核Reviewed by

23、批準(zhǔn)人批準(zhǔn)人Approved by:頁碼PAGE14 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION13.附件附件/ATTACHMENT頁碼PAGE15 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION附件附件 1SOP 確認(rèn)確認(rèn)1.1 目的目的/ Purpose確認(rèn)與驗證有關(guān)的 SOP 是否為現(xiàn)行的、有效的。1.2 程序程序/ Procedure根據(jù)方案檢查并記錄 SOP 的版本號、生效日期。1.3 可接收標(biāo)準(zhǔn)可接收標(biāo)準(zhǔn)/ Acceptan

24、ce Criteria與驗證有關(guān)的 SOP 是現(xiàn)行的、有效的。1.4 內(nèi)容內(nèi)容/ Contents項目項目Item實際結(jié)果實際結(jié)果Actual Result編編號號No.文件編號文件編號文件名稱文件名稱期望結(jié)果期望結(jié)果Expected Result版本號版本號生效日期生效日期符合規(guī)符合規(guī)定定Yes or No測試人測試人/日期日期Tested by/Date1對照品管理規(guī)程2色譜操作通用管理規(guī)程3色譜柱的使用管理規(guī)程4XXXXX 計操作和維護保養(yǎng)規(guī)程5XXXXX 液相色譜儀操作和維護保養(yǎng)規(guī)程6XXXXX 電子天平操作和維護保養(yǎng)規(guī)程該 SOP 是現(xiàn)行的、有效的。YesNo頁碼PAGE16 / 3

25、9文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION項目項目Item實際結(jié)果實際結(jié)果Actual Result編編號號No.文件編號文件編號文件名稱文件名稱期望結(jié)果期望結(jié)果Expected Result版本號版本號生效日期生效日期符合規(guī)符合規(guī)定定Yes or No測試人測試人/日期日期Tested by/Date7XXXXX 電子天平操作和維護保養(yǎng)規(guī)程8XXXXX 液相色譜儀操作和維護保養(yǎng)規(guī)程9XXXXX 電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱操作和維護保養(yǎng)規(guī)程10XXXXX 恒溫恒濕箱操作規(guī)程該 SOP 是現(xiàn)行的、有效的。YesNo注釋注釋/Co

26、mments：簽名/日期 Signature/Date:確認(rèn)結(jié)果 Confirmed Result 通過 Pass 不通過 Failure測試人測試人/Tested By日期日期/Date復(fù)核人復(fù)核人/Checked By日期日期/Date頁碼PAGE17 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION附件附件 2培訓(xùn)的確認(rèn)培訓(xùn)的確認(rèn)2.1 目的目的/ Purpose確認(rèn)有關(guān)人員是否已接受有關(guān)的 SOP 和驗證方案的培訓(xùn)，并能進行相關(guān)操作。2.2 程序程序/ Procedure檢查方案執(zhí)行人員的培訓(xùn)記錄。2.3 可可

27、接接收收標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)/ Acceptance Criteria有關(guān)人員已接受有關(guān)的 SOP 和驗證方案的培訓(xùn)，并能進行相關(guān)操作。2.4 內(nèi)容內(nèi)容/ Contents項目項目Item編編號號No.文件編號文件編號文件名稱文件名稱期望結(jié)果期望結(jié)果Expected Result實際結(jié)果實際結(jié)果Actual Result符合規(guī)符合規(guī)定定Yes or No測試人測試人/日期日期Tested by/Date1對照品管理規(guī)程2色譜操作通用管理規(guī)程3色譜柱的使用管理規(guī)程4XXXXX 計操作和維護保養(yǎng)規(guī)程5XXXXX 液相色譜儀操作和維護保養(yǎng)規(guī)程6XXXXX 電子天平操作和維護保養(yǎng)規(guī)程7XXXXX 電子天平操作和維

28、護保養(yǎng)規(guī)程8XXXXX 液相色譜儀操作和維護保養(yǎng)規(guī)程有關(guān)人員已接受驗證方案及 SOP的培訓(xùn)。Yes No頁碼PAGE18 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION項目項目Item編編號號No.文件編號文件編號文件名稱文件名稱期望結(jié)果期望結(jié)果Expected Result實際結(jié)果實際結(jié)果Actual Result符合規(guī)符合規(guī)定定Yes or No測試人測試人/日期日期Tested by/Date9XXXXX 電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱操作和維護保養(yǎng)規(guī)程10XXXXX 恒溫恒濕箱操作規(guī)程11XXXXX 有關(guān)物質(zhì)驗證方案有關(guān)

29、人員已接受驗證方案及 SOP的培訓(xùn)。Yes No注釋注釋/Comments：簽名/日期 Signature/Date:確認(rèn)結(jié)果 Confirmed Result 通過 Pass 不通過 Failure測試人測試人/Tested By日期日期/Date復(fù)核人復(fù)核人/Checked By日期日期/Date頁碼PAGE19 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION附件附件 3檢測用儀器的確認(rèn)檢測用儀器的確認(rèn)3.1 目的目的/ Purpose確認(rèn)方案實施過程中，需要用到的儀器是否經(jīng)過計量且在校期內(nèi)，電子天平是否在校期內(nèi)

30、，儀器是否在驗證校期內(nèi)。3.2 程序程序/ Procedure檢查方案實施過程中，需要用到的儀器是否經(jīng)過計量標(biāo)準(zhǔn)且在校期內(nèi)，電子天平是否在校期內(nèi)使用前經(jīng)過校正，儀器是否在驗證校期內(nèi)。3.3 可可接接收收標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)/ Acceptance Criteria方案實施過程中，需要用到的儀器經(jīng)過計量且在校期內(nèi)，電子天平在校期內(nèi)，儀器在驗證校期內(nèi)。3.4 內(nèi)容內(nèi)容/ Contents項目項目Item編號編號No.儀器編號儀器編號儀器名稱儀器名稱/型號型號期望結(jié)果期望結(jié)果Expected Result實際結(jié)果實際結(jié)果Actual Result符合規(guī)符合規(guī)定定Yes or No測試人測試人/日日期期Teste

31、d by/Date1XXXXX 酸度計2XXXXX 液相色譜儀3XXXXX 液相色譜儀4XXXXX 電子天平5XXXXX 電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱6XXXXX 恒溫恒濕箱電子天平在校期內(nèi)，儀器在驗證校期內(nèi)。YesNo注釋注釋/Comments：簽名/日期 Signature/Date:確認(rèn)結(jié)果 Confirmed Result 通過 Pass 不通過 Failure測試人測試人/Tested By日期日期/Date復(fù)核人復(fù)核人/Checked By日期日期/Date頁碼PAGE20 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVIS

32、ION附件附件 4試劑、供試品的確認(rèn)試劑、供試品的確認(rèn)4.1 目的目的/ Purpose確認(rèn)使用到的對照品、試劑是否均在效期內(nèi)。4.2 程序程序/ Procedure檢查方案實施過程中，需要用到的對照品、試劑等。4.3 可可接接收收標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)/ Acceptance Criteria使用到的對照品、試劑均在效期內(nèi)。4.4 內(nèi)容內(nèi)容/ Contents項目項目Item編編號號No.試劑編號試劑編號/批批號號試劑名稱試劑名稱/級別級別期望結(jié)期望結(jié)果果Expected Result實際結(jié)果實際結(jié)果Actual Result符合規(guī)定符合規(guī)定Yes or No測試人測試人/日日期期Tested by/Da

33、te1S-鹽酸達泊西?。ㄗ灾茖φ掌罚?R-鹽酸達泊西?。ㄗ灾茖φ掌罚?正己烷（HPLC）4異丙醇（HPLC）5無水乙醇（HPLC）6二乙胺（HPLC）使用到的試劑均在效期內(nèi)YesNo注釋注釋/Comments：簽名/日期 Signature/Date:確認(rèn)結(jié)果 Confirmed Result 通過 Pass 不通過 Failure測試人測試人/Tested By日期日期/Date復(fù)核人復(fù)核人/Checked By日期日期/Date頁碼PAGE21 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION附件附件 5專屬性測試

34、專屬性測試5.1 目的目的/ Purpose在可能存在其他成分（如原料、中間體、反應(yīng)副產(chǎn)物、降解產(chǎn)物等）時，采用的方法能準(zhǔn)確測定出被測物的特性。5.2 程序程序/ Procedure 光照破壞試驗：稱取適量供試品置一潔凈的小燒杯或培養(yǎng)皿中，于 4500lx500lx 的光照下24h 后，精密稱取供試品 50mg 置 50mL 容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。光照（溶液）破壞試驗：精密稱取供試品 15mg 置 25 容量瓶中，加入一定量的稀釋劑溶解供試品于 4500lx500lx 的光照下一段時間后，取出用流動相定容，搖勻，然后精密量取此溶液1.0，置于 10 容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，

35、搖勻。 熱（干）破壞試驗：稱取適量供試品至干燥皿中置于 1055溫度的烘箱中 24h 后，精密稱取供試品 50mg 置 50mL 容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。 供試品溶液：精密稱取供試品 50mg 置 50mL 容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。 熱（溶液）破壞試驗：精密稱取供試品 15.0mg 置 25 容量瓶中，加入一定量的流動相溶解供試品于 100水浴中加熱 60min，放冷至室溫，用流動相定容，搖勻，然后精密量取此溶液 1.0，置于 10 容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。分離度試驗： 定位溶液 A：取纈沙坦起始物料 10mg 置于 100mL 容量瓶中用稀釋液溶解后定容，

36、搖勻，再精密移取 1mL 此溶液至 100mL 容量瓶中用稀釋液溶解后定容，搖勻，進樣分析。 定位溶液 B：取 CV-1 10mg,置于 100mL 容量瓶中用稀釋液溶解后定容，搖勻，再精密移取1mL 此溶液至 100mL 容量瓶中用稀釋液溶解后定容，搖勻，進樣分析。 定位溶液 c：取 CV-2 10mg 置于 100mL 容量瓶中用稀釋液溶解后定容，搖勻，再精密移取1mL 此溶液至 100mL 容量瓶中用稀釋液溶解后定容，搖勻，進樣分析。 定位溶液 D：取纈沙坦雜質(zhì)對照品 C (RRT 0.7) 0.2mg 加入 1.0mL 稀釋液溶解后定容，搖勻，再精密移取 1mL 此溶液至 100mL

37、容量瓶中用稀釋液溶解后定容，搖勻，進樣分析。 定位溶液 E: 取纈沙坦異構(gòu)體對照品 5mg，分別置于 5mL 容量瓶中用稀釋液溶解后定容，搖勻，再精密移取 1mL 此溶液至 100mL 容量瓶中用稀釋液溶解后定容，搖勻，進樣分析。 定位溶液 F: 取纈沙坦對照品 5mg，分別置于 5mL 容量瓶中用稀釋液溶解后定容，搖勻，進頁碼PAGE22 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION樣分析。 混合溶液：精密稱取纈沙坦雜質(zhì)對照品溶液（含雜質(zhì) A)5.0mg，置于 5mlmL 容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻

38、（含有 1mg/mL 纈沙坦和含有 10ug/mL 纈沙坦異構(gòu)體） 全混溶液：精密稱取纈沙坦起始物料、CV-1、CV-2 各 10mg，雜質(zhì) C 對照品 20mg 置于100mL 容量瓶中, 精密稱取供試品 50mg,再精密移取此溶液 0.5mL 至 50mL 容量瓶中，用流動相溶解后定容，搖勻，進樣分析。5.3 可可接接收收標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)/ Acceptance Criteria 破壞性溶液中主峰與相鄰雜質(zhì)之間的分離度應(yīng)不少于 1.5，主峰峰純度不得少于 990；混合溶液中纈沙坦與纈沙坦異構(gòu)體之間的分離度應(yīng)不少于 2.0，主峰峰純度不得少于 990。5.4 內(nèi)容內(nèi)容/ Contents編編號號No

39、.項目項目Item主峰與雜主峰與雜質(zhì)峰的分質(zhì)峰的分離度離度破破壞壞實實驗驗溶液名稱溶液名稱主峰主峰含量含量%雜雜質(zhì)質(zhì)個個數(shù)數(shù) 與與前一前一個峰個峰與后與后一個峰一個峰主峰主峰的峰的峰純度純度期望結(jié)果期望結(jié)果Expected Result實際實際結(jié)果結(jié)果Actual Result符符合合規(guī)規(guī)定定Yes or No測試人測試人/日期日期Tested by/Date123456主峰與相鄰雜質(zhì)之間的分離度應(yīng)不少于 1.5，主峰峰純度不得少于 990。YesNo雜質(zhì)定位雜質(zhì)定位-單針定位單針定位名稱名稱RT理論理論塔板塔板數(shù)數(shù)峰純度峰純度1纈沙坦主峰峰純度不得少于990，理論塔板數(shù)不得少于 2000。Y

40、esNo頁碼PAGE23 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION2纈沙坦異構(gòu)體頁碼PAGE24 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION編編號號No.項目項目Item期望結(jié)果期望結(jié)果Expected Result實際結(jié)果實際結(jié)果Actual Result符合規(guī)定符合規(guī)定Yes or No測試人測試人/日期日期Tested by/Date雜質(zhì)定位雜質(zhì)定位-混合樣品混合樣品名稱名稱RTRRT分離度分離度1纈沙坦2 纈沙坦異構(gòu)體主峰

41、與相鄰雜質(zhì)之間的分離度應(yīng)不少于 2.0YesNo注釋注釋/Comments：簽名/日期 Signature/Date:確認(rèn)結(jié)果 Confirmed Result 通過 Pass 不通過 Failure測試人測試人/Tested By日期日期/Date復(fù)核人復(fù)核人/Checked By日期日期/Date頁碼PAGE25 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION附件附件 6重復(fù)性測試重復(fù)性測試6.1 目的目的/ Purpose確認(rèn)檢測方法的重復(fù)性滿足使用要求。6.2 程序程序/ Procedure由同一分析人員分別

42、配制 6 份濃度相同的同一批供試品溶液，按檢驗方法進行測試。6.3 可可接接收收標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)/ Acceptance Criteria6 次測定纈沙坦異構(gòu)體含量的絕對偏差不得過質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的 50%。6.4 內(nèi)容內(nèi)容/ Contents項目項目Item實際結(jié)果實際結(jié)果Actual Result編編號號No.進樣序列纈沙坦?jié)舛壤i沙坦異構(gòu)體含量(%)期望結(jié)果期望結(jié)果Expected Result符合規(guī)符合規(guī)定定Yes or No測試人測試人/日期日期Tested by/Date12345166 次測定纈沙坦異構(gòu)體含量的絕對偏差不得過質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的50%。YesNo注釋注釋/Comments：簽名/日期 Sig

43、nature/Date:確認(rèn)結(jié)果 Confirmed Result 通過 Pass 不通過 Failure測試人測試人/Tested By日期日期/Date復(fù)核人復(fù)核人/Checked By日期日期/Date頁碼PAGE26 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION附件附件 7精密度測試精密度測試7.1 目的目的/ Purpose確認(rèn)纈沙坦手性異構(gòu)體測試方法的精密度滿足使用要求。7.2 程序程序/ Procedure不同人/時間/儀器的精密度：按檢驗方法不同人不同時間不同儀器分析同一批供試品。7.3 可可接接收

44、收標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)/ Acceptance Criteria不同人/時間/儀器的精密度：兩人檢測結(jié)果的纈沙坦異構(gòu)體含量的絕對偏差不得過質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的50%。7.4 內(nèi)容內(nèi)容/ Contents項目項目Item實際結(jié)果實際結(jié)果Actual Result編編號號No.進樣序列纈沙坦?jié)舛壤i沙坦異構(gòu)體含量（%）期望結(jié)果期望結(jié)果Expected Result符合規(guī)符合規(guī)定定Yes or No測試人測試人/日期日期Tested by/Date12345重復(fù)性6進樣序列纈沙坦?jié)舛壤i沙坦異構(gòu)體含量（%）12345中間精密度612 次測定纈沙坦異構(gòu)體含量的絕對偏差不得過質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的 50%。YesNo頁碼PAGE27 / 3

45、9文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION注釋注釋/Comments：簽名/日期 Signature/Date:確認(rèn)結(jié)果 Confirmed Result 通過 Pass 不通過 Failure測試人測試人/Tested By日期日期/Date復(fù)核人復(fù)核人/Checked By日期日期/Date附件 8準(zhǔn)確度（回收率）測試8.1 目的目的/ Purpose確認(rèn)纈沙坦手性異構(gòu)體測試方法的準(zhǔn)確度滿足使用要求。8.2 程序程序/ Procedure 供試品溶液本底含量：精密稱取供試品 100mg 置 100mlmL 容量瓶中

46、，加流動相稀釋至刻度，搖勻。即得供試品溶液。進樣分析。平行配制兩份。對照品溶液： 按檢驗方法項下對照溶液項同時配制對照溶液，進樣分析。平行配制兩份。纈沙坦異構(gòu)體對照品貯備溶液：精密稱取纈沙坦異構(gòu)體對照品 10mg，置于 10mlmL 容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度。頁碼PAGE28 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION 80%水平溶液：精密稱取供試品 100mg 和加入雜質(zhì)對照品貯備溶液 0.8mlmL 置 100mlmL 容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，混勻，平行配制三份。100%水平溶液：精密稱取供試

47、品 100mg 和加入雜質(zhì)對照品貯備溶液 1.0mlmL 置 100mlmL 容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，混勻，平行配制三份。 120%水平溶液:精密稱取供試品 100mg 和加入雜質(zhì)對照品貯備溶液 1.2mlmL 置 100mlmL 容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，混勻，平行配制三份。8.3 可可接接收收標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)/ Acceptance Criteria根據(jù)纈沙坦異構(gòu)體的投入量和測得量計算回收率，各水平回收率均應(yīng)在 90% - 110%之間。8.4 內(nèi)容內(nèi)容/ Contents項目項目Item編編號號No.濃度水平濃度水平測得值測得值mg/mlmL理論值理論值mg/mlmL回收率回收率%平均

48、回收平均回收率率%期望期望結(jié)果結(jié)果Expected Result實際結(jié)果實際結(jié)果Actual Result符合規(guī)符合規(guī)定定Yes or No測試測試人人/日期日期Tested by/Date12380%456100%789纈沙坦異構(gòu)體120%各水平回收率均應(yīng)在90%-110%之間。YesNo注釋注釋/Comments：頁碼PAGE29 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION簽名/日期 Signature/Date:確認(rèn)結(jié)果 Confirmed Result 通過 Pass 不通過 Failure測試人測試人/

49、Tested By日期日期/Date復(fù)核人復(fù)核人/Checked By日期日期/Date附件附件 9檢測限與定量限測試檢測限與定量限測試9.1 目的目的/ Purpose確認(rèn)鹽酸達泊西汀纈沙坦手性異構(gòu)體測試方法的檢測限與定量限。9.2 程序程序/ Procedure檢測限系指供試品中被測物能被檢測出的最低量，以信噪比為 3：1 來確定檢測限的最低水平。定量限系指供試品中被測物能被定量檢測的最低量，以信噪比約為 10:1 來確定定量限水平。按檢驗方法項下對照溶液配制纈沙坦異構(gòu)體對照溶液，逐步稀釋法進樣分析，按信噪比計算檢測限和定量限。計算公式：標(biāo)準(zhǔn)溶液的信噪比=標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰高/噪音高度，或由液相

50、色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)計算給出。9.3 可可接接收收標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)/ Acceptance Criteria檢測限：信噪比約為 3。定量限：信噪比約為 10。五針峰面積的 RSD%應(yīng)不大于 5%。9.4 內(nèi)容內(nèi)容/ Contents頁碼PAGE30 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION項目項目Item定量限定量限檢測限檢測限編編號號No.雜質(zhì)雜質(zhì)濃度濃度g/mLmL平均信平均信噪比噪比峰面峰面積積RSD%濃度濃度g/mLmL信噪信噪比比期望結(jié)果期望結(jié)果Expected Result實際實際結(jié)果結(jié)果Actual Resu

51、lt符合規(guī)符合規(guī)定定Yes or No測試人測試人/日期日期Tested by/Date1纈沙坦異構(gòu)體定量限水平（LOQ）的信噪比約為10，檢測限（LOD）水平的信噪比約為 3, 5 針峰面積的RSD 應(yīng)不大于 5%；.檢測限（LOD）水平的信噪比約為 3。YesNo注釋注釋/Comments：簽名/日期 Signature/Date:確認(rèn)結(jié)果 Confirmed Result 通過 Pass 不通過 Failure測試人測試人/Tested By日期日期/Date復(fù)核人復(fù)核人/Checked By日期日期/Date附件附件 10線性測試線性測試10.1 目的目的/ Purpose通過纈沙坦有

52、關(guān)物質(zhì)線性的測試，得出其線性范圍。10.2 程序程序/ Procedure纈沙坦異構(gòu)體對照品貯備溶液：精密稱取纈沙坦 CV 異構(gòu)體對照品 10mg，置于 10mlmL頁碼PAGE31 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻。將以上貯備液均按下表稀釋至各容量瓶中，配制成線性溶液：線性水平各對照品貯備液（mlmL）稀釋后體積數(shù)（mlmL）150%1.5100120%1.2100100%1.010080%0.8100LOQ溶液 以上每個線性水平溶液進樣 3 針。以峰面積對溶劑

53、濃度的比值計算得出纈沙坦異構(gòu)體R-鹽酸達泊西汀的線性方程及相關(guān)系數(shù)。10.3 可可接接收收標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)/ Acceptance Criteria每個水平濃度連續(xù)進樣 3 針，各個濃度水平 3 針峰面積的 RSD 應(yīng)不大于 5.0%。以峰面積對溶劑濃度的比值，線性回歸，相關(guān)系數(shù)(r)應(yīng)不小于 0.999。10.4 內(nèi)容內(nèi)容/ Contents項目項目Item編號編號No.相對相對濃度濃度實際實際濃度濃度g/mLmL平均峰平均峰面積面積RSD%線性方線性方程及相程及相關(guān)系數(shù)關(guān)系數(shù)r期望結(jié)果期望結(jié)果Expected Result實際結(jié)果實際結(jié)果Actual Result符合規(guī)符合規(guī)定定Yes or No

54、測試人測試人/日期日期Tested by/Date1150%2120%3100%480%5LOQ各個濃度水平6 針峰面積的RSD 應(yīng)不大于5.0%，相關(guān)系數(shù)(r)應(yīng)不小于0.999。YesNo頁碼PAGE32 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION注釋注釋/Comments：簽名/日期 Signature/Date:確認(rèn)結(jié)果 Confirmed Result 通過 Pass 不通過 Failure測試人測試人/Tested By日期日期/Date復(fù)核人復(fù)核人/Checked By日期日期/Date附件附件 1

55、1耐用性測試耐用性測試11.1 目的目的/ Purpose確認(rèn)測試條件有小變動時，測試結(jié)果不受影響的承受程度，確認(rèn)檢測方法的耐用性滿足使用要求。11.2 程序程序/ Procedure 在下表所列變化的條件下（每次只改變一個參數(shù)） ，用同一個儀器系統(tǒng)，進樣混合溶液、對照品溶液和供試品溶液，記錄各雜質(zhì)峰分離度的變化。變化的參數(shù)水平 1水平 2（正常水平）水平 3頁碼PAGE33 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION磷酸鹽緩沖液:異丙醇96:498:2100:0流速0.9mL/min1mL/min1.1mL/m

56、in柱溫37353311.3 可可接接收收標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)/ Acceptance Criteria 在上述各個變化的條件下，混合溶液中纈沙坦和纈沙坦異構(gòu)體分離度不小于 2.0，供試品溶液中纈沙坦異構(gòu)體含量的變化不得大于質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的 20%，主峰理論塔板數(shù)不低于 2000。10.4 內(nèi)容內(nèi)容/ Contents項目項目Item編編號號No.色譜條件變化色譜條件變化纈沙坦纈沙坦異構(gòu)體異構(gòu)體含量含量（%）主峰與主峰與纈沙坦纈沙坦異構(gòu)體異構(gòu)體分離度分離度主峰理主峰理論塔板論塔板數(shù)數(shù)期望結(jié)果期望結(jié)果Expected Result實際結(jié)果實際結(jié)果Actual Result符合規(guī)定符合規(guī)定Yes or No測試人測

57、試人/日期日期Tested by/Date1正常條件YesNo4正己烷：異丙醇：三氟乙酸83:17:0.1YesNo5正己烷：異丙醇：三氟乙酸87:13:0.1YesNo6流速0.85mlmL/min7流速0.70mlmL/min柱溫 23YesNo柱溫 27混合溶液中纈沙坦和纈沙坦異構(gòu)體分離度不小于 2.0，供試品溶液中纈沙坦異構(gòu)體含量的變化不得大于質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的 20%，主峰理論塔板數(shù)不低于 2000YesNo頁碼PAGE34 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION注釋注釋/Comments： 簽名/日期 S

58、ignature/Date:確認(rèn)結(jié)果 Confirmed Result 通過 Pass 不通過 Failure測試人測試人/Tested By日期日期/Date復(fù)核人復(fù)核人/Checked By日期日期/Date附件附件 12溶液穩(wěn)定性測試溶液穩(wěn)定性測試12.1 目的目的/ Purpose確認(rèn)溶液穩(wěn)定性滿足使用要求。12.2 程序程序/ Procedure 按照分析方法分別配置對照品溶液與供試品溶液，平行測定兩次主成分與雜質(zhì)的含量，然后將上述溶液分別貯存在室溫與冰箱冷藏室（4）中，在 1、2、3、5 和 7 天時分別平行測定兩次主成分與雜質(zhì)的含量。12.3 可可接接收收標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)/ Accept

59、ance Criteria對照品溶液中將各時間點測得的主峰面積與 0 天相比較，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差不得過 2.0%。將各時間點測得的數(shù)據(jù)與 0 天相比較，供試品溶液中主成分的含量變化的絕對值應(yīng)不大于 2.0%，纈沙坦異構(gòu)體含量的變化值不得過質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的 50%。12.4 內(nèi)容內(nèi)容/ Contents項目項目 Item實際結(jié)果實際結(jié)果Actual Result對照品溶液穩(wěn)定性對照品溶液穩(wěn)定性編編號號No.時間時間峰面積峰面積期望結(jié)果期望結(jié)果Expected Result各時間點的主各時間點的主峰面積與峰面積與 0 天天相比較，相比較，RSD（%）符合規(guī)定符合規(guī)定Yes or No測試人測試人/日期日期Tested by/Date10 天21 天 將各時間點測得的主峰YesNo頁碼PAGE35 / 39文件編號DOCUMENT No.文件名DOCUMENT TITLE纈沙坦手性異構(gòu)體檢驗方法驗證版本號REVISION32 天43 天 55 天67 天面積與 0 天相比較，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差不得過2.0%。注釋注釋/Comments：簽名/日期 Signature/Date:確認(rèn)結(jié)果 Confirmed Result 通過Pass 不通過 Failure測試人測試人/Tested By日期日期/Date復(fù)核人復(fù)核人/Checked B