檢驗(yàn)科免疫組管理程序性SOP文件.

1、陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：共99頁陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件（SOP）擬定人：批準(zhǔn)人：批準(zhǔn)日期：啟用日期：制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第1頁共99頁目錄文件名稱 頁碼 免疫實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置及人員情況3免疫實(shí)驗(yàn)室工作管理程序.4免疫實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度6免疫實(shí)驗(yàn)室工作流程19免疫實(shí)驗(yàn)室操作步驟20免疫室內(nèi)質(zhì)控失控分析管理制度42外部質(zhì)控血清的制備和保

2、存44儀器的使用維護(hù)45冰箱的使用、操作和維護(hù)程序.47桂林優(yōu)利特URIT-660酶標(biāo)儀分析儀操作維護(hù)規(guī)程.49深圳雷杜RT-3100洗板機(jī)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序62可調(diào)式移液器的標(biāo)準(zhǔn)操作程序64安徽航天SSC-1500B2生物安全柜的標(biāo)準(zhǔn)操作程序.66電熱恒溫水浴箱操作規(guī)程72制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第2頁共99頁目錄文件名稱 頁碼長沙湘智XZ-4A離心機(jī)操作規(guī)程73上海三申YM-50A高壓蒸汽滅菌器操作規(guī)程75室內(nèi)質(zhì)量控制的標(biāo)準(zhǔn)操作程序78室間質(zhì)量評價的標(biāo)

3、準(zhǔn)操作程序87實(shí)驗(yàn)室意外和事故處理92免疫室保密制度程序95免疫室應(yīng)急處理程序97本操作程序（SOP）的變動程序.99制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第3頁共99頁免疫實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置及人員情況為了更好發(fā)揮傳染病檢測在傳染病防治工作中的作用，根據(jù)全國傳染病檢測技術(shù)規(guī)范對于傳染病的檢測要求，我院檢驗(yàn)科設(shè)置了免疫實(shí)驗(yàn)室。為了使檢測工作能夠正常進(jìn)行，保證傳染病檢測結(jié)果的正確性和準(zhǔn)確性，我們不僅對工作環(huán)境條件和檢測設(shè)施加以整改，而且建立了完整的實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程，以確保

4、傳染病檢測結(jié)果的準(zhǔn)確有效。傳染病檢測實(shí)驗(yàn)室分為清潔區(qū)、半污染區(qū)和操作區(qū)，配備了專用的的生物安全柜、電腦、冰箱、酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、恒溫培養(yǎng)箱、離心機(jī)、高壓消毒鍋等設(shè)備和安全防護(hù)用品等。根據(jù)傳染病檢測實(shí)驗(yàn)室工作的需要，我科配備從事檢測工作人員6名，其中專職工作人員2名，中級衛(wèi)生技術(shù)職稱人員1名，所有人員從業(yè)年限均在5年以上。免疫實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人： 薛軍衛(wèi)人 員： 魏曉麗 張小玲 陳麗麗 景利娜倪宇芹制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第4頁共99頁免疫實(shí)驗(yàn)室工作管理程序一、

5、目的對傳染病四項（甲肝、乙肝、丙肝、梅毒）、肺炎支原體、風(fēng)濕四項、生化標(biāo)本檢驗(yàn)前處理工作全過程進(jìn)行控制，保證檢驗(yàn)工作符合規(guī)定要求，提供可靠的檢驗(yàn)數(shù)據(jù)和有效的檢驗(yàn)報告。二、范圍適用于本實(shí)驗(yàn)室開展的各類醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作的各個環(huán)節(jié)。三、職責(zé)1、工作人員負(fù)責(zé)住院檢驗(yàn)樣品的接收。3、負(fù)責(zé)組織協(xié)調(diào)完成檢驗(yàn)任務(wù)，并負(fù)責(zé)對檢驗(yàn)工作質(zhì)量的監(jiān)督。4、工作人員負(fù)責(zé)執(zhí)行檢驗(yàn)任務(wù)，做好檢驗(yàn)記錄，填報檢驗(yàn)結(jié)果。5、報告授權(quán)審核人負(fù)責(zé)檢驗(yàn)報告的簽發(fā)、發(fā)放。6、實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)檢驗(yàn)資料的歸檔保管(計算機(jī))工作。四、工作程序（一）、檢驗(yàn)工作分類本實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)工作，根據(jù)標(biāo)本的來源不同分為采樣檢驗(yàn)和送樣檢驗(yàn)，根據(jù)工作性質(zhì)分為常規(guī)標(biāo)本檢

6、驗(yàn)和檢驗(yàn)質(zhì)量抽檢委托復(fù)檢。（二）、采樣及樣品管理采樣執(zhí)行陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科文件臨床檢驗(yàn)標(biāo)本采集與送檢手冊。樣品接收、分發(fā)和保管處理，執(zhí)行本科程序文件標(biāo)本管理程序和標(biāo)本采樣管理程序。（四）、標(biāo)本檢驗(yàn)制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第5頁共99頁檢驗(yàn)執(zhí)行本科程序文件標(biāo)本檢驗(yàn)管理程序和檢驗(yàn)項目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。（五）、檢驗(yàn)依據(jù)1、國家標(biāo)準(zhǔn)方法；2、部頒標(biāo)準(zhǔn)方法和檢驗(yàn)規(guī)范；3、衛(wèi)生技術(shù)部門推薦使用方法；4、有關(guān)科技文獻(xiàn)或雜志上發(fā)表的方法；5、自編規(guī)程的使用執(zhí)行檢驗(yàn)方法確

7、認(rèn)程序。（六）、檢驗(yàn)實(shí)施 檢驗(yàn)人員按檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)或試劑說明書的要求按時完成檢驗(yàn)任務(wù)，并按程序文件記錄檔案管理程序做好原始記錄。（七）、檢驗(yàn)報告的編制、復(fù)核和簽發(fā)按本科程序文件檢驗(yàn)報告管理程序執(zhí)行。（八）、檢驗(yàn)方法控制檢驗(yàn)必須按全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程規(guī)定的方法或標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法進(jìn)行，也可用經(jīng)本科技術(shù)負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)的非標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法進(jìn)行。其他檢驗(yàn)方法不得采用。制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第6頁共99頁免疫實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度一、實(shí)驗(yàn)室工作制度1、熱愛黨，熱愛社會主義，堅持四項基本原

8、則，全心全意為人民服務(wù)。2、努力學(xué)習(xí)政治，刻苦鉆研業(yè)務(wù)，發(fā)揚(yáng)救死扶傷，實(shí)行革命人道主義，對病人如親人，態(tài)度和藹，有問必答。3、熱愛本職工作，服從分配，遵守勞動紀(jì)律，做到不遲到、不早退，不擅自離開工作崗位，不私自干私活。4、嚴(yán)格執(zhí)行規(guī)章制度，盡職盡責(zé)，及時做好各項檢驗(yàn)結(jié)果記錄，自覺抵制不良之風(fēng)。5、識大體，顧大局，關(guān)心集體，團(tuán)結(jié)友愛，不背后議論，搬弄是非。6、講究文明禮貌、積極參加愛國衛(wèi)生運(yùn)動，美化環(huán)境，保持醫(yī)院科室整潔，安靜、大方。7、免疫實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定嚴(yán)格的管理制度和標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程，工作人員必須充分了解各項規(guī)定并嚴(yán)格遵照執(zhí)行。二、崗位責(zé)任制1、崗位責(zé)任制是保證工作質(zhì)量和醫(yī)療安全，提高工作效率的

9、重要環(huán)節(jié)。建立崗位責(zé)任制，做到人人分工職責(zé)明確，事事有人負(fù)責(zé)，立足本職，團(tuán)結(jié)互助，相互協(xié)調(diào)，保證各項任務(wù)的勝利完成。2、免疫實(shí)驗(yàn)室由有實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員負(fù)責(zé)。3、牢固樹立把質(zhì)量放在第一位的思想，在工作中必須加強(qiáng)檢查和復(fù)查制度，以保證血液質(zhì)量及醫(yī)療安全。制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第7頁共99頁4、交接工作必須認(rèn)真負(fù)責(zé)，須核對實(shí)物和記錄，對工作一般情況、存在問題和注意事項應(yīng)進(jìn)行具體交待，否則，發(fā)生問題由交班人負(fù)責(zé)。5、職工臨時因故離開工作崗位，必須將工作委托

10、給能勝任該項工作的人員，否則，發(fā)生問題由原擔(dān)任該項工作者負(fù)責(zé)。6、新參加工作的職工，在未熟悉和掌握工作前不能獨(dú)立工作不能頂崗位，在確能掌握經(jīng)考核合格后方可。7、建立免疫實(shí)驗(yàn)室專用的精密儀器和重要設(shè)備專責(zé)崗位制，其他人不得任意使用。嚴(yán)格按照儀器操作規(guī)程操作，不可擅自亂改設(shè)置。8、凡是一物多人使用的，除共同負(fù)責(zé)外，應(yīng)指定一人為該崗位責(zé)任制負(fù)責(zé)人，負(fù)責(zé)指導(dǎo)正確操縱，定期安全檢查，經(jīng)常維護(hù)保養(yǎng)，保持正常運(yùn)轉(zhuǎn)，該負(fù)責(zé)人有權(quán)制止任何違章操作和有害設(shè)備安全的行為。9、人員職責(zé)分工：每日正班人員負(fù)責(zé)樣品的采集，接收，執(zhí)行檢驗(yàn)任務(wù)，做好檢驗(yàn)記錄，填報檢驗(yàn)數(shù)據(jù)，簽發(fā)報告及實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的日常維護(hù)和保養(yǎng)。副班人員負(fù)

11、責(zé)協(xié)助正班人員做好實(shí)驗(yàn)室的所有日常工作，并負(fù)責(zé)對檢驗(yàn)工作質(zhì)量的監(jiān)督，檢驗(yàn)報告的復(fù)核、發(fā)放，結(jié)果的解釋，實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)消毒以及每日醫(yī)療廢棄物的消毒處理。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)檢驗(yàn)資料的歸檔保管(計算機(jī))工作。三、標(biāo)本管理制度 （一）、樣品的采集和處理傳染病檢測最常用的樣品是血液，包括血清、血漿和全血。常用的血液樣品的采集和處理方法如下：制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第8頁共99頁1、血清樣品采集和處理（1）、用一次性注射器（或真空采血管）抽取一定量靜脈血，室溫下自然放置

12、12h，待血液凝固、血塊收縮后再用3000r/min離心15min，吸出血清備用。2、抗凝血樣品采集和處理（1）、用加有抗凝劑的真空采血管（或一次性注射器抽取靜脈血，轉(zhuǎn)移至加有抗凝劑的試管），反復(fù)輕搖，分離血漿和血細(xì)胞備用。（2）、應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選用適當(dāng)?shù)目鼓齽?K3EDTA、肝素、枸櫞酸鈉)。3、采集樣品注意事項（1）、采集樣品原則上應(yīng)按臨床采血技術(shù)規(guī)范操作。（2）、采集樣品時應(yīng)注意安全，建議采用真空采血管及蝶形針具，以避免直接接觸血液；接觸感染者病人血液/體液的操作,應(yīng)戴雙層手套。（3）、所有的血液、血清均應(yīng)視為有潛在傳染性，都應(yīng)以安全的方式進(jìn)行操作。（4）、應(yīng)象操作未知傳染風(fēng)險樣品一樣，

13、小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的質(zhì)量控制和參考物質(zhì)。用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。（5）、采血時一定要注意安全，采血用一次性注射器，謹(jǐn)慎操作，防止發(fā)生刺傷皮膚和造成外界污染。（6）、離心機(jī)要使用密閉的罐和密封頭，以防液體溢出或在超/高速離心時形成氣溶膠。（二）樣品的保存用于抗體檢測的血清或血漿樣品，應(yīng)存放于-20以下，短期（1周）內(nèi)進(jìn)行檢測的樣品可存放于2-8。制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第9頁共99頁（三）樣品的接收1、含有感染性樣品的包裹必須在具有處理感

14、染源設(shè)備的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)由經(jīng)過培訓(xùn)的、穿戴防護(hù)衣的工作人員打開，用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。2、核對樣品與送檢單，認(rèn)真核對標(biāo)本上病人姓名、年齡、性別、病區(qū)、床號、住院號是否與申請單符合。檢查樣品管有無破損和溢漏，如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將尚存留的樣品移出，對樣品管和盛器消毒，同時通知有關(guān)科室。3、檢查樣品的狀況，觀察標(biāo)本的量、標(biāo)本類型、是否抗凝或有小凝塊樣品，記錄有無嚴(yán)重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃疸等情況，判斷標(biāo)本是否符合檢驗(yàn)要求。如果污染過重或者認(rèn)為樣品不能被接受，則應(yīng)和臨床科室聯(lián)系。4、打開標(biāo)本容器時要小心，以防內(nèi)容物潑濺。樣品處理時若內(nèi)容物有可能濺出，則應(yīng)在生物安全柜中戴手套進(jìn)行。同時應(yīng)戴口罩、防護(hù)眼

15、鏡，雙層手套以防皮膚或粘膜污染。7、不符要求的標(biāo)本，必須第一時間通知臨床，說明情況重新采集。不符要求的標(biāo)本與可疑含有感染性樣品用后的包裹同檢驗(yàn)后的標(biāo)本一樣進(jìn)行消毒或無害化處理后廢棄。（四）、標(biāo)本檢測1、離心機(jī)要使用密閉的罐和密封頭，以防液體溢出或在超/高速離心時形成氣溶膠。2、在標(biāo)本足夠的情況下，不能浪費(fèi)、隨意丟棄或損壞標(biāo)本。應(yīng)象操作未知傳染風(fēng)險樣品一樣，小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的質(zhì)量控制和參考物質(zhì)。用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科

16、頁碼：第10頁共99頁（五）、標(biāo)本處理 檢驗(yàn)標(biāo)本先用含2-3g/L有效氯消毒劑浸泡半小時，再用高壓鍋高壓消毒。然后用雙層專用黃色醫(yī)用垃圾袋專人收集所有廢棄醫(yī)用垃圾。送專門存放醫(yī)用垃圾處統(tǒng)一焚化處理。并做好登記。四、試劑管理制度（一）、采購與審批科主任根據(jù)需要定期擬定采購計劃，交由院領(lǐng)導(dǎo)審批，批核后由科主任與供應(yīng)商聯(lián)系進(jìn)貨。（二）、驗(yàn)收與登記倉管負(fù)責(zé)人根據(jù)供應(yīng)商提供的試劑及清單對數(shù)量、品種、品牌、包裝等進(jìn)行驗(yàn)收，并將入庫數(shù)據(jù)登記。（三）、貯存冷藏試劑統(tǒng)一存放在免疫室實(shí)驗(yàn)室專用的冰箱內(nèi)，冰箱保管及溫度登記由專人負(fù)責(zé)。免疫室試劑一般應(yīng)28避光保存，在有效期內(nèi)使用。（四）、出庫管理各室提出試劑申領(lǐng)，倉

17、管人填寫出庫單據(jù)，認(rèn)領(lǐng)人簽名后出庫。（五）、其它1、試劑的保存應(yīng)嚴(yán)格按照要求存放，以保證有效期內(nèi)能有效地使用，杜絕浪費(fèi)現(xiàn)象。2、倉管人應(yīng)對試劑庫存定期檢查，不使用過期變質(zhì)的試劑。3、易燃，易爆試劑應(yīng)分開存放遠(yuǎn)離火源和電源。 制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第11頁共99頁4、劇毒試劑必須由科主任和負(fù)責(zé)科室保衛(wèi)的同志負(fù)責(zé)保存，放保險箱內(nèi)，使用時應(yīng)有兩人在場，并做好登記。五、環(huán)境消毒隔離制度1、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)分為清潔區(qū)和操作區(qū)，清潔區(qū)要注意保護(hù)不受污染。操作有

18、氣溶膠可能的標(biāo)本應(yīng)配置生物安全柜及其它防護(hù)設(shè)置，如紫外線燈，排氣扇等操作區(qū)的工作臺及地面每日用消毒液擦拭一次，有污染時隨時消毒，每周大掃除一次。2、采血室每日操作前用清水擦拭操作臺一次，采血結(jié)束用消毒液擦拭操作臺、桌子和地面一次，紫外線每日照射消毒二次，每月空氣細(xì)菌培養(yǎng)一次，紫外線強(qiáng)度定期測定。3、各種檢驗(yàn)標(biāo)本的收集，送檢必須用相應(yīng)指定的容器留取，不得外溢污染。4、靜脈及末稍采血，應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行消毒隔離措施，靜脈抽血做到一人一針一筒一巾一帶一消毒，所用止血帶及紙墊每日消毒，末稍采血一人一片一管，杜絕交叉污染。5、一次性醫(yī)用器具包括采血針，注射器、尿杯、血紅蛋白微量吸血吸管，應(yīng)嚴(yán)格做好領(lǐng)發(fā)登記，注射

19、器先浸泡消毒后由供應(yīng)室一對一調(diào)換，統(tǒng)一處理，其余一次性器具浸泡消毒后裝入污物袋送焚燒爐焚燒。6、檢驗(yàn)人員在進(jìn)行靜脈抽血時應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作技術(shù)，操作前必須洗手必須戴好帽子與口罩，操作臺和手被污染時應(yīng)用肥皂和流水認(rèn)真洗手，必要時用消毒液浸泡雙手，酒精、碘酒瓶每周更換消毒兩次。制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第12頁共99頁7、溢出試管外的血液，應(yīng)立即用碘酒棉簽擦拭干凈，注意防止玻璃碎片刺傷手，并注意試管有無破裂。8、當(dāng)針頭和碎玻璃刺傷手時,用流水沖洗,擠出血水,

20、應(yīng)立即用碘酒消毒局部。9、實(shí)驗(yàn)室操作時應(yīng)戴上手套。吸取標(biāo)本，離心振蕩等應(yīng)嚴(yán)格按操作規(guī)程，防止自身和實(shí)驗(yàn)室受污染。10、已檢查標(biāo)本與容器分別浸泡于次氯酸鈉(2000mg/L)中兩小時后，標(biāo)本傾棄，一次性容器送焚燒，重復(fù)使用的經(jīng)清洗消毒和滅菌后再使用，均要有記錄。有毒化學(xué)試劑和放射性試劑使用后要經(jīng)無害化處理，防止污染環(huán)境。11、非科室工作人員不準(zhǔn)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，外來人員參觀需經(jīng)科主任同意方可進(jìn)入。六、實(shí)驗(yàn)臺消毒措施1、實(shí)驗(yàn)臺消毒措施必須符合免疫室實(shí)驗(yàn)室的通用生物安全要求。由專人按特定程序和方法進(jìn)行清潔和消毒。2、臺面的清潔消毒，保持清潔、濕式打掃。每天開始工作前用濕布抹擦1次，地面用濕拖把擦1次，禁用

21、干抹干掃。抹布和拖把等清潔用具實(shí)驗(yàn)室專用，不得混用，用后洗凈晾干，下班前用含氯消毒劑（次氯酸鈉，含有效氯2000mg/L）、0.20.5%過氧乙酸或75%乙醇抹擦1次。也可用便捷式高強(qiáng)度紫外線消毒器近距離照射消毒。制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第13頁共99頁3、應(yīng)象操作未知傳染風(fēng)險樣品一樣進(jìn)行消毒與滅菌，小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的血液、質(zhì)量控制和參考物質(zhì)，若被上述物品明顯污染，如具傳染性的標(biāo)本或培養(yǎng)物外溢，濺潑或器皿打破，灑落于臺面，應(yīng)立即用消

22、毒液消毒，用5000mg/L有效氯消毒劑、過氧乙酸或乙醇灑于污染的臺面，并使消毒液浸過污染表面，保持3060 min后再擦，拖把用后浸于上述消毒液內(nèi)1h以上。4、各類在實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)臺上操作后的廢棄物品均應(yīng)視作物染物分類處理，所有廢棄物應(yīng)視為污染物品，按照傳染病防治法處理。七、廢棄物處置和實(shí)驗(yàn)室消毒1、廢棄物處置廢棄物處置應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求（GB 19489-2004）和消毒技術(shù)規(guī)范（2002年版）。從免疫實(shí)驗(yàn)室出來的所有廢棄物，包括不再需要的樣品、培養(yǎng)物和其它物品，均應(yīng)視為感染性廢棄物，應(yīng)置于專用的密封防漏容器中，安全運(yùn)至消毒室，并在高壓消毒后再進(jìn)行處理或廢棄。2、常用的物理消毒方法壓

23、力蒸汽消毒，121，保持1520min; 干燥空氣烘箱消毒（干烤消毒），140，保持23h。制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第14頁共99頁3、常用的化學(xué)消毒方法最常用的化學(xué)消毒劑是含氯消毒劑（次氯酸鈉，含有效氯20005000mg/L）、75%乙醇和2%戊二醛，保持1030 min。4、廢棄物缸：5000mg/L 次氯酸鈉。5、生物安全柜工作臺面和儀器表面：75%乙醇。6、溢出物：5000mg/L次氯酸鈉。7、污染的臺面和器具：2000mg/L 次氯酸鈉,也

24、可以用過氧化氫或過氧乙酸。器械可用2%戊二醛浸泡消毒。八、消毒液的配制及使用措施1、實(shí)驗(yàn)室最常用的化學(xué)消毒劑是含氯消毒劑（次氯酸鈉，含有效氯2000-5000mg/L）、75%乙醇和2%戊二醛，保持1030 min。2、含氯消毒劑的配制：次氯酸鈉原液使用前進(jìn)行1：201：50稀釋（2000-5000mg/L）或聯(lián)昌84使用前進(jìn)行1：101：25（2000-5000mg/L）稀釋后，用于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的消毒。3、乙醇，俗稱“酒精”，能夠殺滅多種細(xì)菌，對病毒有一定的殺滅作用，7075%的效果最好。因此，使用前新鮮配置足量7075%的乙醇，用于生物安全柜、工作臺面和儀器表面的消毒，可以達(dá)到最佳的消毒效果。

25、4、過氧乙酸也是目前使用比較廣泛的一種高效消毒劑，新鮮配置13%的過氧乙酸熏蒸，用于地面、墻壁、實(shí)驗(yàn)器材及實(shí)驗(yàn)室內(nèi)資料、文件、書本等物品的消毒。0.04%的過氧乙酸用于實(shí)驗(yàn)室工作人員手浸泡120分鐘，再用肥皂洗手。制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第15頁共99頁5、2%戊二醛用于可浸泡物品的消毒，醫(yī)療器械等。6、實(shí)驗(yàn)室常用化學(xué)消毒劑的配置，本著多用多配，少用少配，現(xiàn)用現(xiàn)配的原則，保證消毒劑使用時的濃度，保證消毒效果。九、消防安全制度1、根據(jù)“誰主管、誰負(fù)責(zé)”的

26、原則，實(shí)行科室負(fù)責(zé)制。 2、主管領(lǐng)導(dǎo)和保衛(wèi)科對全體職工經(jīng)常進(jìn)行消防安全教育，提高思想認(rèn)識，掌握消防知識和消防器材的使用。 3、嚴(yán)格執(zhí)行安全防火管理制度各種火種與易燃易爆物品，必須嚴(yán)格分區(qū)，保持一定的安全距離。實(shí)驗(yàn)室實(shí)施單向流向制度，通道不得亂堆放易燃爆物品和雜物。 4、嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)吸煙。 5、電器的安裝與拆除，必須由電工進(jìn)行，嚴(yán)禁亂接電源，亂后電線。 6、各種機(jī)電設(shè)備、高溫電器設(shè)備、耐高壓容器和設(shè)施，使用時必須有專人負(fù)責(zé)，隨時檢查，消除隱患，嚴(yán)防事故發(fā)生。7、各防火區(qū)域設(shè)置的消防器材和設(shè)備，應(yīng)定期進(jìn)行檢查，維修和更換，隨時處于完好狀態(tài)，并不得隨便挪動。8、任何人發(fā)現(xiàn)火、水災(zāi)等隱患者，必須及時

27、向科領(lǐng)導(dǎo)報告?？浦魅渭皶r向院領(lǐng)導(dǎo)報告，及時做好善事處理工作。制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第16頁共99頁十、生物安全防護(hù)制度1、上崗工作人員應(yīng)是經(jīng)過崗前安全與技術(shù)培訓(xùn)，取得合格證，具有獨(dú)立工作能力的人員。2、進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室應(yīng)穿戴手套，必要時（如對陽性標(biāo)本進(jìn)行復(fù)測或檢測高危標(biāo)本）要戴防護(hù)眼鏡，防止污染暴露的皮膚和衣物。3、嚴(yán)格按照操作規(guī)程操作。操作過程中，不得用戴手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等。4、操作時可能發(fā)生的觸電、失火、玻璃割傷、針頭刺傷

28、、燒傷、不慎中毒、傳染性標(biāo)本的污染，有應(yīng)急處理的方法，有關(guān)工作人員均應(yīng)熟悉。5、操作中手套破損，應(yīng)立即丟棄，洗手后戴上新手套繼續(xù)操作，不慎發(fā)生瀉漏，應(yīng)立即按照發(fā)生職業(yè)暴露后的處理措施，進(jìn)行處理。6、防止腐蝕、灼傷、中毒、火災(zāi)和爆炸等事件發(fā)生。7、實(shí)驗(yàn)操作完畢后，應(yīng)按照實(shí)驗(yàn)室清理與消毒程序，進(jìn)行善后處理。同時記錄相關(guān)資料與數(shù)據(jù)并存檔。8、工作結(jié)束后，應(yīng)先洗戴手套的手，然后脫去手套丟棄，再脫去工作衣，用肥皂和流動水洗手后離開實(shí)驗(yàn)室。9、注意安全，隨手關(guān)門，做好水，電，門的安全保衛(wèi)工作，防火防盜防水。制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP

29、-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第17頁共99頁十一、職業(yè)暴露的防護(hù)及處理措施    實(shí)驗(yàn)室職業(yè)暴露是指檢驗(yàn)工作人員在從事檢測工作過程中意外被病毒感染者或者病人的血液、體液污染了皮膚或者粘膜，或者被含有傳染病病毒的血液、體液污染了的針頭及其他利器刺破皮膚,有可能被病毒感染的情況。（一）、防護(hù)措施：   1.醫(yī)務(wù)人員進(jìn)行有可能接觸病人血液、體液的診療和護(hù)理操作時必須戴手套，操作完畢，脫去手套后立即洗手，必要時進(jìn)行手消毒。   2.在診療、護(hù)理操作過程中，有可能發(fā)生血液、體液飛濺到醫(yī)務(wù)人員的面

30、部時，醫(yī)務(wù)人員應(yīng)當(dāng)戴手套、具有防滲透性能的口罩、防護(hù)眼鏡；有可能發(fā)生血液、體液大面積飛濺或者有可能污染醫(yī)務(wù)人員的身體時，還應(yīng)當(dāng)穿戴具有防滲透性能的隔離衣或者圍裙。  3.醫(yī)務(wù)人員手部皮膚發(fā)生破損，在進(jìn)行有可能接觸病人血液、體液的診療和護(hù)理操作時必須戴雙層手套。  4.醫(yī)務(wù)人員在進(jìn)行侵襲性診療，護(hù)理操作過程中，要保證充足的光線，并特別注意防止被針頭、縫合針、刀片等銳器刺傷或者劃傷。  5.使用后的銳器應(yīng)當(dāng)直接放入耐刺、防滲漏的利器盒，也可使用具有安全性能的注射器、輸液器等醫(yī)用銳器，以防刺傷。  6.禁止將使用后的一次性針頭重新套上針頭套。禁止用手直接接觸使

31、用后的針頭、刀片等銳器。制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第18頁共99頁十二、篩查檢驗(yàn)程序1、篩查試劑必須是經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊批準(zhǔn)、批批檢合格、在有效期內(nèi)的試劑。推薦使用經(jīng)臨床質(zhì)量評估敏感性和特異性高的試劑。1）甲肝：上?？迫A2）乙肝：英科新創(chuàng)3）丙肝：英科新創(chuàng)4）梅毒：英科新創(chuàng)5）肺炎支原體：濰坊生物6）風(fēng)濕四項：上海捷門2、篩查方法1）、酶聯(lián)免疫試驗(yàn)（ELISA）2）、快速檢測（RT） 3）、其他檢測 制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)

32、院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第19頁共99頁免疫實(shí)驗(yàn)室工作流程按照陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科文件臨床檢驗(yàn)標(biāo)本采集與送檢手冊。病房標(biāo)本由護(hù)士采集送檢驗(yàn)科，門診病人由檢驗(yàn)科人員采集送免疫室，免疫室工作人員接到標(biāo)本將標(biāo)本放入水浴箱30-60min，離心機(jī)3000r/min離心10分鐘依據(jù)化驗(yàn)單申請項目進(jìn)行操作，填寫檢驗(yàn)者復(fù)核者以及檢驗(yàn)日期，門診報告單做完即可發(fā)出住院報告單下午送回臨床各科室。檢驗(yàn)完之后的血液標(biāo)本在第二天早上收集放冰箱冷藏室五到七天，并寫明日期。幾天之后無問題方可將標(biāo)本仍醫(yī)療垃圾袋，按照醫(yī)療垃圾管

33、理辦法扔到指定的位置由醫(yī)院統(tǒng)一處理。制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第20頁共99頁 免疫實(shí)驗(yàn)室操作步驟（一）甲型肝炎病毒IgM抗體（HAV-IgM）1 檢驗(yàn)?zāi)康模簷z測人血清或血漿中的抗HAV-IgM。2 檢測原理：本品系用抗人-IgM（u鏈）包被的微孔板，配以純甲型肝炎抗原（HAV-Ag） 和酶標(biāo)記的甲型肝炎病毒抗體（抗HAV-HRP）及其它試劑，采用捕獲法原理，檢測人血清或血漿中的抗-HAV-IgM。3 試劑：上?？迫A生物工程股份有限公司組分名稱數(shù)量規(guī)格組

34、分名稱數(shù)量規(guī)格HAV-IgM微孔板1塊48T×1底物A1支4.0 mLHAV-IgM酶標(biāo)記抗體1支3.2mL底物B1支4.0 mLHAV-IgM陽性對照血清1支1 .0mL終止液（2MH2SO4）1支3.5 mLHAV-IgM陰性對照血清1支1.0mL封口膜3張甲肝抗原1支2.2 mL濃縮洗滌液1支30 mL自封袋1個說明書1份4 操作：4.1 配液：濃縮洗滌液配制前充分搖勻（如有結(jié)晶析出應(yīng)充分溶解）濃縮洗滌液和蒸餾水或去離子水按1：19稀釋后使用。4.2 編號：將微孔條固定于支架，按序編號。4.3 加樣：待測樣本用生理鹽水作1：1000稀釋，每個樣本檢測孔加入稀釋樣本100 uL。

35、設(shè)陰陽對照各1孔，每孔加入100 uL，并設(shè)空白對照1孔。4.4 溫育：置37溫育20分鐘，室溫平衡2分鐘。4.5 洗滌：用洗滌液充分洗滌5次，洗滌完后扣干（每次應(yīng)保持30-60秒的浸泡時間）。4.6 加抗原、酶：每孔加入抗原（HAV-Ag）30 uL、酶標(biāo)記抗體50uL（1滴），充分混勻。4.7 溫育：置37溫育20分鐘。4.8 洗滌：用洗滌液充分洗滌5次，洗滌完后扣干（每次應(yīng)保持30-60秒的浸泡時間）。4.9 顯色：每孔加底物A、B各50uL，輕拍混勻，置37暗置15分鐘。4.10 終止：每孔加終止液50uL，混勻。4.11 測定：用酶標(biāo)儀單波長450nm/630nm測定各孔OD值（用單

36、波長測定需設(shè)定空白對照一孔，30分鐘完成測定，并記錄結(jié)果）。制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第21頁共99頁5. 結(jié)果判定：5.1 臨界值（C.O.）的計算：臨界值=陰性對照孔OD均值N×2.1 陰性對照OD值低于0.0500.050計算，高于0.050按實(shí)際OD值計算。5.2結(jié)果判定：樣品OD值S/C.O.1者為HAV-IgM陽性樣品OD值S/C.O.1者為HAV-IgM陰性5.3 失效：如果陽性對照OD均值小于0.05，則表明不正常的操作或試劑盒

37、已變質(zhì)損壞。在此情況下，應(yīng)再次仔細(xì)閱讀說明書，并用新的試劑盒重新測試。如果問題仍然存在，應(yīng)立即停止使用此批號產(chǎn)品，并與當(dāng)?shù)毓?yīng)商聯(lián)系。6. 標(biāo)本：6.1 靜脈抽取空腹患者標(biāo)本3.0 mL（真空管采血），將血液放置水浴箱中30分鐘后，分離血清。6.2 溶血標(biāo)本不能用于檢測。 6.3 用完的標(biāo)本，應(yīng)在樣品管上注明日期，放置在28冰箱中保存一周。6.4 樣品放置一周后，逐管加入1：50的84消毒液，并放置4小時后，裝入醫(yī)療垃圾袋由醫(yī)院專人按醫(yī)療垃圾處理。7. 注意事項7.1 本試劑盒僅用于體外診斷試驗(yàn).進(jìn)用于人血清或血漿樣本,其它體液和樣品可能得不到準(zhǔn)確的結(jié)果.7.2 請勿使用溶血標(biāo)本.樣本加樣量對

38、本實(shí)驗(yàn)極為重要,建議使用精密加樣器準(zhǔn)確加樣.并經(jīng)常對精密加樣器進(jìn)行校準(zhǔn).7.3 每板建議設(shè)陰、陽性對照血清各兩孔,設(shè)空白對照時,不加樣品及酶標(biāo)記抗體,其余各步相同.7.4 洗滌時各孔均需加滿,防止孔內(nèi)有游離酶未能洗凈.7.5 加試劑前應(yīng)將試劑瓶翻轉(zhuǎn)數(shù)次,使液體混勻.7.6 實(shí)驗(yàn)環(huán)境應(yīng)保持一定濕度,避風(fēng).避免在過高溫度下進(jìn)行實(shí)驗(yàn).7.7 樣品顯色深淺與樣品中抗體的含量沒有一定正相關(guān).任何一種測試都不能絕對保證樣品中沒有低濃度的抗體存在.7.8 試劑各組分在正當(dāng)處理和保存的情況下直至校期都保持穩(wěn)定,不能使用過校期的試劑盒.不同品名、不同批號的試劑不可混用,以免產(chǎn)生錯誤結(jié)果.制定人修改人審核人批準(zhǔn)人

39、批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第22頁共99頁(二)乙型肝炎病毒（HBV）1、乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）1 .檢驗(yàn)?zāi)康模簷z測人血清（或血漿）中乙肝表面抗原（HBsAg），其陽性者為急性乙型肝炎潛伏期或急性、慢性乙肝患者，無癥狀HBsAg攜帶者。2. 檢驗(yàn)原理：在微孔條上預(yù)包被純化乙肝表面抗體（HBsAb），配以酶標(biāo)記抗體（HBsAbHRP）及TMB等其它試劑，采用夾心法原理檢測人血清（或血漿）中乙肝表面抗原（HBsAg）3. 試劑：英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司。3.1 HB

40、sAg微孔板（96人份） 3.2 HBsAg酶標(biāo)記抗體3.3 HBsAg陽性對照血清 3.4 HBsAg陰性對照血清3.5 濃縮洗滌液 25ml 3.6 底物 A3.7 底物 B 3.8 終止液（2M H2SO4）3.9 封口膜 3.10 自封袋 4. 試劑的貯存： 直接使用，28貯存至失效期避免陽光直射。5.操作：5.1 平衡：將試劑盒各組分從盒中取出，平衡至室溫（1825），微孔板開封后，余者即時以自封袋封存。5.2 配液：濃縮洗滌液配制前充分搖勻（如有晶體應(yīng)充分溶解），濃縮洗滌液和蒸餾水或去離子水按1：19稀釋后使用。5.3 編號：將微孔條固定于支架，按序編號。5.4 加樣：每孔中加入稀

41、釋液20 uL，病人血清100 uL，設(shè)陰、陽性對照各1孔，每孔加入100 uL，空白對照1孔。 5.5 溫育：置37溫育60分鐘，室溫平衡5分鐘。5.6 洗滌：用洗滌液充分洗滌5次，洗滌完后扣干（每次應(yīng)保持3060秒的浸泡時間）。5.7 加酶：每孔加入酶50 uL，溫浴30min 洗滌液充分洗滌5次，洗滌完后扣干5.8 顯色：每孔加底物A、B各50uL，輕拍混勻，置37暗置15分鐘。5.9 終止：每孔加終止液50uL，混勻。5.10 測定：用酶標(biāo)儀單波長450nm或雙波長450nm/630nm測定各孔OD值（用單波長測定時需設(shè)空白對照一孔，30分鐘內(nèi)完成測定，并記錄結(jié)果）。制定人修改人審核人

42、批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第23頁共99頁6. 結(jié)果判定6.1 臨界值（C.O.）的計算：臨界值=陰性對照孔OD均值N×2.1陰性對照OD均值大于0.1或陽性對照小于0.4時應(yīng)重新試驗(yàn)，小于0.05時以0.05計算6.2 結(jié)果判定：樣品OD值S/C.O.1者為HBsAg陽性樣品OD 值S/C.O.1者為HBsAg陰性7.標(biāo)本：7.1靜脈抽取空腹患者標(biāo)本3.0mL（真空采血管），將血液放置在37水浴中30分鐘后，分離血清。7.2 溶血標(biāo)本不能用于檢測。 7.3 用

43、完的標(biāo)本，應(yīng)在樣品管上注明日期，放置在28冰箱中保存一周。7.4 樣品放置一周后，逐管加入1：50的84消毒液，并放置4小時后，裝入醫(yī)療垃圾袋由醫(yī)院專人按醫(yī)療垃圾處理。8.注意事項8.1 每板建議設(shè)陰、陽性對照血清各兩孔，設(shè)空白對照時，不加樣品及酶標(biāo)記抗體，其余各步相同。8.2 洗滌時各孔均須加滿，防止孔口內(nèi)有游離酶未能洗凈。8.3 加試劑前應(yīng)將試劑瓶翻轉(zhuǎn)數(shù)次，使液體混勻。如果滴加，滴加前應(yīng)棄去12滴。滴加時瓶身應(yīng)保持垂直，以使滴量準(zhǔn)確。注意勿將試劑滴在孔壁上。8.4 所有樣品都應(yīng)按傳染源處理。8.5 樣品顯色深淺與樣品中抗原的含量沒有一定正相關(guān)。任何一種測試都不能絕對保證樣品中沒有低濃度的抗

44、原存在。8.6 封口膜使用說明：（1）微孔板拆封后，在取出當(dāng)天所需的微孔條后，其余微孔條可以封口膜封存以避免受潮。在封存時，注意勿把封口膜粘貼到微孔條低部，以免影響其透光性。（2）微孔板溫育時，以封口膜覆蓋孔口，可避免其它因素對實(shí)驗(yàn)帶來的非預(yù)期的影響。8.7 不同品名、不同批號的試劑不可混用，以免產(chǎn)生錯誤結(jié)果。制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第24頁共99頁2、乙型肝炎病毒表面抗體（HBsAb）1 .檢驗(yàn)?zāi)康模簷z測人血清（或血漿）中乙肝表面抗體（HBsAb），

45、其為保護(hù)性抗體，大多數(shù)急性病人恢復(fù)期后為陽性，接種乙肝疫苗后產(chǎn)生免疫力。2. 檢驗(yàn)原理：在微孔條上預(yù)包被純化乙肝表面抗原（HBsAg），配以酶標(biāo)記抗體（HBsAgHRP）及TMB等其它試劑，采用夾心法原理檢測人血清（或血漿）中乙肝表面抗體（HBsAb）3. 試劑：英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司。3.1 HBsAb微孔板（96人份） 3.2 HBsAb酶標(biāo)記抗原3.3 HBsAb陽性對照血清 3.4 HBsAb陰性對照血清3.5 濃縮洗滌液 25ml 3.6 底物 A3.7 底物 B 3.8 終止液（2M H2SO4）3.9 封口膜 3.10 自封袋4. 試劑的貯存： 直接使用，28貯存至失效期，

46、避免陽光直射。 5.操作：5.1 平衡：將試劑盒各組分從盒中取出，平衡至室溫（1825），微孔板開封后，余者即時以自封袋封存。5.2 配液：濃縮洗滌液配制前充分搖勻（如有晶體應(yīng)充分溶解），濃縮洗滌液和蒸餾水或去離子水按1：19稀釋后使用。5.3 編號：將微孔條固定于支架，按序編號。5.4 加樣：用加樣器加入待測血清50uL，設(shè)陰、陽性對照各1孔，每孔加入50 uL，空白對照1孔。5.5 加酶：分別在每孔中加入酶標(biāo)記抗原50uL；輕拍混勻。5.6 溫育：置37溫育30分鐘，室溫平衡5分鐘。5.7 洗滌：用洗滌液充分洗滌5次，洗滌完后扣干（每次應(yīng)保持3060秒的浸泡時間）。5.8 顯色：每孔加底物

47、A、B各50uL，輕拍混勻，置37暗置15分鐘。5.9 終止：每孔加終止液50uL，混勻。5.10 測定：用酶標(biāo)儀單波長450nm或雙波長450nm/630nm測定各孔OD值（用單波長測定時需設(shè)空白對照一孔，30分鐘內(nèi)完成測定，并記錄結(jié)果）。制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第25頁共99頁6.結(jié)果判定6.1 臨界值（C.O.）的計算：臨界值=陰性對照孔OD均值N×2.1陰性對照OD均值大于0.1或陽性對照小于0.4時應(yīng)重新試驗(yàn)，小于0.05時以0.0

48、5計算6.2 結(jié)果判定：樣品OD值S/C.O.1者為HBsAb陽性樣品OD 值S/C.O.1者為HBsAb陰性7.標(biāo)本：7.1靜脈抽取空腹患者標(biāo)本3.0mL（真空采血管），將血液放置在37水浴中30分鐘后，分離血清。7.2 溶血標(biāo)本不能用于檢測。 7.3 用完的標(biāo)本，應(yīng)在樣品管上注明日期，放置在28冰箱中保存一周。7.4 樣品放置一周后，逐管加入1：50的84消毒液，并放置4小時后，裝入醫(yī)療垃圾袋由醫(yī)院專人按醫(yī)療垃圾處理。8.注意事項8.1 每板建議設(shè)陰、陽性對照血清各兩孔，設(shè)空白對照時，不加樣品及酶標(biāo)記抗體，其余各步相同。8.2 洗滌時各孔均須加滿，防止孔口內(nèi)有游離酶未能洗凈加，滴加前應(yīng)棄去

49、12滴。滴加時瓶身應(yīng)保持垂直，以使滴量準(zhǔn)確。注意勿將試劑滴在孔壁上。8.3 加試劑前應(yīng)將試劑瓶翻轉(zhuǎn)數(shù)次，使液體混勻。如果滴加，滴加前應(yīng)棄去12滴。滴加時瓶身應(yīng)保持垂直，以使滴量準(zhǔn)確。注意勿將試劑滴在孔壁上。8.4 所有樣品都應(yīng)按傳染源處理。8.5 樣品顯色深淺與樣品中抗原的含量沒有一定正相關(guān)。任何一種測試都不能絕對保證樣品中沒有低濃度的抗原存在。8.6 封口膜使用說明：（1）微孔板拆封后，在取出當(dāng)天所需的微孔條后，其余微孔條可以封口膜封存以避免受潮。在封存時，注意勿把封口膜粘貼到微孔條低部，以免影響其透光性。（2）微孔板溫育時，以封口膜覆蓋孔口，可避免其它因素對實(shí)驗(yàn)帶來的非預(yù)期的影響。8.7

50、不同品名、不同批號的試劑不可混用，以免產(chǎn)生錯誤結(jié)果。制定人修改人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期陜西省水電醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室SOP文件文件編號:SDYYJYK-SOP-MY1版序：001時間：2015-01-01責(zé)任部門：檢驗(yàn)科頁碼：第26頁共99頁3.乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）1. 檢驗(yàn)?zāi)康模簷z測人血清（或血漿）中乙肝e抗原（HBeAg），其陽性提示病毒復(fù)制，傳染性強(qiáng)。2. 檢驗(yàn)原理：在微孔條上預(yù)包被純化乙肝e抗體（HBeAb），配以酶標(biāo)記抗體（HBeAbHRP）及TMB等其它試劑，采用夾心法原理檢測人血清（或血漿）中乙肝e抗原（HBeAg）3. 試劑：英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司。3.1 HBeAg微孔