高中生物選修三基因工程主要知識(shí)點(diǎn)

1、-作者xxxx-日期xxxx高中生物選修三基因工程主要知識(shí)點(diǎn)【精品文檔】高中生物選修三基因工程主要知識(shí)點(diǎn)（1.1、1.2）1、 基因工程：按照人們的意愿，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類(lèi)型和生物產(chǎn)品。1、 基因工程的三大工具：限制性核酸內(nèi)切酶“分子手術(shù)刀”；DNA連接酶“分子縫合針”；基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體“分子運(yùn)輸車(chē)”。2、 限制性核酸內(nèi)切酶的特點(diǎn)：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且是每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。3、 限制酶識(shí)別序列的特點(diǎn)：反向?qū)ΨQ(chēng)，重復(fù)排列。4、 限制酶在原核生

2、物中的作用：切割外源DNA，保護(hù)細(xì)菌細(xì)胞。5、 為什么限制酶不剪切原核生物自身的DNA分子？ 原核生物本身不含相應(yīng)特異性序列；對(duì)DNA分子進(jìn)行甲基化修飾。6、 兩種常見(jiàn)的DNA連接酶：E·coli DNA連接酶：源自大腸桿菌，只連接黏性末端；T4DNA連接酶：提取自T4噬菌體，兩種末端均可連接，連接平末端效率低。7、 DNA連接酶和DNA聚合酶的相同點(diǎn)：都是蛋白質(zhì)；都能生成3'磷酸二酯鍵。不同：前者在兩個(gè)片段之間形成3'磷酸二酯鍵，后者只能將單個(gè)核苷酸連接到已有片段上；前者不需要模版，后者需要。8、 載體需要滿足的條件：有一到多個(gè)限制酶切點(diǎn)；對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害；導(dǎo)入基因能

3、在受體細(xì)胞內(nèi)復(fù)制和表達(dá)；有某些標(biāo)記基因；分子大小合適。9、 質(zhì)粒：一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的很小的雙鏈環(huán)狀DNA分子。10、 標(biāo)記基因的作用：鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。11、 三類(lèi)載體：質(zhì)粒；噬菌體的衍生物；動(dòng)植物病毒。12、 獲取目的基因的方法：說(shuō)法一：從自然界已有的物種中分體（鳥(niǎo)槍法、反轉(zhuǎn)錄法）、用人工的方法合成；說(shuō)法二：從基因文庫(kù)中獲?。B(niǎo)槍法、反轉(zhuǎn)錄法）、利用PCR技術(shù)合成、用化學(xué)方法人工合成。13、 基因庫(kù)：一個(gè)物種中全部個(gè)體的全部基因的總和；基因文庫(kù)：將含有某種生物不同基因的許多DNA片段，導(dǎo)入受體菌

4、的群體中儲(chǔ)存，個(gè)個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同的基因；基因組文庫(kù)：含有某種生物全部基因的基因文庫(kù)；部分基因文庫(kù)：只含有一種生物部分基因的基因文庫(kù)；cDNA文庫(kù)：用某種生物發(fā)育的某個(gè)時(shí)期的mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種互補(bǔ)DNA片段，與載體連接后儲(chǔ)存在一個(gè)受體菌群中。14、 文庫(kù)類(lèi)型cDNA文庫(kù)基因組文庫(kù)文庫(kù)大小小大啟動(dòng)子無(wú)有內(nèi)含子無(wú)有基因多少某種生物的部分基因某種生物的全部基因物種間基因交流可以部分基因可以15、 人工合成目的基因的兩個(gè)條件：基因比較小；核苷酸序列已知。16、 目的基因：主要是指編碼蛋白質(zhì)的基因，也可以使一些具有調(diào)控作用的因子。17、 啟動(dòng)子的特性：物種特異性、組織特異性、強(qiáng)弱差異。

5、18、 基因工程的步驟：目的基因獲取、構(gòu)建基因表達(dá)載體、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。19、 PCR的全稱(chēng)：多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。20、 PCR擴(kuò)增目的基因的條件：dNTP、引物、Taq酶、DNA模版21、 PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的過(guò)程：90-95，模版解旋；55-60，退火，引物與模版結(jié)合；70-75，Taq酶合成互補(bǔ)鏈。22、 基因工程的核心：構(gòu)建基因表達(dá)載體。23、 構(gòu)建基因表達(dá)載體的作用：使目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)能穩(wěn)定存在，并遺傳給下一代；使目的基因能表達(dá)和發(fā)揮作用。24、 載體構(gòu)成：插入基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因、（復(fù)制原點(diǎn)）。25、 T-DNA：農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒中的一段D

6、NA序列,可以從農(nóng)桿菌中轉(zhuǎn)移并穩(wěn)定整合到植物核基因組中,常用于農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入目的基因。26、倒入方法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法顯微注射法鈣離子處理法受體細(xì)胞雙子葉植物、裸子植物單子葉植物開(kāi)花植物動(dòng)物微生物受體細(xì)胞類(lèi)型體細(xì)胞體細(xì)胞受精卵卵細(xì)胞體細(xì)胞27、 基因工程常利用微生物的原因：繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少。28、 目的基因的檢測(cè)檢測(cè)對(duì)象染色體DNA上是否導(dǎo)入目的基因目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)技術(shù)DNA分子雜交分子雜交抗原-抗體雜交29、 DNA探針：利用放射性同位素等方法標(biāo)記的，含有目的基因特異性片段的單鏈DNA分子。30、 個(gè)體水平的鑒定：觀察受體生物是否表現(xiàn)出目的基因所控制的性狀；基因工程的生物產(chǎn)品與天然產(chǎn)品的功能活性比較。31、 啟動(dòng)子：一段具有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首段，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位。32、 終止子：位于基因的尾端，也一段具有特殊結(jié)