臨床檢驗基礎的現(xiàn)狀和特點

1、 緒緒 論論一、臨床檢驗基礎的現(xiàn)狀和特點一、臨床檢驗基礎的現(xiàn)狀和特點古代古代:感官檢查（如：尿液中世紀）感官檢查（如：尿液中世紀）17世紀世紀:荷蘭荷蘭leeuwenhoek發(fā)明顯微鏡發(fā)明顯微鏡 2020世紀末以來世紀末以來: :自然科學基礎學科與醫(yī)自然科學基礎學科與醫(yī)學基礎學科結合電腦化、自動化、學基礎學科結合電腦化、自動化、微量化微量化2121世紀：現(xiàn)代信息網絡技術（遠程診世紀：現(xiàn)代信息網絡技術（遠程診斷）與系統(tǒng)生物工程（包括分子生物斷）與系統(tǒng)生物工程（包括分子生物學）、臨床醫(yī)學結合。學）、臨床醫(yī)學結合。最常用的臨床檢驗，借助先進的檢測技最常用的臨床檢驗，借助先進的檢測技術，對來自離體的術

2、，對來自離體的血液、尿液、糞便血液、尿液、糞便以以及及分泌物和排泄物分泌物和排泄物等標本進行理學、化等標本進行理學、化學、病原學和顯微鏡形態(tài)學的檢查，學、病原學和顯微鏡形態(tài)學的檢查，以簡便、快以簡便、快速的檢測結速的檢測結果，基本滿果，基本滿足臨床醫(yī)學足臨床醫(yī)學檢驗檢驗篩檢篩檢疾疾病的需求。病的需求。臨床檢驗現(xiàn)代特征：臨床檢驗現(xiàn)代特征：1從手工從手工 自動化、電腦化檢測自動化、電腦化檢測 2 （point of care test， poct） 床邊檢測床邊檢測3試劑批量、配套、專業(yè)和多樣化試劑批量、配套、專業(yè)和多樣化 4. 4. 檢驗方法標準化檢驗方法標準化如：如：19661966年，成立年

3、，成立國際血液學標準化委員國際血液學標準化委員會會（international committee for international committee for standardization of hematology , standardization of hematology , icshicsh，源自，源自19631963年歐洲血液學協(xié)會標準年歐洲血液學協(xié)會標準化委員會）化委員會） 5全面質量保證全面質量保證 人員和物質人員和物質 檢驗分析前：檢驗分析前：標本的標本的采集、儲存采集、儲存和和轉運轉運過過程尤為重要。現(xiàn)認為，管理好這兩個環(huán)程尤為重要?，F(xiàn)認為，管理好這兩個環(huán)節(jié)，可降低節(jié)

4、，可降低70%70%的檢驗差錯率。的檢驗差錯率。(1)(1)標本采集原則標本采集原則保持離體標本保持離體標本質質和和量量的的完整性完整性（2 2）避免非疾病因素的干擾）避免非疾病因素的干擾生理變異：生理變異：第一類：不能控制的第一類：不能控制的生理變異生理變異年齡和性年齡和性別對檢驗影響為長期效應別對檢驗影響為長期效應第二類：相對能控制的第二類：相對能控制的生理變異，如食物、生理變異，如食物、藥物、情緒、狀態(tài)、體位和標本采集時藥物、情緒、狀態(tài)、體位和標本采集時間間等，對檢驗的影響多為短期效應。等，對檢驗的影響多為短期效應。1 1）飲食因素：剛進食、禁食、飲酒、吸煙）飲食因素：剛進食、禁食、飲酒

5、、吸煙2 2）藥物因素：方式、濃度）藥物因素：方式、濃度 二、臨床檢驗基礎的應用目的二、臨床檢驗基礎的應用目的 1為疾病為疾病診斷和鑒別診斷診斷和鑒別診斷提供實驗室提供實驗室檢測客觀依據(jù)檢測客觀依據(jù) 2.2.為疾病為疾病療效監(jiān)測和預后判斷療效監(jiān)測和預后判斷提供動態(tài)提供動態(tài)變化依據(jù)變化依據(jù) 3.3.為為預防疾病預防疾病提供檢測依據(jù)提供檢測依據(jù) 4.4.為為科學研究科學研究提供醫(yī)學檢驗基本數(shù)據(jù)、提供醫(yī)學檢驗基本數(shù)據(jù)、基本檢驗方法和操作技能?；緳z驗方法和操作技能。 三、學好臨床基礎檢驗的基本要求三、學好臨床基礎檢驗的基本要求1 1 掌握檢驗基礎理論掌握檢驗基礎理論2 2掌握檢驗實驗技能掌握檢驗實驗

6、技能3 3熟悉檢驗方法學評價熟悉檢驗方法學評價4 4了解檢驗項目參考值了解檢驗項目參考值 紅 細 胞 計 數(shù)紅 細 胞 計 數(shù) ( r b c )( r b c ) 參 考 值參 考 值男 性 ：男 性 ： ( 4 . 0( 4 . 0 5 . 5 )5 . 5 ) 1 01 01 21 2/ l/ l女性：女性：(3.5(3.55.0 )5.0 )1010 12 12/l /l 5 5熟悉檢驗項目臨床意義熟悉檢驗項目臨床意義 血液標本采集血液標本采集血液標本采集和抗凝劑選擇血液標本采集和抗凝劑選擇 全血全血：臨床血液學檢查：血細胞計數(shù)、分類：臨床血液學檢查：血細胞計數(shù)、分類血漿血漿：臨床生化

7、檢查（內分泌激素測定等）；：臨床生化檢查（內分泌激素測定等）；血栓與止血的檢查血栓與止血的檢查血清血清：除纖維蛋白原等凝血：除纖維蛋白原等凝血因子外，其他成分與血漿因子外，其他成分與血漿基本相同，多數(shù)臨床化學和基本相同，多數(shù)臨床化學和臨床免疫學檢查。臨床免疫學檢查。一、采血方法一、采血方法靜脈采血法靜脈采血法 ( (venipuncture for blood collectionvenipuncture for blood collection) ) 皮膚采血法皮膚采血法( (skin puncture for blood collectionskin puncture for blood

8、collection ) )真空采血法真空采血法 ( (vacuum tube for blood collectionvacuum tube for blood collection，負壓采血法負壓采血法) )。定量、安全、轉運方便定量、安全、轉運方便. .封封閉式采血閉式采血, ,無需容器轉移，減少溶血。真無需容器轉移，減少溶血。真空定量貯存試管適于不同的檢驗項目空定量貯存試管適于不同的檢驗項目 真空采血容器色澤及應用范圍真空采血容器色澤及應用范圍顏顏 色色 抗抗 凝凝 劑劑應應 用用 范范 圍圍灰草酸鹽、氟化鈉草酸鹽、氟化鈉 全血、血漿：血葡全血、血漿：血葡萄糖萄糖 黃血培養(yǎng)血培養(yǎng) 綠肝

9、素肝素全血、血漿：血氣全血、血漿：血氣紅血清：生化、免疫血清：生化、免疫 藍枸櫞酸鹽枸櫞酸鹽 全血、血漿，凝血全血、血漿，凝血檢查檢查 紫乙二胺四乙酸鹽乙二胺四乙酸鹽 全血、血漿、鉀鹽全血、血漿、鉀鹽用于血細胞、血小用于血細胞、血小板和血液學檢查板和血液學檢查 【方法學評價】【方法學評價】皮膚采血：易溶血、凝血和可能混入組皮膚采血：易溶血、凝血和可能混入組織液，重復性差。織液，重復性差。開放式采血開放式采血：操作環(huán)節(jié)多、不規(guī)范，易：操作環(huán)節(jié)多、不規(guī)范，易污染。污染。封閉式采血封閉式采血：操作規(guī)范，安全性、重復：操作規(guī)范，安全性、重復性好。性好?！举|量控制】【質量控制】 血標本采集是分析前質量控

10、制重要環(huán)節(jié)。血標本采集是分析前質量控制重要環(huán)節(jié)。1 1患者患者 2 2采血采血 靜脈采血：止血帶壓迫時間宜靜脈采血：止血帶壓迫時間宜小小于于1min 1min 3 3溶血溶血 4 4血標本處理原則血標本處理原則 及時運送檢測及時運送檢測。 保存：溫度和有效時間保存：溫度和有效時間5 5實驗結果分析實驗結果分析 采樣時采樣時：年齡、性別、飲食、藥物、時間：年齡、性別、飲食、藥物、時間二、抗凝劑選擇二、抗凝劑選擇1. 1. 乙二胺四乙酸（乙二胺四乙酸（ ethylenediamine ethylenediamine tetraacetic acid, tetraacetic acid, edtae

11、dta ）鹽）鹽 nana2 2c c1010h h1414o o8 8n n2 2+ca+ca2+2+ ac ac1010h h1212o o8 8n n2 2+2na+2na+ +2h+2h+ +特點：對血細胞形態(tài)、血小板計數(shù)影響很特點：對血細胞形態(tài)、血小板計數(shù)影響很?。ǖ绊懷“寰奂?。?。ǖ绊懷“寰奂８鶕?jù)根據(jù)國際血液學標準化委員會國際血液學標準化委員會( (icshicsh ) ) 19931993年文件建議，年文件建議，血細胞計數(shù)用血細胞計數(shù)用edta-k2edta-k2作抗凝劑（作抗凝劑（edta-k2-2h2o 1.5edta-k2-2h2o 1.52.2mg/ml2.

12、2mg/ml血液血液）。）。 2草酸鹽（草酸鹽（sodium oxalate）：對凝）：對凝血血v因子保護功能差，影響凝血酶原時間因子保護功能差，影響凝血酶原時間測定；草酸鹽與凝血酶鈣結合后形成的測定；草酸鹽與凝血酶鈣結合后形成的沉淀物，影響自動凝血儀的使用；高濃沉淀物，影響自動凝血儀的使用；高濃度鉀或鈉離子易使血細胞脫水皺縮，草度鉀或鈉離子易使血細胞脫水皺縮，草酸銨使血細胞膨脹。酸銨使血細胞膨脹。 3肝素肝素(heparin) 加強抗凝血酶加強抗凝血酶iii（antithrombin iii,at-iii）滅活絲氨酸）滅活絲氨酸蛋白酶的作用，從而蛋白酶的作用，從而阻止凝血酶阻止凝血酶形成，形

13、成，阻止血小板聚集等作用，抗凝力強。用阻止血小板聚集等作用，抗凝力強。用量量（152.5）u/ml血液血液。但?？伞５？梢鸢滓鸢准毎奂毎奂?，并使血涂片在羅氏染色，并使血涂片在羅氏染色（romanowskys staining）時產生藍）時產生藍色背景。色背景。 4 4枸櫞酸鹽枸櫞酸鹽 枸櫞酸鈉枸櫞酸鈉(trisodium (trisodium citrate)citrate)，能與血液中的鈣離子結合形成，能與血液中的鈣離子結合形成螯合物，從而阻止血液凝固。螯合物，從而阻止血液凝固。 2na2na3 3c c6 6h h5 5o o7 7+2ca+2ca2+2+ 2cac 2cac6

14、 6h h5 50 07 7- -+6na+6na+ + 抗凝力較弱?？鼓^弱?？鼓壤鼓壤? 9。多用于臨床。多用于臨床血液學檢查、血液保養(yǎng)（毒性?。?。血液學檢查、血液保養(yǎng)（毒性?。?。血液涂片制備和細胞染色血液涂片制備和細胞染色 一、血液涂片制備一、血液涂片制備厚薄適宜（與血量多少、推片速度有關），厚薄適宜（與血量多少、推片速度有關），頭體尾明顯：細胞分布要均勻頭體尾明顯：細胞分布要均勻血膜邊緣整齊（留一定空隙）血膜邊緣整齊（留一定空隙）二、血液細胞染色二、血液細胞染色（一）瑞氏染色法（一）瑞氏染色法 (wright(wrights stain)s stain)1 1瑞氏染料瑞氏染料

15、酸性染料伊紅（酸性染料伊紅（eosin, eeosin, e- -）堿性染料亞甲藍（堿性染料亞甲藍（methylene blue, mmethylene blue, m+ +；又名美藍）組成復合染料。又名美藍）組成復合染料。甲醇：溶解美藍和伊紅甲醇：溶解美藍和伊紅meme；固定細胞的形；固定細胞的形態(tài)；提高對染料的吸附作用。態(tài)；提高對染料的吸附作用。2 2染色原理染色原理 物理吸附、化學親和物理吸附、化學親和3 3phph值的影響值的影響 細胞各種成分多屬蛋白質，由于細胞各種成分多屬蛋白質，由于蛋白質系兩性電蛋白質系兩性電解質解質，所帶電荷隨溶液，所帶電荷隨溶液phph而定。而定。在在偏酸時正

16、電荷（偏酸時正電荷（h h）增多）增多，易與伊紅結合，易與伊紅結合，染色偏紅。染色偏紅。在在偏堿時負電荷增多偏堿時負電荷增多，易與美藍或天青結合，染，易與美藍或天青結合，染色偏藍。色偏藍。染料染料貯存時間愈久，染色效果愈好貯存時間愈久，染色效果愈好。染液貯存，必須加塞，以防止甲醇揮發(fā)和被氧化染液貯存，必須加塞，以防止甲醇揮發(fā)和被氧化成甲酸。成甲酸。加入甘油加入甘油, ,防止甲醇揮發(fā)，染色清晰防止甲醇揮發(fā)，染色清晰。（二）姬姆薩染色法（二）姬姆薩染色法姬姆薩染液：由姬姆薩染液：由天青、伊紅天青、伊紅組成。組成?！痉椒▽W評價】【方法學評價】 1.1.血涂片制備血涂片制備 手工推片法手工推片法: :

17、血量少、操作簡單、重復差。血量少、操作簡單、重復差。2.血液細胞染色血液細胞染色 瑞氏染色法：最經典、最常用瑞氏染色法：最經典、最常用 瑞氏瑞氏-姬姆薩復合染液：取長補短姬姆薩復合染液：取長補短 觀察紅細胞的形態(tài)及分布觀察紅細胞的形態(tài)及分布obseve erythrocyte form and distribution觀察白細胞形態(tài)觀察白細胞形態(tài)observe leukocyte form觀察血小板的形態(tài)觀察血小板的形態(tài)observe platelet form觀察有無寄生蟲觀察有無寄生蟲observe parasite第二章第二章 血液一般檢驗血液一般檢驗第一節(jié)第一節(jié) 紅細胞檢驗紅細胞檢驗紅

18、細胞（紅細胞（red blood cell ；erythrocyte）起 源 于 骨 髓 造 血 干 細 胞 （起 源 于 骨 髓 造 血 干 細 胞 （ c o l o n y forming unit-spleen，cfu-s）紅細胞的主要生理功能：通過胞內的血紅紅細胞的主要生理功能：通過胞內的血紅蛋白來實現(xiàn)的。蛋白來實現(xiàn)的。一、紅細胞計數(shù)一、紅細胞計數(shù)( (red blood cell countred blood cell count，rbcrbc) )【檢測原理】【檢測原理】 1手工顯微鏡法手工顯微鏡法2 2血液分析儀法血液分析儀法 利用電阻抗和（或）光散射原理利用電阻抗和（或）光散

19、射原理 紅細胞計數(shù)紅細胞計數(shù)2ml稀釋液稀釋液 充分混勻充分混勻 10ul血液血液 充池、靜止充池、靜止 鏡下計數(shù)鏡下計數(shù) 計算：計算：rbc/l=n510106200neubauer計數(shù)盤 3mm wbc wbc wbc wbc 1mm【方法學評價】【方法學評價】 1 1手工顯微鏡法手工顯微鏡法 2 2血液分析儀法血液分析儀法 為目前主要臨床檢驗細胞計數(shù)方法為目前主要臨床檢驗細胞計數(shù)方法變異系數(shù)（變異系數(shù)（coefficient of variation, cvcoefficient of variation, cv ）小。小?！举|量控制】【質量控制】1 1手工法手工法 誤差來源包括：標本、

20、操作、誤差來源包括：標本、操作、器材、固有誤差（計數(shù)域誤差）器材、固有誤差（計數(shù)域誤差）2 2儀器法儀器法 嚴格按操作規(guī)程；定期作室內和室間質控。嚴格按操作規(guī)程；定期作室內和室間質控。 【參考值】【參考值】 成年：成年： 男性男性 (4(45.5)5.5)10101212/l/l 女性女性 (3.5(3.55.0)5.0)10101212/l/l 新生兒新生兒 (6.07.0)1012/l。 【臨床意義】【臨床意義】 1 1生理性變化生理性變化 (1)(1)年齡與性別的差異年齡與性別的差異(2)(2)精神因素精神因素(3)(3)劇烈體力運動和勞動劇烈體力運動和勞動(4)(4)氣壓降低氣壓降低(

21、5)(5)妊娠中、后期妊娠中、后期2 2病理性變化病理性變化（1 1）紅細胞和血紅蛋白量減少：在臨床）紅細胞和血紅蛋白量減少：在臨床最常見于最常見于各種原因的貧血各種原因的貧血。1 1）急性、慢性紅細胞丟失過多：如各種）急性、慢性紅細胞丟失過多：如各種原因的出血。原因的出血。2 2）紅細胞壽命縮短：如各種原因的溶血）紅細胞壽命縮短：如各種原因的溶血 3 3）造血原料不足）造血原料不足4 4）骨髓造血功能減退）骨髓造血功能減退（2 2）紅細胞增多）紅細胞增多 1 1）原發(fā)性原發(fā)性紅細胞增多：見于真性紅細胞紅細胞增多：見于真性紅細胞增多癥、良性家族性紅細胞增多癥等。增多癥、良性家族性紅細胞增多癥等

22、。2 2）繼發(fā)性紅細胞增多：常見于可以引起）繼發(fā)性紅細胞增多：常見于可以引起低氧血癥低氧血癥的疾?。盒难懿?、肺疾病、的疾病：心血管病、肺疾病、異常血紅蛋白病。異常血紅蛋白病。腎上腺皮質功能亢進（庫欣?。?，可能與腎上腺皮質功能亢進（庫欣?。赡芘c皮質激素刺激骨髓使紅細胞生成偏高有皮質激素刺激骨髓使紅細胞生成偏高有關、關、藥物藥物腎上腺素、糖皮質激素、腎上腺素、糖皮質激素、雄激雄激素素等。等。(3(3）相對性紅細胞增多）相對性紅細胞增多二、血紅蛋白二、血紅蛋白( (hemoglobin, hb或或hgb) )測定測定（一）血紅蛋白分子結構及成分（一）血紅蛋白分子結構及成分 色素：亞鐵血紅素色素

23、：亞鐵血紅素 原卟啉和鐵原子原卟啉和鐵原子組成的一種結合物，合組成的一種結合物，合成受成受-氨基氨基-酮戊酸合成酶（酮戊酸合成酶（-aminolevulinic acid synthetase）、血紅）、血紅素本身和素本身和fefe2+2+的調節(jié)。的調節(jié)。蛋白質：珠蛋白蛋白質：珠蛋白血紅蛋白的結構血紅蛋白的結構construction of hemoglobin 卟啉 卟啉 fe 卟啉 卟啉 珠蛋白珠蛋白 在正常狀態(tài)，在正常狀態(tài)，機體有機體有99% hb99% hb的 鐵 原 子 呈的 鐵 原 子 呈fefe2 +2 +狀態(tài)，稱狀態(tài)，稱為還原為還原h(huán)b ,1%hb ,1%的的 fefe3+3+

24、為高鐵為高鐵血紅蛋白，只血紅蛋白，只有亞鐵狀態(tài)的有亞鐵狀態(tài)的hbhb才能與氧結才能與氧結合，此時稱合，此時稱氧氧合血紅蛋白合血紅蛋白。( (二二) )血紅蛋白的合成血紅蛋白的合成血紅蛋白的合成受激素的調節(jié)。血紅蛋白的合成受激素的調節(jié)。紅細胞生成素紅細胞生成素：促：促-氨基氨基-酮戊酸（酮戊酸（-aminolevulinic acidaminolevulinic acid，alaala）生成與鐵）生成與鐵的利用，促血紅素和的利用，促血紅素和hbhb的合成；的合成；雄激素雄激素：在人體不同生長時期，：在人體不同生長時期，hbhb種類與種類與比例不同。比例不同?！緳z測原理】【檢測原理】血紅蛋白形式：

25、血紅蛋白形式：氧合血紅蛋白（氧合血紅蛋白（oxyhemoglobinoxyhemoglobin）碳氧血紅蛋白（碳氧血紅蛋白（carboxyhemoglobincarboxyhemoglobin）高鐵血紅蛋白（高鐵血紅蛋白（hemiglobinhemiglobin，hihi）其他衍生物其他衍生物1 1氰化高鐵血紅蛋白氰化高鐵血紅蛋白（hemiglobincyanide, hemiglobincyanide, hicnhicn ）測定法）測定法 吸收波峰：吸收波峰：540nm540nm 2 2其他測定法：其他測定法： 疊氮高鐵血紅蛋白法（疊氮高鐵血紅蛋白法（hemiglobin hemiglobi

26、n azide,hinazide,hin3 3）堿羥血紅蛋白測定法堿羥血紅蛋白測定法沙利（沙利（sahlisahli，已經淘汰，已經淘汰）血紅蛋白測定法）血紅蛋白測定法【方法學評價】【方法學評價】19661966年，年，icshicsh氰化高鐵血紅蛋白測定法作為國際氰化高鐵血紅蛋白測定法作為國際標準參考方法。標準參考方法。 hicnhicn法簡便、顯色快而穩(wěn)定法簡便、顯色快而穩(wěn)定?？蓹z測除硫化血紅蛋白（可檢測除硫化血紅蛋白（sulphon hemoglobin, sulphon hemoglobin, shb shb ）外的各種血紅蛋白。）外的各種血紅蛋白。 氰化鉀（氰化鉀（potassium

27、 cyanidepotassium cyanide，kcnkcn）有劇毒）有劇毒十二烷基硫酸鈉血紅蛋白（十二烷基硫酸鈉血紅蛋白（sodium dodecyl sodium dodecyl sulfate, sdssulfate, sds）測定法：除）測定法：除shbshb外，血液中各外，血液中各種種hbhb均可與低濃度均可與低濃度sdssds作用，生成作用，生成sds-hbsds-hb棕紅棕紅色化合物。吸收曲線波峰在色化合物。吸收曲線波峰在538nm538nm，波谷在，波谷在500nm500nm，肩峰在，肩峰在560nm560nm。無公害。破壞白細胞，。無公害。破壞白細胞，不適于不適于同時用于

28、有白細胞計數(shù)和同時用于有白細胞計數(shù)和hbhb測定的血細測定的血細胞分析儀上使用。胞分析儀上使用。 疊氮高鐵血紅蛋白（疊氮高鐵血紅蛋白（hin3）測定法：具）測定法：具有與有與hicn測定法相似的優(yōu)點，測定法相似的優(yōu)點，hbco轉轉化慢。化慢。堿羥血紅蛋白堿羥血紅蛋白(ahd 575)(ahd 575)測定法測定法沙利法為傳統(tǒng)血紅蛋白測定法，已淘汰。沙利法為傳統(tǒng)血紅蛋白測定法，已淘汰?！举|量控制】【質量控制】血標本、方法、器材、采血部位血標本、方法、器材、采血部位 【參考值】【參考值】 成年：男性成年：男性120120160g /l160g /l女性：女性：110110150g/l150g/l新

29、生兒：新生兒：170170200g/l200g/l老年（老年（7070歲以上）：歲以上）：男性：男性：94.294.2122.2g/l122.2g/l女性：女性：86.586.5111.8g/l111.8g/l【臨床意義】【臨床意義】 與紅細胞計數(shù)相似，但與紅細胞計數(shù)相似，但對貧血程對貧血程度判斷的準確性優(yōu)于度判斷的準確性優(yōu)于紅細胞計數(shù)。紅細胞計數(shù)。三、紅細胞形態(tài)檢查三、紅細胞形態(tài)檢查 【方法學評價】【方法學評價】 雖然雖然血細胞分析儀廣泛用于全血細胞計血細胞分析儀廣泛用于全血細胞計數(shù)，但觀察血涂片可用于估計相應血數(shù)，但觀察血涂片可用于估計相應血細胞數(shù)量，因而細胞數(shù)量，因而顯微鏡細胞數(shù)量和形顯

30、微鏡細胞數(shù)量和形態(tài)的觀察態(tài)的觀察現(xiàn)常作為對儀器分析質控的現(xiàn)常作為對儀器分析質控的參考對照參考對照。注意：注意：如果血片制作不良和染色不佳，如果血片制作不良和染色不佳，常使細胞鑒別發(fā)生困難，甚至導致錯常使細胞鑒別發(fā)生困難，甚至導致錯誤結論。誤結論?！举|量控制】【質量控制】 選擇細胞分布均勻的區(qū)域：選擇細胞分布均勻的區(qū)域：紅細胞堆積棒狀穿錢狀：細胞過于密集但如紅細胞堆積棒狀穿錢狀：細胞過于密集但如果在血涂片較薄的區(qū)域出現(xiàn)：可能是紅細果在血涂片較薄的區(qū)域出現(xiàn)：可能是紅細胞外附有異型球胞外附有異型球 蛋白蛋白注意完整的檢查注意完整的檢查順序順序 觀察紅細胞觀察紅細胞 observe erythrocy

31、te色素色素colour大小大小size形態(tài)形態(tài)shape異常結構異常結構abnormal structure 正常紅細胞正常紅細胞normal erythrocytered cell observed under electric microscope【臨床意義】【臨床意義】 1.1.紅細胞大小不一紅細胞大小不一 （1 1） 小紅細胞小紅細胞(microcyte)(microcyte)：6m6m（2 2） 大紅細胞大紅細胞(macrocyte)(macrocyte)：10m10m。常見于巨幼細胞性貧血、溶血性貧血、常見于巨幼細胞性貧血、溶血性貧血、惡性貧血等。惡性貧血等。（3 3） 巨紅細胞

32、巨紅細胞(megalocyte)(megalocyte)：15m15m （4）紅細胞大小）紅細胞大小不均不均(anisocytosis)：同一患者紅細胞同一患者紅細胞之間直徑相差一之間直徑相差一倍以上。如大達倍以上。如大達12m，小僅，小僅2.5m。常見于。常見于嚴重的增生性貧嚴重的增生性貧血，血，巨幼細胞性巨幼細胞性貧血貧血時尤為明顯。時尤為明顯。 2. 2.紅細胞內血紅蛋白含量改變紅細胞內血紅蛋白含量改變（1 1）正常色素性）正常色素性(normochromic)(normochromic)：見于急性失：見于急性失血、再生障礙性貧血、白血病等。血、再生障礙性貧血、白血病等。（2 2）低色素

33、性）低色素性(hypochromic)(hypochromic)：見于缺鐵性貧血、：見于缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血、鐵幼粒細胞性貧血，珠蛋白生成障礙性貧血、鐵幼粒細胞性貧血，某些血紅蛋白病。某些血紅蛋白病。（3 3）高色素性）高色素性(hyperchromic)(hyperchromic)： 最常見于巨幼最常見于巨幼細胞性貧血。細胞性貧血。（4 4）多色性）多色性(polychromatic)(polychromatic)：剛脫核而尚未完：剛脫核而尚未完全成熟的紅細胞，體積較大。正常人外周血占全成熟的紅細胞，體積較大。正常人外周血占1%1%左右。尤見于溶血性或急性失血性貧血。左右。尤見于

34、溶血性或急性失血性貧血。（5）細胞著色不一（）細胞著色不一（anisochromia）：雙形性）：雙形性貧血（貧血（dimorphic anemia）,多見于鐵粒幼紅多見于鐵粒幼紅細胞性貧血。細胞性貧血。 5 5紅細胞形狀改紅細胞形狀改變變（1 1） 球形紅細胞球形紅細胞(spherocyte)(spherocyte)：見于見于遺傳性遺傳性和獲和獲得性球形細胞增得性球形細胞增多癥（如多癥（如自身免自身免疫溶血性貧血疫溶血性貧血或或直接理化損傷如直接理化損傷如燒傷等）。燒傷等）。（2 2） 橢圓形紅細胞橢圓形紅細胞(elliptocyte)(elliptocyte)：見于：見于遺傳性遺傳性橢圓形

35、細胞增多癥、大細胞性貧橢圓形細胞增多癥、大細胞性貧血；偶見于缺鐵性貧血、骨髓纖維化、血；偶見于缺鐵性貧血、骨髓纖維化、巨幼細胞貧血、鐮形細胞性貧血。正常巨幼細胞貧血、鐮形細胞性貧血。正常人血液約占人血液約占1%1%。（3 3） 靶形細胞靶形細胞(target cell)(target cell)：常見于各種低常見于各種低色素性貧血、色素性貧血、尤見于尤見于珠蛋白珠蛋白生成障礙性貧生成障礙性貧血血、hbchbc病，及病，及阻塞性黃疸、阻塞性黃疸、脾切除后。脾切除后。（4 4） 口形紅細胞口形紅細胞(stomatocyte)(stomatocyte)：常見于口形紅細常見于口形紅細胞增多癥，小兒胞增

36、多癥，小兒消化系統(tǒng)疾患引消化系統(tǒng)疾患引起的貧血及酒清起的貧血及酒清中毒、某些溶血中毒、某些溶血性貧血、肝病。性貧血、肝病。（5 5） 鐮形紅細鐮形紅細胞胞(sickle (sickle cell)cell)：鐮狀細鐮狀細胞貧血（胞貧血（hbs-shbs-s，hbs-chbs-c），），在缺在缺氧的條件下，氧的條件下，可有大量鐮狀可有大量鐮狀紅細胞。紅細胞。（ 6 6 ） 棘 紅 細 胞棘 紅 細 胞(acanthocyte)(acanthocyte)：見于見于遺傳性遺傳性或獲得或獲得性性-脂蛋白缺乏脂蛋白缺乏癥癥；于脾切除后、；于脾切除后、酒精中毒性肝臟疾酒精中毒性肝臟疾病、尿毒癥。病、尿毒癥

37、。棘紅細胞應與棘紅細胞應與皺縮紅皺縮紅細胞細胞（也稱（也稱鋸齒狀鋸齒狀紅 細 胞紅 細 胞 ） 區(qū) 別） 區(qū) 別（crenated cell, crenated cell, echinocyteechinocyte）。）。（7 7） 新月形紅細胞（新月形紅細胞（meniscocytemeniscocyte）：見）：見于某些溶血性貧血（如陣發(fā)性睡眠性血于某些溶血性貧血（如陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥），其意義不明。正常人無。紅蛋白尿癥），其意義不明。正常人無。（8 8） 淚滴形紅淚滴形紅細 胞 （細 胞 （ t e a r t e a r drop celldrop cell）：）：可能是細胞內可能

38、是細胞內含有含有heinzheinz小小體或包涵體所體或包涵體所致。見于貧血、致。見于貧血、骨髓纖維化癥骨髓纖維化癥，偶見正常人。偶見正常人。 （9 9） 緡錢狀紅細胞緡錢狀紅細胞(rouleaux formation)(rouleaux formation)：見于血漿中纖維蛋白原和免疫球蛋白增高性等見于血漿中纖維蛋白原和免疫球蛋白增高性等疾病。疾病。（1010）裂紅細胞）裂紅細胞(schistocyte)(schistocyte)：紅細胞碎片：紅細胞碎片（cell fragmentscell fragments），有各種形態(tài)如刺形），有各種形態(tài)如刺形(burr)(burr)、盔形、盔形(he

39、lmet)(helmet)等。見于彌漫性血管內等。見于彌漫性血管內凝血、微血管病性溶血性貧血、重型珠蛋白生凝血、微血管病性溶血性貧血、重型珠蛋白生成障礙性貧血、巨幼細胞性貧血、嚴重燒傷。成障礙性貧血、巨幼細胞性貧血、嚴重燒傷。正常人正常人2%2%。（1111）紅細胞形態(tài)不整）紅細胞形態(tài)不整(poikilocytosis) (poikilocytosis) 在某在某些感染或嚴重貧血時多見，最常見于巨幼細胞些感染或嚴重貧血時多見，最常見于巨幼細胞性貧血。性貧血。（ 1 2 )1 2 ) 有 核 紅 細 胞有 核 紅 細 胞 ( n u c l e a t e d ( n u c l e a t e

40、 d erythrocyte) erythrocyte) 即幼稚紅細胞。正常時，即幼稚紅細胞。正常時，1 1周之內嬰幼兒周之內嬰幼兒血片中可見到少量有核血片中可見到少量有核紅細胞，紅細胞，在成人為病理情況在成人為病理情況。1 1）溶血性貧血：最常見。）溶血性貧血：最常見。表明骨髓有良表明骨髓有良好的調節(jié)功能。好的調節(jié)功能。2 2）造血系統(tǒng)）造血系統(tǒng)惡性惡性疾患或骨髓轉移性腫瘤：疾患或骨髓轉移性腫瘤：見于各種急、慢性白血病及紅白血病。見于各種急、慢性白血病及紅白血病。3 3）脾切除后）脾切除后 4 4紅細胞內出現(xiàn)異常結構紅細胞內出現(xiàn)異常結構（1 1）嗜堿性點彩紅細胞（）嗜堿性點彩紅細胞（baso

41、philic basophilic stippling cellstippling cell）：重金屬損傷細胞膜）：重金屬損傷細胞膜使嗜堿性物質凝集。嗜堿性物質變性，使嗜堿性物質凝集。嗜堿性物質變性，血紅蛋白合成過程中，原卟啉與亞鐵結血紅蛋白合成過程中，原卟啉與亞鐵結合受阻，以合受阻，以鉛鉛的作用最為明顯，常作為的作用最為明顯，常作為鉛中毒鉛中毒診斷篩選指標。診斷篩選指標。（1 1） 豪焦小體豪焦小體(howell(howelljollyjollys body)s body)：又：又稱為稱為染色質小體染色質小體。見于脾切除術后、無脾癥、。見于脾切除術后、無脾癥、脾萎縮、脾功能低下、紅白血病和某

42、些貧血患脾萎縮、脾功能低下、紅白血病和某些貧血患者；在者；在巨幼細胞貧血巨幼細胞貧血時更易見到。時更易見到。（2 2） 卡波環(huán)卡波環(huán)(cabot ring)(cabot ring)：現(xiàn)認為可能是：現(xiàn)認為可能是胞質胞質脂蛋白變性脂蛋白變性，常與豪焦小體同時存在。，常與豪焦小體同時存在。（3）寄生蟲：）寄生蟲：瘧原蟲、微瘧原蟲、微絲蚴、絲蚴、 杜利什曼原杜利什曼原蟲感染時可蟲感染時可見紅見紅 細胞質內相細胞質內相應病原體。應病原體。 四、血細胞比容測定四、血細胞比容測定血細胞比容（血細胞比容（hematocrit, hct，ht,hct 或或packed cell volume, pcv） 離心后

43、血液分層離心后血液分層 layer after blood centrifugated 血漿血漿plasm 血小板血小板platlet 白細胞白細胞white cell還原血紅蛋白還原血紅蛋白reduced hemoglobin 含氧紅細胞含氧紅細胞oxygen red cell【檢測原理】【檢測原理】 1 1wintrobewintrobe法法2.2.微量法（微量法（microhematocritmicrohematocrit）3 3血液分析儀法血液分析儀法 hct = rbc紅細胞平均體積（紅細胞平均體積（mcv） 【方法學評價】【方法學評價】 1 1手工法手工法 手工測定血細胞比容的方法

44、較手工測定血細胞比容的方法較多，如折射計法、粘度法、比重測定法、多，如折射計法、粘度法、比重測定法、離心法和離心法和放射性核素法放射性核素法（最準確，（最準確，icshicsh定定為參考方法）。為參考方法）。溫氏法（溫氏法（wintrobewintrobe法），已屬淘汰之列法），已屬淘汰之列。 微量離心法：微量離心法：whowho定為首選常規(guī)方法定為首選常規(guī)方法。 2 2血液分析儀法血液分析儀法 目前目前常用方法。常用方法。注意：注意：當患者為紅細胞增多癥或血漿滲透壓異常當患者為紅細胞增多癥或血漿滲透壓異常時，儀器法常會出現(xiàn)誤差。時，儀器法常會出現(xiàn)誤差?！举|量控制】【質量控制】 1.1.手工法

45、手工法 避免以下因素：避免以下因素：抗凝劑量抗凝劑量不不準確，準確，混勻混勻不充分，不充分，離心離心速度不夠。速度不夠。2.2.血液分析儀法血液分析儀法 注意注意hcthct是否與紅細是否與紅細胞計數(shù)和紅細胞平均體積測定值的胞計數(shù)和紅細胞平均體積測定值的相相關性關性。 【參考值】【參考值】 wintrobewintrobe法：法：男性男性0.40.40.540.54女性女性0.370.370.47 0.47 微量法：微量法：男性男性0.470.470.040.04女性女性0.420.05 【臨床意義】【臨床意義】 1 1用于計算紅細胞用于計算紅細胞3 3個平均指數(shù)個平均指數(shù)2 2評估血漿容量稀

46、釋濃縮程度評估血漿容量稀釋濃縮程度五、紅細胞平均指數(shù)五、紅細胞平均指數(shù)紅細胞平均容積紅細胞平均容積（mean corpuscular volume, mean corpuscular volume, mcvmcv），指每個紅細胞平均體積的大小，以），指每個紅細胞平均體積的大小，以飛飛升（升（flfl）為單位為單位紅細胞血平均紅蛋白含量紅細胞血平均紅蛋白含量(mean corpuscular (mean corpuscular hemoglobin, mch)hemoglobin, mch)，指每個紅細胞內平均所含，指每個紅細胞內平均所含血紅蛋白的量，以血紅蛋白的量，以皮克（皮克（pgpg）為單

47、位為單位紅細胞平均血紅蛋白濃度紅細胞平均血紅蛋白濃度(mean corpuscular hemoglobin concentration, mchcmchc)，指平均，指平均每升紅細胞中所含血紅蛋白濃度每升紅細胞中所含血紅蛋白濃度（g/lg/l）。 1 1手工法手工法 對同一抗凝血標本同時作對同一抗凝血標本同時作紅細胞計數(shù)、紅細胞計數(shù)、血紅蛋白測定和血細胞比容測定。血紅蛋白測定和血細胞比容測定。 （1 1） 每升血液中紅細胞體積每升血液中紅細胞體積 hcthct mcv= mcv= = = （flfl） 每升血液中紅細胞個數(shù)每升血液中紅細胞個數(shù) rbcrbc （2 2） 每升血液中血紅蛋白含量

48、每升血液中血紅蛋白含量 hbhb mch= mch= = = （pgpg） 每升血液中紅細胞個數(shù)每升血液中紅細胞個數(shù) rbcrbc （3 3） 每升血液中血紅蛋白含量每升血液中血紅蛋白含量 hbhb mchc= mchc= = = 每升血液中血細胞比容每升血液中血細胞比容 hct 2血液分析儀血液分析儀 能直接導出能直接導出mcv的值的值，再結合儀器直接測定的再結合儀器直接測定的rbc和和hb，計算出計算出mch和和mchc mch=hb/rbc mchc=hb/rbcmcv 【方法學評價】【方法學評價】 1.mcv 1.mcv 血液分析儀設定的血液分析儀設定的mcvmcv值最大域值是值最大域

49、值是360fl360fl，可能包含，可能包含紅細胞團塊紅細胞團塊，當紅細胞凝集，當紅細胞凝集如冷凝集綜合征可引起如冷凝集綜合征可引起mcvmcv假性增高；嚴重的假性增高；嚴重的高血糖癥（葡萄糖高于高血糖癥（葡萄糖高于600mg/l600mg/l）可引起紅細）可引起紅細胞腫脹，使胞腫脹，使mcvmcv假性增高假性增高。儀器法。儀器法cvcv小于小于1%1%，手工法手工法cvcv在在10%10%左右。左右。2.mch 2.mch 高脂血癥或白細胞增多癥因血漿濁度增高脂血癥或白細胞增多癥因血漿濁度增加而使加而使mchmch假性增高。假性增高。3.mchc mchc 手工法手工法mchcmchc的測定

50、受到的測定受到hcthct（血漿殘留或（血漿殘留或出現(xiàn)異常紅細胞）和出現(xiàn)異常紅細胞）和hbhb（高脂蛋白血癥、白細（高脂蛋白血癥、白細胞增多癥）的影響。胞增多癥）的影響。 【質量控制】【質量控制】1.1.手工法手工法 紅細胞計數(shù)、血紅蛋白、血細胞比容紅細胞計數(shù)、血紅蛋白、血細胞比容的測定必須用同一抗凝血標本，且所測定的數(shù)的測定必須用同一抗凝血標本，且所測定的數(shù)據(jù)必須準確。據(jù)必須準確。2.2.血液分析儀法血液分析儀法 必須注意紅細胞必須注意紅細胞3 3個平均指數(shù)個平均指數(shù)之間及與紅細胞計數(shù)、血紅蛋白、血細胞比容之間及與紅細胞計數(shù)、血紅蛋白、血細胞比容測定測定3 3個指標之間的個指標之間的相互關聯(lián)

51、性相互關聯(lián)性。3.用于用于xb分析法或浮動均值法分析法或浮動均值法血液分析儀的質量血液分析儀的質量控制：控制：mchc是最為穩(wěn)定的指標是最為穩(wěn)定的指標；任何一個參；任何一個參數(shù)如有數(shù)如有3次次3%,或連續(xù)五次有或連續(xù)五次有2%3%的變異，的變異，即表明儀器失控。用浮動均值法進行質控，即表明儀器失控。用浮動均值法進行質控，每每天標本天標本60份。份。 【參考值】【參考值】 手工法：手工法：mcv 80mcv 8092fl92fl；mch 27mch 2731pg31pg； mchcmchc：320320360g/l360g/l。 血液分析儀法：血液分析儀法：mcv 80100fl；mch 273

52、4pg；mchc：320360g/l 貧血分類貧血分類mcvmcvmchmchmchcmchc貧血貧血正細胞貧正細胞貧血血正常正常 正常正常正常正常再生障礙性貧血、急性失再生障礙性貧血、急性失血性貧血、某些溶血性血性貧血、某些溶血性大細胞貧大細胞貧血血增高增高 增高增高正常正常各種造血物質缺乏或利用各種造血物質缺乏或利用不良的貧血不良的貧血單純小細單純小細胞貧血胞貧血減低減低減低減低正常正常慢性感染、慢性肝腎疾病慢性感染、慢性肝腎疾病性貧血性貧血小細胞低小細胞低色素貧血色素貧血減低減低 減低減低減低減低 缺鐵性貧血及鐵利用不良缺鐵性貧血及鐵利用不良貧血，慢性失血性貧血貧血，慢性失血性貧血貧血的

53、紅細胞形態(tài)學分類貧血的紅細胞形態(tài)學分類紅細胞平均值必須紅細胞平均值必須結合血液涂片結合血液涂片來觀察紅細胞形態(tài)才能得來觀察紅細胞形態(tài)才能得出較為準確的診斷。出較為準確的診斷。 六、紅細胞體積分布寬度六、紅細胞體積分布寬度 紅細胞體積分布寬度紅細胞體積分布寬度(red blood cell (red blood cell volume distribution width, rdw)volume distribution width, rdw)由血由血液分析儀根據(jù)紅細胞體積的直方圖導出，液分析儀根據(jù)紅細胞體積的直方圖導出，反映所測標本中紅細胞體積大小的異質反映所測標本中紅細胞體積大小的異質程度，

54、常用變異系數(shù)（程度，常用變異系數(shù)（cvcv）表示。它比）表示。它比血涂片上紅細胞形態(tài)大小不均的觀察更血涂片上紅細胞形態(tài)大小不均的觀察更為客觀和準確。為客觀和準確。 【檢測原理】【檢測原理】 【方法學評價】【方法學評價】儀器法測定了儀器法測定了數(shù)萬個數(shù)萬個紅細胞后，紅細胞后，由直方圖由直方圖導出導出rdwrdw，更準確、更客觀地反映，更準確、更客觀地反映紅細胞紅細胞體積的異質性的程度體積的異質性的程度。但。但mcvmcv值值只反映只反映紅紅細胞細胞平均體積平均體積大小，大小，不能代表不能代表紅細胞之紅細胞之間體積的差異。間體積的差異?！举|量控制】【質量控制】 rdwrdw結果判斷應結合臨床及結果

55、判斷應結合臨床及紅細胞直方圖的變化，同時分析紅細胞直方圖的變化，同時分析rdwrdw異常異常是否是由于紅細胞碎片、紅細胞凝集或是否是由于紅細胞碎片、紅細胞凝集或雙相性紅細胞引起。雙相性紅細胞引起?！緟⒖贾怠俊緟⒖贾怠?成人：成人：11.6%11.6%14.6%14.6%【臨床意義】【臨床意義】 1進行貧血形態(tài)學新的分類進行貧血形態(tài)學新的分類 1983年年bessman提出用提出用mcv和和rdw 作為貧血的形態(tài)學分類的新作為貧血的形態(tài)學分類的新指標，如果配合紅細胞直方圖，則更有助于判指標，如果配合紅細胞直方圖，則更有助于判斷貧血的病情和療效。斷貧血的病情和療效。 2.2.缺鐵性貧血缺鐵性貧血（

56、iron deficiency anemia, idairon deficiency anemia, ida） 的的篩選診斷和療效觀察篩選診斷和療效觀察 rdwrdw增大：對缺鐵性貧血診斷的增大：對缺鐵性貧血診斷的靈敏度靈敏度達達95%95%以以上，但上，但特異性特異性不強。不強。 3.3.鑒別診斷鑒別診斷 缺鐵性貧血缺鐵性貧血rdw一般增高一般增高，而，而輕型輕型-珠蛋白生珠蛋白生成障礙性貧血成障礙性貧血rdw一般正常一般正常。 七、網織紅細胞（七、網織紅細胞（reticulocyte, ret）計數(shù)）計數(shù) 晚幼紅細胞脫核后到完全成熟紅細胞間的晚幼紅細胞脫核后到完全成熟紅細胞間的過過渡細胞渡

57、細胞，其胞質中殘存，其胞質中殘存非變性非變性嗜堿性物質核糖核嗜堿性物質核糖核酸（酸（ribomucleic acidribomucleic acid，rnarna），經），經煌焦油藍煌焦油藍（brilliant cresyl bluebrilliant cresyl blue）等活體染色后）等活體染色后，嗜，嗜堿性物質凝聚成藍黑色顆粒，顆粒與顆粒連綴成堿性物質凝聚成藍黑色顆粒，顆粒與顆粒連綴成線而得名。體積通常一般為線而得名。體積通常一般為7 79m9m。heilmyerheilmyer根據(jù)其發(fā)育階根據(jù)其發(fā)育階段把它分為段把它分為5 5型型，icshicsh分為分為4 4型（無型（無heilm

58、yer 0heilmyer 0型）。型）。 【檢測原理】【檢測原理】 1普通光學顯微鏡法普通光學顯微鏡法 用活體染色（煌焦用活體染色（煌焦油藍等染液）方法顯示紅細胞內網狀結構油藍等染液）方法顯示紅細胞內網狀結構 2 2網織細胞計數(shù)儀法網織細胞計數(shù)儀法 用熒光染料（如用熒光染料（如吖啶橙、派若寧吖啶橙、派若寧-y-y、噻唑橙）使含、噻唑橙）使含rnarna的的網織紅細胞著色，用流式細胞儀（網織紅細胞著色，用流式細胞儀（flow flow cytometrycytometry，fcmfcm）計數(shù)并計算出網織紅細）計數(shù)并計算出網織紅細胞的百分比。胞的百分比。 3 3血液分析儀法血液分析儀法 原理與網

59、織細胞計數(shù)原理與網織細胞計數(shù)儀法相似。儀法相似。【方法學評價】【方法學評價】1 1普通光學顯微鏡法普通光學顯微鏡法 試管法試管法操作簡便，重復操作簡便，重復性較好，為手工參考性較好，為手工參考方法；方法；玻片法玻片法取血量取血量少，染色時間偏短，少，染色時間偏短，結果偏低，適宜于床結果偏低，適宜于床邊采血操作。邊采血操作。顯微鏡法受主觀因素影顯微鏡法受主觀因素影響多，耗時費力。響多，耗時費力。miller窺盤2 2網織細胞計數(shù)儀法網織細胞計數(shù)儀法 流式細胞術網織紅流式細胞術網織紅細胞計數(shù)可客觀地將網織紅細胞分成高熒細胞計數(shù)可客觀地將網織紅細胞分成高熒光強度網織紅細胞（光強度網織紅細胞（high

60、 fluorescent high fluorescent ratioratio，hfrhfr）、中熒光強度網織紅細胞）、中熒光強度網織紅細胞（middle fluorescent rationmiddle fluorescent ration，mfrmfr）、）、低 熒 光 強 度 網 織 紅 細 胞 （低 熒 光 強 度 網 織 紅 細 胞 （ l o w l o w fluorescent ratiofluorescent ratio，lfrlfr），熒光強度越），熒光強度越高，網織紅細胞越幼稚。高，網織紅細胞越幼稚。對于化療、放療及移植患者治療過程的監(jiān)對于化療、放療及移植患者治療過程的