遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)課件2 (1)

1、請(qǐng)問(wèn)請(qǐng)問(wèn)解離解離與與軟軟化化的目的是什的目的是什么？么？為保證染色的為保證染色的充分充分要注意哪要注意哪些問(wèn)題？些問(wèn)題？壓片時(shí)應(yīng)注意的壓片時(shí)應(yīng)注意的問(wèn)題有哪些？問(wèn)題有哪些？請(qǐng)注意比較經(jīng)過(guò)預(yù)處理和未經(jīng)預(yù)處理的材料有何不同？1.了解果蠅生活史各階段的形態(tài)特征，觀察果蠅的幾了解果蠅生活史各階段的形態(tài)特征，觀察果蠅的幾種常見(jiàn)的突變類型。種常見(jiàn)的突變類型。2.掌握辨別雌雄果蠅的方法。掌握辨別雌雄果蠅的方法。3.了解果蠅的飼養(yǎng)方法和處理方法。了解果蠅的飼養(yǎng)方法和處理方法。 1.材料：野生型和常見(jiàn)的突變型果蠅。材料：野生型和常見(jiàn)的突變型果蠅。2.用具：體視顯微鏡、放大鏡、小鑷子、培養(yǎng)瓶、麻醉瓶、用具：體視顯

2、微鏡、放大鏡、小鑷子、培養(yǎng)瓶、麻醉瓶、白瓷板、培養(yǎng)皿、毛筆。白瓷板、培養(yǎng)皿、毛筆。3. 藥品：乙醚、瓊脂、玉米粉、蔗糖、酵母粉、苯甲酸。藥品：乙醚、瓊脂、玉米粉、蔗糖、酵母粉、苯甲酸。果蠅形體小，生長(zhǎng)迅果蠅形體小，生長(zhǎng)迅速，繁殖率高，飼養(yǎng)速，繁殖率高，飼養(yǎng)簡(jiǎn)便，突變性狀多，簡(jiǎn)便，突變性狀多，是遺傳學(xué)研究的極好是遺傳學(xué)研究的極好材料。材料。1. 果蠅培養(yǎng)基的配制果蠅培養(yǎng)基的配制 玉米粉培養(yǎng)基玉米粉培養(yǎng)基2.果蠅的生活史觀察果蠅的生活史觀察 3.果蠅的麻醉果蠅的麻醉 乙醚麻醉乙醚麻醉0.5min后轉(zhuǎn)入培養(yǎng)皿中，如觀后轉(zhuǎn)入培養(yǎng)皿中，如觀察中蘇醒，可在培養(yǎng)皿內(nèi)放一個(gè)滴有乙醚的濾紙條補(bǔ)救。察中蘇醒，可在

3、培養(yǎng)皿內(nèi)放一個(gè)滴有乙醚的濾紙條補(bǔ)救。 4.果蠅的性狀觀察果蠅的性狀觀察1.描述果蠅的生活史。描述果蠅的生活史。2.如何區(qū)別雌雄果蠅？如何區(qū)別雌雄果蠅？1. 取材取材 取果蠅三齡幼蟲置于載玻片上，滴加取果蠅三齡幼蟲置于載玻片上，滴加0.7生生理鹽水理鹽水2.剖取果蠅唾腺剖取果蠅唾腺 3.染色壓片染色壓片4.鏡檢鏡檢1. 繪出所觀察到的果蠅唾腺染色體的圖像，標(biāo)明染色中心和繪出所觀察到的果蠅唾腺染色體的圖像，標(biāo)明染色中心和5條臂。條臂。2. 果蠅唾腺染色體與其他染色體在形態(tài)結(jié)構(gòu)上有什么區(qū)別？果蠅唾腺染色體與其他染色體在形態(tài)結(jié)構(gòu)上有什么區(qū)別？通過(guò)自行設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案，研究果通過(guò)自行設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案，研究果蠅兩

4、對(duì)相對(duì)性狀的雜交試驗(yàn)結(jié)果蠅兩對(duì)相對(duì)性狀的雜交試驗(yàn)結(jié)果分析，驗(yàn)證獨(dú)立分配規(guī)律。分析，驗(yàn)證獨(dú)立分配規(guī)律。1.材料：長(zhǎng)翅、黑檀體與殘翅、灰體的果蠅。材料：長(zhǎng)翅、黑檀體與殘翅、灰體的果蠅。2.用具：體視顯微鏡、飼養(yǎng)瓶、麻醉瓶、海棉板、白瓷板、用具：體視顯微鏡、飼養(yǎng)瓶、麻醉瓶、海棉板、白瓷板、解剖針、鑷子、毛筆等。解剖針、鑷子、毛筆等。3. 藥品：乙醚、酒精等。藥品：乙醚、酒精等。長(zhǎng)翅黑檀體的雌蠅與長(zhǎng)翅黑檀體的雌蠅與殘翅、灰體的雄蠅交殘翅、灰體的雄蠅交配配(或反交或反交)，F(xiàn)1代自代自交而得的交而得的F2產(chǎn)生性狀產(chǎn)生性狀分離和重組，出現(xiàn)四分離和重組，出現(xiàn)四種表現(xiàn)型，比例為種表現(xiàn)型，比例為9:3:3:1。

5、1. 麻醉麻醉2.選取長(zhǎng)翅、黑檀體處女蠅和殘翅、灰體雄蠅選取長(zhǎng)翅、黑檀體處女蠅和殘翅、灰體雄蠅56對(duì)對(duì)(或反交或反交)，一起放入事先裝有培養(yǎng)基的飼養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。，一起放入事先裝有培養(yǎng)基的飼養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。3.一周后倒出親本果蠅，等一周后倒出親本果蠅，等F1羽化后進(jìn)行觀察、記錄。羽化后進(jìn)行觀察、記錄。 4.任意選取正交或反交組合的任意選取正交或反交組合的F1雌雄果蠅雌雄果蠅(雌蠅必須處雌蠅必須處女蠅女蠅)78對(duì)，放入一個(gè)培養(yǎng)瓶中。對(duì)，放入一個(gè)培養(yǎng)瓶中。5.一周后倒去一周后倒去F1果蠅，待果蠅，待F2羽化后羽化后10天進(jìn)行觀察統(tǒng)計(jì)。天進(jìn)行觀察統(tǒng)計(jì)。1.對(duì)觀察資料進(jìn)行對(duì)觀察資料進(jìn)行2測(cè)驗(yàn)，討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否符合獨(dú)立

6、測(cè)驗(yàn)，討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否符合獨(dú)立分配規(guī)律。分配規(guī)律。2.果蠅雜交時(shí)應(yīng)注意哪些事項(xiàng)？果蠅雜交時(shí)應(yīng)注意哪些事項(xiàng)？1. 掌握人工誘發(fā)多倍體植物的原理、方法及其在植物掌握人工誘發(fā)多倍體植物的原理、方法及其在植物育種上的意義。育種上的意義。2. 觀察多倍體植物，鑒別植物染色體數(shù)目的變化。觀察多倍體植物，鑒別植物染色體數(shù)目的變化。1.材料：玉米、水稻或其他植物種子。材料：玉米、水稻或其他植物種子。 2.用具：顯微鏡、生化培養(yǎng)箱、冰箱、天平、鑷子、解剖用具：顯微鏡、生化培養(yǎng)箱、冰箱、天平、鑷子、解剖針、刀片、載玻片、蓋玻片、燒杯、量筒、吸水紙。針、刀片、載玻片、蓋玻片、燒杯、量筒、吸水紙。3. 藥品：秋水仙素

7、、藥品：秋水仙素、95%酒精、冰醋酸、鹽酸、碘化鉀等。酒精、冰醋酸、鹽酸、碘化鉀等。1. 秋水仙素溶液配制秋水仙素溶液配制2. 材料處理、固定、保存材料處理、固定、保存3. 壓片壓片4. 鏡檢鏡檢繪出玉米根尖多倍性細(xì)胞的中期染色體圖像。繪出玉米根尖多倍性細(xì)胞的中期染色體圖像。1. 了解微核測(cè)試原理和毒理遺傳學(xué)意義了解微核測(cè)試原理和毒理遺傳學(xué)意義 。2. 學(xué)習(xí)蠶豆根尖的微核測(cè)試技術(shù)學(xué)習(xí)蠶豆根尖的微核測(cè)試技術(shù) 。1.材料：蠶豆種子。材料：蠶豆種子。 2.用具：顯微鏡、鑷子、載玻片、蓋玻片、燒杯等。用具：顯微鏡、鑷子、載玻片、蓋玻片、燒杯等。3. 藥品：卡諾固定液、鹽酸酒精解離液、改良苯酚品紅染藥品

8、：卡諾固定液、鹽酸酒精解離液、改良苯酚品紅染液、液、NaN3等。等。微核是真核生物細(xì)微核是真核生物細(xì)胞經(jīng)各種理化因子胞經(jīng)各種理化因子作用后引起染色體作用后引起染色體畸變，在間期細(xì)胞畸變，在間期細(xì)胞中的一種表現(xiàn)形式。中的一種表現(xiàn)形式。1.浸種催芽浸種催芽2.用被檢測(cè)液處理根尖用被檢測(cè)液處理根尖3.根尖細(xì)胞恢復(fù)根尖細(xì)胞恢復(fù)4.根尖細(xì)胞固定、酸解、染色根尖細(xì)胞固定、酸解、染色 5.顯微鏡下觀察顯微鏡下觀察1. 在蠶豆根尖細(xì)胞的微核測(cè)試中，為什么要進(jìn)行恢在蠶豆根尖細(xì)胞的微核測(cè)試中，為什么要進(jìn)行恢復(fù)培養(yǎng)？復(fù)培養(yǎng)？2. 產(chǎn)生微核的根尖細(xì)胞在產(chǎn)生前的分裂中期可能出產(chǎn)生微核的根尖細(xì)胞在產(chǎn)生前的分裂中期可能出現(xiàn)

9、什么樣的中期分裂圖像？現(xiàn)什么樣的中期分裂圖像？掌握從高等真核生物細(xì)胞中制備基因組掌握從高等真核生物細(xì)胞中制備基因組DNA的基本原的基本原理，熟悉從高等植物中提取基因組理，熟悉從高等植物中提取基因組DNA的技術(shù)流程。的技術(shù)流程。1.材料：幼嫩的水稻幼苗。材料：幼嫩的水稻幼苗。 2.用具：水浴鍋、液氮罐、離心機(jī)、移液槍、電泳設(shè)備、用具：水浴鍋、液氮罐、離心機(jī)、移液槍、電泳設(shè)備、凝膠成像分析系統(tǒng)、研缽等。凝膠成像分析系統(tǒng)、研缽等。3. 藥品：藥品：2CTAB抽提緩沖液、氯仿抽提緩沖液、氯仿 異戊醇（異戊醇（24 1）、）、異丙醇、無(wú)水乙醇、異丙醇、無(wú)水乙醇、70%乙醇、乙醇、TE等。等。采用采用CTAB法提取植物法提取植物DNA1.樣品加液氮研磨成粉末，加樣品加液氮研磨成粉末，加2CTAB抽提緩沖液抽提緩沖液65水浴保溫水浴保溫30 min以上；以上；2.加入等體積的氯仿加入等體積的氯仿 異戊醇（異戊醇（24 1）；）；3. 12000 rpm，室溫，離心，室溫，離心1020 min； 4.將上清液加入將上清液加入2/3體積的經(jīng)體積的經(jīng)-20預(yù)冷的異丙醇；預(yù)冷的異丙醇；5.將將DNA沉淀用沉淀用70%乙醇洗滌；乙醇洗滌；6.干燥后的干燥后的DNA沉淀溶于適量沉淀溶于適量TE（pH8.0）緩沖液中；）緩沖液中； 7.取少量取少量DNA溶液在溶液在0.8%的瓊脂