劉國全論文(一)楚雄地區(qū)八角茴香油的提取工藝研究

1、楚雄師范學院本科生畢業(yè)論文題 目楚雄地區(qū)八角茴香油的提取工藝研究姓 名朱恩海學 號20101051213系（院）化學與生命科學系專 業(yè)化生指導教師 陳靖 職稱 講師論文字數(shù)完成日期教務處印制目錄摘要 錯誤！未定義書簽。關鍵詞 錯誤！未定義書簽。Abstract 錯誤！未定義書簽。Keywords 錯誤！未定義書簽。前言 錯誤！未定義書簽。1實驗部分 錯誤！未定義書簽。1.1 材料與方法 錯誤！未定義書簽。1.1.1 材料及儀器 錯誤！未定義書簽。1.2 方法 錯誤！未定義書簽。1.2.1 材料的預處理 錯誤！未定義書簽。1.2.2 黃酮提取液的制備 錯誤！未定義書簽。1.2.3 黃酮的鑒定 錯

2、誤！未定義書簽。2黃酮含量的測定 12.1 測定方法依據(jù) 12.1.1 最大吸收波長的選擇 12.1.2 蘆丁標準溶液的配制 錯誤！未定義書簽。2.1.3 標準曲線的繪制 錯誤！未定義書簽。2.1.4 提取液黃酮含量的測定 錯誤！未定義書簽。2.2 單因素試驗 錯誤！未定義書簽。2.2.1 乙醇質(zhì)量分數(shù)的影響 錯誤！未定義書簽。2.2.2 提取時間的影響 22.2.3 回流溫度的影響 22.2.4 料液比白影響 22.2.5 最佳條件的選擇 22.3 幾種蕨類植物中總黃酮含量的測定 23結(jié)果分析 23.1 黃酮的鑒定 23.2 黃酮含量的測定結(jié)果分析 33.2.1 測定波長的選擇 33.2.2

3、 蘆丁標準曲線的繪制 33.3 單因素試驗結(jié)果分析 43.3.1 乙醇質(zhì)量分數(shù)的影響 43.3.2 提取時間的影響 43.3.3 提取溫度的影響 43.3.4 料液比白影響 53.3.5 最佳條件試驗結(jié)果分析 53.3.6 4種蕨類植物中的黃酮含量 63.4 結(jié)論與討論 6參考文獻 7附錄 8致謝 9楚雄地區(qū)八角茴香油的提取工藝研究摘要：在粒度、提取次數(shù)和工藝流程一定時，通過對乙醇濃度、提取時間、提取溫度與料液比的單因素試驗確定水平點。設計四因素三水平正交試驗，選用L9（3 4）正交表優(yōu)選八角茴香油的提取工藝條件為：料液比5:50,乙醇質(zhì)量分數(shù)為95%,提取溫度60 C,提取時間100min。

4、采用水蒸氣蒸儲法， 丙酮，石油醒作為溶劑提取八角茴香油，通過對提取時間，提取溫度，料液比的單因素實驗確定水平定點，對于水蒸氣蒸儲法，研究浸泡時間對提取率的影響。通過以上實驗最終確定八角茴香油的最佳提取工藝條件為以乙醇為溶劑，質(zhì)量分數(shù)為95%,提取溫度為60 C,提取時間100min。在該條件下提取八角茴香油即經(jīng)濟又安全，產(chǎn)率最高。關鍵詞：八角、八角茴香油、提取、工藝研究、正交2Chuxiong region of star anise oil extraction technology was studiedAbstract : the granularity, extraction time

5、s and the technological process, through the ethanol concentration, extraction time, extraction temperature and solid-liquid ratio of determining the level of single factor experiment.Four factors three levels orthogonal experiment design, choose L9 (34) orthogonal table optimization of star anise o

6、il extraction technology conditions for: 5:50 material liquid ratio, the mass fraction of 95% ethanol, extractingtemperature60 C, extracting time, 100 min.By steam distillation, acetoneandpetroleum ether as solvent extraction of star anise oil, through the extraction time, extractiontemperature, mat

7、erial liquidthan the single factor experimentto determinethelevel of fixed point, for water vapor distillation, study the influence of soaking time on extraction yield.Through the above experiment eventually determine the best extraction technology conditions for star anise oil with ethanol as solve

8、nt, the mass fractionof 95%,the extraction temperature of 60C , the extracting time 100 min.Under the condition ofthe extraction of star anise oil economy and security, the highest yield.Key words： star anise, star anise oil, extraction, process research, orthogonal.楚雄地區(qū)八角茴香油的提取工藝研究、/ 、一刖百八角茴香為木蘭科八角

9、茴香的干燥成熟果實，是中國特產(chǎn)辛香料和中藥，也是居家 必備的調(diào)料。八角茴香中富含八角茴香油，八角茴香油是無色或淡黃色液體，具有清而、一 ，一一.1，一一.辛香的八角茴香的特殊氣味，味略甜。王要成分為八角茴香腦，約占80%-90%還有大茴香基甲酮、大茴香醛、甲基黑椒粉、二戊烯等 2。八角茴香油可用于牙膏和牙粉的加香，改善藥劑的味道，也可以用于糖果和酒類的 生產(chǎn)，在中國許多肉制品中都用它作增香劑；作為中藥，八角茴香油還具有開胃下氣、 散寒、暖腎、止痛等效果，近年來有研究表明其也具有較好的抑菌、殺蟲活性和抗自由 基氧化作用1。在傳統(tǒng)使用中直接使用八角茴香果，八角茴香油的利用率比較低2 ,為了提高八角

10、茴香油的利用率，有必要對八角中八角茴香油的提取進行相關系統(tǒng)性研究。前人在這方面做了大量工作，有的用丙酮作溶劑提取，收率為 10.49%,在八角果 實烘干的時候用80c溫度高了一些，在這個溫度下八角茴香油里有的成分很有可能被蒸 發(fā)了，降低了八角茴香油的提取率 。前人也有用水蒸氣法提取過八角茴香油，提取率.一一 一.一.3八角茴香干果為8%-12%老葉為1.5%,但有著流速過快（12mL/min）等缺點 。但 他們大都集中在單一的實驗方法上，而且最終的提取率都不是很高。同時對于楚雄地區(qū) 的八角中八角茴香油的提取工藝目前尚無相關文獻報道。本課題擬通過水蒸氣蒸儲法和索氏提取法來提取楚雄地區(qū)產(chǎn)八角中的八

11、角茴香油，通過正交實驗，找尋八角茴香油的 最佳提取工藝條件。1實驗部分1.1 材料與方法1.1.1 材料及儀器材料：八角（產(chǎn)自云南楚雄）藥品：無水乙醇，95%乙醇，丙酮，石油醒（6090）,丙酮以上試劑均為分析純，水為實驗室自 制蒸儲水。儀器與設備：回流提取裝置，蒸儲裝置，水蒸氣蒸儲裝置，索氏提取裝置。CP214電子天平（奧豪斯儀器有限公司制造），HH-S2s數(shù)顯電熱恒溫水浴鍋（金壇市大地自動化儀器廠），搖擺式高速中藥粉碎機,25ml,50ml 移液管等。1.2 方法1.2.1 材料的預處理材料采集后在60c烘箱中烘干粉碎，過 40目篩。1.2.2 乙醇為溶劑提取八角茴香油1.2.2.1 質(zhì)量

12、分數(shù)對提取率的影響50ml質(zhì)量分數(shù)為 30% 50% 75%50ml質(zhì)量分數(shù)為95叱醇分別在50ml質(zhì)量分數(shù)為95叱醇在60c水準確稱取5.0000g八角茴香粉于索氏提取裝置中分別加入95%F 口無水乙醇在80c水浴鍋中提取 1小時。1.2.2.2 溫度對提取率的影響準確稱取5.0000g八角茴香粉于回流提取裝置中分別加入30C、40C、50C、60C、70c的水浴鍋中提取 1小時。1.2.2.3 提取時間對提取率的影響準確稱取5.0000g八角茴香粉于回流提取裝置中分別加入浴鍋中分別提取 40min、60min、80min、100min、120min。2黃酮含量的測定2.1 測定方法依據(jù)該法

13、采用乙醇回流提取蕨類植物中總黃酮，以NaNAl(NO) 3-NaOH體系為顯色劑，利用分光光度法測定總黃酮，操作簡便，重現(xiàn)性好，結(jié)果可靠，為蕨類植物提取黃酮的質(zhì)量控制提供了可行的方法5。2.1.1 最大吸收波長的選擇移取10m提取液50 ml容量瓶中，用75%勺乙醇定容至50ml,先加5%E硝酸鈉溶液0.2ml搖勻 放置8min,再加10%硝酸鋁溶液0.2ml搖勻，放置8min,加入10%的氫氧化白氫氧化 4ml,搖勻，此時 溶液呈銅紅色。用 75叱醇稀釋至10ml刻度，搖勻，放置8min后在波長400-700nm范圍內(nèi)進行掃 描，測其最大吸收波長 Amax和吸收光度6。2.1.2 蘆丁標準溶

14、液的配制準確稱取蘆丁( 120c干燥至恒重)10mg,用75叱醇溶解并定容到 50ml制得0.200mg/ml的蘆 丁標準溶液。2.1.3 標準曲線的繪制精確稱取蘆丁對照品10mg置于小燒杯中，加75%乙醇溶液溶解后 移入50ml容量瓶中，用75叱醇溶液稀釋至刻度，搖勻備用。準確移取0.00ml、0.50ml、1.00ml、1.50ml、2.00ml、2.50ml、 3.00ml蘆丁標準液于25 ml比色管中，按2.2.1以空白試劑做參比測定吸光度A。以吸光度值 A為縱坐標，濃度C mg/ml為橫坐標進行線性回歸，求取線性方程，繪制標準曲線。2.1.4 提取液黃酮含量的測定將提取液按2.2.1

15、測定吸光度，回歸線性方程，計算出樣品中黃酮的含量。2.2 單因素試驗2.2.1 乙醇質(zhì)量分數(shù)的影響稱取2.000g粉碎過的樣品于 50ml的圓底燒瓶中用質(zhì)量分數(shù)為50% 60% 70% 80% 90叱醇溶液，按1.22制樣，按2.2.1測定吸光度。確定最佳乙醇濃度。2.2.2 提取時間的影響稱取2.000g粉碎過的樣品于 50ml的圓底燒瓶中用質(zhì)量分數(shù)為70湘流2h、2.5 h、3 h、3.5h ,按1.22制樣，按2.2.1測定吸光度。確定最佳回流時間。2.2.3 回流溫度的影響稱取2.000g粉碎過的樣品于 50ml的圓底燒瓶中，在 65C、70 C、75C、80C、85c下按1.22 制

16、樣，按2.2.1測定吸光度。確定最佳提取溫度。2.2.4 料液比的影響在上述條件的確定下，按料液比1.5:50、2:50、2.5:50、3:50、3.5:50 按1.22制樣，按2.2.1測定吸光度。確定最佳料液比。2.2.5 .最佳條件的選擇根據(jù)單因素試驗結(jié)果，乙醇質(zhì)量分數(shù)（A）、提取時間（B）、提取溫度（C）、選液料比（D）分別在各因素最佳條件前后各取1點組成3個水平，以提取物的吸光度為試驗指標進行L9 （34）正交試驗。2.3 幾種蕨類植物中總黃酮含量的測定在以上條件下按1.22制樣，按2.2.1測定吸光度。3結(jié)果分析3.1 黃酮的鑒定樣品提取液按1.2.3進行試驗，衛(wèi)果如表 3-1。試

17、齊Al(NO) 3NaOHH2SOFeCl3HCl-Zn濃氨水黃色亮黃色墨綠色黃色橙紅色表3-1提取液實驗結(jié)果由表知乙醇提取液與 HC1 Mg NaOH A1C1,反應分別顯深紅色、深黃色、亮黃色，符合黃酮類化合物與這些試劑反應的顯色特性，說明蕨根提取物中有黃酮類化合物存在；綜合3個顏色反應特征和不同黃酮類化合物的顯色性質(zhì)，可以初步判斷蕨根黃酮類化合物以黃酮類、黃酮醇類、二氫黃酮醇類化合物為主要組分7。3.2 黃酮含量的測定結(jié)果分析3.2.1 測定波長的選擇按提取液2.21進行試驗，測定不同波長下的吸光度，結(jié)果如圖3-2。圖3-2最佳波長的選擇由圖可知，樣品液在顯色后于510nm出游最大吸收峰

18、，本實驗中均已510nm為最大吸收波長。3.2.2蘆丁標準曲線的繪制不同濃度下的蘆丁標準液顯色后，在510nm出的吸光度結(jié)果如圖 3-3.C(mg/ml)00.010.020.030.040.050.06A00.1210.2350.3460.4590.5780.666圖3-3蘆丁標準曲線數(shù)據(jù)以吸光度值A為縱坐標，濃度C mg/ml為橫坐標進行線性回歸，求取線性方程，繪 制標準曲線如圖3-4。圖3-4蘆丁標準曲線由曲線的線性回歸方程：A=0.00305 +0.11471 x R=0.99992SD= 0.00308P<0.00013.3 單因素試驗結(jié)果分析3.3.1 乙醇質(zhì)量分數(shù)的影響稱取

19、2.000g粉碎過的樣品于 50ml的圓底燒瓶中用質(zhì)量分數(shù)為50% 60% 70% 80% 90叱醇溶液，按1.22制樣，按2.2.1測定吸光度。結(jié)果如圖 3-5。 B3-5乙醇質(zhì)量分數(shù)的影響從圖可以看出分別以不同質(zhì)量分數(shù)的乙醇溶液回流提取，其它條件相同的時候濃度為80吐右的乙醇提取效果較好。3.3.2 提取時間的影響稱取2.000g粉碎過的樣品于 50ml的圓底燒瓶中用質(zhì)量分數(shù)為70湘流2h、2.5 h、3 h、3.5h ,按1.22制樣，按2.2.1測定吸光度。結(jié)果如圖3-6.3-6提取時間的影響從圖可以看出分別以不同質(zhì)量分數(shù)的乙醇溶液回流提取，其它條件相同的時候時間為2.h提取效果較好。

20、黃酮在隨時間的增加提取效果增加，當?shù)?.5h時析出達到飽和，此時一部分黃酮在水解，因此呈現(xiàn)出隨時加的增加，總含量呈下降趨勢。3.3.3 提取溫度的影響稱取2.000g粉碎過的樣品于 50ml的圓底燒瓶中，在 65C、70 C、75C、80C、85c下按1.22制樣，按2.2.1測定吸光度。結(jié)果如圖 3-7.3-7提取溫度的影響溫度升高，提取率增加，但到80c后，提取率急劇下降。常壓下，體系在附近溶劑沸騰，沸 點還要受到溶劑濃度的影響。說明溶劑沸騰后固液充分接觸，物質(zhì)溶出已達飽和再升高溫度，溶質(zhì)水解速率加大，水解程度也加大。3.3.4 料液比的影響3-8料液比的影響如圖3-8所示，隨溶劑量的增加

21、，提取率增加。料液比到 2: 50以后，對提取率的影響就不明 顯了。固液比越大，濃度梯度越大，物質(zhì)溶出越多。但當達到平，再增大溶劑量，物質(zhì)得率變化就 不明顯了，所以最佳料液比為 2: 50。3.3.5 最佳條件試驗結(jié)果分析根據(jù)文獻和預實驗， 選用L9（34）正交表對水解條件進行正交實驗，選用A（乙醇質(zhì)量分數(shù)）、B（回流時間）、C（回流溫度）、D（料液比）為考察因素，每個因素 3個水平，各因素水平見圖 3-9。A%BCD1652802:502702.5852.5:503753903:503-9序號ABCD黃酮含量%A值111115.8970.545222216.5630.606313335.82

22、00.538421235.3530.495522324.9500.458613126.0160.556731324.9830.461832114.4170.409933234.7220.437Ki5.9115.9385.4435.626K25.4445.3105.5465.450K4.7075.5205.2515.298R1.2040.62800.2950i0.3280圖3-10正交結(jié)果及分析試驗結(jié)果表明，各因素對提取效果的影響程度依次為：乙醇質(zhì)量分數(shù) 回流時間料液比回流溫度。這表明，在以乙醇為提取液的蕨類植物黃酮類化合物提取方法中，乙醇質(zhì)量分數(shù)對黃酮的提取有顯著影響，回流時間次之，而回流溫度

23、的影響不大，優(yōu)選工藝為4及?？?，即乙醇質(zhì)量分數(shù)為70%回流時間2.5h，在85 C,料液比為2:50 ,提取效果最佳。3.3.64種蕨類植物中的黃酮含在乙醇質(zhì)量分數(shù)為70%回流時間2.5h,在85 C,料液比為2:50的時候，4種蕨類植物總黃酮的含量測定結(jié)果圖3-11表種類吸光度濃度（mg/ml）質(zhì)里分數(shù)%黑足金粉蕨0.4680.040535.6094南鱗蓋蕨0.1900.016302.036野雞尾0.0750.0062727.827牙抱踹益厥0.5840.050656.323圖3-11 4種蕨類植物總黃酮的含量測定結(jié)果3.4結(jié)論與討論（1）紫外分光光度法測定黃酮含量是簡便、經(jīng)濟的方法，該研究

24、亦采用紫外分光光度法測定蕨類植物提取物中黃酮的含量，建立的回歸方程線性關系良好R =0.099992, P =0.00001 ,表明紫外分光光度法準確度高，相對標準偏差小，是測定蕨類植物提取物中總黃酮含量的一種經(jīng)濟有效的方法。（2）該法采用乙醇回流提取蕨類植物中總黃酮，以NaNAl（ NO）-2NaOH體系為顯色劑，利用分光光度法測定總黃酮，操作簡便，重現(xiàn)性好，結(jié)果可靠，為蕨類植物提取黃酮的質(zhì)量控制提供了可行的 方法8。(3)試驗結(jié)果表明，黃酮這種有較強的生理活性的物質(zhì)存在于大多數(shù)蕨類植物中，云南當?shù)氐霓ь愔参镉写诳茖W的開發(fā)和利用。參考文獻1李增富，黃暉，張杭穎，等.蕨類植物中黃酮類物質(zhì)的提取研究進展J.三明學院學 報,2008,25(2