動物細胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)(第一課時)

1、2.2 動物細胞工程動物細胞工程第一課時 皮膚燒傷，如果創(chuàng)面很?。ú淮笥谟矌牛┲灰つw燒傷，如果創(chuàng)面很小（不大于硬幣）只要保持清潔，甚至深度燒傷，也可能自愈。如果下層保持清潔，甚至深度燒傷，也可能自愈。如果下層真皮受損面積較大，常常需要植皮。植皮需要的健真皮受損面積較大，常常需要植皮。植皮需要的健康皮片。植皮需要的健康皮片，可以取自燒傷病人康皮片。植皮需要的健康皮片，可以取自燒傷病人自身未燒傷的部位（自體植皮），也可取自其他活自身未燒傷的部位（自體植皮），也可取自其他活人或尸體（異體植皮）等。自體植皮是永久性的，人或尸體（異體植皮）等。自體植皮是永久性的，取自其他人或動物的植皮是暫時性的，是在

2、創(chuàng)面愈取自其他人或動物的植皮是暫時性的，是在創(chuàng)面愈合過程中為保護創(chuàng)面而采取的措施，合過程中為保護創(chuàng)面而采取的措施，10101414天后就天后就要被身體排斥。要被身體排斥。 如果一個大面積燒傷的病人來說，自體如果一個大面積燒傷的病人來說，自體皮膚有限，其他渠道的皮膚來源不足。如何皮膚有限，其他渠道的皮膚來源不足。如何才能獲得大量的自體健康皮膚？才能獲得大量的自體健康皮膚？細胞增殖細胞增殖（1 1）思考：為什么培養(yǎng)前要將組織細胞分散成單）思考：為什么培養(yǎng)前要將組織細胞分散成單個細胞？個細胞？（2）胰蛋白酶真的不會把細胞消化掉嗎？為什）胰蛋白酶真的不會把細胞消化掉嗎？為什么？么？胰蛋白酶除了可以消化

3、細胞間的蛋白外，長時間胰蛋白酶除了可以消化細胞間的蛋白外，長時間的作用也會消化細胞膜蛋白，對細胞有損傷作用，的作用也會消化細胞膜蛋白，對細胞有損傷作用，因此因此必須控制好胰蛋白酶的消化時間必須控制好胰蛋白酶的消化時間。 P44P44 1.1.進行動物細胞傳代培養(yǎng)時用胰蛋白酶分散進行動物細胞傳代培養(yǎng)時用胰蛋白酶分散細胞，說明細胞間的物質(zhì)主要是什么成分？用胃細胞，說明細胞間的物質(zhì)主要是什么成分？用胃蛋白酶行嗎？蛋白酶行嗎？用胰蛋白酶分散細胞用胰蛋白酶分散細胞，說明說明細胞間的物質(zhì)主要是細胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)。 不能用胃蛋白代替不能用胃蛋白代替（最適（最適PHPH不同）不同）l幾個?？几拍?/p>

4、幾個常考概念l、細胞貼壁：、細胞貼壁： 懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁。稱為細胞貼壁。要求：要求：培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無毒、易培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無毒、易 于貼附。于貼附。、細胞的接觸抑制：、細胞的接觸抑制： 當(dāng)貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細當(dāng)貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的接胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的接觸抑制觸抑制。、原代培養(yǎng)：、原代培養(yǎng)： 、傳代培養(yǎng)：、傳代培養(yǎng)：細胞細胞懸浮懸浮液液1010代代細胞細胞5050代代細胞細胞無限無限傳代傳代原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)

5、傳代培養(yǎng)如何界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)？如何界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)？隨細胞增多，細胞就會停止分裂增殖隨細胞增多，細胞就會停止分裂增殖 無菌無毒環(huán)境、充足營養(yǎng)無菌無毒環(huán)境、充足營養(yǎng)（血清或血漿）、（血清或血漿）、適宜溫度、適宜溫度、PHPH、氣體環(huán)境。、氣體環(huán)境。溫度和溫度和PH ： 36.50.5 0.5 ；PH = 7.27.4PH = 7.27.4氣體環(huán)境氣體環(huán)境O2和和CO2 l 1 1、大規(guī)模的生產(chǎn)生物制品。、大規(guī)模的生產(chǎn)生物制品。l 2 2、培養(yǎng)的動物細胞作為基因工程的受體細胞。、培養(yǎng)的動物細胞作為基因工程的受體細胞。l 3 3、檢測判斷物質(zhì)的毒性。、檢測判斷物質(zhì)的毒性。l 4 4、培養(yǎng)

6、正?；蚋鞣N病變的細胞，用于生理、病理、藥、培養(yǎng)正?；蚋鞣N病變的細胞，用于生理、病理、藥理等方面的研究，如用于理等方面的研究，如用于 等，為等，為 及其他疾病提供及其他疾病提供理論依據(jù)。理論依據(jù)。 篩選抗癌藥物篩選抗癌藥物治療和預(yù)防癌癥治療和預(yù)防癌癥資料一：資料一： 培養(yǎng)的動物細胞可以用于培養(yǎng)的動物細胞可以用于檢測有毒物質(zhì)檢測有毒物質(zhì)。許。許多致畸、致癌物質(zhì)加入培養(yǎng)液后，培養(yǎng)細胞會發(fā)多致畸、致癌物質(zhì)加入培養(yǎng)液后，培養(yǎng)細胞會發(fā)生染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目的變異。根據(jù)變異細胞占全生染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目的變異。根據(jù)變異細胞占全部培養(yǎng)細胞的百分?jǐn)?shù)，可以判斷某種物質(zhì)的毒性。部培養(yǎng)細胞的百分?jǐn)?shù)，可以判斷某種物質(zhì)的毒性?，F(xiàn)

7、在動物細胞培養(yǎng)已經(jīng)成為檢測有毒物質(zhì)的快速現(xiàn)在動物細胞培養(yǎng)已經(jīng)成為檢測有毒物質(zhì)的快速而靈敏的有效手段。而靈敏的有效手段。 資料二：資料二：人工關(guān)節(jié)人工關(guān)節(jié)軟骨再生軟骨再生1.1.第一次手第一次手術(shù)術(shù): : 從從病人病人關(guān)節(jié)軟骨關(guān)節(jié)軟骨中未中未 受力的部分，取出一片受力的部分，取出一片約為約為葡萄葡萄干干大大小的健康小的健康軟軟骨骨組織組織。2.2.分分離軟離軟骨骨細胞并經(jīng)細胞并經(jīng)三星期的三星期的體體外外 培培養(yǎng)養(yǎng)，使，使細胞數(shù)細胞數(shù)增加增加約約10102020倍。倍。3.3.第二次手第二次手術(shù)術(shù): : 清理清理軟軟骨受骨受損損的部分，的部分，從從下方骨下方骨頭頭部位取出一片部位取出一片約與傷約與傷口口大大小相同的骨膜，小相同的骨膜，縫縫在在傷傷口上方，再口上方，再將將軟軟骨骨細胞細胞注射到骨膜下方。注射到骨膜下方。資料三：資料三：結(jié)果結(jié)果: : 經(jīng)過復(fù)健經(jīng)過復(fù)健一年一年后后即可即可恢復(fù)恢復(fù)正常的生活。正常的生活。比較項目比較項目植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)原理原理細胞的全能性細胞的全能性細胞增殖細胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基性質(zhì)固體固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基液體液體