植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)考試試題

1、植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)考試試題一、名詞解釋：1、標(biāo)準(zhǔn)曲線:用標(biāo)準(zhǔn)溶液制成得曲線。先配制一系列不同濃度得標(biāo)準(zhǔn)溶液，在溶液吸收 最大波長(zhǎng)下，逐一測(cè)定吸光度,然后用坐標(biāo)紙以溶液濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)作圖, 若被測(cè)物質(zhì)對(duì)光得吸收符合光得吸收定律，必然得到一條通過(guò)原點(diǎn)得直線，即標(biāo)準(zhǔn)曲 線。4、氮素代謝:氮素及含氮得活體物質(zhì)得同化異化與排泄,總稱為氮素代謝、5、淀粉酶:就是水解淀粉與糖原得酶類總稱。6、真空滲入:指將葉片打孔放入注射器中,加水浸沒(méi),排出空氣后用手指堵住前端小孔，同 時(shí)把活塞向外抽拉,即可造成減壓而排出組織中得空氣,輕放活塞,水液即進(jìn)入組織得方 法。7、離心技術(shù):就是根據(jù)物質(zhì)顆粒在一個(gè)離心場(chǎng)中

2、得沉降行為而發(fā)展起來(lái)得。它就是分離 細(xì)胞器與生物分子大分子物質(zhì)必備得手段之一,也就是測(cè)定某些純品物質(zhì)得部分性質(zhì)得 一種方法。8、電泳:各種生物大分子在一定PH條件下,可以解離成帶電荷得顆粒,這種帶電顆粒在 電場(chǎng)得作用下向相反電極移動(dòng)得現(xiàn)象稱為電泳、9、同工酶:凡能催化同一種化學(xué)反應(yīng)但其分子結(jié)構(gòu)與帶電性質(zhì)不同得一組酶稱為同工 酶10、遷移率:指帶電顆粒在單位電場(chǎng)強(qiáng)度下得泳動(dòng)速度、】1、聚丙烯醸胺凝膠:就是一種人工合成凝膠,就是以丙烯酰胺為單位，由甲叉雙丙烯 猷胺交聯(lián)成得,經(jīng)干燥粉碎或加匸成形制成粒狀,控制交聯(lián)劑得用量可制成各種型號(hào)得 凝膠。20、超氧化物歧化酶(SOD):普遍存在動(dòng)植物體內(nèi)得一種

3、清除超氧陰離子口由基02得 酶。2 1、硝酸還原還原酶:就是植物氮素同化得關(guān)鍵酶,它催化植物體內(nèi)得硝酸鹽還原為亞硝 酸。22、誘導(dǎo)酶:乂稱適應(yīng)酶,指植物體內(nèi)本來(lái)不含有,但在特定外來(lái)物質(zhì)得誘導(dǎo)下誘導(dǎo)生成得 酶。如硝酸還原酶可為NO3-所誘導(dǎo)生成。A二、填空：1、測(cè)定植物可溶性蛋白質(zhì)含量時(shí),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線就是標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)濃度為橫 坐標(biāo),以吸光值為縱坐標(biāo)。2、常用得測(cè)定植物可溶性蛋白質(zhì)含量得方法有:FOlin-酚試劑法(LoWry法)、雙縮 腺法、考馬斯亮藍(lán)法與紫外吸收法。4、用滴定法測(cè)VC含量時(shí),若樣品本身帶有顏色,則需先將樣品用莖酸處理。5、測(cè)定淀粉酶活性時(shí),3,5_二硝基水楊酸試劑(DNS)得作用

4、就是與還原糖顯色生成 棕紅色得3-氨基一5 硝基水楊酸與終止酶活性。6、在測(cè)定淀粉酶得活性時(shí):a淀粉酶不耐_酸_,卩一淀粉酶不耐一熱7、聚丙烯酰胺凝膠電泳分離過(guò)氧化物同工酶實(shí)驗(yàn)中,電泳存在三大效應(yīng),分別就是遜斂 應(yīng)、分子篩效應(yīng)與電荷效應(yīng)。9、用活體法測(cè)定硝酸還原酶得材料,取樣前葉子需進(jìn)行一段時(shí)間得光合作用,以積累光 合產(chǎn)物,產(chǎn)生更多NADH加速硝酸鹽得還原。11、葉綠素吸收光譜有紅光與藍(lán)紫光區(qū)兩個(gè)最強(qiáng)吸收區(qū)。12、類胡蘿卜素吸收光譜最強(qiáng)吸收區(qū)在綠素得作用。13、葉綠素溶液在透射光下呈色,在反射光下呈暗紅色、15、水培時(shí)要選用黑色容器裝營(yíng)養(yǎng),這就是為了防止藻類滋生16、常用水溶液培養(yǎng)法確定植物生

5、長(zhǎng)得必需元素。三、選擇1當(dāng)植物細(xì)胞水勢(shì)小于外界溶液水勢(shì)時(shí),植物細(xì)胞_外液濃度變DA吸水 B 失水C小 D大2用紅菜苔做植物組織原生質(zhì)透性得觀察時(shí)，學(xué)生2 O分鐘后觀察到有紅色色素出現(xiàn)， 下面那種處理方式不可能出現(xiàn)這種情況A清水浸泡B清水煮沸Imin C 3 0%得醋酸D 70%酒精3希爾反應(yīng)實(shí)驗(yàn)常用植物材料為新鮮菠菜,選用菠菜葉出于 _方面考慮A葉綠素含量高B易于碾磨 C營(yíng)養(yǎng)豐富 D顏色漂亮4植物生理實(shí)驗(yàn)時(shí),在碾磨植物材料時(shí)經(jīng)常會(huì)用得石英砂,其主要作用為A_A增加粗糙度B保護(hù)葉綠體或營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)C易于過(guò)濾 D使溶液分層5植物組織中得水分主要有口由水與束縛水兩種形式存在,有同學(xué)通過(guò)實(shí)驗(yàn)測(cè)定某一植 物

6、得自由水與束縛水得比值比較大,可推斷該植物處于AA旺盛生長(zhǎng)時(shí)期 B衰退狀態(tài)C病蟲(chóng)危害狀態(tài) D干旱狀態(tài)6蛋白質(zhì)含量得測(cè)定常用“考馬斯藍(lán)G- 2 5 0 ”方法,其主要原理:考馬斯藍(lán)G-250燃 料在游離狀態(tài)下稱紅色,當(dāng)它與蛋白質(zhì)結(jié)合后呈青色、其結(jié)合物在光波 下吸光值 與蛋白質(zhì)含量成正比，故用分光光度計(jì)比色法測(cè)定A 6 6 8 n m B 5 9 5nm C 25Onm D 320 n m7在綠豆芽蛋白質(zhì)含量得測(cè)定實(shí)驗(yàn)時(shí),實(shí)驗(yàn)儀器用到了離心機(jī),其作用主要為 A使蛋白質(zhì)與水分離B使殘?jiān)c浸出液分離C使色素與水分離D使蛋白質(zhì)與水混合8葉綠素不能溶液以下哪種溶液 BA乙醇B水C丙酮D氯仿9環(huán)形層析法分離

7、葉綠體中得各色素,色素種類從里向外得順序?yàn)?A葉綠素a、葉綠素b、葉黃素、胡蘿卜素B葉綠素b、葉綠素a、葉黃素、胡蘿卜素C葉綠素b、葉綠素a、胡蘿卜素、葉黃素D胡蘿卜素、葉黃素、葉綠索b、葉綠素a1 0紅外線C0?分析儀測(cè)環(huán)境中CO：得含量具有易操作、高效率等優(yōu)點(diǎn)。當(dāng)用同一臺(tái)儀 器對(duì)武生院不同地點(diǎn)進(jìn)行C 0：測(cè)定時(shí)，發(fā)現(xiàn)林下與餐廳C0：濃度相差不太明顯,據(jù)推測(cè)主 要原因?yàn)镃A儀器誤差B人為操作不當(dāng)C風(fēng)得影響D光線得影響11植物得生長(zhǎng)發(fā)育需要大量得營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)才能完成,現(xiàn)代無(wú)土栽培方法主要通過(guò)配制一 定得比例得營(yíng)養(yǎng)液來(lái)培養(yǎng)園藝花卉或農(nóng)作物,而植物缺乏某一種營(yíng)養(yǎng)元素都會(huì)產(chǎn)生不正 常得外在表現(xiàn),我們稱之

8、為“缺素癥”。當(dāng)我們對(duì)海桐枝條進(jìn)行缺素培養(yǎng)時(shí)，同學(xué)們發(fā)現(xiàn) 海桐枝條用缺素液培養(yǎng)與完全營(yíng)養(yǎng)液、純水培養(yǎng)等兒種方法培養(yǎng),其外在表現(xiàn)上沒(méi)有差 別,其主要原因有可能就是 CA肥料失效B稱量誤差C海桐對(duì)缺素不敏感D光照影響1 3植物細(xì)胞膜對(duì)維持細(xì)胞得微環(huán)境與正常代謝起著重要作用。在正常情況下細(xì)胞膜對(duì) 物質(zhì)具有選擇透性能力。為了測(cè)定植物得抗逆性,實(shí)驗(yàn)中我們常用不同溫度處理,通過(guò)測(cè) 溶液導(dǎo)電性,來(lái)判斷植物對(duì)高溫得抗性大小。如果有兩種植物,用相同得溫度處理,發(fā)現(xiàn) 植物a得電導(dǎo)率為1。235,植物b得電導(dǎo)率為0、8 34,那么那種植物可能更耐高溫一些 BA植物a B植物b14 TTC法測(cè)種子生命力,通過(guò)溫水浸泡

9、過(guò)得健康玉米種子,B不會(huì)染色A胚芽 B胚乳C胚軸 D胚根】5植物呼吸強(qiáng)度得測(cè)定實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，用廣口瓶中加入一定量得Ba(OH)2,并懸掛植物 材料,則植物材料呼吸放出得C0：彼容器中Ba(OH) =所吸收,然后用草酸溶液滴定殘留 Ba(OH) 2,根據(jù)與空白樣本對(duì)比本可以計(jì)算出植物得呼吸速率。如果空白滴定所有草酸量 為V。，樣品滴定所用草酸量為V：,有同學(xué)做實(shí)驗(yàn)滴定得草酸量V。為7。4ml,V1為7、Gm1 ,那么該同學(xué)所滴定得結(jié)果B_A正確 B錯(cuò)誤2、進(jìn)行酶活力測(cè)定時(shí)：A )A、底物濃度必須極大于酶濃度B、酶濃度必須極大于底物濃度C、與底物濃度無(wú)關(guān)D、酶能提高反應(yīng)得平衡點(diǎn)44、FOIin一酚試

10、劑 Lowry法)測(cè)定蛋白質(zhì)濃度時(shí),用(B )波長(zhǎng)比色,測(cè)定光密度值。A、26Onm650n m C、5 4 Onm 2 8 Onin5、不連續(xù)聚肉烯酰胺凝膠電泳比一般電泳得分辨率高,就是因?yàn)榫哂邢铝心姆N效 應(yīng)?(ABC) A、濃縮效應(yīng)B、電荷效應(yīng)C、分子篩效應(yīng)D、粘度效應(yīng)6、硝酸還原酶與亞硝酸還原酶(D )A.都就是誘導(dǎo)酶B .硝酸還原酶不就是誘導(dǎo)酶,而亞硝酸還原酶就是C、都不就是誘導(dǎo)酶D、硝酸還原酶就是誘導(dǎo)酶,而亞硝酸還原酶不就是7、酶得分離提純過(guò)程中,不正確得操作就是(C)A、需在低溫下進(jìn)行,一般在05°C之間 B、酶制劑制成干粉后可保存于4。C冰箱 中C、需經(jīng)常使用疏基乙醇以

11、防止酶蛋白二硫鍵發(fā)生還原 D、提純時(shí)間盡量短8、在提取葉綠素時(shí)，研磨葉片時(shí)加入少許C a CO3,其目得就是(D)A.使研磨更充分B.加速葉綠素溶解C.使葉綠素a、b分離 D、保護(hù)葉綠素10、一般而言,正常植物葉片得葉綠素與類胡蘿卜素得比值為(B)AO 2:1 BO 3:1 C、1 :2 DO 1:311、測(cè)定葉綠素總量時(shí),分光光度計(jì)選用得波長(zhǎng)就是(D )A、663nn B. 6 4 5nm C、430 n m D、652nm四、問(wèn)答題1、試述植物種子萌發(fā)得三個(gè)階段以及各階段得代謝特點(diǎn)？答:吸脹吸水階段：為依賴原生質(zhì)膠體吸脹作用得物理吸水階段,無(wú)論種子就是否通過(guò) 休眠還就是有無(wú)生命力,均具有此

12、階段;緩慢吸水階段:種子吸水受種皮得束縛,原生 質(zhì)得水合度達(dá)到飽與,酶促反應(yīng)與呼吸作用增強(qiáng),貯藏物質(zhì)開(kāi)始分解,胚細(xì)胞得吸水力提 高;生長(zhǎng)吸水階段:在貯藏物質(zhì)加快轉(zhuǎn)化得基礎(chǔ)上,胚根、胚芽中得核酸、蛋白質(zhì)等原 生質(zhì)組分合成加快,細(xì)胞吸水加強(qiáng)、當(dāng)胚根突破種皮后,有氧呼吸增強(qiáng),種子吸水與鮮重 持續(xù)增加、2、什么叫質(zhì)壁分離現(xiàn)象？研究質(zhì)壁分離有什么意義？答:植物細(xì)胞由丁液泡失水而使原生質(zhì)體與細(xì)胞壁分離得現(xiàn)象稱為質(zhì)壁分離。在剛發(fā)生 質(zhì)壁分離時(shí),原生質(zhì)與細(xì)胞壁之間若接若離。稱為初始質(zhì)壁分離、把己發(fā)生質(zhì)壁分離得 細(xì)胞置丁水勢(shì)較高得溶液與純水中，則細(xì)胞外得水分向內(nèi)滲透,使液泡體積逐漸增大因 而原生質(zhì)層與細(xì)胞壁相接

13、觸,恢復(fù)原來(lái)得狀態(tài),這一現(xiàn)象叫質(zhì)壁分離復(fù)原、 研究質(zhì)壁分離可以鑒定細(xì)胞得死活,活細(xì)胞得原生質(zhì)層才具半透膜性質(zhì)，產(chǎn)生質(zhì)壁分離 現(xiàn)象,而死細(xì)胞無(wú)比現(xiàn)象;可測(cè)定細(xì)胞水勢(shì),在初始質(zhì)壁分離時(shí),此時(shí)細(xì)胞得滲透勢(shì)就就 是水勢(shì)(因?yàn)榇藭r(shí)壓力勢(shì)為零)：還可用以測(cè)定原生質(zhì)透性、滲透勢(shì)及粘滯性等。3、小籃子法測(cè)定萌發(fā)得小麥種子呼吸強(qiáng)度，以Ba(OH)2吸收呼吸時(shí)放出得CO 2種子重 5g,反應(yīng)進(jìn)行20分鐘,用0、IN-草酸滴定剩余得Ba(OH)2,用去草酸18ml,空白滴定用 去草酸2 0 ml,計(jì)算萌發(fā)小麥種子得呼吸強(qiáng)度。答:小麥種子呼吸強(qiáng)度(鮮重小時(shí))=2。64 (mgCo2gFWh)4、農(nóng)諺講“旱長(zhǎng)根,水長(zhǎng)苗

14、”就是什么意思？道理何在？答:這就是指水分供應(yīng)狀況對(duì)植物根冠比調(diào)節(jié)得一個(gè)形象比喻。植物地上部生長(zhǎng)與消耗 得大量水分,完全依靠根系供應(yīng),土壤有效水得供應(yīng)量直接影響枝葉得生長(zhǎng),因此凡就是 能增加土壤有效水得措施,必然有利地上部生長(zhǎng);而地上部生長(zhǎng)旺盛,消耗耗大1：光合產(chǎn) 物,使輸送到根系扔機(jī)物減少，乂會(huì)削弱根系得生長(zhǎng),加之如果水分過(guò)多,通氣不良，也會(huì) 限制根系活動(dòng),這些都將使根冠比減少。干旱時(shí)，由丁根系得水分環(huán)境比地上部好,根系 仍能較好地生長(zhǎng);而地上部則由于抽水,枝葉生長(zhǎng)明顯受阻,光合產(chǎn)物就可輸入根系,有 利根系生長(zhǎng),使根冠比増大、所以水稻栽培中,適當(dāng)落干曬,可對(duì)促進(jìn)根系生長(zhǎng),増加根 冠比、6、簡(jiǎn)

15、述氣孔開(kāi)閉得主要機(jī)理。答:氣孔開(kāi)閉取決丁保衛(wèi)細(xì)胞及其相鄰細(xì)胞得水勢(shì)變化以及引起這些變化得內(nèi)、外部因 素，與晝夜交替有關(guān)、在適溫、供水充足得條件下,把植物從黑暗移向光照,保衛(wèi)細(xì)胞得 滲透勢(shì)顯著下降而吸水膨脹，導(dǎo)致氣孔開(kāi)放。反之,當(dāng)日間蒸騰過(guò)多,供水不足或夜幕布 降臨時(shí),保衛(wèi)細(xì)胞因滲透勢(shì)上升,失水而縮小,導(dǎo)致氣孔關(guān)閉。氣孔開(kāi)閉得機(jī)理復(fù)雜，至少有以下三種假說(shuō)：（1）淀粉一一糖轉(zhuǎn)化學(xué)說(shuō),光照時(shí),保衛(wèi)細(xì)胞 內(nèi)得葉綠體進(jìn)行光合作用，消耗C 02,使細(xì)胞內(nèi)PH值升高,促使淀粉在磷酸化酶催化下轉(zhuǎn) 變?yōu)?-磷酸葡萄糖,細(xì)胞內(nèi)得葡萄糖濃度高,水勢(shì)下降,副衛(wèi)細(xì)胞得水進(jìn)入保衛(wèi)細(xì)胞,氣 孔便張開(kāi)、在黑暗中，則變化相反。

16、（2）無(wú)機(jī)離子吸收學(xué)說(shuō),保衛(wèi)細(xì)胞得滲透系統(tǒng)亦可由 鉀離子（K+）所調(diào)節(jié)。光合磷酸化產(chǎn)生ATP. ATP使細(xì)胞質(zhì)膜上得鉀一氫離子泵作功,保 衛(wèi)細(xì)胞便可逆著與其周?chē)砥ぜ?xì)胞之間得離子濃度差而吸收鉀離子，降低保衛(wèi)紐1胞水勢(shì), 氣孔張開(kāi)。（3）有機(jī)酸代謝學(xué)說(shuō),淀粉與蘋(píng)果酸存在著相互消長(zhǎng)得關(guān)系。氣孔開(kāi)放時(shí),葡 萄糖增加,再經(jīng)過(guò)糖酵解等一系列步驟,產(chǎn)生蘋(píng)果酸,蘋(píng)果酸解離得H+可與表皮細(xì)胞得 K+交換,蘋(píng)果酸根可平衡保衛(wèi)細(xì)胞所吸入得K+。氣孔關(guān)閉時(shí),此過(guò)程可逆轉(zhuǎn)。總之,蘋(píng) 果酸與K+在氣孔開(kāi)閉中起著互相配合得作用。7、呼吸代謝得多條途徑對(duì)植物生存有何適應(yīng)意義？答:植物代謝受基因得控制,而代謝（包括過(guò)程、產(chǎn)物

17、等）乂對(duì)基因表達(dá)具控制作用，基因 在不同時(shí)空得有序即表現(xiàn)為植物得生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程,高等植物呼吸代謝得多條途徑（不同 底物、呼吸途徑、呼吸鏈及末端氧化等）使其能適應(yīng)變化多端得環(huán)境條件。如植物遭病 菌浸染時(shí),PPP增強(qiáng)，以形成植保素,木質(zhì)素提高其抗病能力，乂如水稻根在淹水缺氧條 件下，乙醇酸氧化途徑與與氧親與力高得細(xì)胞色素氧化酶活性增強(qiáng)以保持根得正常生 理功能、4. 請(qǐng)介紹3種常用得可溶性蛋白質(zhì)得測(cè)定方法。答:目前常用得有以下幾種方法:雙縮腺法、LOWry法（FoIin-酚試劑法）、BradfOr d 法（考馬斯亮 藍(lán)法）、紫外吸收法。5、簡(jiǎn)述斐林一酚試劑法測(cè)定植物可溶性蛋白質(zhì)得原理。a答：FOlin

18、-酚試劑法也稱 LOWry法，斐林（FOIin）酚試劑法結(jié)合了雙縮豚試劑與酚試劑與蛋白質(zhì)得反應(yīng),其中包 括兩步反應(yīng):第一步就是在堿性條件下,蛋白質(zhì)中得肽鍵與銅試劑作用生成紫紅色得蛋白 質(zhì)一銅絡(luò)合物（雙縮腋反應(yīng)）；第二步就是此絡(luò)合物以及蛋白質(zhì)中酪氨酸與苯丙氨酸等芳 香族氨基酸得殘基使磷鉗酸-磷鉤酸試劑（FOIin試劑）還原,產(chǎn)生磷鉗藍(lán)與磷鉤藍(lán)得深 藍(lán)色混合物質(zhì),在一定得條件下,顏色深淺與蛋白含量成正相關(guān)、因此,可利用其在65 0 nm波長(zhǎng)下得特定吸收進(jìn)行比色測(cè)定。6、植物組織可溶性蛋白質(zhì)含量得測(cè)定中,斐林一酚試劑法、考馬斯亮藍(lán)法兩種方法各 有何優(yōu)缺點(diǎn)？答:斐林一酚試劑法其優(yōu)點(diǎn)就是:由于加入了 F

19、Ol i n酚試劑后使蛋白質(zhì)肽鍵顯色效果 增強(qiáng),從而減少了因蛋白質(zhì)種類引起得偏差、其靈敏度比雙縮豚法高1 00倍。此法操作 簡(jiǎn)便,適于蛋白質(zhì)含量較微小得樣品測(cè)定?？蓹z測(cè)得最低蛋白質(zhì)含量達(dá)5ug,通常測(cè) 定范圍5IoOUg、Oo 0 20。50mg / mL蛋白質(zhì),也可用于酪氨酸與色氨酸得定量測(cè) 定。缺點(diǎn)就是操作煩瑣,耗時(shí)較長(zhǎng),要精確控制操作時(shí)間,標(biāo)準(zhǔn)曲線不就是嚴(yán)格得直線形式, IL專一性差,干擾物質(zhì)（酚類、檸檬酸、TriS緩沖液、廿氨酸、糖類、甘油等）較多、 考馬斯亮藍(lán)法就是靈敬度更高得一種方法,優(yōu)點(diǎn)有:靈敏度高,比1 Owry法高4倍 左右,最低檢測(cè)達(dá)1一5微克;測(cè)定快速、簡(jiǎn)便,染色穩(wěn)定;干

20、擾物質(zhì)少。缺點(diǎn)就是用丁-不 同蛋白質(zhì)測(cè)定時(shí)有較大得偏差;仍有干擾,如SDS、去污劑、Trit O n xl O O等;標(biāo)準(zhǔn)曲 線有輕微得非線性、7、FOl in酚試劑法測(cè)定植物可溶性蛋白質(zhì)時(shí)受哪些因素得干擾？答：FOl i n-酚試顯色反應(yīng)就是由絡(luò)氨酸、色氨酸與半胱氨酸引起得,因此樣品中若含有 酚類、檸檬酸與疏基類化合物均有干擾作用。此外,不同蛋白質(zhì)音絡(luò)氨酸、色氨酸含量 得不同而使顯色強(qiáng)度稍有差異、8、用弟三酮顯色法測(cè)定植物組織氨基酸時(shí),加入VC得作用就是什么？答:由于該反應(yīng)得第一步就是苗三酮得還原,而還原型飾三酮在含氧量髙得情況下很容 易再氧化，對(duì)反應(yīng)有干擾,因此,常在反應(yīng)體系中加入還原劑,

21、以阻止還原型諱三酮得再氧 化。9、昂三酮顯色法測(cè)定植物組織氨基酸時(shí)為什么要除去蛋白質(zhì)？用10%乙酸除去蛋白 質(zhì)得原理就是什么？答:由丁蛋白質(zhì)與多肽中得游離氨基酸也會(huì)產(chǎn)生同樣反應(yīng),因此,對(duì)于含大量蛋白質(zhì)與多 肽得樣品,應(yīng)先用蛋白質(zhì)沉淀劑將其除去、常用得蛋白質(zhì)沉淀劑有10%乙酸、磺基水 楊酸(SSA).三 氯乙酸(TCA)、過(guò)氯酸(PCA)等,其中以乙酸提取總氨基酸得效果較 好、 原理：1 0%乙酸與蛋白質(zhì)反應(yīng)使之沉淀下來(lái)()10、用弟三酮顯色法測(cè)定植物組織氨基酸時(shí),為什么要用無(wú)氨蒸餡水？答：氨基酸與苗三酮反應(yīng)得實(shí)質(zhì)就是還原型苗三酮與另一分子苗三酮與一分子氨得縮 合脫水反應(yīng)。故,若蒸憎水中含有氨將

22、使氨基酸含量增大、帶來(lái)誤差、11、測(cè)定植物組織中游離氨基酸總量有何生理意義？答:測(cè)定植物體內(nèi)游離氨基酸含量對(duì)研究植物在不同條件下及不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期氮代謝 變化、植物對(duì)氮素得吸收、運(yùn)輸、同化及營(yíng)養(yǎng)狀況等有重要意義。12、測(cè)定淀粉酶活性時(shí),3,5二硝基水楊酸試劑(DNS)得作用就是什么？答：淀粉酶水解淀粉生成得麥芽糖,可用3,5-二硝基水楊酸試劑測(cè)定。由丁-麥芽糖能將 后者還原生成3-氨基-5硝基水楊酸得顯色基團(tuán),在一定范圍內(nèi)其顏色得深淺與糖得濃 度成正比,故可求出麥芽糖得含量。13、測(cè)定(+)-i½粉酶總活力時(shí),為什么要將淀粉酶原液稀釋成淀粉酶稀釋液后進(jìn)行反 應(yīng)。答:淀粉酶原液主要就是

23、用于鈍化P-淀粉酶,從而測(cè)定a淀粉酶得活力。而淀粉酶稀 釋液主要就是用于測(cè)出(+)-淀粉酶總活力,從而可得出P淀粉酶得活力。14、測(cè)定淀粉酶活性時(shí),為什么要將酶提取液與淀粉溶液分別放在40C水浴中預(yù)保溫？ 答:因?yàn)閍淀粉酶得最適溫度在40°C50°C之間,在這一溫度范圍內(nèi)a淀粉酶得活 性最強(qiáng),催化淀粉得能力最強(qiáng)、因此,將酶提取液與淀粉溶液分別放在4(TC水浴中預(yù)保 溫,有利于淀粉酶活性得測(cè)定,減少誤差。15、測(cè)定硝酸還原酶活性得離體法與活體各有何特點(diǎn)?4答:活體法步驟簡(jiǎn)單,適合快速、 多組測(cè)定,重復(fù)性不好,應(yīng)在4。C離體法步驟復(fù)朵,但重復(fù)性較好。需要在低溫與NA DH得條件

24、下進(jìn)行。1血、為什么用活體法測(cè)定硝酸還原酶得材料,在取樣前要進(jìn)行一段 時(shí)間得光合作用？答:因?yàn)闇y(cè)定前材料在進(jìn)行光合作用,會(huì)積累能量物質(zhì),可促進(jìn)硝酸還原酶得產(chǎn)生。17、活體法測(cè)植物體內(nèi)硝酸還原酶活力實(shí)驗(yàn)中,硝酸鹽還原過(guò)程為何在黑暗中進(jìn)行？ 答:硝酸鹽還原過(guò)程應(yīng)在黑暗中進(jìn)行,以防亞硝酸鹽還原為氨。18、活體法測(cè)植物體內(nèi)硝酸還原酶活力實(shí)驗(yàn)中,如何判斷真空抽氣得終點(diǎn)？答:真空抽氣時(shí),葉片完全軟化沉入杯底,則代表葉片組織間隙得氣體得以全部排除,那么 就就是真空抽氣得終點(diǎn)。19、用2,6二氯酚靛酚滴定法測(cè)定維生素C含量時(shí),為什么強(qiáng)調(diào)滴定時(shí)間不超過(guò)2分 鐘答:維生素C具有很強(qiáng)得還原性,如果滴定時(shí)間過(guò)長(zhǎng),維生

25、素C就會(huì)被空氣中得氧 氣氧化,從而減少維生素C得含量,最終影響到維生素C含量得測(cè)定。20、為什么用2,6二氯酚靛酚滴定法測(cè)定維生素C含量時(shí),要在測(cè)定得同時(shí)進(jìn)行2, 6 二氯酚靛酚溶液得標(biāo)定答:就是為了知道此時(shí)2.6-D染料得滴定度(每ml染料相當(dāng)于抗壞血酸得mg 數(shù))。就是因?yàn)?,6 D染料很不穩(wěn)定,隨著時(shí)間得推移,其滴定度一直在變化中,因此 只能現(xiàn)測(cè)現(xiàn)用。21、簡(jiǎn)述滴定法測(cè)定VC含量得實(shí)驗(yàn)原理。*答:還原型抗壞血酸還原染料2,6-二氯靛 酚,該染料在酸性中呈紅色,被還原后紅色消失。還原型抗壞血酸還原2,6-二氯靛酚后, 本身彼氧化成脫氫抗壞血酸。在沒(méi)有朵質(zhì)干擾時(shí),一定量得樣品提取液還原標(biāo)準(zhǔn)2

26、,6-二 氯靛酚得量與樣品中所含維生素C得量成正比。心2。為了準(zhǔn)確測(cè)定果蔬得抗壞血酸 含量,在測(cè)定過(guò)程應(yīng)注意些什么?答:實(shí)驗(yàn)所用得蒸憎水必須就是無(wú)氨水。濾必須用 干燥濾紙。格掌握加入抗壞血酸得含量、準(zhǔn)曲線應(yīng)在測(cè)定樣品得同時(shí)做,以減少操 作及反應(yīng)條件得誤差。定要水沸騰后才能將試管放入加熱,而11水浴鍋得水位一定要 高于試管內(nèi)試劑得高度。管從沸水浴中取出,一定要冷水迅速冷卻后才能加入乙醇、 (因加熱時(shí)形成得紅色還原型苛三銅，在冷卻過(guò)程被空氣得氧氧化而褪色,而苗三銅與氨 基酸得藍(lán)紫色反應(yīng)物仍留著,并變得更 加明顯、)銅與氨基酸反應(yīng)生成得顏色在1小 時(shí)內(nèi)保持穩(wěn)定,所以要抓緊時(shí)間比色。靈敏度在很大程度上

27、與H離子濃度有關(guān),最適 PH4、5,應(yīng)嚴(yán)格控制。23、簡(jiǎn)述“過(guò)氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝膠電泳”實(shí)驗(yàn)中所用得過(guò)硫酸彼、四甲基乙 二胺、蔗糖、漠酚藍(lán)、H2O2等試劑得作用就是什么？答:過(guò)硫酸筱得作用:使丙烯酰胺(ACr)與交聯(lián)劑甲叉丙烯酰胺(B i S)聚合成聚丙烯酰 胺凝膠。四甲基乙二胺(TEMED)得作用:作為丙烯酰胺(A C r)與交聯(lián)劑甲義丙烯酰胺 (BiS)聚合得加速劑。蔗糖得作用:使同工酶沉在點(diǎn)樣孔底部,防止同工酶漂浮。 浪酚藍(lán)得作用:可以作為電泳進(jìn)度得指示分子,起指示作用。H2O2得作用:作為氧化 物,使過(guò)氧化物酶同工酶催化H2O2分解,從而來(lái)進(jìn)行植物過(guò)氧化物酶同工酶得測(cè) 定。24

28、. 什么叫同工酶?測(cè)定同工酶有什么意義？答:同工酶:能催化同一種化學(xué)反應(yīng)但其分子結(jié)構(gòu)與帶電性質(zhì)不同得一組酶、(由于同 一種酶可分布于多種臟器組織,它們之中得任何一個(gè)發(fā)生病變,都可引起酶在血清中得 活力變化。除了少數(shù)組織專一性得酶以外,大多數(shù)血清酶不能特異地反映某個(gè)特定組織得 病變。）而不同臟器或組織得同工酶譜型不同,當(dāng)其發(fā)生病變后,釋放到血清中得各種同工 酶得比例也不一致,所以血清酶得同工酶譜型得改變能精確地反映出患病得部位與損傷 得程度,提高了血清酶測(cè)定在反映組織病變上得專一性O(shè) 25-.聚丙烯酰胺凝膠電泳分離 過(guò)氧化物同工酶實(shí)驗(yàn)中,電泳結(jié)束后如何進(jìn)行染色？電泳完畢,將電泳槽取出,倒去緩沖液

29、,取下凝膠管,放入培養(yǎng)皿中、用一個(gè)帶有長(zhǎng)針頭得注 射器,吸滿水,將針頭沿管壁插入,同時(shí)慢慢地將注射器中得水推出,并不斷轉(zhuǎn)動(dòng)凝膠管, 將凝膠管擠 脫出來(lái),也可用洗耳球擠壓。取0、5ml聯(lián)苯胺母液+ H20 9o 3 ml+0。 2m 13%H2O2,混勻后倒入盛有凝膠 條得培養(yǎng)皿。此時(shí)可以瞧到膠條上出現(xiàn)藍(lán)色或 棕褐色環(huán),即過(guò)氧化物酶帶,約十min后用口來(lái)水沖洗，這時(shí)藍(lán)色帶也慢慢變成棕褐 色。26、簡(jiǎn)述聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)得原理聚肉烯酰胺凝膠由丙烯酰胺與交聯(lián)劑甲義雙丙烯酰胺在催化劑作用下聚合而成,具有三 維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),其網(wǎng)孔大小可由凝膠濃度與交聯(lián)度加以調(diào)節(jié)。凝膠電泳兼有電荷效應(yīng)與分子 篩效應(yīng)

30、、被分離物質(zhì) 由丁所載電荷數(shù)量、分子大小與形狀得差異,因此在電泳時(shí)產(chǎn)生不 同得泳動(dòng)速率而相互分離、利用特異性得顏色反應(yīng)使待測(cè)酶著色,這樣就可在凝膠中展 現(xiàn)出酶譜。過(guò)氧化物酶就是植物體內(nèi)常見(jiàn)得氧化酶、植物體內(nèi)許多生理代謝過(guò)程常與 它得活性及其同工酶得種類有關(guān)。利用過(guò)氧化物酶能催化H 2 02把聯(lián)苯胺氧化成 藍(lán)色或棕褐色產(chǎn)物得原理,將經(jīng)過(guò)電泳后得凝膠置丁有H2O2及聯(lián)苯胺得溶液染色,出 現(xiàn)藍(lán)色或棕褐色部位即為過(guò)氧化物酶同工酶在凝膠中存在得位置,多條有色帶即構(gòu)成過(guò) 氧化物酶同工酶譜。29、葉綠素a在藍(lán)光區(qū)也有吸收峰,能否用這一吸收峰波長(zhǎng)進(jìn)行葉綠素a得定量分析？ 為什么？不能,因?yàn)轭惡}卜素得最大吸收

31、帶在400500得藍(lán)紫光區(qū),不吸收紅光,為了排除類 胡蘿卜素得干擾,所以選擇葉綠素在紅光區(qū)得最大吸收峰;并Jl葉綠素得溶液呈綠色, 易與藍(lán)紫光產(chǎn)生遮光效果,混淆實(shí)驗(yàn)效果。31、為什么提取葉綠素時(shí)干材料一定要用8 0%得丙酮，而新鮮得材料可以用無(wú)水丙 酮提?。恳?yàn)槿~綠素分子結(jié)構(gòu)得“頭部”就是親水得,與蛋白質(zhì)結(jié)合很牢,需經(jīng)過(guò)水解作用才可被 提取出來(lái)。而干材料中沒(méi)有水分，故提取葉綠素時(shí)干材料一定要用80%丙酮或9 5%乙 醇提取,而新鮮得材料總含有水分,可以贏無(wú)水丙酮或乙醇提取。33、影響呼吸速率測(cè)定得因素有哪些？答：1 o內(nèi)部因素。不同種類植物得呼吸速率不同,凡就是生長(zhǎng)快得植物呼吸速率就高, 生長(zhǎng)

32、慢得呼吸速率就低;一般旱生植物,生長(zhǎng)緩慢,呼吸速率比水生植物低;陰生植物所 處得光強(qiáng)度較弱,呼吸也較弱,呼吸速率比陽(yáng)生植物低。同一種植物在不同得生長(zhǎng)發(fā)育時(shí) 期,呼吸速率也不同,一般在幼苗期、開(kāi)花期等生長(zhǎng)旺盛期,呼吸速率増高。同一種植物得 不同器官,呼吸速率也不同,一般生殖器官比營(yíng)養(yǎng)器官高,幼嫩組織器官比衰老得組織器 官高,種子內(nèi)胚得呼吸速率比胚乳高。多年生植物得呼吸速率還表現(xiàn)出季節(jié)周期性變化, 在溫帶生長(zhǎng)得植物,春夭呼吸速率最高,夏天略降低,秋夭乂上升，以后一直下降,到冬夭降 到最低點(diǎn),這種周期性變化除了外界環(huán)境得影響外,與植物體得代謝強(qiáng)度、酶活性及呼吸 底物得多寡也有密切關(guān)系。2外界因素對(duì)呼

33、吸速率得影響、（1）溫度:溫度呼吸作用得影響主耍表現(xiàn)為溫度對(duì)呼吸酶 活性得影響。呼吸速率在一定范圍內(nèi)隨溫度得增高而增高,達(dá)到最高值后,繼續(xù)增高溫度, 呼吸速率反而下降、一般植物在OC以下,呼吸作用很 弱或幾乎停止，呼吸作用得最適 溫度一般在2 5C35°C之間，呼吸作用得最高溫度，一般在3 5°C4 5呼吸作用得最低溫度因植物種類不同有很大差異。呼吸作用得最適溫度總就是比光合作用得最 適溫度高。（2）氧氣:氧就是有氧呼吸途徑運(yùn)轉(zhuǎn)得必耍因素、從有氧呼吸來(lái)瞧,在氧濃度 較低情況下,呼吸速率與氧濃度成正比,達(dá)到氧飽與點(diǎn)以后,則無(wú)促進(jìn)作用、氧濃度過(guò)高或 過(guò)低都會(huì)對(duì)植物產(chǎn)生毒害。根系

34、缺氧會(huì)抑制根尖細(xì)胞分裂,影響根系內(nèi)物質(zhì)得運(yùn)輸,對(duì)植 物生長(zhǎng)發(fā)育造成嚴(yán)重危害。（3）二氧化碳二氧化碳就是呼吸作用得最終產(chǎn)物,當(dāng)外界 環(huán)境中二氧化碳濃度增高時(shí),脫竣反應(yīng)減慢,呼吸作用受到抑制、一些植物（如豆科）得種 子由于種皮限制，使呼吸作用釋放得CO2難以釋出,種皮內(nèi)積聚起高濃度得CO2 抑制了呼吸作用,從而導(dǎo)致種子休眠。（4）水分植物組織得含水量與呼吸作用有密切 得關(guān)系。在一定范圍內(nèi),呼吸速率隨組織含水量得増加而升高。干燥種子得呼吸作用很 微弱,當(dāng)種子吸水后,呼吸速率迅速增加。因此,種子含水量就是制約種子呼吸作用強(qiáng)弱得 重耍因素。對(duì)于整體植物來(lái)說(shuō),接近萎蔦時(shí),呼吸速率有所增加,如萎鳶時(shí)間較長(zhǎng),

35、細(xì)胞含水 量則成為呼吸作用得限制因素。影響呼吸作用得外界因素除了溫度、氧氣、二氧化碳、 水分之外,呼吸底物得含量（如可溶性糖）、機(jī)械損傷、一些礦質(zhì)元素（如磷、鐵、銅等）對(duì) 呼吸也有顯著影響。此外病原菌感染可使寄主得線粒體增多,多酚氧化酶活性提高,抗亂 呼吸與PPP途徑增強(qiáng)、34、在呼吸速率測(cè)定中哪些步驟容易出現(xiàn)誤差?應(yīng)怎樣避免。1）實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)該不時(shí)輕輕得搖動(dòng),使溶液表面得BaCO薄膜破壞,有利于CO得充 分吸收2）實(shí)驗(yàn)過(guò)程中還要防止口中呼出得氣體進(jìn)入瓶?jī)?nèi)3）應(yīng)該用無(wú)CO蒸憎水或 煮沸過(guò)得冷開(kāi)水洗滌廣口瓶35、廣口瓶橡皮塞上加一堿石灰管有何作用？37、在SOD測(cè)定中為什么設(shè)照光對(duì)照管與暗中空白

36、管？設(shè)照光對(duì)照管為消除日光燈得光質(zhì)差異;暗中空白管用來(lái)在測(cè)定吸收峰時(shí)做空白對(duì)照 得。3 8、影響SOD活力測(cè)定準(zhǔn)確性得主要因素就是什么?應(yīng)如何克服？主要因素就是：1試管,所用試管得玻璃質(zhì)量要一樣,包括厚度,直徑,質(zhì)量2光照條件, 光照條件要求一致,即照光時(shí)試管放得高度,背景等各外界條件因素要一致39、植物缺鎂與缺鐵表現(xiàn)癥狀有何異同為什么？答:相同點(diǎn):缺鎂與缺鐵都呈現(xiàn)缺綠癥。不同點(diǎn):缺鎂出現(xiàn)得缺綠癥狀首先從下部老葉上 表現(xiàn)出來(lái),而缺鐵得缺綠癥狀首先從上部新生葉表現(xiàn)出來(lái)、原因就是鎂就是參與循環(huán) 得元素,即可再利用元素,而鐵就是不參與循環(huán)得元素,即不可再利用元素、40簡(jiǎn)要介紹測(cè)定光合速率得三種方法及原理？改良半葉法注要就是測(cè)定單位時(shí)間、單位面積葉片干重得增加量;