高三生物課物細胞工程

1、2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供二、動物細胞工程二、動物細胞工程 動物細胞培養(yǎng)技術是其他動物細胞動物細胞培養(yǎng)技術是其他動物細胞工程技術的工程技術的基礎基礎動物細胞培養(yǎng)；動物細胞融合動物細胞培養(yǎng)；動物細胞融合單克隆抗體；胚胎移植；核移植單克隆抗體；胚胎移植；核移植（一）動物細胞培養(yǎng)（一）動物細胞培養(yǎng)2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供動物胚胎或幼齡動動物胚胎或幼齡動物的組織、器官物的組織、器官細胞懸浮液細胞懸浮液胰蛋白酶胰蛋白酶10代細胞代細胞原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)50代細胞代細胞傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細胞株細胞株無限傳代無限傳代細胞系細胞系單個細胞單個細胞加培養(yǎng)液加培養(yǎng)液202

2、1-11-13該課件由【語文公社】友情提供（2）為什么選用動物胚胎或幼齡個體的）為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細胞培養(yǎng)材料？器官或組織做動物細胞培養(yǎng)材料？（1）動物細胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？）動物細胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何獨特之處？較植物組培培養(yǎng)基有何獨特之處？主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機鹽、主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。維生素和動物血清等。獨特之處：獨特之處：1、液體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基 2、成分中有、成分中有動物血清等動物血清等 因為這些組織或器官上的細胞生命力因為這些組織或器官上的細胞生命力旺盛，分裂能力強旺盛，分裂能力強（

3、動物體細胞大都生活在（動物體細胞大都生活在液體液體的環(huán)境）的環(huán)境）2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供 血清是一種很好的營養(yǎng)物質，含血清是一種很好的營養(yǎng)物質，含有動物體細胞生長所需要的營養(yǎng)物質，有動物體細胞生長所需要的營養(yǎng)物質，并給動物創(chuàng)造了生活環(huán)境。并給動物創(chuàng)造了生活環(huán)境。 任何血清使用前必須經過任何血清使用前必須經過鑒定鑒定，只有，只有無菌、無內毒素、無溶血或低溶血、蛋白無菌、無內毒素、無溶血或低溶血、蛋白質以及營養(yǎng)素達一定標準以上才能使用。質以及營養(yǎng)素達一定標準以上才能使用。 血清與血漿的主要區(qū)別是血清里不含血清與血漿的主要區(qū)別是血清里不含纖維蛋白原纖維蛋白原2021-11-

4、13該課件由【語文公社】友情提供（3）為什么培養(yǎng)前要將組織細胞分散）為什么培養(yǎng)前要將組織細胞分散成單個細胞？成單個細胞？ 成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細胞懸浮液利于培養(yǎng)細胞懸浮液利于培養(yǎng)（4）動物細胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織）動物細胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個體？培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個體？ 不能，動物細胞培養(yǎng)只能使細胞數目增不能，動物細胞培養(yǎng)只能使細胞數目增多，不能發(fā)育成新的動物個體多，不能發(fā)育成新的動物個體2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供胰蛋白酶胰蛋白酶 動物組織細胞間隙中含有一定量的動物組織細胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質彈

5、性纖維等蛋白質，它們與細胞一起，它們與細胞一起，形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。 彈性纖維易被胰蛋白酶分解彈性纖維易被胰蛋白酶分解胃蛋白酶？胃蛋白酶？no2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供貼壁生長貼壁生長 大多數組織細胞不適應懸浮生長，大多數組織細胞不適應懸浮生長，必須在固定的表面生長和分裂。必須在固定的表面生長和分裂。脫離下來脫離下來 當表面相互接觸時就停止分裂增殖當表面相互接觸時就停止分裂增殖接觸抑制接觸抑制 2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供動物動物胚胎胚胎或或幼齡幼齡動動物的組織、器官物的組織、器官胰蛋白酶胰蛋白酶剪碎

6、剪碎單個細胞單個細胞加培養(yǎng)液加培養(yǎng)液制成制成細胞細胞懸浮懸浮液液細胞株細胞株細胞系細胞系細胞增殖細胞增殖無限傳代無限傳代去掉組織去掉組織間蛋白間蛋白動物細胞培養(yǎng)不能動物細胞培養(yǎng)不能最終培養(yǎng)成生物體最終培養(yǎng)成生物體2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供動物細胞動物細胞動物細胞動物細胞原代培養(yǎng) 分裂10次細胞株細胞株傳代培養(yǎng) 分裂50次( (細胞系細胞系) )( (細胞株細胞株) )細胞系細胞系無限分裂無限分裂遺傳物質未遺傳物質未發(fā)生改變發(fā)生改變遺傳物質發(fā)生遺傳物質發(fā)生改變無限增殖改變無限增殖2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供細胞細胞懸浮懸浮液液1010代代細胞細胞5050

7、代代細胞細胞無限無限傳代傳代原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細胞株細胞株細胞系細胞系注意界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)；細胞株和細胞系注意界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)；細胞株和細胞系多數組織細胞固定在表面多數組織細胞固定在表面生長和分裂。生長和分裂。隨細胞增多，細胞就會停止分裂增殖隨細胞增多，細胞就會停止分裂增殖遺傳物質改變遺傳物質改變2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供動物細胞培養(yǎng)技術的應用動物細胞培養(yǎng)技術的應用（1 1）生產蛋白質生物制品：病毒疫苗、）生產蛋白質生物制品：病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。干擾素、單克隆抗體等。（2 2）獲得大量自身的皮膚細胞，用于）獲得大量自身的皮膚細胞，用于

8、植皮。植皮。（3 3）用于檢測有毒物質）用于檢測有毒物質（4 4）用于生理、病理、藥理等方面的）用于生理、病理、藥理等方面的研究，為治療和預防疾病提供理論依據研究，為治療和預防疾病提供理論依據2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供植物體植物體培養(yǎng)結果培養(yǎng)結果獲得細胞或細胞獲得細胞或細胞分泌蛋白分泌蛋白培養(yǎng)目的培養(yǎng)目的葡萄糖葡萄糖動物血動物血清清蔗糖蔗糖植物激素植物激素液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性質培養(yǎng)基性質細胞增殖細胞增殖細胞的全能性細胞的全能性原理原理動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較項目比較項目細胞株、細胞系細胞株、細胞系植物體植物體培養(yǎng)結果

9、培養(yǎng)結果分泌蛋白分泌蛋白快速繁殖、培育快速繁殖、培育無病毒植株無病毒植株培養(yǎng)目的培養(yǎng)目的葡萄糖葡萄糖動物血動物血蔗糖蔗糖植物激素植物激素培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)基特有成分液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性質培養(yǎng)基性質細胞的增殖細胞的增殖細胞的全能性細胞的全能性原理原理動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較項目比較項目植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供（二）動物細胞融合（二）動物細胞融合2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供細胞細胞a細胞細胞b雜種細胞雜種細胞滅活的病毒滅活的病毒物理法物

10、理法化學法化學法仙臺病毒仙臺病毒皰疹病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒新城雞瘟病毒2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供用滅活的病毒誘導動物細胞融合過程用滅活的病毒誘導動物細胞融合過程細胞核細胞核病毒顆粒病毒顆粒細胞核細胞核2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供誘導動物細胞融合的方法誘導動物細胞融合的方法物理法：離心、振動、電刺激物理法：離心、振動、電刺激化學法：聚乙二醇（化學法：聚乙二醇（pegpeg）生物法：滅活的動物病毒生物法：滅活的動物病毒（喪失感染活性）（喪失感染活性）2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供主要用于制備主要用于制備單克隆抗體單克隆抗體獲得雜種植株獲

11、得雜種植株用途用途物理、化學方法物理、化學方法（同左）（同左）滅活的病毒滅活的病毒物理（離心、振物理（離心、振蕩、電刺激）蕩、電刺激）化學（聚乙二醇）化學（聚乙二醇）誘導方法誘導方法使細胞分散后誘使細胞分散后誘導細胞融合導細胞融合去除細胞壁后誘去除細胞壁后誘導原生質體融合導原生質體融合細胞融合的方法細胞融合的方法細胞膜的流動性細胞膜的流動性細胞膜的流動性、細胞膜的流動性、植物細胞全能性植物細胞全能性細胞融合的原理細胞融合的原理動物細胞融合動物細胞融合植物體細胞雜交植物體細胞雜交比較項目比較項目比較項目比較項目植物、動物細胞融合的比較植物、動物細胞融合的比較2021-11-13該課件由【語文公社

12、】友情提供動物細胞融合最重要的用途動物細胞融合最重要的用途制備單克隆抗體制備單克隆抗體2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供抗原抗原吞噬細胞吞噬細胞t細胞細胞b細胞細胞增殖、分化增殖、分化效應效應b細胞細胞t記憶細胞記憶細胞b記憶細胞記憶細胞抗體抗體抗原抗原殺滅殺滅結合結合增殖增殖增殖、分化增殖、分化效應效應t細胞細胞靶細胞靶細胞接觸、激活接觸、激活溶酶體酶溶酶體酶靶細胞靶細胞解體死亡解體死亡增殖增殖淋巴因子淋巴因子增強增強免疫細胞作用免疫細胞作用再次進入2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供讀下面一段文字資料，思考以下問題：讀下面一段文字資料，思考以下問題：長期以來，為了

13、獲得抗體，采用的是把某種抗原反復長期以來，為了獲得抗體，采用的是把某種抗原反復注射到動物體內，然后從動物血清中分離出所需抗體注射到動物體內，然后從動物血清中分離出所需抗體的方法。用這種方法獲得的抗體，不僅產量低，而且的方法。用這種方法獲得的抗體，不僅產量低，而且抗體的特異性差，純度低，反應不夠靈敏。人們發(fā)現(xiàn)，抗體的特異性差，純度低，反應不夠靈敏。人們發(fā)現(xiàn)，在動物發(fā)生免疫反應的過程中，體內的在動物發(fā)生免疫反應的過程中，體內的b細胞可以產細胞可以產生多達百萬種以上的特異性抗體，但是生多達百萬種以上的特異性抗體，但是每個每個b細胞只細胞只分泌一種化學性質單一、特異性強的抗體分泌一種化學性質單一、特異

14、性強的抗體。要想獲得。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個大量的單一抗體，必須用單個b細胞進行無性繁殖，細胞進行無性繁殖，即克隆。即克隆。 （1）請從以上文字資料中找出單克隆抗體的概念）請從以上文字資料中找出單克隆抗體的概念用單個用單個b細胞進行克隆，得到的細胞群能夠分泌一種細胞進行克隆，得到的細胞群能夠分泌一種化學性質單一、特異性強的抗體，這種抗體就叫做單化學性質單一、特異性強的抗體，這種抗體就叫做單克隆抗體?？寺】贵w。2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供提示提示1：僅用細胞培養(yǎng)技術可行嗎？：僅用細胞培養(yǎng)技術可行嗎？（2）怎樣才能獲得單克隆抗體？）怎樣才能獲得單克隆抗體？提示提示2

15、：我們所學的哪種細胞是可以無限：我們所學的哪種細胞是可以無限增殖的？增殖的？提示提示3：有什么方法能使：有什么方法能使b細胞產生抗體細胞產生抗體的能力和腫瘤細胞無限增殖能力同時具的能力和腫瘤細胞無限增殖能力同時具備呢？備呢？2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供（1 1）提出問題：從）提出問題：從動物血清中分離抗體動物血清中分離抗體的方的方法產量低、特異性差、純度低、反應不夠靈法產量低、特異性差、純度低、反應不夠靈敏敏（三）單克隆抗體（三）單克隆抗體（2 2）設計方案：由于）設計方案：由于每一個每一個b b淋巴細胞只分泌淋巴細胞只分泌一種特異性抗體一種特異性抗體，利用，利用單個單個b

16、 b淋巴細胞淋巴細胞進行無性進行無性繁殖，就可以產生單克隆抗體。繁殖，就可以產生單克隆抗體。 由于由于b b淋巴細胞不能無限增殖，因此利用淋巴細胞不能無限增殖，因此利用小鼠骨髓瘤細胞與之融合，就可達到目的。小鼠骨髓瘤細胞與之融合，就可達到目的。2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供 單克隆抗體制備過程：單克隆抗體制備過程： 注射抗原注射抗原b淋巴細胞淋巴細胞骨髓瘤細胞骨髓瘤細胞細胞融合、篩選細胞融合、篩選雜交瘤細胞雜交瘤細胞細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數量的、能產生足夠數量的、能產生特定抗體的細胞群特定抗體的細胞群體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔單克隆

17、抗體單克隆抗體（選擇性培養(yǎng)基）（選擇性培養(yǎng)基）選擇性培養(yǎng)基：選擇性培養(yǎng)基：使親本細胞不能使親本細胞不能存活而雜種細胞可存活存活而雜種細胞可存活2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供1、本過程利用了哪些原理？、本過程利用了哪些原理？免疫原理，免疫原理，細胞融合原理和動物細胞培養(yǎng)原理細胞融合原理和動物細胞培養(yǎng)原理2、為什么選用小鼠骨髓瘤細胞與、為什么選用小鼠骨髓瘤細胞與b細胞細胞融合？融合？ 這樣融合成的雜交瘤細胞，繼承了這樣融合成的雜交瘤細胞，繼承了雙親細胞的遺傳物質，不僅具有雙親細胞的遺傳物質，不僅具有b細胞分細胞分泌抗體的能力，而且還有無限增殖的本泌抗體的能力，而且還有無限增殖的本

18、領，因而可以獲得大量單克隆抗體領，因而可以獲得大量單克隆抗體2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供 細胞的同源性細胞的同源性越近越近，融合形成的，融合形成的雜種細胞越易成活雜種細胞越易成活 有無限增殖能力（失去凋亡機制，有無限增殖能力（失去凋亡機制，失去接觸抑制等）的細胞是腫瘤細胞，失去接觸抑制等）的細胞是腫瘤細胞，而具有轉移能力的腫瘤細胞，稱為癌細而具有轉移能力的腫瘤細胞，稱為癌細胞。胞。2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供單克隆抗體的應用單克隆抗體的應用在基礎理論研究中具有重要意義在基礎理論研究中具有重要意義在疾病診斷、治療和預防方面，具在疾病診斷、治療和預防方面，具

19、有特異性高、靈敏度高等優(yōu)越性。有特異性高、靈敏度高等優(yōu)越性。生物導彈生物導彈（作為載體，運載抗癌藥物，形成（作為載體，運載抗癌藥物，形成“生物導彈生物導彈”治治療腫瘤）療腫瘤）2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供資料資料：目前世界各國已經研制出數以百目前世界各國已經研制出數以百計的單克隆抗體。許多缺乏良好診斷手計的單克隆抗體。許多缺乏良好診斷手段的傳染病、免疫性疾病、血液病、內段的傳染病、免疫性疾病、血液病、內分泌疾病和遺傳病，用單克隆抗體作為分泌疾病和遺傳病，用單克隆抗體作為診斷手段，是一個必然趨勢。另外，用診斷手段，是一個必然趨勢。另外，用單克隆抗體做體內診斷，借以鑒別和定單克

20、隆抗體做體內診斷，借以鑒別和定位體內位體內“病灶病灶”也引起人們的注意，目也引起人們的注意，目前，主要用于腫瘤追蹤及心肌梗塞的診前，主要用于腫瘤追蹤及心肌梗塞的診斷。斷。2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供小結小結兩個過程兩個過程動物細胞培養(yǎng)過程動物細胞培養(yǎng)過程單克隆抗體制備過程單克隆抗體制備過程三個三個“一一”一個誘導細胞融合的新方法一個誘導細胞融合的新方法 滅活病毒滅活病毒一個新細胞雜交瘤細胞一個新細胞雜交瘤細胞一個優(yōu)勢單克隆抗體特異性一個優(yōu)勢單克隆抗體特異性 強、靈敏度高的優(yōu)勢強、靈敏度高的優(yōu)勢卵細胞卵細胞c母綿羊子宮母綿羊子宮母綿羊母綿羊母綿羊母綿羊乳腺細胞乳腺細胞細胞質細

21、胞質細胞核細胞核細胞核移植細胞核移植胚胎移植胚胎移植早期胚胎早期胚胎多莉羊多莉羊分娩分娩卵裂卵裂融合后的卵細胞融合后的卵細胞細胞拆合技術細胞拆合技術妊娠妊娠多莉羊的培育過程多莉羊的培育過程細胞核細胞核移植移植2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供黑面綿羊去黑面綿羊去核卵細胞核卵細胞白面綿羊乳白面綿羊乳腺細胞核腺細胞核細胞核移植細胞核移植重組細胞重組細胞電脈沖刺激電脈沖刺激早期胚胎早期胚胎胚胎移植胚胎移植另一頭綿羊的子宮另一頭綿羊的子宮妊娠、出生妊娠、出生克隆羊多莉克隆羊多莉2021-11-13該課件由【語文公社】友情提供 采用此方法可以將兩個不同種、屬采用此方法可以將兩個不同種、屬的動物優(yōu)點集中在一起，產生的動物優(yōu)點集中在一起，產生具有雙親具有雙親優(yōu)點優(yōu)點的可繁殖的雜種動物。的可繁殖的雜種動物。 細胞核移植對動物優(yōu)良雜交種的無性細胞核移植對動物優(yōu)良雜交種的無性繁殖具有重大意義。這一技術的成功與完繁殖具有